一种溴布特罗检测方法及其试剂盒与流程

文档序号:12453922阅读:427来源:国知局

本发明涉及一种检测技术,具体是一种溴布特罗检测方法及其试剂盒。



背景技术:

盐酸溴布特罗,又名为瘦肉精,是一种人工合成的β2肾上腺素受体激动剂,常用于防治哮喘及肺气肿等肺部疾病。当其使用剂量达到治疗量的5-10倍时,具有调节营养物质流向和重新分配的作用,可使机体肌肉合成增加,脂肪沉积减少。若在畜牧生产中大剂量使用可明显提高饲料转化率和瘦肉率,但同时也会造成动物性食品中瘦肉精的残留,食用后会对肝肾等内脏器官产生毒理作用,出现心悸、头痛、目眩及肌肉振颤等症状,从而引起人类中毒事件的发生,严重时甚至会造成死亡。因此,世界各国政府普遍都禁止用盐酸克伦特罗作为畜牧动物的饲料添加剂。我国农业部在2002年12月24日发布的第235号公告中也明确禁止在饲料中添加盐酸溴布特罗,并规定在动物性食品中盐酸溴布特罗残留量为不得检出。因此,有效的检测方法是控制盐酸溴布特罗滥用的关键之一,有必要研究高灵敏度快速检测盐酸溴布特罗的方法。

目前,常用检测盐酸溴布特罗的方法主要有气相色谱-质谱法、高效液相色谱法、酶联免疫法及胶体金免疫层析法等。其中,胶体金免疫层析法基于免疫层析技术理论,通过制备免疫金标试剂卡,对动物尿液或组织样本中的盐酸溴布特罗进行检测,以此来定性判断动物性肉食品中是否存在盐酸溴布特罗残留。该试剂卡具有操作简便、检测快速及费用低的优点,因而,在现场检测或样本初筛阶段被广泛使用。

不过,现有的利用胶体金免疫层析法的盐酸溴布特罗检测试剂卡具有检测灵敏度不高及不能应用于定量检测装置的缺点。其原因在于,由于试剂卡显色部分直接暴露于空气中,因而极易造成环境因素对试剂卡的影响,从而造成试剂卡上检测线的颜色不稳定,造成在极深色与极浅色时凭借肉眼判定可能出现假阳性及假阴性的情况发生,造成误判,从而影响人民群众的食品安全;此外,当需要对盐酸溴布特罗残留进行定量检测时,由于目前的盐酸溴布特罗胶体金检测试剂卡存在的上述缺陷,造成环境因素对试剂卡检测线颜色的影响,使得试剂卡检测线颜色的不稳定及失真情况加剧,基于此试剂卡检测线颜色的光电传感器在读取数据时会进一步放大失真的效果,最终反映在定量判定的数值上,就会存在严重的不准确性,因而造成目前普遍使用的盐酸溴布特罗检测试剂卡无法应用于定量检测装置或定量检测效果不佳。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种溴布特罗检测方法及其试剂盒,以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:

一种溴布特罗检测方法及其试剂盒,包含测试纸和盒体,所述测试纸包括底板、样本吸收层、胶体金层、保护层、硝酸纤维素膜和吸水层,所述底板设置了最下部,底板上面最左边设有样本吸收层,样本吸收层的右侧设有胶体金垫,胶体金垫的右侧设有硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜的右侧设有吸水层,所述盒体包括上盖、侧壁和底座,测试纸插在底座的中间,所述保护膜设于所述硝酸纤维素膜的一侧表面,所述胶体金垫包被有抗盐酸溴布特罗抗体,所述硝酸纤维素膜设有检测线和质控线,所述检测线包被有盐酸溴布特罗蛋白质偶联物并靠近所述胶体金垫设置,所述质控线包被有羊或兔抗鼠抗体并靠近所述吸水垫。

作为本发明进一步的方案:所述底座上设有温度计探头,上盖内侧设有湿度计,侧壁外侧设有显示温度和湿度的显示器,检测盒设有干燥腔,干燥腔横截面为环形,干燥腔的外侧壁为侧壁。

