用于分离微囊泡的方法与流程

文档序号:16702339发布日期:2019-01-22 21:46阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于从生物样品中提取核酸的方法,其包括:

(a) 提供生物样品;

(b) 在足以使微囊泡级分保留在捕获表面之上或其中的条件下,使所述生物样品与捕获表面接触,其中所述捕获表面包含带正电的并且由季铵R-CH2-N+(CH3)3官能化的三个膜,其中所述三个膜彼此直接邻近;

(c) 在所述微囊泡处于所述捕获表面之上或其中时,裂解所述微囊泡级分;和

(d) 从所述微囊泡级分中提取核酸。

2.如权利要求1所述的方法,其中所述膜是强化型稳定纤维素膜。

3.如权利要求1所述的方法,其中所述三个膜的每一个具有至少3 um的孔径。

4.如权利要求1所述的方法,其中所述膜具有在3-5 um范围内的孔径。

5.如权利要求1所述的方法,其中所述三个膜彼此相同。

6.如权利要求1所述的方法,其中所述生物样品是血浆、血清、尿、脑脊髓液或细胞培养物上清液。

7.如权利要求1所述的方法,其中所述步骤(a) 进一步包括使所述生物样品与装载缓冲液接触。

8.如权利要求7所述的方法,其中所述装载缓冲液具有中性pH。

9.如权利要求1所述的方法,其中所述核酸是RNA。

10.如权利要求9所述的方法,其中所述RNA是mRNA、miRNA或其组合。

11.一种用于从生物样品中提取核酸的方法,其包括:

(a) 提供生物样品;

(b) 在足以使微囊泡级分保留在捕获表面之上或其中的条件下,使所述生物样品与捕获表面接触,其中所述捕获表面包含带正电的并且由季铵R-CH2-N+(CH3)3官能化的三个膜,其中所述三个膜彼此直接邻近;

(c) 从所述捕获表面洗脱所述微囊泡,以获得微囊泡级分;和

(d) 从所述微囊泡级分中提取核酸。

12.如权利要求11所述的方法,其中来自步骤(c) 的所述洗脱的微囊泡级分通过旋转浓缩器进行浓缩,以获得浓缩的微囊泡级分,并且其中从所述浓缩的微囊泡级分中提取核酸。

13.如权利要求11所述的方法,其中所述三个膜的每一个包含再生纤维素。

14.如权利要求11所述的方法,其中所述三个膜的每一个具有至少3 um的孔径。

15.如权利要求11所述的方法,其中所述膜具有在3-5 um范围内的孔径。

16.如权利要求11所述的方法,其中所述三个膜彼此相同。

17.如权利要求11所述的方法,其中所述生物样品是血浆、血清、尿、脑脊髓液或细胞培养物上清液。

18.如权利要求11所述的方法,其中所述步骤(a) 进一步包括使所述生物样品与装载缓冲液接触。

19.如权利要求18所述的方法,其中所述装载缓冲液具有中性pH。

20.如权利要求11所述的方法,其中所述核酸是RNA。

21.如权利要求20所述的方法,其中所述RNA是mRNA、miRNA或其组合。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1