一种不同区段鹿茸粉的鉴定方法及应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种不同区段鹿茸粉的鉴定方法及应用，属于鹿茸制品的质量鉴定【技术领域】。本发明所提供的方法是先提取不同区段鹿茸中的脂溶性成分和水溶性成分，并测定脂溶性成分指数和水溶性成分指数，计算获得鹿茸有效成分指数，建立不同区段鹿茸有效成分指数数据库，检测待测样品的鹿茸有效成分指数，再将所得指数与数据库中不同区段鹿茸标准有效成分指数进行比对，确定待测样品属于鹿茸的具体区段。本发明所提供的方法具有可靠性强、准确度高的特点，适合于鹿茸粉及鹿茸产品的质量鉴定。
【专利说明】-种不同区段鹿首粉的鉴定方法及应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种不同区段鹿茸粉的鉴定方法及应用，属于鹿茸制品的质量鉴定技 术领域。
【背景技术】
[0002] 鹿茸是我国传统的中药材，W其独特的壮阳、抗疲劳、抗老化、提高免疫力、提高造 血功能等特性而闻名遐选。鹿茸的药用和保健价值沿长轴自上而下逐渐降低。鹿茸不同部 位价格差距很大，鹿茸最上面尖部的价格要比最下面基部高数十倍，甚至上百倍。对整枝鹿 茸和鹿茸片来说，我们很容易通过肉眼观察判断其质量和鹿茸片在鹿茸中所处的部位。但 由于该两种产品服用困难，因此人们常常将鹿茸加工成粉剂来食用或加工成深加工产品。 对于鹿茸的粉剂来说，我们无法通过肉眼观察判断其在鹿茸上的取材部位，因而也就难W 评估其质量和价格的高低。目前最常用的检测鹿茸粉取材部位的方法为"灰分分析法"，但 鹿茸灰分在鹿茸长轴上自上而下不是线性关系，所W测定结果不可靠。因而鹿茸"灰分分析 法"并没有得到广泛的应用。除此之外，市场上再没有能够检测鹿茸粉质量的方法。由于市 场上缺失鹿茸粉质量检测、鉴定标准，导致其质量一直无法取得消费者的信赖，严重限制了 鹿茸深加工制品的发展。
【发明内容】
[0003] 为解决上述问题，本发明提供了一种不同区段鹿茸粉的鉴定方法，所采取的技术 方案如下：
[0004] 本发明的目的在于提供一种不同区段鹿茸粉的鉴定方法，该方法是提取不同区段 鹿茸中的脂溶性成分和水溶性成分，并测定脂溶性成分指数和水溶性成分指数，计算获得 鹿茸有效成分指数，建立不同区段鹿茸有效成分指数数据库，检测待测样品的鹿茸有效成 分指数，在将所得指数与数据库中不同区段鹿茸标准有效成分指数进行比对，确定待测样 品属于鹿茸的具体区段。
[0005] 所述方法的步骤如下：
[0006] 1)提取不同区段鹿茸粉中的水溶性成分和脂溶性成分；
[0007] 2)测定步骤2)所得的水溶性成分和脂溶性成分的水溶性指数WI和脂溶性指数 LI，计算获得鹿茸有效成分指数ECV ;
[000引 3)根据步骤2)所得的不同区段鹿茸有效成分指数ECV建立鹿茸区段鉴定数据 库；
[0009] 4)检测待测样品的鹿茸有效成分指数ECV，并与步骤3)所得的鹿茸区段鉴定数据 库中不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV进行比对，确定待测样品所属鹿茸的区段。
[0010] 所述不同鹿茸区段，是指蜡片区鹿茸、粉片区鹿茸、血片区鹿茸和骨片区鹿茸。
[0011] 所述蜡片区鹿茸，是指位于鹿茸的最上段，因不含血管，鹿茸片似蜡样，保健和药 用价值最高；所述粉片区鹿茸，是指位于鹿茸中上段，含血管较少或只含毛细血管，切片呈 粉红色，保健和药用价值次之；所述血片鹿茸，是指位于鹿茸中断和中下段，富含血管，切片 血红色，保健和药用价值较粉片低；所述骨片区鹿茸，是指位于鹿茸最下段，鹿茸骨化严重， 切片边缘有明显的骨密质环，保健和药用价值最低。
[0012]脂溶性指数 LI = L X (50/TL);
[001 引 水溶性指数 WI = PA/RF X 20 X 巧0/TW);