作为本发明进一步的方案:所述样本吸收层包括设于其一端的凹槽,所述胶体金层一端夹设于所述样本吸收垫的凹槽内。

作为本发明再进一步的方案:所述胶体金层包括设于其一端的插槽,所述硝酸纤维素膜一端夹设于所述胶体金垫的插槽内。

作为本发明再进一步的方案:所述吸水层包括设于其一端的插口,所述硝酸纤维素膜另一端夹设于所述吸水垫的插口内。

作为本发明再进一步的方案:所述保护膜为空气隔离防氧化聚乙烯保护膜。

作为本发明再进一步的方案:所述检测盒为外部材料为透明材质。

作为本发明再进一步的方案:所述上盖与侧壁之间设有密封垫。

一种溴布特罗检测方法,包含以下步骤,A、样本检测,取所需数量的微孔,置于微孔板上;向每个微孔中依次加入2mL样品稀释液和2mL待测样品,混匀;向每孔中插入试纸条,等待3分钟观察结果,15分钟后结果无效;B、结果判断:阴性:检测线和质控线均显色,且无论显色深浅都判断为阴性,表示样品中溴布特罗浓度低于200ppb或不含溴布特罗残留;阳性:质控线显色,同时质控线显色而检测线不显色,说明样品的溴布特罗的残留超过200ppb,但不高于400ppb;当质控线显色,而两条检测线均不显色时,说明样品中的溴布特罗含量超过400ppb;无效:质控线未显色,无论检测线有无显色,均表明不正确的操作过程或检测条已失效。

与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明通过在硝酸纤维素膜的一侧表面增设保护膜,使得硝酸纤维素膜可有效避免空气环境因素对硝酸纤维素膜上检测线的显色影响,从而使得显色更稳定,效果更佳,方便准确定性判定检测结果;并使得盐酸克伦特罗检测试剂卡还能应用于定量检测,定量判定数据更真实可靠,同时设有具有干燥腔的检测盒,横截面为环形的干燥腔解决了检测卡打开后放置一会会影响检测结果的技术问题,使检测卡免收空气中水分、空气酸碱度的影响。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。

一种溴布特罗检测方法及其试剂盒,包含测试纸和盒体,所述测试纸包括底板、样本吸收层、胶体金层、保护层、硝酸纤维素膜和吸水层,所述底板设置了最下部,底板上面最左边设有样本吸收层,样本吸收层的右侧设有胶体金垫,胶体金垫的右侧设有硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜的右侧设有吸水层,所述盒体包括上盖、侧壁和底座,测试纸插在底座的中间,所述保护膜设于所述硝酸纤维素膜的一侧表面,所述胶体金垫包被有抗盐酸溴布特罗抗体,所述硝酸纤维素膜设有检测线和质控线,所述检测线包被有盐酸溴布特罗蛋白质偶联物并靠近所述胶体金垫设置,所述质控线包被有羊或兔抗鼠抗体并靠近所述吸水垫。

底座上设有温度计探头,上盖内侧设有湿度计,侧壁外侧设有显示温度和湿度的显示器,检测盒设有干燥腔,干燥腔横截面为环形,干燥腔的外侧壁为侧壁。样本吸收层包括设于其一端的凹槽,所述胶体金层一端夹设于所述样本吸收垫的凹槽内。胶体金层包括设于其一端的插槽,所述硝酸纤维素膜一端夹设于所述胶体金垫的插槽内。吸水层包括设于其一端的插口,所述硝酸纤维素膜另一端夹设于所述吸水垫的插口内。保护膜为空气隔离防氧化聚乙烯保护膜。检测盒为外部材料为透明材质。上盖与侧壁之间设有密封垫。

本发明的工作原理是:检测方法包含以下步骤,A、样本检测,取所需数量的微孔,置于微孔板上;向每个微孔中依次加入2mL样品稀释液和2mL待测样品,混匀;向每孔中插入试纸条,等待3分钟观察结果,15分钟后结果无效;B、结果判断:阴性:检测线和质控线均显色,且无论显色深浅都判断为阴性,表示样品中溴布特罗浓度低于200ppb或不含溴布特罗残留;阳性:质控线显色,同时质控线显色而检测线不显色,说明样品的溴布特罗的残留超过200ppb,但不高于400ppb;当质控线显色,而两条检测线均不显色时,说明样品中的溴布特罗含量超过400ppb;无效:质控线未显色,无论检测线有无显色,均表明不正确的操作过程或检测条已失效。

对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

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