一种黄鳝组织采样方法
【专利摘要】本发明公开了一种黄鳝组织采样方法。它解决了目前不同黄鳝个体之间的交叉污染，个体内组织与组织之间的交叉污染，黄鳝皮肤与肌肉精确分离的问题。步骤：A、黄鳝的解剖；B、黄鳝肝脏、肾脏、皮肤与肌肉的采集；C、组织样品的保存。本发明能够简单、快速、有效的完成黄鳝样品的采集。
【专利说明】-种黄錯组织采样方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于水产品药物残留分析领域。具体涉及一种黄錯组织采样方法，特别适 用于药物残留检测的黄錯组织采样方法
【背景技术】
[0002] 随着黄錯养殖的不断扩大，疾病也越来越多，药物的使用量不断攀升，所W造成了 大量的药物残留。为了避免残留药物对人类的伤害，要对黄錯体内的药物进行监控，所W要 进行药物代谢和药物残留研究。在该些研究中，要用到色谱和质谱学仪器进行痕量检测，在 操作的过程中很容易受到污染。另外，黄錯属无鱗鱼，体表分泌大量的粘液不易抓握，皮肤 和肌肉结合紧密，很难剥离，在采样的过程中要耗费大量的时间和人力。因此，为了解决W 上问题，开发出一套方便有效的黄錯样品采集的方法。
【发明内容】
[0003] 为了节约试验时间和人力，本发明的目的是提供一种黄錯组织采样方法，方法简 单，特别适用于黄錯药物残留检测的组织采样。
[0004] 为了达到上述目的，本发明采取W下技术方案：
[0005] -种黄錯组织采样方法，包括W下步骤：
[0006] 1)黄錯的解剖；已死亡的黄錯放血洗净后，把黄錯放入采样盘中，剪断头部和躯 干连接处的脊柱，便于抓握。采用手术刀沿背中线，从脊柱剪断处到尾部剖开皮肤和肌肉， 然后翻转黄錯，沿腹中线剖开皮肤和肌肉。
[0007] 2)黄錯肝脏、肾脏、皮肤与肌肉的采集：黄錯腹部剖开之后，取出肠道，采集肝脏 和肾脏。防止肠内容物溢出，把肠道移出采样盘。把皮肤和肌肉剥离，在黄錯躯干中部，先 用尖头綴子插到皮肤和肌肉之间，从背部穿透到腹部，抽出綴子，插入手术剪刀的头部，撑 开剪刀，扩大剥离面积，然后在黄錯的头部侧用吸水纸包裹抓握，继续用手扩大剥离面，一 直到尾部。最后清除滤纸，剥离头部侧皮肤与肌肉，采集皮肤；手术剪剪断脊柱两侧骨头，剥 离脊柱，采集肌肉。每个样品采集完毕之后，所用到的綴子、手术剪和手术刀，首先用自来水 清洗干净，然后98%的酒精清洗一遍，最后再用自来水清洗一遍。
[0008] 3)黄錯组织样品的保存：每种组织单独放在3号样品袋中，-2(TC保存。
[0009] W上所述的方法，优选的，步骤1)中，在采样盘中铺设隔离膜后，再把黄錯放入采 样盘中。采用吸水纸包裹在黄錯头部，抓取黄錯头部，用手术刀沿背中线，从脊柱剪断处到 尾部剖开皮肤和肌肉，刀尖要触到骨头，然后翻转黄錯，沿腹中线剖开皮肤和肌肉。
[0010] 本发明的方法采集的黄錯组织，适用于黄錯的药物残留检测W及其他无鱗鱼的药 物残留采样。
[0011] 与现有技术相比，本发明具有W下优点：
[0012] 目前，在药物残留采样中，药物浓度高的动物个体容易污染浓度低的个体，致使低 浓度的组织样品检测过高，造成残留检测失败，浪费大量的人力和物力。另外，无鱗鱼具有 自己的特点，W黄錯为例，由于黄錯体表分泌大量的粘液，很难抓握，在采样的过程中容易 滑脱，致使采样效率大大下降。在残留检测中需要把试验动物的皮肤和肌肉分离，黄錯通体 润滑，而且皮肤和肌肉结合紧密，不采用工具很难剥离；采用错误的工具和方法，容易造成 皮肤破裂或皮肤和肌肉粘连不能剥离。
[0013]在本方法中，为了避免个体与个体之间的污染，采用隔离膜与采样盘隔离，采完一 条黄錯后，清除隔离膜，铺设新的隔离膜。为了不使黄錯滑脱，我们在头部和躯干连接处切 口，在用手抓握的地方包裹吸水纸，增加摩擦力。由于皮肤和肌肉的紧密，我们先沿背中线 切开背部，沿腹中线切开腹部，在躯干中部的皮肤和肌肉之间插入尖头綴子，从背部穿透到 腹部，抽出綴子，插入手术剪刀的头部，扩大剥离面积，然后继续剥离，该样采集皮肤和肌肉 完整，而且没有粘连。样品采集完毕之后，所用到的綴子、手术剪和手术刀，首先用自来水清 洗干净，然后98 %的酒精清洗一遍，最后再用自来水清洗一遍，防治药物在器具上的残留。