[0014] 其中，L是通过索式提取法提取的待测样品脂溶性成分，化是鹿茸最尖部脂溶性 物质的百分含量，PA为凝胶色谱中SOOOKDa分子量W下物质的峰面积，RF是校正因子，为平 行测定的细胞色素C峰下面积与浓度的比值，TW是鹿茸最尖部（从上往下1cm段）水溶性 物质的WI值，即TW = PA(最尖部）/RF X 20 ;
[0015] 步骤1)所述提取不同区段鹿茸粉中的水溶性成分是指通过传统方法能够提取出 来的水溶性成分的总和；所述提取不同区段鹿茸粉中的脂溶性成分，是通过索式提取法提 取的脂溶性成分的总和。
[0016] 步骤2)所述测定水溶性指数WI和脂溶性指数LI，是选用细胞色素C作为内参，用 凝胶色谱进行测定，根据如下公式进行计算获得：
[0017] 脂溶性指数 LI = L X (50/TL);
[001 引 水溶性指数 WI = PA/RF X 20 X 巧0/TW);
[0019] 其中，L是通过索式提取法提取的待测样品脂溶性成分，化是鹿茸最尖部脂溶性 物质的百分含量，PA为凝胶色谱中SOOOKDa分子量W下物质的峰面积，RF是校正因子，为平 行测定的细胞色素C峰下面积与浓度的比值，TW是鹿茸最尖部（从上往下1cm段）水溶性 物质的WI值，即TW = PA(最尖部）/RF X 20 ;
[0020] 所述鹿茸有效成分指数ECV，是水溶性指数WI与脂溶性指数LI之和。
[0021] 步骤3)所述鹿茸区段鉴定数据库，根据步骤2)测定结果确定蜡片区鹿茸、粉片区 鹿茸、血片区鹿茸和骨片区鹿茸所对应的鹿茸有效成分指数ECV。
[0022] 步骤4)所述不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV分别是：蜡片区鹿茸92. 2,粉片 区鹿茸65. 1，血片区鹿茸40. 6,骨片区鹿茸24. 5。
[0023] 所述方法的具体步骤如下：
[0024] 1)提取蜡片区鹿茸、粉片区鹿茸、血片区鹿茸和骨片区鹿茸中的脂溶性成分和水 溶性成分；
[0025] 2) W细胞色素C为内参，用凝胶色谱测定步骤1)所得的脂溶性成分和水溶性成分 的峰面积，根据W下公式计算水溶性指数WI与脂溶性指数LI :
[0026] 脂溶性指数 LI = L X (50/TL);
[0027] 水溶性指数 WI = PA/RF X 20 X 巧0/TW);
[002引其中，L是通过索式提取法提取的待测样品脂溶性成分，化是鹿茸最尖部脂溶性 物质的百分含量，PA为凝胶色谱中SOOOKDa分子量W下物质的峰面积，RF是校正因子，为平 行测定的细胞色素C峰下面积与浓度的比值，TW是鹿茸最尖部（从上往下1cm段）水溶性 物质的WI值，即TW = PA(最尖部）/RF X 20 ;
[0029] 最后，根据公式ECV = WI+LI，获得各个区段的鹿茸有效成分指数ECV ;
[0030] 3)根据步骤2)所得的各个区段的鹿茸有效成分指数ECV建立鹿茸区段鉴定数据 库，并获得不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV ;
[0031] 所述不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV分别是：蜡片区鹿茸92. 2,粉片区鹿茸 65. 1，血片区鹿茸40. 6,骨片区鹿茸24. 5。
[0032] 4)测定待测样品的鹿茸有效成分指数ECV，与步骤3)所得的鹿茸区段鉴定数据库 中不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV进行比对，确定待测样品所属的鹿茸区段。
[0033] 所述方法用于鉴定鹿茸粉及其制品的质量。
[0034] 本发明取得的有益效果如下：
[0035] 鹿茸的有效成分在鹿茸长轴上自而下逐渐降低，价格上差距也较大，蜡片的价格 要高于其他部位数十甚至上百倍。目前常用灰分分析来来评价鹿茸粉的质量，但鹿茸灰分 在鹿茸长轴上自上而下不是线性关系，无法准确代表鹿茸粉质量。本方法选择利用"脂溶性 成分和水溶性成分的总和"作为鹿茸有效成分的标测指标来评价鹿茸质量，填补了鹿茸市 场上缺乏鹿茸粉质量鉴定标准的空白，从源头保证了鹿茸制品的保健价值和药效；为鹿茸 质量体系的建立提供了技术支持，为鹿茸产业的可持续性发展保驾护航。
