用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条的制作方法
【专利摘要】本实用新型提供了一种用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其包括硬质底板，其上表面叠设有胶层，胶层上依次粘贴样品垫、结合垫、多孔硝酸纤维素膜和吸水滤纸；样品垫为玻璃纤维膜或聚酯膜；结合垫为吸附标记抗体的多孔玻璃纤维膜，标记抗体为带有标记物的特定性蛋白的抗体；硝酸纤维素膜孔径2-10μm，其上垂直液体层析流动方向设置有条带状的检测区域和对照区域，检测区域内固定有所述特定性蛋白的抗体，对照区域内固定有标记抗体的二抗；样品垫下游端搭接于结合垫的上游端之上，结合垫下游端搭接于硝酸纤维素膜的上游端之上，吸水滤纸的上游端搭接于硝酸纤维素膜的下游端之上。本实用新型可用于检测肉中是否掺假。
【专利说明】用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种用于检测肉中是否掺有某种动物肉(即，检测肉中是否掺假)的免疫层析试纸条，可检测动物(包括但不限于牛、羊)等肉中掺入的其它动物(包括但不限于猪、鸭、鸡、马)等肉，属于食品安全领域的快速检测方法。
【背景技术】
[0002]由于利益诱惑，驱使一些不法分子在牛、羊、等高价肉制品中掺杂猪、鸭、猫、狐狸、水獭等低价肉或非食用动物的原料，用香精处理这些低价肉后冒充高价肉进行销售。这些掺假行为不仅会对消费者的经济利益造成损失，对于有些对某种动物过敏的消费者而言甚至可能造成身体伤害，更有甚者会涉及到民族问题造成恶劣的社会影响。随着国家相关监管部门的介入和消费者意识的提高，对肉类消费中肉类成分是否掺假产生了强烈的需求。
[0003]人们对肉类掺假的研宄已经开展了多年，目前的技术主要基于对肉品中特异性蛋白、DNA、脂肪酸等分子结构、序列或组成进行分析，涉及的技术手段包括酶联免疫、聚合酶链式反应、电泳、色谱、生物传感分析等。其中，DNA检测方法和酶联免疫法是目前用于肉类检测的成熟方法。DNA分子具有高度的保守型、种间特异性强、较高的热稳定性等优点，聚合酶链式反应通过检测特异的DNA片段，可独立用于分析样品中是否含有某类动物的成分；但是DNA技术需要昂贵的设备，专业的操作人员，检测过程繁琐且费时多，而且DNA技术的高灵敏度导致其容易被污染，这一方面对样品的采集有更高的要求，另一方面对检测的环境也有更高的要求，这些缺点导致DNA肉类掺假检测技术只能在发达地区少量应用，并不适合大规模推广及应用。酶联免疫法属于免疫检测技术，在肉类掺假中，主要检测肉类中动物的特异性蛋白，有较高的敏感度。酶联免疫法属于很成熟的检测方法，但是其具有如下缺点:需要配置检测设备、需要专业人员操作、检测步骤复杂且费时，适用于有一定技术及资金实力的实验室。其他诸如电泳、色谱等方法，由于各种原因，并未被开发。
[0004]免疫层析技术属于一种现场快速的免疫检测方法，最常见的免疫层析技术是胶体金免疫层析，它利用了抗原抗体反应的特异性及胶体金的肉眼可见性。免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为:GICA。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于临床诊断、家庭自检、食品安全、农畜牧业等领域的检测。胶体金免疫层析技术具有如下优点:使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在15分钟内完成；成本低，不需要特殊的仪器设备；应用范围广，可适应多种检测条件；可以进行多项检测，若阳性样本比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；标记物稳定，标记样品在4°C贮存两年年以上，无信号衰减现象；胶体金本身为红色，不需要加入发色试剂，省却了酶标的致癌性底物及终止液的步骤，对人体无毒害。
