一种β-兴奋剂七合一胶体金检测卡的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及食品安全检测领域，尤其涉及一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡。
【背景技术】
[0002]β -兴奋剂是由儿茶酚胺类化学合成的衍生物，在药理效应上属于拟肾上腺素药物，其具有苯乙醇胺结构母核，苯环上连接有碱性的β-羟胺侧链。这类药物主要包括克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、妥布特罗、溴布特罗、马布特罗、西布特罗、特布他林、马喷特罗、卡布特罗、西马特罗、班布特罗等。
[0003]兴奋剂能促进动物生长，减少脂肪率，使胴体瘦肉率增加10%以上，因此，常作为生长促进剂被广泛应用于畜禽生长中。实际上，其作为饲料添加剂的用量是治疗剂量的5-10倍，消费者因食用β -兴奋剂残留食品而中毒的事件，国内外已发生多起，并且基本都是由克伦特罗造成的。由此，各国均加强了对克伦特罗的监管，从而使克伦特罗的非法使用受到极大限制，不法分子开始寻找新的替代品，结构略有差异但生物活性相似的新的同系物被不断使用。
[0004]目前，国内外β-兴奋剂的检测方法主要有高效液相色谱法、液/质联用分析法、气/质联用分析法、酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法等。利用色谱/质谱技术原理的几大检测方法具有灵敏度高、重复性好、准确度高等优点，但操作繁琐、所需仪器昂贵、操作人员需要专业培训；酶联免疫吸附法具有成本低、灵敏度高等优点，但检测步骤多，需要适宜的实验环境及配备一些相关仪器，对操作人员有一定的要求；胶体金免疫层析法因其具备操作简单、检测快速、成本低，能实现高通量现场检测等特点而得到广泛应用，然而，现有的胶体金检测卡主要针对于克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇，检测项目有限，其已经不能够满足检测需求。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型的目的在于针对上述问题，提供一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡，其能同时检测猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、溴布特罗、西布特罗、马布特罗、特布他林七种常见β -兴奋剂药物的残留，且检测灵敏度高。
[0006]本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现:
[0007]一种兴奋剂七合一胶体金检测卡，包括卡壳及设置于卡壳内的检测底板，所述检测底板上沿液体流动方向依次设置有样品垫Α、结合物垫、样品垫B、硝酸纤维素膜及吸水垫，所述硝酸纤维素膜上邻近样品垫B的一端设置有检测线，且硝酸纤维素膜上邻近吸水垫的一端设置有质控线，所述检测线上包被有溴布特罗-载体蛋白偶联物，所述质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体，所述结合物垫上包被有抗克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物。
[0008]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳上开有加样孔，所述加样孔位于样品垫A的上方。
[0009]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳上开有观察窗，所述观察窗位于硝酸纤维素膜的上方。
[0010]作为本实用新型的优选方案，所述溴布特罗-载体蛋白偶联物中的载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵白蛋白或血蓝蛋白。
[0011]作为本实用新型的优选方案，所述抗克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物中胶体金颗粒的大小为20nm-40nmo
[0012]作为本实用新型的优选方案，所述样品垫A的长度为12_，所述结合物垫的长度为8mm，所述样品垫B的长度为7mm，所述硝酸纤维素膜的长度为25mm，所述吸水垫的长度为17mm,所述硝酸纤维素膜与样品垫B交叠2_，且硝酸纤维素膜与吸水垫交叠2_，所述结合物垫与样品垫A交叠3mm，且结合物垫与样品垫B交叠2mm。
[0013]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳由塑料材料制成，所述检测底板由聚氯乙稀材料制成。
[0014]作为本实用新型的优选方案，所述的吸水垫为滤纸。
[0015]本实用新型的有益效果为，所述一种兴奋剂七合一胶体金检测卡操作简单，成本低，通过增设样品垫B，可有效控制流速，提高检测灵敏度，且本实用新型可用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、溴布特罗、西布特罗、马布特罗、特布他林残留量的高通量在线定性检测，检测项目多，能满足检测需求。
【附图说明】
[0016]图1为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的结构示意图；
[0017]图2为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的检测底板的结构示意图；
[0018]图3为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的阴性状态示意图；
[0019]图4为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的阳性状态示意图；
[0020]图5为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的一种失效状态示意图；
[0021]图6为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的另一种失效状态示意图。
[0022]图中:
[0023]1、卡壳；11、观察窗；12、加样孔；2、检测底板；21、样品垫A ;22、结合物垫；23、样品垫B ;24、硝酸纤维素膜；25、吸水垫；26、检测线；27、质控线。
【具体实施方式】
[0024]下面结合附图并通过【具体实施方式】来进一步说明本实用新型的技术方案。可以理解的是，此处所描述的实施例仅仅用于解释本实用新型，而非对本实用新型的限定。
[0025]请参照图1及图2所示，图1为本实用新型一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡的结构示意图；图2为本实用新型一种β-兴奋剂七合一胶体金检测卡的检测底板的结构示意图。
[0026]于本实施例中，一种β -兴奋剂七合一胶体金检测卡，包括由塑料制成的卡壳I及设置于卡壳I内的检测底板2，所述检测底板2由聚氯乙烯材料制成，其上沿液体流动方向依次设置有样品垫A21、结合物垫22、样品垫B23、硝酸纤维素膜24及吸水垫25，所述吸水垫25为滤纸，所述样品垫A21的长度为12mm，所述结合物垫22的长度为8mm，所述样品垫B23的长度为7mm，所述硝酸纤维素膜24的长度为25mm，所述吸水垫25的长度为17mm，所述硝酸纤维素膜24与样品垫B23交叠2mm，且硝酸纤维素膜24与吸水垫25交叠2mm，所述结合物垫22与样品垫A21交叠3mm，且结合物垫22与样品垫B23交叠2mm，所述卡壳I上开有加样孔12及观察窗11，所述加样孔12位于样品垫A21的上方，所述观察窗11位于硝酸纤维素膜24的上方，所述硝酸纤维素膜24上邻近样品垫B23的一端设置有检测线26，且硝酸纤维素膜24上邻近吸水垫25的一端设置有质控线27，所述检测线26上包被有溴布特罗-牛血清白蛋白偶联物，所述质控线27上包被有羊抗鼠IgG抗体，所述结合物垫22上包被有抗克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物，所述抗克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物中胶体金颗粒的大小为30nm。
[0027]值得一提的是，虽然上述实施例中，检测线26上包被溴布特罗-牛血清白蛋白偶联物，但是本实用新型不限于此，检测线26上也可包被溴布特罗-鸡卵白蛋白偶联物或溴布特罗-血蓝蛋白偶联物。
[0028]请参照图3至图6所示，检测时，将猪尿滴入到加样孔12中，液体按照图中箭头方向流动，反应5min，在观察窗11即可看到检测线26、质控线27的显色情况，图3中，质控线27与检测线26都有条带，即表示待检猪尿为阴性；图4中质控线27显色，而检测线26无条带，即表示待检猪尿为阳性；图5及图6中质控线27不显色，即表示该β -兴奋剂七合一胶体金检测卡已失效。
[0029]一、胶体金的制备
[0030]胶体金的制备采用柠檬酸三钠还原法:99mL超纯水中加入ImL 1%氯金酸，加热煮沸，迅速加入ImL I %柠檬