[0031]图11为玫瑰香鲜食葡萄的硬度的Arrhenius图。
[0032]图12为玫瑰香鲜食葡萄的失水率的Arrhenius图。
【具体实施方式】
[0033]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0034]实施例1
[0035]制备副干酪乳杆菌菌液:将副干酪乳杆菌干粉进行两次活化，然后再37°C下培养24小时，将菌液离心，用无菌生理盐水洗涤两次，得到沉淀，加入无菌生理盐水，制备成浓度为10_8?10_9CFU/ml的微生物菌液，备用。
[0036]配制生长基质:配制MRS肉汤培养液。
[0037]配制混有pH指示剂的MRS溶液:每升MRS肉汤培养基加入0.04g的溴甲酚绿粉末。
[0038]所述微生物菌液与所述混有pH指示剂的MRS溶液以体积比为10_5:1混合均匀，分装入容器，即制得微生物TTI。
[0039]实用性测定:
[0040]将该微生物TTI置于15°C下，每隔4h左右测定响应值(可滴定酸浓度、pH、总色差」E)，得到TTI响应参数变化趋势图。
[0041]
[0042]TTI颜色的测定应用Hunter Lab系统，采用Minolta CR410色差计测定L、a、b值，其中L表示亮度，a表示亨特(Hunter)标度中的a轴值，b表示亨特(Hunter)标度中的b轴值，+a表不红色，~a表不绿色，+b表不黄色，~b表不蓝色，用Zl E表不总色差(色差是指用数值来表示两种颜色给人色彩感觉上的差别)。
[0043]E= ( A a2+ A b2+ ^ c2)1/2
[0044]TTI可滴定酸浓度的测量:5g的TTI溶液用20ml的无菌蒸馏水稀释，用0.5ml的I %的酚酞使其均质化(1s)，之后用0.lmol/L的NaOH滴定到pH = 8.2。
[0045]TA(% ) = a*b*0.009*100/w
[0046]a是NaOH的用量，单位为ml ；b是NaOH的摩尔浓度；0.009是乳酸的等价因子；w是样品重量(g)。
[0047]图2为15°C恒温条件下，本指示器TTI体系的颜色变化历程，从图2可以看出，随着时间的迀移。本指示器TTI产生了从墨绿色到黄色的明显的颜色变化。
[0048]图3为本指示器TTI体系反应中15°C恒温条件下，可滴定酸浓度变化趋势图，从图3可以看出，随着时间的增加，可滴定酸浓度呈上升趋势。
[0049]图4为本指示器TTI体系反应中15°C恒温条件下，总色差Δ E变化趋势图，从图4可以看出，随着时间的增加，总色差呈上升趋势。
[0050]图5为本指示器TTI体系反应中15°C恒温条件下，pH变化趋势图，从图5可以看出，随着时间的增加，pH呈下降趋势。
[0051]从图3?5中可以看出，本指示器TTI体系反应中15°C恒温条件下，可滴定酸浓度、总色差ΔΕ、pH均与时间t呈现很好的线性关系。
[0052]按照实施例的方法制备微生物型时间温度指示器，分别在15°C、25°C、37°C条件下进行恒温试验。定期测量时间温度指示器的总色差、pH、可滴定酸浓度。
[0053]图5?7为本指示器TTI体系反应中15°C、25°C、37°C恒温条件下，pH的变化趋势图，从图中可以看出，该反应体系在不同温度下，PH随时间的变化均呈较好的线性关系，可以得到不同温度下的反应速率。
[0054]根据阿伦尼乌斯方程:-1nk = Ea/RT-lnk。，将图3?7中获得反应速率取自然对数，再与绝对温度与气体常数乘积的倒数进行线性拟合，建立关系曲线lnk-1/RT，即可绘出时间温度指示器pH、TA、」E的Arrhenius图，如图8?10。TTI各指标活化能由直线斜率直接获得。TTI 的 pH、TA、」E 活化能依次为 76.052kJ/mol、79.461kJ/mol、73.926kJ/mol。
[0055]同理，对玫瑰香鲜食葡萄的关键品质指标硬度和失水率进行测量，得到其Arrhenius曲线，如图11?12，由图可以获得玫瑰香鲜食葡萄的硬度、失水率品质指标的活化能为66.905kJ/mol、71.955kJ/mol。其中鲜食葡萄的失水率与微生物TTI的Z E活化能范围都在70?75kJ/mol，且相差1.971kJ/mol，最为接近。理论上TTI与产品的活化能相差20kJ/mol，TTI可准确用于该产品品质监测。因此，该微生物型时间温度指示器可用于鲜食葡萄品质感知与监测。
[0056]虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1.一种用于鲜食葡萄品质感知的微生物型时间温度指示器，其特征在于，其包括一个容器，容器内含有混合均匀的微生物菌液、生长基质及PH指示剂；所述微生物为副干酪乳杆菌；所述生长基质为MRS肉汤培养基；所述pH指示剂为溴甲酚绿。2.根据权利要求1所述的时间温度指示器，其特征在于，其制备方法包括如下步骤: 1)在生长基质中加入溴甲酚绿粉末，得到混有PH指示剂的MRS溶液； 2)将微生物菌液与步骤I)得到的MRS溶液混合均匀，即得。3.根据权利要求2所述的时间温度指示器，其特征在于，所述步骤I)为:在每升生长基质中加入0.039?0.041g溴甲酚绿粉末，得到混有pH指示剂的MRS溶液。4.根据权利要求2或3所述的时间温度指示器，其特征在于，所述步骤2)为:将微生物菌液与步骤I)得到的MRS溶液以体积比为10_5:1的比例混合均匀。5.根据权利要求1?3任一项所述的时间温度指示器，其特征在于，所述微生物菌液的制备方法具体为:将副干酪乳杆菌干粉进行活化，37°C恒温培养24小时，将菌液离心，用无菌生理盐水洗涤两次，得到沉淀，加入无菌生理盐水，制备成浓度为10_8?10_9CFU/ml的微生物菌液；其中，菌种活化和培养时所用的培养基为MRS肉汤培养基。6.权利要求1?5任一项所述的时间温度指示器在鲜食葡萄品质感知与监测中的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种用于鲜食葡萄品质感知的微生物型时间温度指示器，其包括一个容器，容器内含有混合均匀的微生物菌液、生长基质及pH指示剂；所述微生物为副干酪乳杆菌；所述生长基质为MRS肉汤培养基；所述pH指示剂为溴甲酚绿。本发明提供的时间温度指示器其活化能与果蔬的活化能相接近，可用于监测生鲜果蔬冷链物流中的品质变化，尤其能准确用于鲜食葡萄品质感知与监测。
【IPC分类】G01N21/78
【公开号】CN104964968
【申请号】CN201510243990
【发明人】张小栓, 孙格格, 肖新清, 刘苑睿, 朱志强
【申请人】中国农业大学
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2015年5月14日