一种虾夷扇贝活力快速评价方法与流程

本发明涉及水产品的活体流通领域，特别是一种虾夷扇贝活力快速评价方法。

背景技术：

虾夷扇贝是我国非常重要的养殖品种之一，具有较高经济价值和营养价值。在我国活品是最受欢迎的产品形式。

活品品质评价既是研究扇贝品质变化机制的前提手段，又是供应链各个环节间商业运作的判断依据。在实际生产中，规格、缩边率和肥满度是行业目前姑且使用的指标；在科学研究领域中，则大多沿用鱼类保鲜的理论和技术。通常使用的指标有atp关联化合物、肌肉ph值、糖原含量、游离氨基酸等。其中atp和磷酸原能较好地反应活品品质，但是由于提取复杂以及测定过程中需要使用高效液相等大型仪器，不便于在贝类捕捞、运输及消费的现场进行测定。并且测定过程需要消耗数个小时，无法满足整个流通过程中的实时监测需求，因此现在需要一种能够解决上述问题的方法或装置。

技术实现要素：

本发明是为了解决现有技术所存在的上述不足，提出一种在捕捞、运输及消费现场随时可以便捷快速测定的虾夷扇贝活力评价方法。

本发明的技术解决方案是：一种虾夷扇贝活力快速评价方法，其特征在于：所述的方法按照以下步骤依次进行：

首先，将活品虾夷扇贝的左壳用速干水泥固定在方形石块上，右壳保持自由活动状态，在室温环境下放置30分钟使水泥固化,以固定扇贝，

然后，将测力计的下端勾在扇贝可自由活动的右壳边缘，用针刺激扇贝外套膜，刺激间隔为30s/次，共刺激12次，通过与测力计相连的外接电脑进行数据的实时记录,检测在6分钟内闭合的频率和闭合力的瞬时最大值,以横轴为检测时间，纵轴为闭合力绘制闭合力波形图，

对闭合力波形图进行分析，使用origin软件对扇贝闭合产生频率和瞬间最大峰值进行统计，计算其瞬间闭合力的平均值，用以评价扇贝的活力，计算公式为：闭合力平均值（n）=各峰值总和/闭合频次。

本发明同现有技术相比，具有如下优点：

本发明所述的虾夷扇贝活力快速评价方法，针对传统的利用检测扇贝atp和磷酸原能的方式来评价扇贝活力的方式所存在的问题，设计出一种简单的评价方法，该方法通过闭合力大小来反应扇贝肌肉的收缩力量，获得闭合力的变化波形图。然后将获得波形图进行解析，计算闭合力的平均值作为扇贝活力的快速评价指标；该方法和经典的生化评价方法（传统的利用大型设备检测扇贝atp和磷酸原能的方法）结果呈正相关，方法简单易行，最重要的是可进行实时评价，因此可以说它具备了多种优点，特别适合于在贝类活品流通领域中推广应用，其市场前景十分广阔。

附图说明

图1是本发明所述方法所使用设备的示意图。

图2是扇贝闭合力的变化波形图。

图3是扇贝atp含量及闭合力变化散点图。

具体实施方式

下面将结合附图说明本发明的具体实施方式，如图1、图2、图3所示：一种虾夷扇贝活力快速评价方法，按照以下步骤依次进行：

首先，将活品虾夷扇贝的左壳用速干水泥固定在方形石块上，右壳保持自由活动状态，在室温环境下放置30分钟使水泥固化,以固定扇贝，

然后，在扇贝外套膜的触须充分展开、保持自然开口状态时，将测力计的下端勾在扇贝可自由活动的右壳边缘，

用针刺激扇贝外套膜，刺激间隔为30s/次，共刺激12次，通过与测力计相连的外接电脑进行数据的实时记录,检测在6分钟内闭合的频率和闭合力的瞬时最大值,以横轴为检测时间，纵轴为闭合力绘制闭合力波形图，

