测定氟康唑的有关物质及特征未知杂质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，特别是涉及药品分析方法领域。本发明旨在建立HPLC 法测定氟康挫的有关物质，并对特征未知杂质进行结构确证。本发明采用CERIL-column ODS柱（250mmX4.6mm，5ym)色谱柱；以 0.01mol/L醋酸钠缓冲液（pH5.0)_ 甲醇（95:5) 为流动相A，乙腈-甲醇（60:40)为流动相B，梯度洗脱；流速I.OmL/min;检测波长261nm， 柱温30°C。本发明接着用LC-MS分析特征未知杂质，再用半制备液相色谱分离纯化，通过 NMR确定结构。由此，本发明建立的HPLC有关物质分析方法具有良好的方法学验证结果， 与中国药典方法比较，杂质检出能力更强；特征未知杂质为2-(2, 4-二氟苯基）-1，3-二 (1H-1，2, 4-三唑-1-基）-丁 -2-醇。已经发现，本发明建立的方法简便、灵敏、专属性好、 杂质检出能力强，能有效的反应药品质量。
【背景技术】
[0002] 氟康唑（fluconazole)，分子式C13H12F2N60，分子量 306. 27 ;化学名： a- (2, 4-二氟苯基）-a- (1H-1，2, 4-三唑-1-基甲基）-1H-1，2, 4-三唑-1-基乙醇；英文 化学名：1_(2, 4-difluorophenyl)-l-(lH-l，2, 4_triazol-l-ylmethyl)-lH-l，2, 4-Triazo le-l-ethanol;CAS号 86386-73-4。
[0003] 氟康唑是治疗真菌感染的一种药物，为广谱抗真菌药，对人和动物的真菌感染均 有治疗作用，目前市场上有片剂、胶囊、粉针剂和注射液几种剂型。
[0004] 氟康唑为白色或类白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带特异臭，味苦。该品在甲醇 中易溶，在乙醇中溶解，在二氯甲烷、水或醋酸中微溶，在乙醚中不溶。熔点为137~141°C。
[0005] 口服制剂以片剂为例，氟康唑片的适应症包括：1.念珠菌病：用于治疗口咽部和 食道念珠菌感染；播散性念珠菌病，包括腹膜炎、肺炎、尿路感染等；念珠菌外阴阴道炎。尚 可用于骨髓移植患者接受细胞毒类药物或放射治疗时，预防念珠菌感染的发生。2.隐球菌 病：用于治疗脑膜以外的新型隐球菌病；治疗隐球菌脑膜炎时，本品可作为两性霉素B联合 氟胞嘧啶初治后的维持治疗药物。3.球孢子菌病。4.用于接受化疗、放疗和免疫抑制治疗 患者的预防治疗。5.本品亦可替代伊曲康唑用于芽生菌病和组织胞浆菌病的治疗。其用 法用量为：口服；成人（1)播散性念珠菌病：首次剂量〇. 4g，以后一次0. 2g，一日1次，至少 4周，症状缓解后至少持续2周；（2)食道念珠菌病：首次剂量0. 2g，以后一次0.lg，一日1 次，持续至少3周，症状缓解后至少持续2周；根据治疗反应，也可加大剂量至一次0. 4g，一 日1次；（3) 口咽部念珠菌病：首次剂量0? 2g，以后一次0?lg，一日1次，疗程至少2周；（4) 念珠菌外阴阴道炎：单剂量，0. 15g。
[0006] 注射制剂以注射液为例，氟康唑的注射液适应症是主要用于以下适应症中病情较 重的患者：1.念珠菌病：用于治疗口咽部和食道念珠菌感染；播散性念珠菌病，包括腹膜 炎、肺炎、尿路感染等；念珠菌外阴阴道炎。尚可用于骨髓移植患者接受细胞毒类药物或放 射治疗时，预防念珠菌感染的发生。2.隐球菌病：用于治疗脑膜以外的新型隐球菌病；治疗 隐球菌脑膜炎时，本品可作为两性霉素B联合氟胞嘧啶初治后的维持治疗药物。3.球孢子 菌病。4.本品亦可替代伊曲康唑用于芽生菌病和组织胞浆菌病的治疗。
[0007] 氟康唑属吡咯类抗真菌药。抗真菌谱较广。口服及静注该品对人和各种动物真菌 感染，如念珠菌感染（包括免疫正常或免疫受损的人和动物的全身性念珠菌病）、新型隐球 菌感染（包括颅内感染）、糠秕马拉色菌、小孢子菌属、毛癣菌属、表皮癣菌属、皮炎芽生菌、 粗球孢子菌（包括颅内感染）及荚膜组织胞浆菌、斐氏着色菌、卡氏枝孢霉等有效。该品的 体外抗菌活性明显低于酮康唑，但该品的体内抗菌活性明显高于体外作用。该品的作用机 制主要为高度选择性干扰真菌的细胞色素P-450的活性，从而抑制真菌细胞膜上麦角固醇 的生物合成。氟康唑对真菌依赖的细胞色素P-450酶具有高度选择性。一日服用该品0. 5g， 连续28天，已证明对男性的血浆睾丸素浓度及育龄期妇女的留体激素浓度均无影响。
[0008] 氟康唑口服吸收良好，且不受食物、抗酸药、H2受体阻滞药的影响。空腹口服该品 约可吸收给药量的90%。单次口服该品100mg，平均血药峰浓度（Cmax)为4. 5~8mg/L。 表观分布容积（Vd)接近于体内水分总量。该品血浆蛋白结合率低（11%~12% )，在体内 广泛分布于皮肤、水疱液、腹腔液、痰液等组织体液中，尿液及皮肤中药物浓度约为血药浓 度的10倍；水疱皮肤中约为2倍；唾液、痰、水疱液、指甲中与血药浓度接近；脑膜炎症时， 脑脊液中该品的浓度可达血药浓度的54%~85%。该品少量在肝脏代谢。主要自肾排泄， 以原形自尿中排出给药量的80%以上。血消除半衰期（tl/2?)为27~37小时，肾功能 减退时明显延长。血液透析或腹膜透析可部分清除该品。
[0009] 氟康唑是三唑类的第三代抗真菌药，也是较少的水溶性抗真菌药之一。该品种由 辉瑞公司于1981年首先研发成功，1992年国内开始生产并用于临床。《中国药典》2010年 版和USP38、BP2015、EP8. 0中均已收载本品种[中国药典2010年版二部p547 ;USP38p3509 ; BP2015p969 ;EP8. 0p2245]，据文献报道[VaijanathG.Dongre,PravinP.Karmuse,Pradeep D.Ghugre,etal.Preparativeisolationandstructuralelucidationofimpurities influconazolebyLC/MS/MS[J].JPharmBiomedAnal, 2006, 42(3):334；Vaijanath G.Dongre,PradeepD.Ghugare,PravinP.Karmuse,etal.Isolationandstructural identificationofanimpurityinfluconazolebulkdrugsubstance[J].JPharm BiomedAnal,2007, 45(3) :422；HoudaBourichi,YounessBrik,PhilipeHubert,et al.Solid-statecharacterizationandimpuritiesdeterminationoffluconazol genericproductsmarketedinMorocco[J].JP