技术特征：
1.一种同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：其包括如下步骤：(1)、量取稀释剂作为空白溶液，注入液相色谱仪中，记录210nm、230nm和255nm波长下的色谱图；(2)、分别称取三组分吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟，加稀释剂配制成每1ml含26μg吡喹酮、73μg氯芬新、4.8μg米尔贝肟溶液作为供试品溶液，注入液相色谱仪中，记录210nm、230nm和255nm波长下的色谱图；(3)、取吡喹酮、吡喹酮杂质a、吡喹酮杂质b、吡喹酮杂质c、氯芬新、氯芬新杂质b、氯芬新杂质c、氯芬新杂质g、米尔贝肟及米尔贝肟杂质d的对照品各适量，加稀释剂溶解并制成每1ml中含上述对照品均为1mg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液，注入液相色谱仪中，记录230nm和255nm波长下的色谱图。2.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述吡喹酮的浓度为283.20-654.64μg/ml，所述氯芬新的浓度为570.44-1171.20μg/ml，所述米尔贝肟的浓度为27.57-64.32μg/ml。3.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述吡喹酮杂质a为(11brs)-2-苯甲酰基-1,2,3,6,7,11b-六氢-4h-吡嗪基[2,1-a]异喹啉-4-酮，所述吡喹酮杂质b为2-(环己甲酰基)-2,3,6,7-四氢-4h-吡嗪并[2,1-a]异喹啉-4-酮，所述吡喹酮杂质c为n-甲酰基-n-[2-氧-2-(1-氧-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-yl)乙基]环己甲酰胺。4.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述氯芬新杂质b为n-[(2,5-二氯-4-对羟基苯)氨甲酰基]-2,6-二氟苯甲酰胺，所述氯芬新杂质c为n-[3-氯-4-(1,1,2,3,3,3-全氟丁二烯丙氧基)苯基-氨甲酰基]-2,6-二氟苯甲酰胺，所述氯芬新杂质g为2,5-二氯-4-[3-(2,6-二氟苯甲酰)脲基]碳酸二苯酯。5.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述米尔贝肟杂质d为(1
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r,2r,4
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s,5s,6r,8
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r,10
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e,13
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r,14
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e,16
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e,20
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r,21
′
z,24
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s)-24
′‑
羟基-21
′‑
(肟基)-6-(丙烷-2-yl)-5,11
′
,13
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,22
′
四甲基-3,4,5,6-四氢螺环[吡喃-2,6
′‑
[3,7,19]三氧四环[15.6.1.14,8.020,24]二十五烷[10,14,16,22]四烯]-2
′‑
酮。6.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)中，所述稀释剂为乙腈。7.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)中，所述液相色谱仪中色谱柱为用十八烷基硅烷键合硅胶。8.根据权利要求1所述的同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，其特征在于：步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)中，所述液相色谱仪中，梯度洗脱，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，紫外检测波长为230nm，进样量20μl；流动相a为磷酸溶液，流动相b为乙腈，所述流动相a的含量为10-30wt％，所述流动相b的含量为70-90wt％。
技术总结
本发明提供了一种同时检测吡喹酮、氯芬新和米尔贝肟三组分含量的方法，包括先配制空白溶液，再配制含吡喹酮、氯芬新、米尔贝肟的供试品溶液，最后配制系统适用性试验溶液，分别注入液相色谱仪中，记录紫外波长下的色谱图；稀释剂为乙腈，液相色谱仪中使用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱，梯度洗脱，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，紫外检测波长为230nm，进样量20μL；流动相A为磷酸溶液，含量为10-30wt％，流动相B为乙腈，含量为70-90wt％；本发明的检测方法简便，节约时间，降低成本，有很好的专属性、准确度、线性、耐用性及精密度，用于检测三组分的含量是适宜的、准确的，从而可用于宠物药日常检测的需要。常检测的需要。常检测的需要。
技术研发人员：宋毓
受保护的技术使用者：上海汉维生物医药科技有限公司
技术研发日：2021.12.30
技术公布日：2022/4/5