鹿茸组合物及其制备方法

专利名称：鹿茸组合物及其制备方法
技术领域：
本发明是关于一种鹿茸组合物，尤其指一种具有特殊包覆基材的鹿茸组合物。本发明还进一步相关于一种特殊的鹿茸抽取物，以及鹿茸粉末制造方法。
但目前所使用的舌下或鼻膜喷雾方式亦有许多缺点，例如其表面有大量唾液或鼻涕流动，会带走此处的药物，所以鹿茸抽取液可被吸收的时间甚短；同时因高分子化合物渗透性差，不易被舌下或鼻膜吸收。而且，一般药物在没有包覆基材包覆之下药效消失很快，为了能持续24至48小时的药效，发展一适当的包覆基材实为必要。
在现今制程中，有不少高分子被应用于包覆基材控制释放领域，但大多数的高分子对于鹿茸抽取液并不适合，原因如下(1)鹿茸抽取液含多种高分子化合物，其须与一种具有特殊弹性、吸附力极强的高分子形成一种微胶囊(microencapsulates)，方能使此复合物停留于舌下或鼻膜的时间拉长，以助鹿茸在人体的吸收。
(2)此高分子化合物须不溶于水，而分子大小正好可以容纳鹿茸抽取物与处方中另一些化合物。
(3)所使用的高分子必须是医药级，且不会造成中毒现象。此外，最终产物须经过杀菌步骤，因此，该包覆基材的化学性质须在灭菌状况下，如高温高压，仍保持稳定状态。
为增加该包覆基材以及鹿茸抽取液中的复杂高分子的渗透性，需要溶于一种具有特别水溶性与油溶性双重效果的溶剂。此外，为避免酵素将鹿茸抽取液中的活性因子降解，亦须将酵素活性降至最低；因此，应将一种适用于鹿茸抽取液的酵素抑制剂加入本复合物中。
此外，在美国专利4,702,923中描述一种发酵乳配方，其中添加7-15％重的鹿茸粉；由于其鹿茸含量甚低，因而药效甚微。然由于鹿茸中含有许多高分子化合物，当鹿茸含量高时，会产生水溶性甚低的问题，致使高含量的鹿茸产品难以配制成水溶液或喷雾状包装，限制鹿茸组合物在液体产品中的应用。因此，目前市场上仍无法提供高含量的鹿茸产品。
再者，就鹿茸加工方法而言，传统的鹿茸加工法是将鹿茸用酒精或水(或酒精加水)抽取，然后用冷冻干燥法研磨成粉。此种方法必须先冷冻鹿茸(最好用液态氮)。此种方法的缺点为有许多药物成分无法用酒精/水抽取出来，药效无法发挥，且此种方法相当昂贵。美国专利6,099,867描述一种新的加工方法。此方法是将鹿茸加热于100-120℃，2小时，再经分离、均质、过滤、混合与冷冻干燥等过程。此方法的缺点为加热温度过高且时间过长，许多鹿茸中的有效成分可能会产生化学变化而失去活性。
本发明的另一目的在于提供一种鹿茸组合物的制造方法，能使鹿茸中的活性物质有效包覆于高分子基材中以形成复合物。
本发明的又一目的在于提供一种鹿茸抽取物，由加入特定添加物，并经特殊处理步骤，可制备出含有高含量鹿茸成分的水溶液产品，且相当稳定不会产生沉淀，可充分维持鹿茸中活性物质的稳定。
本发明的再一目的在于提供一种鹿茸粉末制造方法，能维持鹿茸中的有效物质，隔绝病菌或杂质的污染，并彻底杀菌消毒，其制得的产物亦可长期保存。
为实现上述目的，本发明提供的鹿茸抽取物，以包含下列步骤的方式制得(a)提供含有70至90％重量百分比的鹿茸粉末、2至10％重量百分比的胺基酸、1至5％重量百分比的醣类、0.1至2％重量百分比的维生素，以及0.1至3％重量百分比的矿物质的粉状混合物；(b)将该粉状混合物置入一高速搅拌机中，加入70-80℃热水，该混合物与水的比例为1∶1.5至1∶8.0重量比；并加入0.1至1.5％重量百分比的乳化剂、0.1至1.0％重量百分比的安定剂以及0.005至0.2％重量百分比的添加剂，充分混合并加热至50-70℃，10至20分钟；(c)将经步骤(b)处理的混合物置入一中速加温搅拌混合槽内充分混合并加热至60-65℃，30分钟；(d)将经步骤(c)处理的混合物置入真空脱气器中脱气，重复1至4次；(e)将经步骤(d)处理的混合物置入均质机内均质，待均质后，快速冷却至4℃；以及(f)将经步骤(e)处理的混合物置入冷藏低速搅拌的老化缸内，于4℃下低速搅拌12至24小时，完成脱气及老化过程。
其中步骤(c)的均质步骤分为两段压力，第一段介于1,000至1,500psi之间，第二段介于1,500至3,000psI之间；以及该冷却方法为快速冷却。
其中该鹿茸粉末为冷冻干燥的鹿茸粉末；以及该胺基酸至少一种是选自由丙胺酸(alanine)、精胺酸(arginine)、天门冬酰胺(asparigine)、天门冬胺酸(aspartic acid)、胱胺酸(cystine)、谷酰胺(glutamine)、谷胺酸(glutamic acid)、甘胺酸(glycine)、组胺酸(histidine)、异白胺酸(isoleucine)、白胺酸(leucine)、离胺酸(lysine)、甲硫胺酸(methionige)、苯丙胺酸(phenylalanine)、脯胺酸(proline)、丝胺酸(serine)、苏胺酸(threonine)、色胺酸(tryptophan)、酪胺酸(tyrosine)，与缬胺酸(valine)等组成的群组。
