茂甲巧标准曲线图。
[0038] 图5为淫羊蕾巧标准曲线图。
【具体实施方式】
[0039] 为使本发明更加容易理解，下面将结合实施例和附图来详细说明本发明，该些实 施例仅起说明性作用，并不局限于本发明的应用范围，下列实施例中未提及的具体实验方 法，通常按照常规实验方法进行。
[0040] 实施例
[00川 实施例1 :
[0042] 1.仪器；Waters e2695高效液相色谱仪；蒸发光散射检测器。
[0043] 试剂：
[0044] 己膳；天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱纯，20120419。
[0045] 甲醇；成都市科龙化工试剂厂，色谱纯，20130423。
[0046] 正下醇：成都市科龙化工试剂厂，分析纯，20110328。
[0047] 氨水；成都市科龙化工试剂厂，分析纯，20100419。
[0048] 己醇；成都市科龙化工试剂厂，分析纯，20110703。
[004引纯化水；自制。
[0050]对照品：
[005。 黄茂甲巧冲国药品生物制品检定所，含量100%，批号110781-200613。
[005引淫羊蕾巧冲国药品生物制品检定所，含量100%，批号110737-200415。
[0053] 样品；扶正解毒散，由洛阳惠中兽药有限公司生产。
[0054] 2.黄茂甲巧的鉴别
[00巧]待测样品提取物溶液I的制备：将8g待测样品与20ml甲醇混合并加热回流1小 时，过滤，将所获得的滤液加入中性氧化铅柱(所述氧化铅柱的内径为10~15mm;所述氧化 铅的粒径为100~120目，其用量为5g)，用100ml40%的甲醇洗脱，并将洗脱液蒸干，所向剩 余残渣中加入30ml水使其溶解，用水饱和的正下醇振摇提取2次，每次20ml，合并所获得的 正下醇提取液，用水洗涂2次，每次20ml，将洗涂后正下醇提取液蒸干，向剩余残渣中加入 0.5ml甲醇使其溶解，即得。
[0056] 对照样品溶液的制备；对照样品溶液W甲醇为溶剂制得，其浓度为Img/ml。
[0057] 检测方法：W黄茂甲巧作对照样品，W甲醇为溶剂，W 13:7:2的H氯甲焼-甲 醇-水的下层溶液为展开剂，分别将2 y 1对照样品溶液和扶正解毒散待测样品提取物溶液 在同一硅胶G薄层板上点样展开，取出、瞭干、并喷W 10%硫酸己醇溶液，105°C加热至斑点 显色清晰，然后检视待测样品色谱中，在与对照样品色谱相应的位置上是否显示与对照样 品相同颜色的斑点，检视结果见图1。从图1可W看出，待测样品色谱中，在与对照样品色谱 相应的位置上是否显示与对照样品相同颜色的斑点，说明待测样品中含有黄茂甲巧。
[00则 3.检查
[0059] 粒度；通过24目筛的扶正解毒散粉末的重量为99. 2%。
[0060] 外观均匀度；取待测样品适量，置光滑纸上，平铺约5cm2,将其表面压平，在明亮处 观察，色泽均匀，无花纹、色斑。
[006。 水分；照水分测定法冲国兽药典2010版二部附录60页）测定，为3. 2%。
[00的]4.含量测定
[006引色谱条件
[0064]色谱柱：Kromasil C18 柱。
[00财 流动相：己膳-水（35: 。
[0066] 流速；1.Oml/min。
[0067] 检测器；蒸发光散射检测器。
[006引条件；气体流量25psi ;增益150 ;漂移管温度6(TC，喷雾器温度36°C。
[006引柱温；3(TC
[0070] ①对照品溶液的制备：
[ocm] a取黄茂甲巧对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，即得。
[0072] b取淫羊蕾巧对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.Img的溶液，即得。
[0073] ②待测样品溶液的制备：
[0074] a取本品约lOg，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适 量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的 正下醇振摇提取4次，每次40ml，合并正下醇液，用浓度为40vol. %的氨水溶液充分洗涂2 次，每次约40ml，弃去氨液，正下醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸 附树脂柱（内径为1. 5畑1，柱高为12畑1)，W水50ml洗脱，弃去水液，再用40%己醇30ml洗脱， 弃去洗脱液，继用70%己醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量 瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
[00巧]b取本品粉末约l.Og，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀己醇20ml，称定重 量，超声1小时，再称定重量，用稀己醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。
[007引 5.专属性试验
[0077] 按处方配比称取除黄茂、淫羊蕾外其它药材并按制备工艺制备样品作为阴性样 品，取阴性样品同法操作。同时进行阴性样品测定，结果阴性无干扰。黄茂甲巧专属性实验 图谱见图2,淫羊蕾巧专属性实验图谱见图3。
