本发明涉及一种检测方法，具体是一种检测粮食中糖分的方法。
背景技术：
糖分是人类生存所需的三大营养物质之一，是维持人们基本生活能量的保障，因此每天需要从粮食中摄取大量的糖分满足日常的消耗，粮食中的糖分含量直接决定了饮食健康问题，因此粮食中的糖分含量是国家食品安全检验中必不可少的一部分，由于糖的种类多、结构复杂且多为异构体，存在微观不均一性，通常，单糖、寡糖仅在基团一CHOH构型排列上有所不同，所以采用常规方法对其分离鉴定较为困难。糖类传统的测定方法多利用糖类具有还原性的性质采用氧化还原滴定法(如斐林氏滴定法、高锰酸钾滴定法)、比色法(如3'5一二硝基水杨酸法)等方法进行测定。这些测定方法获得的结果均反映了还原物质(不仅包括糖)的总量，而无法只针对糖分进行测定;气相色谱法虽然可以分别测定不同糖的含量，灵敏度高，但由于糖难以气化，必须进行衍生化反应才可检测，而在衍生化的过程中步骤繁琐，条件要求高，特别是对于热不稳定单糖或寡糖，在样品预处理过程中易产生其他副反应或样品挥发，从而降低分析的准确度，同时也影响样品分析处理速度。高效液相色谱(HPLC)系统通常配备紫外检测器或荧光检测器，但由于糖类没有紫外吸收，为此常采用衍生化处理，将糖类组分转变为带发色基团的分子，不仅过程繁琐、反应时间长，且可导致不稳定基团的解离，给测定结果带来偏差。示差折光检测器(R工D)虽然样品不需衍生化，可以直接测定糖分，但是由于灵敏度较低，不能测出残糖样品中的较低的糖分，因而受到一定的限制。脉冲安培检测器具有高灵敏度(皮克量级)的特点，但是难以达到平衡，同时设备昂贵，限制了它的应用。而蒸发光散射检测器(ELSD)的独特检测原理为，首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶，然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发，最后余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中通过散射光强度得到检测。也就是说蒸发光检测器的响应不依赖于样品的光学特性，因此，蒸发光散射检测器灵敏度远远高于示差折光检测器(可达到纳克级)。但另一方面，样品中除糖以外的不挥发性溶质也将产生响应，虽然这些溶质不会和糖类物质共同积分，但可能会引起基线漂移，从而干扰糖类物质测定的准确度。粮食中可以被菌种用于发酵的成分主要是包括淀粉和可溶性葡萄糖在内的总糖，要利用蒸发光检测器检测粮食总糖含量，需先将淀粉经HCl水解成葡萄糖。经HCl水解后待测总糖的粮食样品，在使用NaOH中和时会产生大量NaCl，在进行HPLC检测时会发生基线漂移，严重影响测定的准确度。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种检测粮食中糖分的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种检测粮食中糖分的方法，包含以下步骤，
A、取样：选取20g待检测的粮食样本，置于200ml的玻璃容器中，加入25ml5mol/L的氯化氢溶液，装上冷凝管，放置在沸水浴中回流90min，然后通过水冷却法对其进行冷却操作，待样品冷却后，加入氢氧化钠调节器PH值到7，
B、预处理：加入15mL百分之20浓度的(CH3COO)2Pb，摇匀后放置15分钟，以沉淀蛋白质、果胶等杂质，摇匀后用蒸馏水转移至200L容量瓶中，加水定容，过滤，弃去初滤液，收集5mL滤液以1.5mL/min的流速通过预活化好的反相C18固相萃取小柱，弃去最初的1一2mL，收集后面的3一4mL，再用0.22um的水系滤膜过滤；
C、制作标准液：取纯度达标且经100摄氏度干燥至恒重的无水葡萄糖，配制成一系列浓度梯度的标准溶液，同时在标准溶液中添加氯化钠，并使其终浓度为0.28mo1/L；
D、高效液相色谱-蒸发光散射标准曲线的建立:将标准溶液进样于高效液相色谱-蒸发光散射系统进行检测；
E、待测样本的高效液相色谱-蒸发光散射测定，通过峰面积及标准曲线计算出水解液中葡萄糖浓度，再通过水解液中葡萄糖浓度及水解样品的重量或体积计算出样品中总糖的含量；
F、通过公式计算得出糖分含量。
作为本发明进一步的方案：步骤D的取样方法是把标准溶液装入 100ml 离心管中，在离心机 2000r/min 离心条件下离心3min，得到上清液。
作为本发明进一步的方案：所述步骤F中所用到的公式是糖分含量=（水解液中糖分浓度/20）*100%。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明检测粮食中糖分的方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测分析法对粮食中的糖分含量进行检测，其操作步骤简单，使用的辅助材料少，因此具有快速、精确、稳定等优点。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
一种检测粮食中糖分的方法，其特征在于，包含以下步骤，
A、取样：选取20g待检测的粮食样本，置于200ml的玻璃容器中，加入25ml5mol/L的氯化氢溶液，装上冷凝管，放置在沸水浴中回流90min，然后通过水冷却法对其进行冷却操作，待样品冷却后，加入氢氧化钠调节器PH值到7，
B、预处理：加入15mL百分之20浓度的(CH3COO)2Pb，摇匀后放置15分钟，以沉淀蛋白质、果胶等杂质，摇匀后用蒸馏水转移至200L容量瓶中，加水定容，过滤，弃去初滤液，收集5mL滤液以1.5mL/min的流速通过预活化好的反相C18固相萃取小柱，弃去最初的1一2mL，收集后面的3一4mL，再用0.22um的水系滤膜过滤；
C、制作标准液：取纯度达标且经100摄氏度干燥至恒重的无水葡萄糖，配制成一系列浓度梯度的标准溶液，同时在标准溶液中添加氯化钠，并使其终浓度为0.28mo1/L；
D、高效液相色谱-蒸发光散射标准曲线的建立:将标准溶液进样于高效液相色谱-蒸发光散射系统进行检测；
E、待测样本的高效液相色谱-蒸发光散射测定，通过峰面积及标准曲线计算出水解液中葡萄糖浓度，再通过水解液中葡萄糖浓度及水解样品的重量或体积计算出样品中总糖的含量；
F、通过公式计算得出糖分含量。
步骤D的取样方法是把标准溶液装入 100ml 离心管中，在离心机 2000r/min 离心条件下离心3min，得到上清液。
步骤F中所用到的公式是糖分含量=（水解液中糖分浓度/20）*100%。
上清液在使用乳成分分析仪检测前，需先加入样品管中并摇匀，然后放置于恒温水浴锅中水浴后，再使用乳成分分析仪测定。上清液在使用乳成分分析仪检测前，需先加入样品管中并摇匀，然后放置于恒温水浴锅中水浴后，再使用乳成分分析仪测定。
本发明的工作原理是：以地瓜为例做糖分含量测定：取10g未经发酵的地瓜切碎成小颗粒，置于200mL磨口锥形瓶中，酸水解、水解液的预处理以及水解液的高效液相色谱-蒸发光散测定。通过峰面积的及标准曲线计算出水解液中葡萄糖浓度为1. 108mg/mL。再通过水解液中葡萄糖浓度(1. 108mg/mL)、水解液体积(250mL)及发酵残渣的取样重量(2500g)计算出芭蕉芋初始总糖的含量为2.216mg/g。