其中该脂肪酸至少一种是选自由硬脂酸(stearic acid)、油酸(oleicacid)、亚麻仁油酸(linioleic acid)、月桂酸(lauric acid)、辛酸(caprylic acid)、癸酸(capric acid)、肉苴蔻酸(myristic acid)、棕榈酸(palmitic acid)等组成的群组；以及该醣类至少一种是选自由淀粉(starch)、麦芽糖(maltose)、果醣(fructose)、蔗糖(sucrose)、葡萄糖(glucose)、山梨醣(sorbitol)、树胶醛醣(arabinose)、木醣(xylose)、乳醣(lactose)、玉米糖浆(corn syrup solid)、麦芽糖环糊精(maltodextrins)、环糊精(dextrine)，与dextrose等组成的群组。
其中该维生素至少一种是选自由维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、维生素H(biotin)与泛酸等组成的群组；以及该矿物质至少一种是选自由锌、钙、磷、钾、锰、钴、铁、铜、钠、镁、碘、氯及氟组成的群组。
其中该乳化剂至少一种选自由单脂肪酸甘油酯、二脂肪酸甘油酯、山梨糖酯(Sorbitan)、单硬酯酸(Monostearate)、聚山梨醇酐脂肪酸酯六十(Polysorbate 60)、聚山梨醇酐脂肪酸酯八十(Polysorbate 80)、卵磷脂(Lecithin)、益面剂(Emplex)、Caprol、Myyerol组成的群组；该安定剂至少一种选自由胞外多醣(Xanthan gum)、CMC胶、鹿角菜胶(Carageenan)、Methocol、Klucel、关华豆胶(Guar gum)、刺槐豆胶(Locus bean gum)、海藻酸盐(Alginates)组成的群组。
该添加剂至少一种选自由缓冲试剂、sequestraut、防腐剂、食品颜料组成的群组；其中，该缓冲试剂为磷酸钾和/或磷酸钠；该sequestraut为EDTA、柠檬酸和/或多磷酸盐；该防腐剂为丙酸钾和/或乙二烯酸钾；该食品颜料是选自由黄色5号、黄色6号、红色2号、红色40号、β-胡萝卜素组成的群组。
其中该鹿茸粉末的制造方法包含以下步骤(a)将鹿茸浸泡于约80至90℃纯水中30分钟，分离鹿茸皮与其他组织；(b)将鹿茸皮与其他组织分别均质；(c)将该鹿茸皮的均质液过滤移除毛发部分；(d)将该移除毛发的鹿茸皮均质液与其他组织均质液混合；
(e)分离水溶液与沉淀物部分；以及(f)将该水溶液与该沉淀物分别于约70至95℃的吹风干燥机中制成粉末。
其中该步骤(f)还包含将该水溶液于流状床干燥机中干燥，并将该沉淀物于混合回流床干燥机中干燥。
本发明提供的鹿茸组合物，由特定比例的β-环糊精(β-cyclodextrin)、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂所形成的包覆基材，与鹿茸抽取物混合而制得；其中该包覆基材与该鹿茸抽取物的重量比为1∶1.5至1∶2.7。
其中该β-环糊精∶高酯类∶蛋白酶抑剂∶有机溶剂的比例为1∶0.01∶0.02∶0.45份重至1∶0.20∶0.18∶0.55份重。
其中该β-环糊精为医药级；该高酯类是由具12至18个碳的醇类与具8至18个碳的羧酸类反应而得；该蛋白酶抑制剂为黏液蛋白酶抑制剂(Mucus proteinase inhibitot)；以及该有机溶剂为丙二醇(Propyleneglycol)。
其为经过杀菌并以无菌方式封包，该封包方式为适合鼻膜或舌下传输的喷雾式包装。
其中该鹿茸抽取物为权利要求1所述的鹿茸抽取物。
本发明提供的鹿茸组合物，其制备方法包含下列步骤(a)制备包覆基材，将β-环糊精(cyclodextrin)、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂以特定比例混合，并将该包覆基材加入水中，于室温下慢速搅拌18至36小时；(b)加入鹿茸抽取物，于室温下慢速搅拌18至24小时；(c)于4℃下静置24至48小时，待沉淀析出；以及(d)过滤取出沉淀物。
其还包含将最终沉淀物加入3倍重量纯水混合，并经杀菌步骤，以无菌方式封包；该封包方式为适合鼻膜或舌下传输的喷雾式包装。
本发明的鹿茸组合物，包含以特定比例的β-环糊精、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂所形成的包覆基材，以及鹿茸柚取物。其包覆基材各成分的比例较佳为β-环糊精∶高酯类∶蛋白酶抑制剂∶有机溶剂的比例为1∶0.01∶0.02∶0.45份重至1∶0.20∶0.18∶0.55份重；而该包覆基材与该鹿茸抽取物的比例较佳为1∶1.5至1∶2.7重量比。所使用的任一材料皆为医药级试剂。该高酯类较佳为由具12至18个碳的醇类与具8至18个碳的羟酸类反应而得；该蛋白酶抑制剂较佳为黏膜蛋白酶抑制剂；该有机溶剂较佳为丙二醇。