[0005]传统的胶体金免疫层析试纸条的结构，通常是在底衬上依序设置样品垫、设有胶体金颗粒标记物的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，硝酸纤维素膜上设有检测线和控制线。针对具体检测项目的胶体金免疫层析试纸条，在传统试纸条结构的基础上会对所用试剂材料及具体结构有所改动。例如:
[0006]CN 202814977 U公开了一种胱抑素C胶体金免疫层析检测试纸条，其采用了生物素-亲和素微信号放大系统，在检测样品中胱抑素C过程中，扩大了胱抑素C的信号，增加检测灵敏度，避免因信号太弱而出现假阴或漏检。
[0007]CN 202548130 U公开了一种改进的免疫层析试纸条，其中在吸水垫上安装了一个RFID射频卡，该RFID射频卡产生的数据通过UPT上转发光仪器中的RFID阅读仪器读出，使检测精准度提尚。
[0008]CN 202735347 U公开了一种新型临床检测免疫层析试纸条，该试纸条包括底板，底板上依次相互搭接有长条形样品垫、圆形样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，长条形样品垫和圆形样品垫下面设有红细胞过滤膜，硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，该现有技术通过改变样品垫形状，在全血样品检测时实现红细胞和血清的有效分离，提高检测结果的准确度。
[0009]CN 203396776 U公开了一种HIT抗体检测免疫荧光层析试纸条，该试纸条由依次在衬板上相互搭接的样品垫、反应膜和吸收垫组成，样品垫两端分别设置有第一加样点和第二加样点，反应膜固定有一条内部质控带和至少一条抗体检测带，该HIT抗体检测免疫荧光层析试纸条，可实现半定量或定量检测，为肝素诱导的血小板减少症及相关并发症的诊断提供较为可靠实用的方法。
[0010]CN 202676702 U公开了一种胶体金免疫层析定量检测试纸，包括试剂卡槽、衬板、样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水纸，试剂卡槽包括上壳体和下壳体，上壳体与所述下壳体卡扣连接，上壳体设有第一孔洞和第二孔洞，样品垫置于第一孔洞下方，硝酸纤维素膜置于第二孔洞下方，衬板固定于试剂卡槽中，样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次排列连接于衬板上表面，硝酸纤维素膜上设有至少三条检测线，检测线中包被有已知量的抗原或者抗体，通过多条检测线与待检测样品的定量结合与检测，实现对待检测样品的定量检测。
[0011]然而，上述这些现有技术的试纸条均是针对特定的而设计的，这些试纸条并不能用来检测肉类是否掺假，无法适应肉类食品安全领域的快速检测需求。目前未见关于肉类掺假快速检测技术的报道。
实用新型内容
[0012]本实用新型的主要目的在于提供一种用于检测肉中是否掺假的免疫层析试纸条，应用该试纸条能够快速、简便地检测出某种动物(包括但不限于牛、羊等)肉中是否掺入了其它动物(包括但不限于猪、鸭、鸡、马等)肉，以满足各个层面的现场快速检测需求。
[0013]为实现上述目的，本实用新型使用不同动物的血清白蛋白的特异性抗体进行标记，另外的特异性抗体进行NC膜包被，做出用于肉中掺假检测的免疫层析试纸条。
[0014]具体而言，本实用新型提供了一种用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，该免疫层析试纸条包括硬质底板，于硬质底板的上表面叠设有一层胶层，按照液体层析流动上下游方向，胶层上依次粘贴有样品垫、结合垫、多孔硝酸纤维素膜和吸水滤纸；其中:
[0015]所述样品垫为玻璃纤维膜或聚酯膜；
[0016]所述结合垫为吸附标记抗体的多孔玻璃纤维膜，所述标记抗体为带有标记物的所述某种动物的特定性蛋白的抗体；
