一种甘草酸衍生物的检测方法
【专利摘要】本发明提供了一种甘草酸衍生物的检测方法，属于物理分析检测领域范畴。本发明所建立的高效液相色谱梯度洗脱法同时检测甘草次酸、乙酰甘草次酸、甘草酸酯等，具有良好的精密度、重现性、可靠性，方法先进简单，可以同时测定多种甘草酸衍生物的纯度，能够安全、有效、全面的控制甘草酸衍生物的质量。
【专利说明】一种甘草酸衍生物的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种甘草酸衍生物多种成分的高效液相色谱检测方法，属于物理分析检测领域范畴。
【背景技术】
[0002]甘草为多年生草本植物甘草(Glycyrrhiza urlensis Fisch.)的根及根莖,性味甘平，归心、肺、脾、胃经，是临床上常用的药材之一，具有“十方九草”的美称。药理研究表明甘草具有补脾益气、润肺止咳、通经脉、利气血、清热解毒、止血祛痰润肺的功效，临床上被广泛地用于治疗胃溃疡和十二指肠溃疡、咽喉肿痛、支气管炎、咳嗽、关节炎、过敏等疾病及用于保肝、降血脂、抗癌、抗干扰素诱生及增强细胞免疫调节等。甘草酸(glycyrrhizicacid,GA)是甘草中最重要的有效成分之一，具有解毒、消炎、抗氧化、抗过敏、抗肿瘤以及增强免疫等多种药理活性。但游离GA的水溶性较差，需制成有关衍生物后药用。而由GA制得的衍生物主要包括甘草甜素(glycyrrhizic,GL)、甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GAS)以及酸化甘草次酸(acyl glycyrrhetinic acid, AGA)。
[0003]本实验室在研究过程中，对甘草酸进行处理，获得了甘草酸衍生物:甘草酸单糖苷、甘草次酸、乙酰甘草次酸以及甘草酸酯。本发明在甘草酸甜素的液相色谱条件的基础上进行改进，建立的一种甘草酸衍生物通用的高效液相色谱检测方法，用于检测区别不同的甘草酸衍生物和含量。本方法简便快捷，精密度好，重现性好，具有很强的实用性。
[0004]在已经公开的文献与专利中，都是关于甘草酸及其衍生物的制备与应用、研究进展和药理活性研究的描述，未发现与本发明相关或类似的报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种测定多种甘草酸衍生物纯度的方法，本方法相对简单，具有良好的精密度、重现性和可靠性，通用于测定多种甘草酸衍生物成分的纯度及含量，可用于甘草酸衍生物的质量控制。
[0006]本发明提供一种甘草酸衍生物的高效液相检测方法，该方法包括以下步骤:
[0007](I)色谱条件:室温，相对湿度25?40% ;以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30?90%乙腈溶液为流动相A，以0.0lmol/L磷酸水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速:0.8?1.2ml/min，柱温25?40°C，检测波长250?257nm。
[0008]
【权利要求】
1.一种甘草酸衍生物的检测方法，其特征在于该方法如下: 色谱条件:室温，相对湿度25~40% ;以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30~90%乙腈溶液为流动相A，以0.01mol/L磷酸水为流动相B ;按下表中的规定进行梯度洗脱；流速:0.8 ~1.2ml/min,柱温 25 ~40°C。 称取甘草酸衍生物适量，加入适量甲醇，制成每Iml含0.5~2mg的溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。
2.根据权利要求1所述的的检测方法，其特征在于梯度洗脱过程为--第0.01分钟，流动相A乙腈为30~40%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为60~70% ;第10~15分钟，流动相A乙腈为40~50%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为50~60 第15~25分钟，流动相A乙腈为50~55%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为45~50% ;第25~35分钟，流动相A乙腈为55~65%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为35~45%;第35~50分钟，流动相A乙腈为65~85%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为15~35%;第50~60分钟，流动相A乙腈为85~90%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为10~15%。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于供试品溶液的制备方法为:称取甘草酸衍生物适量，加入适量甲醇，超声溶解5~20分钟，放冷，配制成每Iml含0.5~2mg的溶液。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于高效液相色谱的进样量为10或20 μ 1，优选为 20 μ I。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于色谱条件中室温优选为20°C，相对湿度优选为35%，柱温为30°C。
6.根据权利要求2所述的的检测方法，其特征在于梯度洗脱过程为:第0.01分钟，流动相A乙腈为35%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为65% ;第15分钟，流动相A乙腈为45%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为55% ;第25分钟，流动相A乙腈为55%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为45%;第35分钟，流动相A乙腈为65%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为35% ;第50分钟，流动相A乙腈为85%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为15% ；第60分钟，流动相A乙腈为90%，流动相B0.01mol/L磷酸水溶液为10%。
7.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于供试品溶液制备中的超声处理为10分钟，制成每Iml含Img的溶液。
【文档编号】G01N30/36GK103529151SQ201210228702
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2012年7月4日 优先权日:2012年7月4日
【发明者】易铭, 杨永安, 钟慧, 金显友, 袁继文, 魏元刚, 黄全书, 季浩 申请人:江苏天晟药业有限公司