该鹿茸组合物的制造方法如下将上述比例的β-环糊精、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂混合，做为包覆基材的材料，其适用的较佳例亦如上述；加入纯水，该混合物与纯水的比例较佳为1∶3重量比，于室温下慢速搅拌18至36小时，形成包覆基材的悬浮液。于该悬浮液中加入如上述比例的鹿茸抽取物，于室温下用慢速搅拌约18至24小时，形成微胶囊。该混合物于4℃静置24至48小时，待沉淀生成。将上述沉淀物过滤出，其过滤方法不限，并以清水清洗再过滤，如此重复多次，得最终沉淀物。该沉淀物再加入3倍纯水中，在均质搅拌机(homomixer)中搅拌约15-20分钟，待完全混合后，所得产物经完全杀菌，制成喷雾式成品；或可将该产物喷雾干燥成粉末，用于长期保存，需要时再加入水制成喷雾试剂，封包过程全程须为无菌状态，该封包方式较佳为适合鼻膜或舌下传输的喷雾式包装。
本发明鹿茸组合物中所使用的鹿茸抽取物亦为一新颖的鹿茸抽取物，其中鹿茸活性成分的含量较传统鹿茸产品高出许多。如先前所述，由于鹿茸中含有许多高分子，含量高时会产生难溶于水的问题，若想添加其他成分，还容易产生油水分离的现象；因此，本发明是以特殊乳化处理方式解决此问题。依此，本发明的鹿茸抽取物包含鹿茸混合物与乳化处理试剂两部分。
该鹿茸混合物包含70至90％重量百分比的鹿茸粉末、2至10％重量百分比的胺基酸、1至5％重量百分比的醣类、0.1至2％重量百分比的维生素，以及0.1至3％重量百分比的矿物质。其中，该各成分皆以粉状物质混合，且该鹿茸粉末为经冷冻干燥的鹿茸粉末。该胺基酸种类不限，较佳为一种或多种选自于由丙胺酸(alanine)、精胺酸(arginine)、天门冬酰胺(asparigine)、天门冬胺酸(aspartic acid)、胱胺酸(cystine)、谷酰胺(glutamine)、谷胺酸(glutamic acid)、甘胺酸(glycine)、组胺酸(histidine)、异白胺酸(isoleucine)、白胺酸(leucine)、离胺酸(lysine)、甲硫胺酸(methionine)、苯丙胺酸(phenylalanine)、脯胺酸(proline)、丝胺酸(serine)、苏胺酸(threonine)、色胺酸(tryptophan)、酪胺酸(tyrosine)，与缬胺酸(valine)等必需胺基酸组成的群组。该脂肪酸种类不限，较佳为一种或多种选自于由硬脂酸(stearic acid)、油酸(oleic acid)、亚麻仁油酸(linoleic acid)、月桂酸(lauric acid)、辛酸(caprilic acid)、癸酸(capric acid)、肉豆蔻酸(myristicacid)、棕榈酸(palmitic acid)等组成的群组。该醣类种类不限，较佳为一种或多种选自于由淀粉(Starch)、麦芽糖(maltose)、果醣(fructose)、蔗糖(sucrose)、葡萄糖(glucose)、山梨醣(sorbitol)、树胶醛醣(arabinose)、木醣(xylose)、乳醣(lactose)、玉米糖浆(com syrup solid)、麦芽糖环糊精(maltodextrins)、环糊精(dcxlrine)，与dextrose等组成的群组。该维生素种类不限，较佳为选自于由维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、维生素H(biotin)与泛酸等组成的群组。该矿物质种类不限，较佳为一种或多种选自于由锌、钙、磷、钾、锰、钴、铁、铜、钠、镁、碘、氯及氟等组成的群组。
该乳化处理试剂包含0.1至1.5％重量百分比的乳化剂、80℃纯水、0.1至1.0％重量百分比的安定剂与0.005至0.2％重量百分比的添加剂，其中该纯水与上述鹿茸混合物的比例为1.5∶1至8.0∶1。上述乳化剂种类不限，较佳为至少一种选自由单脂肪酸甘油酯、二脂肪酸甘油酯、山梨糖酯(Sorbitan)、单硬脂酸(Monostearate)、聚山梨醇酐脂肪酸酯六十(Polysorbatc 60)、聚山梨醇酐脂肪酸酯八十(Polysorbate 80)、卵磷脂(Lecithin)、益面剂(Emplex)、Caprol、Myyerol组成的群组。该安定剂种类不限，较佳为至少一种选自由胞外多醣(Xanthan gum)、CMC胶、鹿角菜胶(Carageenan)、Methocol、Klucel、关华豆胶(Guar gum)、刺槐豆胶(Locusbcan gum)、海藻酸盐(Alginates)组成的群组。该添加剂种类不限，较佳为至少一种选自由缓冲试剂、Scquestraut、防腐剂、食品颜料组成的群组。上述缓冲试剂种类不限，较佳为磷酸钾和/或磷酸钠等；该sequestraut种类不限，较佳为EDTA、柠檬酸和/或多磷酸盐等；该防腐剂种类不限，较佳为丙酸钾和/或乙二烯酸钾等。该食品颜料可为人工食用色素如黄色5号、黄色6号、红色2号、红色40号等，和/或天然色素如β-胡萝卜素等。