[0017]所述多孔硝酸纤维素膜为孔径2-10 μ m的多孔硝酸纤维素膜，多孔硝酸纤维素膜上垂直液体层析流动方向设置有条带状的检测区域和对照区域，检测区域内固定有所述特定性蛋白的抗体，对照区域内固定有标记抗体的二抗，例如羊抗鼠IgG ;
[0018]样品垫下游端搭接于结合垫的上游端之上，结合垫下游端搭接于多孔硝酸纤维素膜的上游端之上，吸水滤纸的上游端搭接于多孔硝酸纤维素膜的下游端之上。
[0019]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条还可包括卡壳，卡壳内容置硬质底板、样品垫、结合垫、多孔硝酸纤维素膜和吸水滤纸，且卡壳上表面对应样品垫的位置开设加样窗口，对应多孔硝酸纤维素膜的检测区域和对照区域的位置开设观察窗口。
[0020]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条中，所述样品垫为孔径2-8 μm的多孔玻璃纤维膜或多孔聚酯膜；所述结合垫为孔径2-8 μ m的多孔玻璃纤维膜。
[0021]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条中，所述某种动物为猪、鸭、鸡、狐狸、水獭或马。
[0022]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条中，所述特定性蛋白为免疫球蛋白或血清白蛋白或肌钙蛋白。
[0023]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条中，结合垫吸附的带有标记物的特异性蛋白的抗体与检测区域内固定的特定性蛋白的抗体相同或不同。
[0024]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条中，所述标记物为胶体金粒子、荧光微球、磁性微球或胶乳粒子，标记物粒径为0.02-0.8 μ mo
[0025]根据本实用新型的具体实施方案，本实用新型的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条中，所述底板是作为硝酸纤维素膜、吸水纸、样品垫、结合垫的支撑物，其可以是涂了胶的PVC硬质板，其中PVC底板的颜色包括白色和黑色等不同的颜色。
[0026]本实用新型所描述的是用于各种肉中掺假检测的免疫层析试纸条。所述的肉中掺假检测的样品指的是包括但不限于牛、羊肉等高价肉，掺假的肉的动物类别包括但不限于猪、鸭、鸡、马、狐狸、水獭等。
[0027]根据本实用新型的一个具体实施案例，猪血清白蛋白的特异性单抗I用于标记胶体金，标记后的胶体金抗体复合物，喷点于玻璃纤维膜上，然后在鼓风干燥箱中37°C干燥24小时，然后切割成30cm*0.5cm的长条，作为结合垫。猪血清白蛋白的另一个特异性单抗包被在硝酸纤维素膜上作为T线(检测区域)，C线(对照区域)包被的是羊抗鼠IgG，包被后的硝酸纤维素膜在鼓风干燥箱中37°C干燥2小时。干燥后的硝酸纤维素膜贴于PVC底板上，并粘贴结合垫、样品垫和吸水纸，组成检测卡的大板，使用切条机将此大板切割成0.4cm宽，装入检测卡的卡壳为肉类中猪肉成分掺假的快速检测卡。本实用新型的检测卡在检测中，需要将待检测肉品绞碎成肉泥，然后用缓冲液包括但不限于PBS进行10-50倍稀释，取样50-150ul于检测卡的样品孔中，在5-10分钟后观察检测线和控制线的条带颜色深浅。T线接近或深于C线显示肉类样品中掺有猪肉，T线明显浅于C线显示肉类样品中没有猪肉。