【专利附图】
【附图说明】
[0036] 图1为鹿茸灰分与鹿茸粉取样部位的关系图。
[0037] 图2为ECV值与鹿茸粉取样部位的关系图。
【具体实施方式】
[003引下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
[0039] W下实施例所用材料、试剂、仪器和方法，未经特殊说明，均为本领域常规材料、试 剂、仪器和方法，均可通过商业渠道获得。
[0040] 实施例1鹿茸不同部位灰分测定
[0041] 1)将干鹿茸按照传统方式分为4个区段，每区段的两端各取1个样品，共8个样 品，从下到上标记为1-8号，每个样品质量为5g，粉碎，二号筛过滤。
[0042] 2)将样品置于灼烧至恒重（a)的相蜗中，称重为b，准确至0. Olg。马弗炉内550°C 灼烧约化，完全灰化至恒重，称重为C。
[00创 3)按照公式X = (c-a)/(b-a) X 100%，计算各个部位的灰分含量。
[0044] 4)重复操作步骤1)到步骤3) 3次，获得3个平行数据，取平均数，代表每个区段的 灰分含量，结果如图1所示。从图1中可W看出，灰分含量从上而下不是线性关系。
[0045] 实施例2鹿茸不同区段ECV值数据库的建立
[0046] 1)提取不同区段鹿茸脂溶性成分和水溶性成分
[0047] 将鹿茸按照传统方式分为4个区段，分别为蜡片区、粉片区、血片区和骨片区，将 各片区磨成粉剂，45目筛子过滤。每区段各取0.5g用索式提取法提取测定脂溶性物质含 量（L)。每区段各取0. 5g融入10ml磯酸盐缓冲液化05M，P册.9)中，充分溶解，离屯、，取 上清，用于凝胶色谱分析。用已知浓度的细胞色素C作为内参。
[0048] 2)利用公式计算各区段的脂溶性物质的指数值（LI)和水溶性物质的指数值 (WI)，本方法设定鹿茸有效成分最高值为100 (鹿茸尖部的有效成分值为100,其余部位有 效成分值W测定数据按比例降低），脂溶性成分和水溶性成分各占50 %。
[0049] LI = L X 巧0/化）
[0050] WI = PA/RF X 20 X (50/TW)
[005U ECV = LI+WI
[0化2] 注；PA ;凝胶色谱图中SOOOkD分子量W下物质的峰下面积
[005引 RF ;校正因子，平行测定的细胞色素C峰下面积与浓度的比值
[0化4] TW ;鹿茸最尖部水溶性物质的PA/RF X 20值，通过测定计算此值为0. 0135
[0化5] TL ;鹿茸最尖部脂溶性物质的百分含量，通过测定计算，此值为0. 052
[0056] 3)通过上述公式计算鹿茸四个区段的各自的ECV。
[0057] 4)鉴于我国典籍记载有药用价值的鹿茸为梅花鹿茸和马鹿茸，测量样品来源于梅 花鹿和马鹿两个鹿种，每个鹿种进行5次平行测量，各平行测量所用鹿茸样品均取自13个 鹿场，2011-2014年的梅花鹿和马鹿共139头，其中梅花鹿72头，马鹿67头，每年每头鹿取 样一次，包括四个区段，记为一个样本，总样本量为556,建立数据库后取各个区段鹿茸ECV 的平均值，获得每区段ECV的标准数值（如表1)。
[0化引表1鹿茸区段鉴定数据库不同区段鹿茸标准ECV值
[0059]
【权利要求】
1. 一种不同区段鹿茸粉的鉴定方法，其特征在于，提取不同区段鹿茸中的脂溶性成分 和水溶性成分，并测定脂溶性成分指数和水溶性成分指数，计算获得鹿茸有效成分指数，建 立不同区段鹿茸有效成分指数数据库，检测待测样品的鹿茸有效成分指数，再将所得指数 与数据库中不同区段鹿茸标准有效成分指数进行比对，确定待测样品属于鹿茸的具体区 段。