本发明鹿茸组合物中鹿茸抽取物的制备，是将上述的鹿茸混合物置入一高速搅拌机中，先加入热水搅拌均匀，并将温度维持在60℃继续搅拌约10分钟后，续加入其余上述的乳化处理试剂，充分混合并加热，较佳为加热至50-70℃，并维持10至20分钟。之后将处理过的混合物抽入一中速加温搅拌混合槽内充分混合并加热，较佳为加热至60-65℃，30分钟；接著将该混合物抽入真空脱气器中脱气，可视需要重复此脱气步骤1至4次直到空气泡沫脱去为止。待脱气步骤完成后，将该混合物以马达抽入一均质机内，该均质机较佳为两段式均质机，分两段压力进行均质步骤，第一段介于1,000至1,500psi之间，第二段介于1,500至3,000psi之间。待均质完成后，会形成一乳化混合物，将该乳化的混合物快速冷却至3-6℃，该冷却方法较佳为HTST快速泠却。最后将该混合物置入冷藏低速搅拌的老化缸内，于4℃下低速搅拌12至24小时，完成脱气及老化过程，彻底脱除空气并使产品均质。最后将该产物包装于塑胶瓶中冷藏，保鲜其约为1至2周。上述“老化”过程，是指称该混合物已搅拌并静置，慢慢达到化学平衡的状态。
在上述鹿茸抽取物中，该鹿茸粉末的制造方法包含下列步骤将鹿茸浸泡于适当温度纯水中，水温较佳为80至90℃，更佳为85℃；于热水中浸泡约30分钟后，待鹿茸皮与其他组织分离。之后将鹿茸皮与其他组织分别均质，并将该鹿茸皮的均质液过滤移除毛发部分，再将该移除毛发的鹿茸皮均质液与其他组织均质液混合。此时形成一混浊状悬浮液，分离水溶液与沉淀物部分；最后将该水溶液与该沉淀物分别于吹风干燥机中制成粉末。该吹风干燥机的温度设定于70至95℃，且该水溶液较佳是于流状床干燥机中干燥其粉末出机温度较佳介于60-85℃，此时水分含量应小于6％重。较佳例之一为将该沉淀物于混合回流床干燥机中干燥，其粉末出机温度介于60-85℃，水分含量小于7％重。使用时将该水溶液与沉淀物分别形成的干燥粉末混合使用。
实施例实施例1 鹿茸原料粉末的制备用电锯将冷冻鹿茸锯成每条约5公分长，然后将鹿茸用干净的温水洗净之后，泡于85℃水中约30分钟后，将鹿茸的皮与其他组织分开。
鹿茸皮置于高速打果汁机中均质约5分钟后经纱布过滤后，过滤物经蒸馏水冲洗，除去毛发部分。鹿茸的其他组织经同样方式均质过滤。之后将两过滤液相混合。
混合液再经过均质步骤5分钟后，放入离心机内离心(1000xg，15分钟)，分别取水溶液与沉淀物部分。该水溶液于流状床干燥机中干燥20分钟，粉末出机温度约80℃，水分含量小于6％重。而该沉淀物则于混合回流床干燥机中干燥约20分钟，粉末出机温度约78℃，水分含量小于7％重。再将上述两种粉末以磨碎机研磨成细粉，再混合完成备用。此时该鹿茸粉末水分含量小于6.5％重。
实施例2 鹿茸抽取物的制备A、各粉状原料配方如下表1(各比例皆为重量百分比)
表1

B、加入乳化处理试剂的鹿茸抽取物该加入乳化处理试剂的鹿茸抽取物配方如下表2(各比例皆为重量百分比)表2

(样品编号HL-483)上述配方各成分以下列顺序加入高速搅拌机中(1)先加入80℃纯水；(2)徐徐加入卵磷酯、单脂肪酸甘油酯与二脂肪酸甘油酯，以及山梨糖单甘油酯；(3)加入磷酸钾；(4)徐徐加入鹿角菜胶GP-713、再加入胞外多醣(事先以1∶10的比例溶入丙二醇中)；(5)加入盐类与β-胡萝卜素；(6)最后加入鹿茸抽取物原料(AE-792)。
将上述各成分置于高速搅拌机中搅拌约10分钟后，将此100公斤液体，利用马达抽入一小型加温混合槽，以中速搅拌，同时加热至60℃约30分钟，此时测试该固体含量以确保各成分比例正确。加热后再经马达抽至一真空脱气机(Deaerator)中，经四道轮回脱气除去泡沫后，再将该混合物抽入一两段式均质机中，进行乳化均质，第一段压力为1,200psi，第二段压力为3,500psi；乳化温度约为55℃。
待乳化完毕后，将此液体经由马达抽入一快速冷却器内冷却至4℃，再抽入一小型“老化缸”中静置，以低速搅拌继续脱除空气，同时维持该混合悬浮液的均质性，并将温度保持于4℃。
经上述步骤处理的悬浮液，至于已消毒过的瓶中冷藏静置，观察其稳定性。经五个月后，发现仅有1％的样品有油水分离的现象。且该悬浮液以1∶9的比例稀释后加入口服液中(完全杀菌包装)，在常温下稳定性可达99％，保存期间约6个月。
上述的特殊乳化步骤是经由多次试验方得最佳化制程。以下为本发明制程与其他制程的比较。
实施例3 鹿茸组合物本范例所使用的各化合物皆为医药级。将以下各种化合物依下表3的重量置入一不锈钢混合槽中表3

将以上混合物加入30公斤重蒸馏水，此时总重量为40公斤重；以慢速搅拌约18至36小时，形成包覆基材的悬浮液。于该悬浮液中加入5.5公斤的鹿茸抽取物，于室温下用慢速搅拌约18至24小时，形成微胶囊。该混合物于4℃静置24至48小时，待沉淀生成。将上述的沉淀物以纱布过滤出，并以清水清洗再过滤，如此重复3次。此时可得最终沉淀物约18公斤，将该沉淀物加入55公斤纯水中，在均质搅拌机(homomixer)中搅拌约15分钟，待完全混合后，以瞬间加热机加热至212°F，2分钟；急速冷却后，装入以酒精消毒过的玻璃瓶中，该玻璃瓶上附有喷雾产生器。封包过程全程为无菌状态。