[0028]根据本实用新型的又一个具体实施案例，猪血清白蛋白的特异性单抗I用于标记焚光微球，此焚光微球的激发波长为480nm-560nm，标记后的焚光微球抗体复合物，喷点于玻璃纤维膜上，然后在鼓风干燥箱中37°C干燥24小时，然后切割成30cm*0.5cm的长条，作为结合垫。猪血清白蛋白的另一个特异性单抗包被在硝酸纤维素膜上作为T线，C线包被的是羊抗鼠IgG，包被后的硝酸纤维素膜在鼓风干燥箱中37°C干燥2小时。干燥后的硝酸纤维素膜贴于PVC底板上，并粘贴结合垫、样品垫和吸水纸，组成检测卡的大板，使用切条机将此大板切割成0.4cm宽，装入检测卡的卡壳为肉类中猪肉成分掺假的快速检测卡。本实用新型的检测卡在检测中，需要将待检测肉品绞碎成肉泥，然后用缓冲液包括但不限于PBS进行5-100倍稀释，取样50-150ul于检测卡的样品孔中，在5_10分钟后使用荧光检测仪检测T/C线的荧光信号。T线信号强于C线显示肉类样品中掺有猪肉，T线信号低于C线显示肉类样品中没有猪肉。
[0029]与现有技术相比，本实用新型的有益效果在于:
[0030]1，能够提供一种基于抗原抗体反应的高特异性的针对不同肉类特异性蛋白的肉类掺假的现场快速检测方法，能够在15分钟内完成肉类是否掺假的鉴定，提高肉类掺假的检测效率；
[0031]2，本实用新型的检测对操作的要求非常低，非专业人士经过简单的培训即可实现；
[0032]3，本实用新型的检测对于检测实验室设备和设施要求基本没有，大大提高其在基层推广的可能性；
[0033]4，本实用新型的检测成本相比于DNA检测方法有大大的降低；
[0034]5，本实用新型的检测的成本和其他要求，相比于DNA检测方法大大降低。
[0035]综上所述，本实用新型提供一种高效、廉价、简单的肉类掺假检测方法，有利于降低肉类掺假检测的成本，能用于有力打击肉类掺假的违法违规行为，保障人民群众的生命财产安全。
【专利附图】
【附图说明】
[0036]图1为本实用新型一具体实施例的免疫层析检测试纸条的结构示意图。
[0037]图2为本实用新型的带卡壳的免疫层析检测试纸条的结构示意图。
【具体实施方式】
[0038]下面结合具体实施例对本实用新型进一步加以描述。所述实施例旨在以举例方式具体阐明本实用新型，不构成对本实用新型可实施范围的限制。
[0039]实施例1牛肉中猪肉掺假的胶体金免疫层析检测试纸条制备及性能
[0040]请参见图1所示，本实用新型提供了一种用于检测牛肉中是否掺有猪肉的免疫层析试纸条，该免疫层析试纸条包括硬质底板101 (PVC硬质板)，于硬质底板101的上表面叠设有一层胶层102，按照液体层析流动上下游方向(图中从左至右方向)，胶层102上依次粘贴有样品垫103、结合垫104、多孔硝酸纤维素膜105和吸水滤纸106 ;其中:
[0041]所述样品垫103为多孔玻璃纤维膜；其孔径2-8 μπι ;
[0042]所述结合垫104为吸附标记抗体的多孔玻璃纤维膜，其孔径2-8 μ m，所述标记抗体为带有标记物的猪特定性蛋白的抗体；
[0043]所述多孔硝酸纤维素膜105为孔径2-10 μπι的多孔硝酸纤维素膜，多孔硝酸纤维素膜105上垂直液体层析流动方向设置有条带状的检测区域501和对照区域502，检测区域501内固定有所述猪特定性蛋白的抗体，对照区域502内固定有标记抗体的二抗；
[0044]样品垫103下游端搭接于结合垫104的上游端之上，结合垫104下游端搭接于多孔硝酸纤维素膜105的上游端之上，吸水滤纸106的上游端搭接于多孔硝酸纤维素膜105的下游端之上。
[0045]如图2所示，本实施例的免疫层析试纸条还包括卡壳107，卡壳107内容置硬质底板101、样品垫103、结合垫104、多孔硝酸纤维素膜105和吸水滤纸106，且卡壳107上表面对应样品垫103的位置开设加样窗口 701，对应多孔硝酸纤维素膜105的检测区域和对照区域的位置开设观察窗口 702。
[0046]本实施例的试纸条可按照以下方法制备得到:
