一种梯度洗脱的高效液相色谱法测定奥氮平片及相关物质含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种药物分析领域，具体涉及一种梯度洗脱的高效液相色谱分离分析 方法测定奧氮平片及相关物质含量的方法。
【背景技术】
[0002] 本品主要成份为奧氮平。其化学名称为：2-甲基-10-(4-甲基-1-脈嗦)-4H-喔 吩并巧,3-b] [1,引本并二氮杂。通用名为；再普乐，分子式：C 17 H 20 N 4 S分子重： 312. 43;本品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色或黄色。
[0003] 本品属于抗精神病类药物。
[0004] 有关物质检查是药品质量控制的重要指标。建立起准确测定杂质的检验方法尤其 重要，要对有关物质进行严格的控制，就离不开专属性强、灵敏度高的分析方法，及其对分 析方法的筛选与验证。美国药典35已经收载了此品种，但在检测杂质含量时仍存在问题， 色谱峰形较差，杂质分离度不好。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有技术存在的不足，提供了一种梯度洗脱的高效液相色谱 法测定奧氮平及相关物质含量的方法。
[0006] 本发明的目的是通过W下技术手段实现的： 采用W下的操作条件： a. 色谱柱采用反相C8色谱柱； b. 流速为1.5ml/min，检测波长为220皿，柱温为35。C，待测样品温度为5° C; C.十二烷基硫酸轴缓冲液经过W下方法配制，取水1500ml，加磯酸5. 0ml，用50%氨氧 化轴溶液调节pH值至2. 5,加入十二烷基硫酸轴13. Og，振摇使溶解，滤过； d. 流动相A按己膳与十二烷基硫酸轴缓冲液的体积比为48 : 52配制； e. 流动相B按己膳与十二烷基硫酸轴缓冲液的体积比为70 : 30配制。
[0007] 与现有技术相比本发明具有W下明显的优点：专属性好、准确度高，主峰与杂质能 够有效的分离，能够准确地检测出奧氮平片有关物质。
【附图说明】
[0008] 图1是酸破坏色谱图； 图2是碱破坏色谱图； 图3是氧化破坏色谱图； 图4是高温破坏色谱图； 图5是光照破坏色谱图； 图6是检出限色谱图； 图7是系统适用性对比色谱图； 图8是样品检测色谱图； 图9是美国标准色谱图。
【具体实施方式】
[0009] -种梯度洗脱的高效液相色谱法测定注射用奧氮平及相关物质含量的方法，采用 W下的操作条件： a. 色谱柱采用反相C8色谱柱； b. 流速为1.5ml/min，检测波长为220皿，柱温为35。C，待测样品温度为5°C; C.十二烷基硫酸轴缓冲液经过W下方法配制，取水1500ml，加磯酸5. 0ml，用50%氨氧 化轴溶液调节pH值至2. 5,加入十二烷基硫酸轴13.Og，振摇使溶解，滤过； d. 流动相A按己膳与十二烷基硫酸轴缓冲液的体积比为48 : 52配制； e. 流动相B按己膳与十二烷基硫酸轴缓冲液的体积比为70 : 30配制。
[0010] 一、适用性对比试验 溶剂按己膳与十二烷基硫酸轴缓冲液的体积比为60 : 40配制，分别取奧氮平对照品、 杂质I、II、111、IV、V、VI、W各适量，置同一量瓶中，加溶剂适量，超声使溶解并用溶剂稀释 制成每1ml中约含奧氮平20嗦、其他杂质各2嗦的溶液，作为系统适用性试验溶液。精密 量取20y1注入液相色谱仪，记录色谱图，奧氮平与杂质IV(N-氧化物）的分离度应不小于 3. 0,奧氮平主峰的拖尾因子应不大于1. 5。
