一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种药物的分析方法，特别是涉及一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效 液相色谱测定方法。
【背景技术】
[0002] 布洛芬（Ibuprfen)是英国Boots公司1967年创制、1969年上市的一种疗效确切、 毒副作用小、安全性高的烷基苯丙酸类消炎、解热、镇痛药。但几乎不溶于水，普通口服片在 胃肠中溶出慢，体内消除快。而治疗风湿及类风湿性关节炎等慢性疾病时，需长期频繁大剂 量用药，易导致胃肠出血，且对肾脏有一定的损害，导致某些病人不能继续治疗。为适应临 床要求，国外相继设计的多种剂型问世，以精氨洛芬为原料制成的糖浆剂，缓释小颗粒等新 剂型，在国外已上市，国内临床已开始应用。精氨洛芬是由布洛芬和精氨酸形成的复盐，精 氨酸为人体所需的氨基酸类基本营养成分，将布洛芬与精氨酸成盐，形成的复盐在水中的 溶解度大幅提高，扩展了布洛芬的制剂类型和临床应用。精氨洛芬质量标准中的一个重要 检测项目是测定产品中游离布洛芬的含量，目前药典中没有给出检验方法，产品的质量控 制各企业采用各自的企业内控标准，一般是紫外-可见分光光度法，但存在专属性不强，不 够准确的缺点。
【发明内容】
[0003] 针对现有技术的不足，本发明的目的旨在提供一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效 液相色谱测定方法，具有稳定、准确、可靠、重复性好、方便推广使用的特点。
[0004] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0005] 一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，其特征在于，按以下步骤 进行：
[0006] 1)高效液相色谱条件：采用高效液相色谱仪，色谱柱为：C18柱，规格为 4. 6mmX250mm，5um;柱温30°C，紫外检测器，检测波长为220nm;流动相：甲醇与水混合组 成，甲醇与水的体积比为75:25,用2%呀04调pH至2. 5 ;流速：1.Oml/min;
[0007] 2)供试品溶液的制备：称取精氨洛芬样品，用脂溶性有机溶剂进行提取，定容后， 作为供试品溶液；
[0008] 3)对照品洛液的制备：取布洛分标准对照品适量，用甲醇制成0. 2mg/ml的对照品 溶液；
[0009] 4)测定：取供试品溶液及对照品溶液各20ul进样，注入高效液相色谱仪，记录色 谱图，采用外标法进行定量分析，计算游离布洛芬含量。
[0010] 作为优选，在步骤2中，供试品溶液的制备：称取lg精氨洛芬样品，加脂溶性有机 溶剂20ml，磁力搅拌提取lOmin，滤出脂溶性有机溶剂，滤渣再用20ml脂溶性有机溶剂重 复提取2次，合并脂溶性有机溶剂提取液，将滤液于50°C水浴减压蒸干，回收脂溶性有机溶 剂，浓缩后得到的剩余物用甲醇溶解，并定容至l〇〇ml，作为供试品溶液。
[0011] 作为优选，在步骤2)中，所述脂溶性有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、三氯甲烷、二氯 乙烷、乙酸乙酯中的任意一种。
[0012] 作为进一步优选，在步骤2)中，所述脂溶性有机溶剂为三氯甲烷。
[0013] 本发明的有益效果在于：
[0014] 本发明采用脂溶性有机溶剂将样品中的游离布洛芬转移到有机溶剂中进行液相 色谱测定，减少了处理样品时可能引入水份造成的样品分解，且提取物中的有关杂质相对 减少，保证了结果的可靠性，同时，本发明针对精氨洛芬的特点，优化了高效液相色谱条件， 使得本发明能准确和可靠的检测精氨洛芬中游离布洛芬的含量，是一种实用和可靠的检测 方法，优于使用紫外-可见分光光度计的检测方法。
【附图说明】
[0015] 图1为本发明的回归方程图。
[0016] 图2为本发明200ug/ml布洛芬对照品溶液的高效液相色谱图。
[0017] 图3为本发明5ug/ml布洛芬对照品溶液的高效液相色谱图。
[0018] 图4为本发明供试品溶液的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0019] 本发明提供的检测方法中所用试剂均由市场购得。所述脂溶性有机溶剂为氯仿、 二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙烷、乙酸乙酯中的任意一种。