2. 权利要求1所述方法，其特征在于，步骤如下： 1) 提取不同区段鹿茸粉中的水溶性成分和脂溶性成分； 2) 分别测定步骤2)所得的水溶性成分和脂溶性成分的水溶性指数WI和脂溶性指数 LI，计算获得鹿茸有效成分指数ECV ; 3) 根据步骤2)所得的不同区段鹿茸有效成分指数ECV建立鹿茸区段鉴定数据库； 4) 检测待测样品的鹿茸有效成分指数ECV，并与步骤3)所得的鹿茸区段鉴定数据库中 不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV进行比对，确定待测样品所属鹿茸的区段。
3. 权利要求2所述方法，其特征在于，所述不同鹿茸区段，是指蜡片区鹿茸、粉片区鹿 茸、血片区鹿茸和骨片区鹿茸。
4. 权利要求2所述方法，其特征在于，步骤1)所述提取不同区段鹿茸粉中的水溶性成 分是指利用PH7. 0 0. 05M磷酸盐缓冲溶液将鹿茸粉溶解后，通过超声处理提取出来的水溶 性成分的总和；所述提取不同区段鹿茸粉中的脂溶性成分，是通过索式提取法提取的脂溶 性成分的总和。
5. 权利要求2所述方法，其特征在于，步骤2)所述测定水溶性指数WI和脂溶性指数 LI，是选用细胞色素 C作为内参，用凝胶色谱进行测定，根据如下公式进行计算获得： 脂溶性指数LI = L x (50/TL); 水溶性指数 WI = PA/RF x 20 x (50/TW); 其中，L是通过索式提取法提取的待测样品脂溶性成分的百分含量，TL是鹿茸顶部lcm 的脂溶性物质的百分含量，代表LI的最高值，PA为凝胶色谱中SOOOKDa分子量以下物质的 峰面积，RF是校正因子，为平行测定的细胞色素 C峰下面积与浓度的比值，TW是鹿茸顶部 lcm的水溶性物质的WI值，代表WI的最高值； 所述鹿茸有效成分指数ECV，是水溶性指数WI与脂溶性指数LI之和。
6. 权利要求2所述方法，其特征在于，步骤3)所述鹿茸区段鉴定数据库，包含步骤2) 测定的所有蜡片区鹿茸、粉片区鹿茸、血片区鹿茸和骨片区鹿茸的鹿茸有效成分指数ECV。
7. 权利要求2所述方法，其特征在于，步骤4)所述不同区段鹿茸标准有效成分指数 ECV分别是：蜡片区鹿茸92. 2,粉片区鹿茸65. 1，血片区鹿茸40. 6,骨片区鹿茸24. 5。
8. 权利要求2所述方法，其特征在于，具体步骤如下： 1) 提取蜡片区鹿茸、粉片区鹿茸、血片区鹿茸和骨片区鹿茸中的脂溶性成分和水溶性 成分； 2) 以细胞色素 C为内参，用凝胶色谱测定步骤1)所得的脂溶性成分和水溶性成分的峰 面积，根据以下公式计算水溶性指数WI与脂溶性指数LI : 脂溶性指数LI = L x (50/TL); 水溶性指数 WI = PA/RF x 20 x (50/TW); 其中，L是通过索式提取法提取的待测样品脂溶性成分的百分含量，TL是鹿茸最尖部 脂溶性物质的百分含量，PA为凝胶色谱中SOOOKDa分子量以下物质的峰面积，RF是校正因 子，为平行测定的细胞色素 C峰下面积与浓度的比值，TW是鹿茸顶部lcm水溶性物质的WI 值； 最后，根据公式ECV = WI+LI，获得各个区段的鹿茸有效成分指数ECV ; 3) 根据步骤2)所得的各个区段的鹿茸有效成分指数ECV建立鹿茸区段鉴定数据库，并 获得不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV ; 所述不同区段鹿茸标准有效成分指数ECV分别是：蜡片区鹿茸92. 2,粉片区鹿茸65. 1， 血片区鹿茸40. 6,骨片区鹿茸24. 5 ; 4) 测定待测样品的鹿茸有效成分指数ECV，与步骤3)所得的鹿茸区段鉴定数据库中不 同区段鹿茸标准有效成分指数ECV进行比对，确定待测样品所属的鹿茸区段。
9.权利要求1-8所述方法，其特征在于，用于鉴定鹿茸粉及鹿茸制品的质量。
【文档编号】G01N30/88GK104502512SQ201510016444
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2015年1月13日 优先权日:2015年1月13日
【发明者】赵海平, 李春义, 李贺, 董振 申请人:中国农业科学院特产研究所