[0011] 二、样品测定 取奧氮平对照品适量，精密称定，用溶剂溶解并稀释制成每1ml中含2. 5嗦的溶液，作 为对照品溶液；取本品数片，研细，取细粉适量，精密称定，加样品溶剂适量，超声并不时振 摇10~20分钟，使奧氮平溶解，放冷，用溶剂稀释制成每1ml中约含奧氮平0. 5mg的溶液， 离也，取上清液作为供试品溶液。精密量取上述两种溶液各20y1分别注入液相色谱仪，记 录色谱图。供试品溶液色谱图中如显杂质峰，量取各杂质峰面积，其含量按加校正因子的自 身对照法用对照品的峰面积折计，杂质II的校正因子为0. 4,其他杂质的校正因子按1. 0计 算。杂质I不得过0. 1%，杂质II不得过0.2%，杂质III不得过0. 15%，杂质IV、V、VI均不得 过0. 5%，杂质VH不得过0. 1 %，单个未知杂质不得过0. 2%，杂质总量不得过1. 5%。计算时应 扣除溶剂峰，同时不计梯度漂移产生的峰。
[001引 S、专属性试验 酸破坏；取本品2片，研细，取细粉0. 2g，精密称定，置于10ml量瓶中，加溶剂超声并 不时振摇10~20分钟，使奧氮平溶解，放冷，加lmol/1盐酸2ml，在水浴上加热比，加入 2mol/l氨氧化轴2ml，中和，用溶剂稀释到刻度。
[0013] 碱破坏；取本品2片，研细，取细粉0. 2g，精密称定，置于10ml量瓶中，加溶剂超 声并不时振摇10~20分钟，使奧氮平溶解，放冷，加lmol/1氨氧化轴2ml，在水浴上加热 比，加入2m〇Vl盐酸2ml，中和，用溶剂稀释到刻度。
[0014] 氧化破坏；取本品2片，研细，取细粉0.2g，精密称定，置于10ml量瓶中，加溶剂 超声并不时振摇10~20分钟，使奧氮平溶解，放冷，加30%双氧水3滴，放置30分钟，用溶 剂稀释到刻度。
[0015] 高温破坏；取本品2片，研细，取细粉0.2g，精密称定，置于10ml量瓶中，加溶剂超 声并不时振摇10~20分钟，使奧氮平溶解，放冷，沸水加热化，放冷，用溶剂稀释到刻度。
[0016] 光照破坏；取本品2片，研细，取细粉0.2g，精密称定，置于10ml量瓶中，加溶剂超 声并不时振摇10~20分钟，使奧氮平溶解，放冷，用溶剂稀释到刻度。置45001X照5天。
[0017] 四、检测限 取对照品溶液，采用逐级稀释法，依次进样。当信噪比（S/N)约为3时，此对应的奧氮 平片为检测限。
[0018] 五、重复性 取同一批奧蛋平片制备6份供试品溶液，分别进样测定并记录色谱图及峰面积，计算 相对标准偏差：
【主权项】
1. 一种梯度洗脱的高效液相色谱法测定奥氮平及相关物质含量的方法，其特征是，采 用以下的操作条件： a. 色谱柱采用反相C8色谱柱； b. 流速为1.5ml/min，检测波长为220nm，柱温为35° C，待测样品温度为5° C; c. 十二烷基硫酸钠缓冲液经过以下方法配制，取水1500ml，加磷酸5. Oml，用50%氢氧 化钠溶液调节pH值至2. 5,加入十二烷基硫酸钠13. 0g，振摇使溶解，滤过； d. 流动相A按乙腈与十二烷基硫酸钠缓冲液的体积比为48 : 52配制； e. 流动相B按乙腈与十二烷基硫酸钠缓冲液的体积比为70 : 30配制。
【专利摘要】本发明公开一种梯度洗脱的高效液相色谱法测定奥氮平及相关物质含量的方法，采用以下的操作条件：a.色谱柱采用反相C8色谱柱；b.流速为1.5ml/min，检测波长为220nm，柱温为35℃，待测样品温度为5℃；c.十二烷基硫酸钠缓冲液经过以下方法配制，取水1500ml，加磷酸5.0ml，用50%氢氧化钠溶液调节pH值至2.5，加入十二烷基硫酸钠13.0g，振摇使溶解，滤过；d．流动相A按乙腈与十二烷基硫酸钠缓冲液的体积比为48∶52配制；e．流动相B按乙腈与十二烷基硫酸钠缓冲液的体积比为70∶30配制。本发明专属性好、准确度高，主峰与杂质能够有效的分离，能够准确地检测出奥氮平片有关物质。
【IPC分类】G01N30-02, G01N30-60
【公开号】CN104749259
【申请号】CN201310724368
【发明人】张宇丽
【申请人】辰欣药业股份有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年12月25日