[0020] 实施例：
[0021] -种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，按以下步骤进行：
[0022] 1)高效液相色谱条件：高效液相色谱仪，岛津LC-20AT，液相色谱条件：C18柱 (4. 6mmX250mm，5um)，柱温30°C，紫外检测器，检测波长220nm;流动相：甲醇：水（含2% 把卩04，？11 = 2.5)= 75:25，流速：1.〇1111/111111
[0023] 2)供试品溶液的制备：称取lg精氨洛芬样品，加二氯甲烧20ml，磁力揽拌提取 lOmin，滤出三氯甲烷，滤渣再用20ml三氯甲烷重复提取2次，合并三氯甲烷提取液，将滤液 于50°C水浴减压蒸干，回收三氯甲烷，浓缩后得到的剩余物用甲醇溶解，并定容至100ml， 作为供试品溶液。
[0024] 3)对照品溶液的制备：取布洛芬标准对照品适量，用甲醇制成0.2mg/ml的对照品 溶液；
[0025] 4)测定：取供试品溶液及对照品溶液各20ul进样，记录色谱图，采用外标法进行 定量分析，计算游离布洛芬含量。
[0026] 方法验证：
[0027] 1、线性范围：取布洛芬配成浓度在5?200ug/ml范围内的7个浓度的溶液（见表 1)，分别进样测定，测定峰面积，以峰面积对数值为纵坐标，进样量对数值为横坐标，计算其 回归方程，结果表明布洛芬在5?200ug/ml范围内线性关系良好（见图1)，回归方程为：Y =51753X+39655,r= 0.9999。
[0028] 表 1
[0029]
【主权项】
1. 一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，其特征在于，按w下步骤进 行： 1) 高效液相色谱条件：采用高效液相色谱仪，色谱柱为；C18柱，规格为 4. 6mmX250mm，5um ;柱温30。紫外检测器，检测波长为220nm ;流动相：甲醇与水混合组 成，甲醇与水的体积比为75:25,用2%畔〇4调抑至2. 5 ;流速；1. Oml/min ; 2) 供试品溶液的制备；称取精氨洛芬样品，用脂溶性有机溶剂进行提取，定容后，作为 供试品溶液； 3) 对照品溶液的制备；取布洛芬标准对照品适量，用甲醇制成0. 2mg/ml的对照品溶 液； 4) 测定；取供试品溶液及对照品溶液各20ul进样，注入高效液相色谱仪，记录色谱图， 采用外标法进行定量分析，计算游离布洛芬含量。
2. 根据权利要求1所述的精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，其特征在 于；在步骤2)中，供试品溶液的制备：称取Ig精氨洛芬样品，加脂溶性有机溶剂20ml，磁力 揽拌提取lOmin，滤出脂溶性有机溶剂，滤渣再用20ml脂溶性有机溶剂重复提取2次，合并 脂溶性有机溶剂提取液，将滤液于50°C水浴减压蒸干，回收脂溶性有机溶剂，浓缩后得到的 剩余物用甲醇溶解，并定容至100ml，作为供试品溶液。
3. 根据权利要求2所述的精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，其特征在 于；在步骤2)中，所述脂溶性有机溶剂为氯仿、二氯甲烧、S氯甲烧、二氯己烧、己酸己醋中 的任意一种。
4. 根据权利要求2所述的精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，其特征在 于；在步骤2)中，所述脂溶性有机溶剂为=氯甲烧。
【专利摘要】本发明公开了一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法，主要步骤为用脂溶性有机溶剂提取样品中的游离布洛芬，定容后用高效液相色谱测定，外标法计算样品中游离布洛芬的含量。本发明具有稳定、准确、可靠，重复性好，方便推广使用的优点。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104535683
【申请号】CN201410831391
【发明人】蒲含林, 朱义波, 相东方
【申请人】广州普星药业有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月25日