二、实验实验1 鹿茸抽取物的存放实施本发明鹿茸抽取物的制程是特别用于解决高含量鹿茸的难溶性问题，各步骤的顺序或处理方式皆具其特殊意义。因此以下列各比较例中的产物与本发明实施例2的产物进行存放实验的比较，各比较例制备方法如下比较例1所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，但在各成分加入高速搅拌机中时，先将鹿茸混合物(AE-792)加入水中，之后再加入卵磷脂等脂肪酸。
比较例2所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于该加温混合槽加温至80℃约30分钟。
比较例3所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在省略真空脱气步骤。
比较例4所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于乳化时第一段的压力为500psi，第二段压力为2,000psi。
比较例5所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤如同于比较例4，不同之处在乳化时第一段的压力为1,000psi，第二段压力为2,500psi。
比较例6所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于加温至70℃约30分钟。
比较例7所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于真空脱气步骤仅进行2次。
比较例8所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于乳化过程是于40℃下进行。
比较例9所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于乳化过程是于65℃下进行。
比较例10所使用的配方如同实施例2的配方(HL-483)，各步骤亦同于实施例2，不同之处在于省略最后的老化步骤。
将上述实施例2与比较例1至比较例10的样品置于常温下，每周观察一次产品是否有油水分离或高分子沉淀的现象，共观察6个月，该外观纪录于下表4与表5中表4 各制程所制备的鹿茸组合物存放实验结果(油水分离占全部百分比)

表5 各制程所制备的鹿茸组合物存放实验结果(高分子化合物沉淀百分比)

由上述各比较例可发现，鹿茸混合物添加的顺序(比较例1)、于加温混合槽中的温度(比较例2)、真空脱气的次数(比较例3与7)、乳化时的压力(比较例4与5)，以及老化步骤(比较例10)，皆会影响到该鹿茸组合物的油水分离或沉淀现象，熟习此技术的人士皆可体察到，该现象会影响到生物体的吸收性与利用性，进而影响其药效。因此，须以本发明所提供的特定制程才可制备出可维持长时间稳定、均质的高含量液状鹿茸组合物。
实验2 鹿茸抽取物的动物实验模式由实施例2制备的成品(HL-483)，与常用的鹿茸中药配方相较，比较其对于老鼠的影响。意即实验组为本发明的鹿茸产品(HL-483)，对照组为鹿茸中药配方，而控制组为不加任何鹿茸组合物。该实验方法如同实验A、B、C。其中该鹿茸中药配方是混合鹿茸粉20克，地丁10克，山甲3克，黄芩、郁全、三不留行、生甘草各4克，金银花藤、连翘、当归、赤芍、山栀、香附、漏芦各5克，并以3倍的水煎煮出。
采用上述样品编号为HL-483的鹿茸抽取物与传统冷冻干燥的鹿茸粉进行比较实验。
实验对象为年令约6周体重约100克重白变种Wistar公鼠60只。将这些公鼠分别置于笼中，每笼约4-6只，以Adlibitum，一种净化的酪蛋白作为基础食物。将样品编号HL-483的鹿茸组合物以200毫克的剂量加入实验组老鼠每餐饮食中，另将200毫克的传统鹿茸中药配方加入对照组老鼠每餐饮食中，控制组的饮食则不加任何鹿茸添加物。各组老鼠的饮水皆为蒸馏水，随时供应。喂养6周的后的结果如下表6(所有数据皆为平均值)表6 服用本发明鹿茸组合物与传统鹿茸中药配方的老鼠群的体重改变

由以上结果可得知，本发明的鹿茸抽取物(HL-483)的帮助生长效用，较控制组与传统鹿茸中药配方来得好。且样品HL-483所含的鹿茸混合物含量为样品AE-792(实施例1)的35％，其体重增加量亦约为实验A的一半，证实本发明的鹿茸混合物对于老鼠生长的影响具有再现性。
实验B 老鼠抗衰老实验实验方法同实验A，且使用剂量皆为200mg。结果如下表7与表8(所有数据皆为平均值)
表7 服用本发明鹿茸组合物与传统鹿茸中药配方的老鼠群的体内睾固酮含量

*睾固酮含量愈高表示抗衰老效果愈显著。
表8 服用本发明鹿茸组合物与传统鹿茸中药配方的老鼠群体内MAO-B活性比较

*MAO-B活性愈低表示抗衰老程度愈显著由上表可知HL-483与控制组以及传统鹿茸中药配方相较，对于老鼠的抗衰老作用更显著。
实验C 老鼠抗发炎实验实验方法同实验B，不同之处为对照组为传统鹿茸中药配方，且使用剂量皆为200mg。结果如下表9(所有数据皆为平均值)表9 以本发明鹿茸组合物与传统鹿茸中药配方处理的白血球数目比较