[0047]烧制粒径为40nm的胶体金:10ml的0.01 %的氯金酸溶液煮沸后加入I %的柠檬酸1ml，继续煮沸至氯金酸溶液变黑，然后再继续煮沸10分钟，加水补充烧制后的胶体金体积至100ml。使用氢氧化钠将胶体金的pH调节为8.3，加入合适量的抗猪血清白蛋白的单克隆抗体A，反应30分钟；加入5%的BSA，反应20分钟；16000转30分钟离心，除去上清液，用0.0lM的PB复溶胶体金标记物。使用含有0.5%蔗糖的0.0lM的PBS溶液100倍稀释胶体金标记物，并用ZX1010喷点平台将胶体金标记物喷点于玻璃纤维膜上，鼓风干燥箱中干燥24小时；将干燥后的胶体金标记物切割成30cm*0.5cm的形状，待用。
[0048]在赛多利斯的CN 95硝酸纤维素膜设置检测区域和对照区域，检测区域(检测线)包被2mg/ml的抗猪血清白蛋白的单克隆抗体，对照区域(控制线)包被lmg/ml的羊抗鼠IgG，鼓风干燥箱中干燥2小时；将干燥后的硝酸纤维素膜贴于PVC底板；再将切割后的胶体金标记物贴于硝酸纤维素膜靠近加样窗口(加样孔)的一端，作为结合垫；在结合垫的另一端贴上30cm*l.5cm的玻璃纤维膜，作为样品垫；在硝酸纤维素膜的另一端贴上30cm*2cm的吸水滤纸，作为吸水垫。使用斩切机将粘贴后的检测卡大板切成0.4cm宽的试纸条，装入卡壳中。其中卡壳的底部起到支撑整个检测试纸条的作用，卡壳的顶部，用于与底部一起固定试纸条在检测卡内部；卡壳上面设置加样窗口(加样孔)和观察窗口，加样窗口为滴加样品所用，通过此孔道，样品流到玻璃纤维膜上，并进一步完成层析；观察窗口用于观察检测卡上检测线和控制线的条带颜色。
[0049]本实施例的试纸条在用于检测时，可按照以下操作进行:
[0050]将含有不同比例(猪肉:牛肉=P/B，0%、1%、5%、20%、50%、100% )猪肉的牛肉捣碎lg，加入0.0lM的PBS共10ml，反复震荡混匀，取上清液10ul加入到猪肉掺假的胶体金免疫层析检测卡的加样孔中，5分钟后观察检测线和控制线的颜色深度，以检测线的颜色接近或深于控制线判断样品为有猪肉掺假，检测线的颜色明显浅于控制线判断样品为无猪肉掺假。当牛肉样品中的猪肉成分含量为0%和1%时，检测线的颜色深于控制线；当牛肉样品中的猪肉成分含量达到5 %、20 %、50 %、100 %时，检测线与控制线一样深，即猪肉掺假的胶体金免疫层析检测卡的灵敏度能达到5%。
[0051]检测表明，通过猪肉掺假的胶体金免疫层析检测卡，通过检测样品中的猪血清白蛋白能够快速高灵敏度地检测出牛肉中的猪肉掺假成分。
[0052]实施例2牛肉中猪肉掺假的荧光免疫层析检测试纸条制备及性能
[0053]按照经典方法，将抗猪血清白蛋白的单克隆抗体A标记duke的羧基修饰荧光微球(直径为0.4um，激发/发射波长为470nm和51nm):在50mM的MES溶液中溶解单克隆抗体A的浓度为5mg/ml ;在Iml的抗体溶液中加入Iml的2%的荧光微球，室温下孵育15分钟；加入8mg的EDC到此反应液中，震荡混合；使用氢氧化钠调节pH为6，室温下震荡反应2小时；加入甘氨酸(浓度调节为10mM)终止反应30分钟；离心分离荧光微球与未反应的抗体。使用含有0.5%蔗糖的0.0lM的PBS溶液1000倍稀释荧光微球标记物，并用ZX1010喷点平台将荧光微球标记物喷点于玻璃纤维膜上，鼓风干燥箱中干燥2小时；将干燥后的荧光微球标记物切割成30cm*0.5cm的形状，待用。
[0054]在赛多利斯的CN 95硝酸纤维素膜上设置线条状的检测区域和对照区域，检测区域(检测线)包被2mg/ml的抗猪血清白蛋白的单克隆抗体，对照区域(控制线)包被Img/ml的羊抗鼠IgG，鼓风干燥箱中干燥2小时；将干燥后的硝酸纤维素膜贴于PVC底板，再将切割后的荧光抗体标记物贴于硝酸纤维素膜靠近加样窗口(加样孔)的一端，作为结合垫；在结合垫的另一端贴上30cm*l.5cm的玻璃纤维膜，作为样品垫；在硝酸纤维素膜的另一端贴上30cm*2cm的吸水滤纸，作为吸水垫。使用斩切机将粘贴后的检测卡大板切成0.4cm宽的试纸条，装入卡壳中。其中卡壳的底部起到支撑整个检测试纸条的作用，卡壳的顶部用于与底部一起固定试纸条在检测卡内部；卡壳上面设置加样窗口(加样孔)和观察窗口，加样窗口为滴加样品所用，通过此孔道，样品流到玻璃纤维膜上，并进一步完成层析；观察窗口用于激光诱导检测仪扫描检测卡上检测线和控制线的荧光信号。