[0078] 6.线性范围考察 [007引黄茂甲巧
[0080] 精密称取黄茂甲巧对照品25. 4mg，加甲醇制成0. 508mg/血的溶液，按上述色谱条 件分别进样3y L、5y L、10y L、15y L、20y L测定。W峰面积对数（y)为纵坐标，W进样量 对数（X)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程y=1.4828x+5. 312，r=0. 9991，见表1，黄茂甲 巧标准曲线见图4。
[0081] 表1黄茂甲巧线性关系试验结果
[0082]
【主权项】
1. 一种检验扶正解毒散质量的方法，包括鉴别扶正解毒散中黄芪甲苷、检测扶正解毒 散中黄芪甲苷和淫羊藿苷的含量以及检测扶正解毒散中的水分。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扶正解毒散中淫羊藿苷的含量测定 采用高效液相色谱法，包括采用蒸发光散射检测器检测，并以十八烷基硅烷键合硅胶为色 谱柱填充剂，以淫羊藿苷为对照样品，以乙腈-水为流动相，在对照品溶液III与待测样品提 取物溶液III进样后，记录色谱图，用外标两点法对数方程计算扶正解毒散中淫羊藿苷的含 量，其中，所述色谱柱的理论塔板数按淫羊藿苷峰计算至少为1500。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在流动相中，乙腈与水的体积比为25:75。
4. 根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述待测样品提取物溶液III的制备 包括将待测样品粉末置于具塞锥形瓶中，加入乙醇，称定重量，超声波处理后，再称定重量， 再用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤去杂质即得；所述待测样品提取物溶液III的进样量为 10 u 1〇
5. 根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述对照样品溶液III是以甲醇为溶剂 制成，并且浓度为0. lmg/ml ;所述对照样品溶液III的进样量为5iU和15iU。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扶正解毒散中黄芪甲苷的含量测定 采用高效液相色谱法，包括采用蒸发光散射检测器检测，并以十八烷基硅烷键合硅胶为色 谱柱填充剂，以黄芪甲苷为对照样品，以乙腈-水为流动相，在对照品溶液II与待测样品提 取物溶液II进样后，记录色谱图，用外标两点法对数方程计算扶正解毒散中黄芪甲苷的含 量，其中，所述色谱柱的理论塔板数按黄芪甲苷峰计算至少为4000。
7. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在所述流动相中，乙腈与水的比例为 35:65〇
8. 根据权利要求1到7中任意一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括检视扶正 解毒散的外观均匀度、检视扶正解毒散的微观结构特征、检测扶正解毒散的粒度； 其中，所述检视扶正解毒散的外观均匀度包括将待测样品置于白色光滑平面上，平铺 5cm2,将其表面压平，在明亮处检视其色泽是否均匀，是否有花纹及色斑； 所述检测扶正解毒散的粒度是将扶正解毒散过24目筛,称量,计算扶正解毒散通过24 目筛的比率； 所述检视扶正解毒散的微观结构特征是将扶正解毒散置于显微镜下进行观察。
9. 根据权利要求1到8中任意一项所述的方法，其特征在于，所述扶正解毒散以重量份 计由以下组分组成： 板蓝根 60份， 黄芪 60份， 淫羊藿 30份； 其中，按干燥品计算所述扶正解毒散中黄芪甲苷的含量不低于〇. 16mg/g;按干燥品 计算所述扶正解毒散中淫羊藿苷的含量不低于〇. 5mg/g ;所述扶正解毒散中水含量不大于 10% (重量)，优选不大于6% (重量)。
10. 根据权利要求9所述的方法，其特征在于， 所述扶正解毒散的粒径为过24目筛的扶正解毒散颗粒的比例至少为99. 2% ; 所述扶正解毒散的外观特征为灰黄色的粉末，且色泽均匀，无花纹及色斑； 所述扶正解毒散的微观结构特征为：纤维成束或散离，壁厚，表面有纵裂纹，两端断裂 成帚状或较平截；非腺毛3~10细胞，长200~1000μm，顶端细胞长，有的为棕色或黄棕 色。
【专利摘要】本发明涉及一种检验扶正解毒散质量的方法，该方法包括检视扶正解毒散的外观均匀度、检视扶正解毒散的微观表面、检测扶正解毒散的粒度、鉴别扶正解毒散中黄芪甲苷、检测扶正解毒散中黄芪甲苷和淫羊藿苷的含量以及检测检测扶正解毒散中的水分。该方法通过建立专属性强的鉴别方法、有效的检查方法及重复性、准确性良好的含量测定方法，能够有效控制该产品的质量，可增强该药的质量可控性和稳定性，保证其临床使用安全，有效，稳定。
【IPC分类】G01N21-84, G01N15-02, G01N30-02
【公开号】CN104749261
【申请号】CN201310736704
【发明人】张许科, 刘兴金, 张晓会
【申请人】洛阳惠中兽药有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年12月25日