*白血球数目愈少，表示抗发炎效果愈好由上表可知HL-483的抗发炎效果比传统鹿茸中药配方好，且远比控制组好许多。于此再度证明本发明鹿茸抽取物的优良效果，不仅在物理化学性质的稳定性上有重大突破，更在药效上优于目前常用的中药鹿茸单方或复方。
实验3 鹿茸组合物(含有包覆基材)的药物动力学研究实验(Pharmaco-kinetics study)本实验是比较本发明的配方及其服用方法，与传统鹿茸抽取液服用方法的效果，尤其在人体吸收与持续释放方面作一详细比较。传统的鹿茸抽取液是作成粉状，包入胶囊中，以口服方式投药。而本发明则将鹿茸抽取液复合物以瓶装喷雾方式输送。
人体生长激素(Human Growth Hormone，HGH)为鹿茸抽取液中最重要的成分之一且含量固定；因此我们以HGH的含量作为鹿茸抽取物中活性物质含量的代表。实验中所有鹿茸抽取液来自同一批原料，以方便比较各组差异。
A、试管内试验(In-vitro)决定复合物与鹿茸抽取物的比例以未包覆本发明高分子复合物的鹿茸抽取液胶囊作为控制组，并以下表10各比例配制本发明鹿茸抽取物复合物，其亦包入与控制组相同的胶囊中。
表10组别鹿茸抽取液重量比 -环糊精重量比第1组 1 1第2组 1 1.5第3组 1 2.0第4组 1 2.7第5组 1 3.5上述鹿茸抽取物为同一批成品取样，其中HGH含量为150mg。HGH是以IRMA(RADZM公司制造)进行化学定量。其余各成分如实施例1所述。
将上述鹿茸抽取物复合物分别置入试管中，其内含有10毫升PBS缓冲溶液，并以搅拌装置持续搅拌。24小时后，将试管中所有溶液移入另一试管中进行HGH含量分析，该实验样品再放入另一新的10毫升PBS缓冲溶液。如此每24小时测量一次，直至144小时为止。结果如下表11所示表11时间(h) HGH含量(mg)控制组 第1组 第2组 第3组 第4组 第5组0150 15015015015015024 35 75135129123 9848 12 54114107109 7372 0 17 80 81 77 2896 0 3 56 52 53 9120 0 0 32 27 25 0144 0 0 4 5 2 0由以上结果可知，第2组与第4组的持续释放效果最好。
B、人体中(In-vivo)鹿茸抽取物复合物的释放研究以下实验的控制组如上所述，但鹿茸抽取物复合物包装于喷雾式瓶中，使用时是喷至受试者舌下部分，控制组则以口服方式。
以未包覆本发明高分子复合物的鹿茸抽取液胶囊作为控制组，并以下表12各比例配制本发明鹿茸抽取物复合物，其亦包入与控制组相同的胶囊中。
表12组别鹿茸抽取液重量比-环糊精重量比第1组 1 1第2组 1 1.5第3组 1 2.0第4组 1 2.7第5组 1 3.5上述鹿茸抽取物为同一批成品取样，其中HGH含量为150mg。HGH是以IRMA(RADZM公司制造)进行化学定量。其余各成分如实施例3所述。
受试者分别以口服方式服用控制组，以及将第1组至第5组以喷入舌下方式投药。每组6人，男女各占一半，共28组参与试验。受试者每24小时抽血一次，将血浆抽出测试其内HGH含量；总共144小时。结果如下表13，该数据为平均值，除标有*号者外，其余皆有p＝0.05的统计学显著性。
表13时间(h) HGH含量(mg)控制组 第1组 第2组 第3组 第4组 第5组0 150 150 150 150 150 1502423 105 127 132 130 11248 0 83 109 115 1178772 0 508187896296 0 17*52*595824120 0 0293337 3144 0 0 3 5 9 0*这些组别未达到统计学显著性(p＞0.05)。
由以上结果可知，仍是第2组至第4组的持续释放效果最好。由此可知鹿茸抽取物与包覆基材的最佳重量比介于1∶1.5至1∶2.7。同时此比例中的鹿茸抽取物复合物远比传统方式(控制组)更能达到持久释放的效果。本实验更证明经本发明特殊复合物包覆的鹿茸抽取物，在体内试验中，该鹿茸抽取物(以HGH含量为代表)可留在人体中达6日之久，其功效显著，可见一斑。
由上所述可知，本发明所制备的鹿茸组合物，是采用舌下或鼻膜喷雾吸收，不经胃酸分解，可完整保存其内所含的活性物质。发明中以β-环糊精做为包覆基材，β-环糊精为一种有弹性、吸附力极强，不溶于水，无毒性，具食品安全特性的高分子化合物；此外，此高分子在本发明中所使用的适当比例可恰好包覆鹿茸抽取物，并使微胶囊的尺寸为最佳化(2至10微米)，不会太过松散而慢慢松脱，亦不会太紧密而失去渗透性，因此可控制鹿茸抽取物于血液中的释放速率，使药效可于24至48小时内持续释放。此外，为增进鹿茸抽取物的渗透性，本发明特别加入水溶性与油溶性极佳的溶剂-丙二醇，其稳定性极强，且无毒性，特别适合用于鹿茸处方中。另外，舌下与鼻腔黏膜中的少数酵素，其抑制剂并不易找出。本发明经多次实验与深入研究，发现加入适当比例的高酯类与黏液蛋白酶抑制剂(10∶1至1∶9重量比)，可具极佳的抑制效果，进而保护鹿茸抽取物中的活性物质；且此混合物相当稳定，不会引起包覆基材的变化。