对闭合力波形图进行分析，使用origin软件对扇贝闭合产生频率和瞬间最大峰值进行统计，计算其瞬间闭合力的平均值，用以评价扇贝的活力，计算公式为：闭合力平均值（n）=各峰值总和/闭合频次。

具体实施例：

1.选定商品规格扇贝：壳高约10.5cm、壳长约10cm、壳厚约2.0cm、重量约120g，健康完好活体60个。

2.虾夷扇贝的固定：将虾夷扇贝的左壳用速干水泥固定在方形石块上，保持右壳可自由活动。

3.虾夷扇贝活力标准化：将固定的扇贝放到流动的海水槽中暂养24小时，使扇贝充分恢复活力状态。

4.施加干露胁迫：将恢复到最佳状态的扇贝，从海水中取出，分成6组，每组10个，每一组中选取5个用本方法处理，另5个则用传统方法测定其肌肉的atp含量（利用传统方法测定肌肉atp含量的为参照组）。这6组扇贝分别在4℃冷柜中放置0h、6h、8h、12h、36h、48h。

5.扇贝闭合力测定：按照图1所示，分别测定施加刺激（30s/次）后虾夷扇贝在6min内的闭合频率和瞬间最大闭合力。闭合的频率在10-20次之间，闭合力在1-25n之间。

每个扇贝按照上述操作进行闭合力采集。计算每组扇贝在6分钟内闭合力瞬时最大值的平均值（average(n1:n5)），作为各组扇贝活力的指标。

6.扇贝闭壳肌中atp关联化合物含量测定：从每一个经过上述测定的扇贝上截取1.0g贝肉并以1：10加入5%的高氯酸（pca），于冰浴中充分捣碎后加入2mol/lkoh调ph至2.0～3.5，加超纯水定容至20ml，在3000g条件下离心5min，取上清液用0.45µm滤膜过滤。取4ml滤液并加入1ml0.1mol/l磷酸盐缓冲液（ph7.5）。整个过程均在冰浴条件下进行。

采用高效液相色谱法进行分析。色谱柱：大连依利特公司（sinochromods-bp5μm，4.6mm×250mm）；检测器：二极管阵列检测器(dad)；检测波长：254nm；温度：35℃；流速：0.7ml/min；进样量：0.02ml。流动相a：0.05mol/lk2hpo4-kh2po4缓冲液（ph6.5），流动相b：流动相a∶甲醇溶液=（8∶2）。

数据分析：以干露时间为横坐标，闭合力和atp含量分别作为纵坐标进行分析。结果显示：随着干露时间的延长，扇贝的闭合力从14n逐渐衰减至6n。atp含量从5.6μmol/g下降至3.6μmol/g。闭合力大小与atp含量均呈现下降趋势。对两个指标的相关性分析（见表1），闭合力大小与atp含量的相关系数为0.94，说明闭合力与atp含量的变化呈极显著相关性（p＜0.01）。

技术特征：

技术总结
本发明公开一种虾夷扇贝活力快速评价方法，其特征在于：所述方法按照以下步骤依次进行：首先，将活品虾夷扇贝的左壳用速干水泥固定在方形石块上，右壳保持自由活动状态；然后，将测力计的下端勾在扇贝可自由活动的右壳边缘；用针刺激扇贝外套膜，刺激间隔为30s/次，共刺激12次，通过与测力计相连的外接电脑进行数据的实时记录,检测在6分钟内闭合的频率和闭合力的瞬时最大值。以横轴为检测时间，纵轴为闭合力绘制闭合力波形图，使用origin软件对扇贝闭合力波形图进行分析，计算瞬间最大闭合力峰值的平均值，最后以该值大小评价扇贝的活力。

技术研发人员：田元勇;刘俊荣;刘洋;李亚煊
受保护的技术使用者：大连海洋大学
技术研发日：2019.08.08
技术公布日：2019.11.12