一种检验扶正解毒散质量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药检测技术领域，涉及一种检验扶正解毒散质量的方法。
【背景技术】
[0002] 扶正解毒散是根据《中华人民共和国兽药典》2010版二部扶正解毒散项下规定，由 黄茂、板蓝根和淫羊蕾H味中药按一定比例组合粉碎而成的成方制剂，具有扶正巧邪、清热 解毒、补中益气的功效，主治鸡法氏囊病。另外，还可帮助修复免疫细胞功能，诱导机体产生 抗干扰素，调整机体免疫功能。
[0003] 药典中扶正解毒散项下质量标准未规定其各有效成分的鉴别方法和含量测定方 法。《中华人民共和国兽药典》2010版二部中扶正解毒散的质量标准只有鉴别及检查项，没 有含量测定项。对于兽药复方中药，有效成分的含量测定需要精密的仪器，价格昂贵，很多 兽药厂家考虑到成本，很少配置成套的检测仪器，因此含量测定项往往舍去，药品质量控制 水平就比较低。
[0004] 因此，目前需要建立一个完善的扶正解毒散的质量标准及其检测方法来增强该药 的质量可控性和稳定性。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了一种检验扶正解毒散 质量的方法。该方法包括扶正解毒散的质量标准及其检验方法，该方法通过建立专属性强 的鉴别方法、有效的检查方法及重复性、准确性良好的含量测定方法，能够有效控制该产品 的质量，保证其临床使用安全，有效，稳定。
[0006] 该方法包括检视扶正解毒散的外观均匀度、检视扶正解毒散的微观表面、检测扶 正解毒散的粒度、鉴别扶正解毒散中黄茂甲巧、检测扶正解毒散中黄茂甲巧和淫羊蕾巧的 含量W及检测检测扶正解毒散中的水分。该方法通过建立专属性强的鉴别方法、有效的检 查方法及重复性、准确性良好的含量测定方法，能够有效控制该产品的质量，保证其临床使 用安全、有效、稳定。
[0007] 为此，本发明提供了一种检验扶正解毒散质量的方法，包括鉴别扶正解毒散中黄 茂甲巧、检测扶正解毒散中黄茂甲巧和淫羊蕾巧的含量W及检测扶正解毒散中的水分。
[0008] 根据本发明方法，鉴别扶正解毒散中黄茂甲巧是采用薄层色谱法，包括W黄茂甲 巧作对照样品，W甲醇为溶剂，W13:7:2的H氯甲焼-甲醇-水的下层溶液为展开剂，分别 将2y1对照样品溶液I和扶正解毒散待测样品提取物溶液I在同一硅胶G薄层板上点样 展开，取出、瞭干、并喷W10%硫酸己醇溶液，105C加热至斑点显色清晰，然后进行检视；女口 果检视的结果为待测样品色谱中，在与对照样品色谱相应的位置上，显示与对照样品相同 颜色的斑点，即说明待测样品中含有黄茂甲巧。
[0009] 在本发明的一个实施例中，所述待测样品提取物溶液I的制备包括；将8g待测样 品与20ml甲醇混合并加热回流1小时，过滤，将所获得的滤液加入中性氧化铅柱(所述氧化 铅柱的内径为10~15mm;所述氧化铅的粒径为100~120目，其用量为5g)，用100ml40% 的甲醇洗脱，并将洗脱液蒸干，所向剩余残渣中加入30ml水使其溶解，用水饱和的正下醇 振摇提取2次，每次20ml，合并所获得的正下醇提取液，用水洗涂2次，每次20ml，将洗涂后 正下醇提取液蒸干，向剩余残渣中加入0. 5ml甲醇使其溶解，即得。
[0010] 在本发明的另一个实施例中，所述对照样品溶液IW甲醇为溶剂制得，其浓度为 Img/ml。
[0011] 根据本发明方法，所述扶正解毒散中黄茂甲巧的含量测定采用高效液相色谱法， 包括采用蒸发光散射检测器检测，并W十八烷基娃焼键合硅胶为色谱柱填充剂，W黄茂甲 巧为对照样品，W己膳-水为流动相，在对照品溶液II与待测样品提取物溶液II进样后，记 录色谱图，用外标两点法对数方程计算扶正解毒散中黄茂甲巧的含量，其中，所述色谱柱的 理论培板数按黄茂甲巧峰计算至少为4000。
[0012] 在本发明的一个实施例中，在所述流动相中，己膳与水的体积比为35:65。该种配 比的流动相可W使待测样品中的各成分的色谱峰分开，杂质检测明确。
[0013] 在本发明的另一个实施例中，所述待测样品提取物溶液II的制备包括；将lOg待 测样品置于索氏提取器中，加入40ml甲醇，冷浸过夜，再加入甲醇，加热回流4小时，将所获 得的提取液浓缩至干，向剩余残渣中加10ml水，加热到30~4(TC使其溶解，用水饱和的正 下醇振摇提取4次，每次40ml，合并正下醇提取液，用浓度为40vol. %的氨水溶液洗涂2次， 每次约40ml，将洗涂后的正下醇提取液蒸干，向剩余的残渣中加5ml水使其溶解，放冷，通 过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1. 5cm，柱高为12cm)，先用50ml水洗脱，再用30ml40% 的己醇洗脱，再用80ml70%的己醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，剩余的残渣加甲醇溶解并转移 至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。所述待测样品提取物溶液II的进样量为10y1。