与公知技术相比较，不论是传统上所使用的口服，或仅将鹿茸抽取物制成粉末或溶液，以舌下或鼻膜吸收，皆无法如本发明，可完整维持鹿茸中的活性物质；本发明所制备的产物更加强其于黏膜上的停留时间与渗透性，增加其生物可利用率，同时可维持鹿茸中活性物质的释放速率。
此外，该鹿茸组合物中所使用的鹿茸抽取物，由加入特殊的乳化剂与安定剂，经由特定的乳化均质步骤使高含量的鹿茸产品达到稳定均质的品质，同时维持其药效。各原料的加入次序有特定顺序，可确保最终产品的均质；同时控制加热温度，该温度可杀菌且促进各成分分散，同时维持鹿茸的活性。另一关键步骤则在于以足够压力进行均质过程，以及进行脱气步骤，防止产品的泡沫化，避免成分中的酵素或具活性的蛋白质失去活性。本发明所使用的制备方法可解决公知技术中无法高含量鹿茸产品的杂溶性问题，而制备出高含量的鹿茸组合物，此产品可进一步依需要稀释或作各种变化，使用弹性大幅增加。
且该鹿茸抽取物中所使用的鹿茸粉末制造方法，于干燥过程同时消毒，干燥机的温度高至90℃，除孢子以外的病菌皆可完杀除；且将最终产物制成水分低于6.5％重的粉末，此种干燥程度连孢子都无法生长，因此可完全达到消毒的功效，合乎卫生要求；不需额外进行杀菌处理，与传统制程相较，更能维持鹿茸中的活性物质，且更节省制作成本。
再者，该鹿茸抽取物，除了提高了鹿茸含量之外，还添加多种人体必需胺基酸与脂肪酸，以及人体会大量流失的矿物质及维生素，由实验证明，该鹿茸抽取物比常用的鹿茸中药配方或鹿茸本身更具滋补效果，提供更好的帮助生长、抗衰老与抗发炎的功效。依本发明的制备方法，除了可解决传统技术中高含量鹿茸的难溶性问题外，亦可使其他成分，不论是脂溶性或水溶性，都能互相均匀混合，达到相当好的均质效果与稳定性，进而提供常用鹿茸抽取物所无法达到的功效。
应注意的是，上述诸多实施例仅是为了便于说明而举例而已，本发明所主张的权利范围自应以申请专利范围所述为准，而非仅限于上述实施例。
权利要求
1.一种鹿茸抽取物，以包含下列步骤的方式制得(a)提供含有70至90％重量百分比的鹿茸粉末、2至10％重量百分比的胺基酸、1至5％重量百分比的醣类、0.1至2％重量百分比的维生素，以及0.1至3％重量百分比的矿物质的粉状混合物；(b)将该粉状混合物置入一高速搅拌机中，加入70-80℃热水，该混合物与水的比例为1∶1.5至1∶8.0重量比；并加入0.1至1.5％重量百分比的乳化剂、0.1至1.0％重量百分比的安定剂以及0.005至0.2％重量百分比的添加剂，充分混合并加热至50-70℃，10至20分钟；(c)将经步骤(b)处理的混合物置入一中速加温搅拌混合槽内充分混合并加热至60-65℃，30分钟；(d)将经步骤(c)处理的混合物置入真空脱气器中脱气，重复1至4次；(e)将经步骤(d)处理的混合物置入均质机内均质，待均质后，快速冷却至4℃；以及(f)将经步骤(e)处理的混合物置入冷藏低速搅拌的老化缸内，于4℃下低速搅拌12至24小时，完成脱气及老化过程。
2.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其特征在于，其中步骤(c)的均质步骤分为两段压力，第一段介于1,000至1,500psi之间，第二段介于1,500至3,000psI之间；以及该冷却方法为HTST快速冷却。
3.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其特征在于，其中该鹿茸粉末为冷冻干燥的鹿茸粉末；以及该胺基酸至少一种是选自由丙胺酸(alanine)、精胺酸(arginine)、天门冬酰胺(asparigine)、天门冬胺酸(aspartic acid)、胱胺酸(cystine)、谷酰胺(glutamine)、谷胺酸(glutamic acid)、甘胺酸(glycine)、组胺酸(histidine)、异白胺酸(isoleucine)、白胺酸(leucine)、离胺酸(lysine)、甲硫胺酸(methionige)、苯丙胺酸(phenylalanine)、脯胺酸(proline)、丝胺酸(serine)、苏胺酸(threonine)、色胺酸(tryptophan)、酪胺酸(tyrosine)，与缬胺酸(valine)组成的群组。
4.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其特征在于，其中该脂肪酸至少一种是选自由硬脂酸(stearic acid)、油酸(oleic acid)、亚麻仁油酸(linioleic acid)、月桂酸(lauric acid)、辛酸(caprylic acid)、癸酸(capric acid)、肉苴蔻酸(myristic acid)、棕榈酸(palmitic acid)组成的群组；以及该醣类至少一种是选自由淀粉(starch)、麦芽糖(maltose)、果醣(fructose)、蔗糖(sucrose)、葡萄糖(glucose)、山梨醣(sorbitol)、树胶醛醣(arabinose)、木醣(xylose)、乳醣(lactose)、玉米糖浆(corn syrup solid)、麦芽糖环糊精(maltodextrins)、环糊精(dextrine)，与dextrose组成的群组。