【具体实施方式】
[0014] 实施例1 :
[0015] 一种黄錯组织采样方法，包括W下步骤：
[0016] 1)黄錯的解剖；已死亡的黄錯放血洗净后，在采样盘中铺设隔离膜（本实施例使 用的是聚己帰保鲜膜，在一条黄錯采集完成后，清除隔离膜，铺设新的隔离膜），把黄錯放入 采样盘中，剪断头部和躯干连接处的脊柱，由于黄錯体表分泌粘液很难抓取，采用吸水纸包 裹在黄錯头部，抓取黄錯头部，手术刀沿背中线，从脊柱剪断处到尾部剖开皮肤和肌肉，刀 尖要触到骨头，然后翻转黄錯，沿腹中线剖开皮肤和肌肉，。
[0017] 2)黄錯肝脏、肾脏、皮肤与肌肉的采集：黄錯腹部剖开之后，取出肠道，采集肝脏 和肾脏，防止肠内容物溢出，把肠道移出采样盘。皮肤和肌肉的剥离，在黄錯躯干中部，先用 尖头綴子插到皮肤和肌肉之间，从背部穿透到腹部，抽出綴子，插入手术剪刀的头部，撑开 剪刀，扩大剥离面积，然后在黄錯的头部侧用滤纸包裹抓握，用手继续扩大剥离面，一直到 尾部。最后清除滤纸，剥离头部侧皮肤与肌肉，采集皮肤；手术剪剪断脊柱两侧骨头，剥离 脊柱，采集肌肉。样品采集完毕之后，所用到的綴子、手术剪和手术刀，首先用自来水清洗干 净，然后98%的酒精清洗一遍，最后再用自来水清洗一遍。
[0018] 3)黄錯组织样品的保存：每种组织单独放在3号样品袋中，-2(TC保存。
[0019] 利用上述方案，每条黄錯的采样时间为4-6min，大大缩短了采样时间。
[0020] 实施例2 :
[0021] 采样过程中防污染效果的比较：
[0022] 实验组为实施例1中所述方法，对照组为实施例1中不铺设隔离膜，不防止肠内容 物溢出，不对采样器具进行清洗，其他步骤与实施例1完全相同的方法。
[002引黄錯WlOmg/kgbW的剂量口灌诺氣沙星，在给药后12h，2化，4她和72h，分别进 行采用本法采样（实验组）和不采用本法采样（对照组）。之后，对黄錯肌肉中的诺氣沙星 药物残留进行检测，对照组得到的肌肉组织中的药物浓度，比实验组得到的肌肉组织中的 药物浓度，平均高出28. 2%、24. 5%、55. 4%和26. 9%。具体请见表1所示。
[0024]表1在黄錯肌肉中采用实验组和对照组采样对诺氣沙星的浓度影响
[00 巧]
【权利要求】
1. 一种黄鳝组织采样方法，包括以下步骤： 1) 黄鳝的解剖：已死亡的黄鳝放血洗净后，在采样盘中铺设隔离膜后，把黄鳝放入采样 盘中，剪断头部和躯干连接处的脊柱，采用吸水纸包裹在黄鳝头部，抓取黄鳝头部，采用手 术刀沿背中线，从脊柱剪断处到尾部剖开皮肤和肌肉，刀尖要触到骨头，然后翻转黄鳝，沿 腹中线剖开皮肤和肌肉； 2) 黄鳝肝脏、肾脏、皮肤与肌肉的采集：黄鳝腹部剖开之后，取出肠道，采集肝脏和肾 脏；防止肠内容物溢出，把肠道移出采样盘；把皮肤和肌肉剥离，在黄鳝躯干中部，先用尖 头镊子插到皮肤和肌肉之间，从背部穿透到腹部，抽出镊子，插入手术剪刀的头部，撑开剪 刀，扩大剥离面积，然后在黄鳝的头部侧用吸水纸包裹抓握，继续用手扩大剥离面，一直到 尾部；最后清除滤纸，剥离头部侧皮肤与肌肉，采集皮肤；手术剪剪断脊柱两侧骨头，剥离 脊柱，采集肌肉；每个样品采集完毕之后，所用到的镊子、手术剪和手术刀，首先用自来水清 洗干净，然后98%的酒精清洗一遍，最后再用自来水清洗一遍； 3) 黄鳝组织样品的保存：每种组织单独放在3号样品袋中，-20°C保存。
【文档编号】G01N1/04GK104359704SQ201410692709
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年11月26日 优先权日:2014年11月26日
【发明者】胥宁, 艾晓辉, 杨移斌, 董靖, 杨秋红, 刘永涛 申请人:中国水产科学研究院长江水产研究所