[0055]将含有不同比例(猪肉:牛肉=Ρ/Β，0%、0.5%、1%、5%、100% )猪肉的牛肉捣碎lg，加入0.0lM的PBS共10ml，反复震荡混匀，取上清液10ul加入到猪肉掺假的荧光免疫层析检测卡的样品孔中，10分钟后使用激光诱导检测仪扫描硝酸纤维素膜膜上检测线和控制线的荧光信号，以检测线的信号高于控制线判断样品为有猪肉掺假，检测线的信号低于控制线的信号为无猪肉掺假。本实施例中，当牛肉样品中的猪肉成分含量达到0.5%时，检测线的信号高于控制线的信号，即猪肉掺假的荧光免疫层析检测卡的灵敏度能达到0.
[0056]检测表明，通过猪肉掺假的荧光免疫层析检测卡，通过检测样品中的猪血清白蛋白能够快速高灵敏度地检测出牛肉中的猪肉掺假成。
【权利要求】
1.一种用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，该免疫层析试纸条包括硬质底板，于硬质底板的上表面叠设有一层胶层，按照液体层析流动上下游方向，胶层上依次粘贴有样品垫、结合垫、多孔硝酸纤维素膜和吸水滤纸；其中: 所述样品垫为玻璃纤维膜或聚酯膜； 所述结合垫为吸附标记抗体的多孔玻璃纤维膜，所述标记抗体为带有标记物的所述某种动物的特定性蛋白的抗体； 所述多孔硝酸纤维素膜为孔径2-10 μ m的多孔硝酸纤维素膜，多孔硝酸纤维素膜上垂直液体层析流动方向设置有条带状的检测区域和对照区域，检测区域内固定有所述特定性蛋白的抗体，对照区域内固定有标记抗体的二抗； 样品垫下游端搭接于结合垫的上游端之上，结合垫下游端搭接于多孔硝酸纤维素膜的上游端之上，吸水滤纸的上游端搭接于多孔硝酸纤维素膜的下游端之上。
2.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，该免疫层析试纸条还包括卡壳，卡壳内容置硬质底板、样品垫、结合垫、多孔硝酸纤维素膜和吸水滤纸，且卡壳上表面对应样品垫的位置开设加样窗口，对应多孔硝酸纤维素膜的检测区域和对照区域的位置开设观察窗口。
3.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，所述样品垫为孔径2-8 μ m的多孔玻璃纤维膜或多孔聚酯膜；所述结合垫为孔径2-8 μ m的多孔玻璃纤维膜。
4.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，所述某种动物为猪、鸭、鸡、狐狸、水獭或马。
5.根据权利要求1或4所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，所述特定性蛋白为免疫球蛋白或血清白蛋白或肌钙蛋白。
6.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，结合垫吸附的带有标记物的特异性蛋白的抗体与检测区域内固定的特定性蛋白的抗体相同或不同。
7.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，所述标记物为胶体金粒子、荧光微球、磁性微球或胶乳粒子，标记物粒径为0.02-0.8 μ--ο
8.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，所述标记抗体的二抗为羊抗鼠IgG。
9.根据权利要求1所述的用于检测肉中是否掺有某种动物肉的免疫层析试纸条，其特征在于，所述硬质底板为PVC硬质板。
【文档编号】G01N33/543GK204241478SQ201420784407
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月11日 优先权日:2014年12月11日
【发明者】王志, 喻晓峰 申请人:北京智峰博泰生物科技有限公司