5.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其特征在于，其中该维生素至少一种是选自由维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、维生素H(biotin)与泛酸组成的群组；以及该矿物质至少一种是选自由锌、钙、磷、钾、锰、钴、铁、铜、钠、镁、碘、氯及氟组成的群组。
6.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其特征在于，其中该乳化剂至少一种选自由单脂肪酸甘油酯、二脂肪酸甘油酯、山梨糖酯(Sorbitan)、单硬酯酸(Monostearate)、聚山梨醇酐脂肪酸酯六十(Polysorbate 60)、聚山梨醇酐脂肪酸酯八十(Polysorbate 80)、卵磷脂(Lecithin)、益面剂(Emplex)、Caprol、Myyerol组成的群组；该安定剂至少一种选自由胞外多醣(Xanthan gum)、CMC胶、鹿角菜胶(Carageenan)、Methocol、Klucel、关华豆胶(Guar gum)、刺槐豆胶(Locus bean gum)、海藻酸盐(Alginates)组成的群组。
7.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其特征在于，该添加剂至少一种选自由缓冲试剂、sequestraut、防腐剂、食品颜料组成的群组；其中，该缓冲试剂为磷酸钾和/或磷酸钠；该sequestraut为EDTA、柠檬酸和/或多磷酸盐；该防腐剂为丙酸钾和/或乙二烯酸钾；该食品颜料是选自由黄色5号、黄色6号、红色2号、红色40号、β-胡萝卜素组成的群组。
8.如权利要求1所述的鹿茸抽取物，其中该鹿茸粉末的制造方法包含以下步骤(a)将鹿茸浸泡于约80至90℃纯水中30分钟，分离鹿茸皮与其他组织；(b)将鹿茸皮与其他组织分别均质；(c)将该鹿茸皮的均质液过滤移除毛发部分；(d)将该移除毛发的鹿茸皮均质液与其他组织均质液混合；(e)分离水溶液与沉淀物部分；以及(f)将该水溶液与该沉淀物分别于约70至95℃的吹风干燥机中制成粉末。
9.如权利要求8所述的鹿茸抽取物，其中该步骤(f)还包含将该水溶液于流状床干燥机中干燥，并将该沉淀物于混合回流床干燥机中干燥。
10.一种鹿茸组合物，其由特定比例的β-环糊精(β-cyclodextrin)、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂所形成的包覆基材，与鹿茸抽取物混合而制得；其中该包覆基材与该鹿茸抽取物的重量比为1∶1.5至1∶2.7。
11.如权利要求10所述的鹿茸组合物，其特征在于，其中该β-环糊精∶高酯类∶蛋白酶抑剂∶有机溶剂的比例为1∶0.01∶0.02∶0.45份重至1∶0.20∶0.18∶0.55份重。
12.如权利要求10所述的鹿茸组合物，其特征在于，其中该β-环糊精为医药级；该高酯类是由具12至18个碳的醇类与具8至18个碳的羧酸类反应而得；该蛋白酶抑制剂为黏液蛋白酶抑制剂(Mucusproteinase inhibitot)；以及该有机溶剂为丙二醇(Propylene glycol)。
13.如权利要求10所述的鹿茸组合物，其特征在于，其为经过杀菌并以无菌方式封包，该封包方式为适合鼻膜或舌下传输的喷雾式包装。
14.如权利要求10所述的鹿茸组合物，其特征在于，其中该鹿茸抽取物为权利要求1所述的鹿茸抽取物。
15.如权利要求10所述的鹿茸组合物，其特征在于，其制备方法包含下列步骤(a)制备包覆基材，将β-环糊精(cyclodextrin)、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂以特定比例混合，并将该包覆基材加入水中，于室温下慢速搅拌18至36小时；(b)加入鹿茸抽取物，于室温下慢速搅拌18至24小时；(c)于4℃下静置24至48小时，待沉淀析出；以及(d)过滤取出沉淀物。
16.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于，其还包含将最终沉淀物加入3倍重量纯水混合，并经杀菌步骤，以无菌方式封包；该封包方式为适合鼻膜或舌下传输的喷雾式包装。
全文摘要
一种鹿茸组合物及其制备方法，其由特定比例的β－环糊精(β－cyclodextrin)、高酯类、蛋白酶抑制剂与有机溶剂所形成的包覆基材，与鹿茸抽取物混合而制得；其中该包覆基材与该鹿茸抽取物的重量比为1∶1.5至1∶2.7。该鹿茸组合物具有良好活性与稳定性质，并可于人体中维持稳定释放。
文档编号A61P1/00GK1466954SQ0214103
公开日2004年1月14日 申请日期2002年7月11日 优先权日2002年7月11日
发明者徐孝陵, 陈思如 申请人:陈思如