[0014] 在本发明的又一实施例中，所述对照样品溶液IIW甲醇为溶剂制成，并且浓度为 0. 5mg/ml。所述对照样品溶液II的进样量为5y1和15y1。
[0015] 根据本发明方法，所述扶正解毒散中淫羊蕾巧的含量测定采用高效液相色谱法， 包括采用蒸发光散射检测器检测，并W十八烷基娃焼键合硅胶为色谱柱填充剂，W淫羊蕾 巧为对照样品，W己膳-水为流动相，在对照品溶液III与待测样品提取物溶液III进样后，记 录色谱图，用外标两点法对数方程计算扶正解毒散中淫羊蕾巧的含量，其中，所述色谱柱的 理论培板数按淫羊蕾巧峰计算至少为1500。
[001引在本发明的一个实施例中，在流动相中，己膳与水的体积比为25:75。该种配比的 流动相可W使待测样品中的各成分的色谱峰分开，杂质检测明确。
[0017] 根据本发明，所述待测样品提取物溶液III的制备包括将待测样品粉末置于具塞锥 形瓶中，加入己醇，称定重量，超声波处理后，再称定重量，再用己醇补足减失的重量，摇匀， 滤去杂质即得；所述待测样品提取物溶液III的进样量为10y1。
[0018] 在本发明的一个实施例中，例如，所述待测样品提取物溶液III的制备包括将0. 5g 待测样品粉末置于具塞锥形瓶中，加入浓度为95%的己醇20ml，称定重量，超声波处理1小 时，再称定重量，用浓度为95%的己醇补足减失的重量，摇匀，滤去杂质即得。所述待测样品 提取物溶液III的进样量为10y1。
[0019] 在本发明的另一个实施例中，所述对照样品溶液III是W甲醇为溶剂制成，并且浓 度为0.Img/ml。所述对照样品溶液III的进样量为5y1和15y1。
[0020] 根据本发明，所述方法还包括检视扶正解毒散的外观均匀度、检视扶正解毒散的 微观结构特征、检测扶正解毒散的粒度。其中，所述检视扶正解毒散的外观均匀度包括将待 测样品置于白色光滑平面上，平铺5cm2,将其表面压平，在明亮处检视其色泽是否均匀，是 否有花纹及色斑。所述检测扶正解毒散的粒度是将扶正解毒散过24目筛，称量，计算扶正 解毒散通过24目筛的比率。所述检视扶正解毒散的微观结构特征是将扶正解毒散置于显 微镜下进行观察。
[0021] 本发明中，所述扶正解毒散W重量份计由W下组分组成：
[00过板蓝根 60份，
[0023] 黄茂 60份，
[0024] 淫羊蕾 30份；
[002引其中，按干燥品计算所述扶正解毒散中黄茂甲巧的含量不低于0. 16mg/g;按干燥 品计算所述扶正解毒散中淫羊蕾巧的含量不低于0. 5mg/g;所述扶正解毒散中水含量不大 于10% (重量)，优选不大于6% (重量)。
[0026] 本发明中，所述扶正解毒散的制备方法是将W上3种组分，粉碎，过筛，混匀，即 得。
[0027] 本发明中，所述扶正解毒散的粒径为过24目筛的扶正解毒散颗粒的比例至少 为99. 2%。由于24目筛的孔径相当于850 + 29ym，所W所述扶正解毒散的粒径为小于 850 + 29ym的扶正解毒散颗粒的比例至少为99. 2%。
[0028] 本发明中，所述扶正解毒散的外观特征为灰黄色的粉末，且色泽均匀，无花纹及色 斑。
[0029]本发明中，所述扶正解毒散的微观结构特征为：纤维成束或散离，壁厚，表面有纵 裂纹，两端断裂成靑状或较平截；非腺毛3~10细胞，长200~1000ym，顶端细胞长，有的 为踪色或黄踪色。
[0030] 如前所述，现有药典中扶正解毒散项下质量标准未规定其各有效成分的鉴别方法 和含量测定方法，且其质量标准只有鉴别及检查项，没有含量测定项。对于兽药复方中药， 有效成分的含量测定需要精密的仪器，价格昂贵，很多兽药厂家考虑到成本，很少配置成套 的检测仪器，因此含量测定项往往舍去，药品质量控制水平就比较低。
[0031]为了完善扶正解毒散的质量标准及其检查方法，更好的控制药品质量，本发明的 发明人对扶正解毒散中淫羊蕾的成分淫羊蕾巧、黄茂的成分黄茂甲巧的鉴别方法进行了探 索，并确定了扶正解毒散中淫羊蕾巧及黄茂甲巧的含量测定方法。
[0032] 本发明的检验扶正解毒散质量的方法包括检视扶正解毒散的外观均匀度、检视扶 正解毒散的微观表面、检测扶正解毒散的粒度、鉴别扶正解毒散中黄茂甲巧、检测扶正解毒 散中黄茂甲巧和淫羊蕾巧的含量W及检测检测扶正解毒散中的水分。该方法通过建立专属 性强的鉴别方法、有效的检查方法及重复性、准确性良好的含量测定方法，能够有效控制该 产品的质量，可增强该药的质量可控性和稳定性，保证其临床使用安全、有效、稳定。
【附图说明】
[0033] 下面将结合附图来说明本发明。
[0034]图1为黄茂鉴定薄层色谱图；图中附图标记如下；1黄茂甲巧；2~4待测样品；5 缺黄茂阴性对照。
[0035] 图2为黄茂甲巧专属性实验图谱；图中附图标记的含义如下；1黄茂甲巧对照品色 谱图；2待测样品色谱图；3阴性对照色谱图。
[0036] 图3为淫羊蕾巧专属性实验图谱；图中附图标记的含义如下；1淫羊蕾巧对照品色 谱图；2待测样品色谱图；3阴性对照色谱图。
[0037] 图4为黄