高效液相色谱法测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种高效液相色谱法测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法，旨在提供一种分析效率高，可作为清喉利咽颗粒的质量控制方法；该方法包括下述步骤：制备供试品溶液；制备对照品；属性试验，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各2μl注入液相色谱仪检测，所述的色谱条件如下：色谱柱：InertsilODS?SP液相色谱柱，5μm，4.6×250mm；流动相：乙腈－0.5％醋酸，其体积比为：44:56；流速0.8mL/min；波长：287nm；柱温：30℃；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
高效液相色谱法测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种黄芩苷的鉴别方法，具体地说，是一种HPLC测定清喉利咽颗粒中 黄芩苷含量的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 清喉利咽颗粒是由黄芩、西青果、桔梗、竹茹、枳壳、胖大海、橘红等13种中药组成。 功效清热利咽，宽胸润喉。用于外感风热所致的咽喉发干、声音嘶哑；急慢性咽炎、扁桃体炎 见上述证候者，常用有保护声带作用。其质量标准收载于:《中国药典》2005年版一部，只有 黄芩苷的含量测定指标，不利于控制该药品的质量。
【发明内容】
[0003] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种分析效率高，检测结果重现好的清喉利 咽颗粒中黄芩苷的鉴别方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种HPLC测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法，依次包括下述步骤：
[0006] 1)取本品粉末5g，加体积比1:1的N，N_二甲基甲酰胺和乙醇30ml溶解，离心取上清 液，通过已处理好的D101型树脂柱，先用70 %乙醇洗，收集洗脱液，蒸干，再用40 %乙醇5ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，用5ml甲醇溶解，过滤作为供试品；
[0007] 2)取黄芩苷对照品5g，超声30min溶解，用0.22wii微孔滤膜滤过，补足10ml制得作 为对照品储备液;吸取对照品储备液l〇ml置20ml瓶中加甲醇稀释至刻度，过滤作为对照品 溶液；
[0008] 3)专属性试验
[0009] 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2iU注入液相色谱仪，检测。
[0010] 所述的色谱条件如下：
[0011] 色谱柱：Inerts i 10DS-SP液相色谱柱，5wn，4 ? 6 X 250mm;
[0012]流动相：乙腈一〇 ? 5 %醋酸，其体积比为:44:56
[0013] 流速 0.8mL/min;
[0014] 波长：287nm;
[0015] 柱温：3(TC;
[0016] 进样量 2iU。
[0017] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案采用大孔树脂吸附法对清喉利咽颗粒进 行提取分离，在通过高效液相色谱进行含量检测，该方法简便、重现性好，结果准确可靠，可 以用于清喉利咽颗粒中黄芩苷的含量测定，为清喉利咽颗粒的质量控制提供一定的理论依 据。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0019] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固定的均为质量浓度。
[0020] 实施例1
[0021] 本发明提供的一种HPLC测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法，该方法具体如 下：
[0022] 一种HPLC测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法，依次包括下述步骤：
[0023] 1)取本品粉末5g，加体积比1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙醇30ml溶解，离心取上清 液，通过已处理好的D101型树脂柱，先用70 %乙醇洗，收集洗脱液，蒸干，再用40 %乙醇5ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，用5ml甲醇溶解，用0.22wii微孔滤膜过滤作为供试品；
[0024] 2)取黄芩苷对照品5g，超声30min溶解，补足10ml，用0.22mi微孔滤膜滤过，制得作 为对照品储备液;吸取对照品储备液l〇ml置20ml瓶中加甲醇稀释至刻度，过滤作为对照品 溶液；
[0025] 3)专属性试验
[0026] 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2iU注入液相色谱仪，检测。
[0027]所述的色谱条件如下：
[0028]色谱柱：Inerts i 10DS-SP液相色谱柱，5wn，4 ? 6 X 250mm;
[0029]流动相：乙腈一0 ? 5%醋酸，其体积比为:44:56
[0030] 流速 0.8mL/min;
[0031] 波长：287nm;
[0032] 柱温：30。(：；
[0033]进样量:2yl。
[0034]为了检测该方法的精密度，取同一份对照品溶液，按同一色谱条件，连续进样6次， 测定峰面积积分值，黄芩苷RSD为0.16 % (n = 6)结果表明，仪器精密度良好。
[0035]线性关系考察
[0036] 按上述的色谱条件分别精密吸取上述对照品溶液0.2、l、2、3、5yl注入色谱仪，测 定，以峰面积积分值为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线;黄芩苷的 回归方程为:￥ = 45.9乂+5.67& = 0.9997);结果表明；黄芩苷在25~625即范围内，进样量与 峰面积积分值呈良好的线性关系，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系。
[0037] 稳定性试验
[0038]取同一份样品溶液，分别在0,2,4,8，12,2处，按上述色谱条件进样测定，分别测定 峰面积积分值，黄芩苷RSD为0.99 % (n = 6)结果表明，在24小时内待测物稳定。
[0039]样品含量测定
[0040] 按上述含量测定方法，测定了本品3批样品中的黄芩苷含量，结果见表1。
[0041] 表1、样品测定结果(n = 3)
[0043]与现有技术相比，本发明的优点在于方法简单准确，对提高产品质量和临床用药 的有效性与安全性均具有重要意义。
【主权项】
1. 一种高效液相色谱法测定清喉利咽颗粒中黄芩苷含量的方法，其特征在于，依次包 括下述步骤： 1) 取本品粉末5g，加体积比1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙醇30ml溶解，离心取上清液， 通过已处理好的D101型树脂柱，先用70 %乙醇洗，收集洗脱液，蒸干，再用40 %乙醇5ml洗 脱，收集洗脱液，蒸干，用5ml甲醇溶解，过滤作为供试品； 2) 取黄芩苷对照品5g，超声30min溶解，用0.22μπι微孔滤膜滤过，补足IOml制得作为对 照品储备液;吸取对照品储备液IOml置20ml瓶中加甲醇稀释至刻度，过滤作为对照品溶液； 3) 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μ1注入液相色谱仪，检测。 所述的色谱条件如下： 色谱柱：Inertsi IODS-SP液相色谱柱，5μL?，4 · 6 X 250mm; 流动相：乙腈一0.5 %醋酸，其体积比为:44:56 流速 〇.8mL/min; 波长:287nm; 柱温：30°C; 进样量2μ1。
【文档编号】G01N30/06GK105929055SQ201610248818
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月20日
【发明人】陈学松, 林冬杰, 李亚, 梁慧敏, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所