Ihc、组织载片流体交换可置换件和系统的制作方法
【专利说明】I He、组织载片流体交换可置换件和系统
[0001]相关申请的交叉引用
本申请要求2014年3月11日提交的美国临时申请序列N0.61/951，135和2014年8月19日提交的N0.62/039,082的优先权，它们的公开通过引用并入本文中。
【背景技术】
[0002]免疫组织化学(IHC)指的是通过使用标记的抗体或其它配体来利用特定抗体-抗原相互作用来检测组织切片的细胞中的抗原(例如蛋白质)的过程。IHC在基础研宄中还广泛地用来理解生物组织的不同部分中的生物标志物和表达不同的蛋白质的分布和定位。应用包括诊断、药物开发和研宄。
[0003]例如，可在单独的载片上准备样本，或者可将多个样本布置在单个载片上用于比较分析，诸如用组织微阵列。可对IHC载片进行处理和染色，并且接着通过光学显微镜或荧光显微镜观看。组织染色的主要输出是用于光学或荧光成像，以及对染色组织进行存档和储存。
[0004]目前存在对于IHC可用的高容量和中等容量的自动化系统。手动系统对于临时研宄为可用的，该手动系统是劳动力密集型的，并且需要许多移液和浸渍/浸泡洗涤步骤。这些步骤包括载片安装式组织洗涤、封堵、一级、二级和三级抗体引入、覆盖孵化，以及在各个步骤之间的多次洗涤和漂洗。该复杂冗长的处理过程容易有误差，其最终可损害结果。
【发明内容】
[0005]提供一种消除常规系统的缺点的系统将是合乎需要的，该系统例如允许将流体一致地输送到样本，回收宝贵的试剂，对载片进行最少的处理(载片不在不同的浴槽之间传送)，以及同时进行多个化验。
[0006]现有技术的缺点已经由本文公开的实施例克服，该实施例在某些方面涉及真空源，该真空源连接于夹到样本安装式载片上的流槽。基元使组织保持干燥，并且允许流体(例如封堵剂、抗体、洗涤剂和漂洗剂等)引入到样本中以及放置成与样本接触，以及从腔室中冲洗出。在某些实施例中，设备包括载片保持器组件夹具、载片保持器、载片保持器框架和载片保持器框架组件，该载片保持器框架组件适于放置成与诸如真空的驱动力连通，以将流体抽吸通过载片保持器。
[0007]在某些实施例中，载片保持器包括注射/回收端口，该注射/回收端口允许一致的流体(例如抗体、链接剂、指示剂和色原)输送和回收，同时最小化气泡引入，从而减少误差，并且允许有大约>75%的流体(例如抗体)回收，以及在某些实施例中，>95%的回收。在某些实施例中，载片保持器包括储存器，该储存器允许填充、浸泡、漂洗、冲洗组织、用抗体均匀地覆盖组织，以及减少处理时间、空间和误差。在某些实施例中，载片在载片保持器中的定向允许目测标签信息和组织，以确认充分的抗体覆盖。多端口框架允许同时执行多次化验(例如，每个框架组件可处理1-12个载片)。能够从真空歧管移除载片保持器框架，并且允许载片保持器框架从真空歧管容易地传送到孵化箱/冰箱以及传送回来。
【附图说明】
[0008]图1是根据某些实施例的载片保持器组件夹具和载片的透视分解图；
图2是根据某些实施例的、具有安装好的载片和载片保持器的载片保持器组件夹具的透视分解图；
图3是根据某些实施例的、安装在载片保持器组件夹具上的载片保持器的透视俯视图；
图4是根据某些实施例的、安装在载片保持器组件夹具上的载片保持器的透视侧视图；
图5A是根据某些实施例的载片保持器的正视图；
图5B是根据某些实施例的图5A的载片保持器的侧视图；
图5C是根据某些实施例的载片保持器中的垫圈的一部分的放大透视图；
图6是根据某些实施例的图5A的载片保持器的一部分的第一透视图；
图7是根据某些实施例的图5A的载片保持器的一部分的第二透视图；
图8是根据某些实施例的图5的载片保持器的正视图，其显示流体流进入载片保持器腔室中的方向；
图9是根据某些实施例的图5的载片保持器的正视图，其显示流体流离开载片保持器腔室的方向；
图10是根据某些实施例的保持载片保持器的载片保持器框架和盖的透视图；
图11是根据某些实施例的、定位在载片保持器框架中的载片保持器的横截面图；
图12是根据某些实施例的载片保持器框架的透视图；
图13是根据某些实施例的、显示载片释放特征的载片保持器和载片保持器组件夹具的透视图；
图14是根据某些实施例的、具有附连于其的膜片的载片的透视图；
图15A是根据某些实施例的图14的载片和具有载片井的真空歧管的分解透视图；
图15B是根据某些实施例的真空歧管的载片井的横截面透视图；
图15C是根据某些实施例的真空歧管的载片和载片井的分解横截面图；
图16A是根据某些实施例的载片保持器的正视图；
图16B是根据某些实施例的载片保持器的第一横截面透视图；
图16C是根据某些实施例的载片保持器的第二横截面透视图；
图16D是根据某些实施例的载片保持器的俯视图；
图17A是根据某些实施例的载片和载片保持器流槽组件的分解透视图；
图17B是根据某些实施例的安装于载片保持器流组件的载片的透视图；
图17C是图17B的组件的仰视透视图；
图18A是根据某些实施例的歧管框架和载片保持器流槽的横截面分解透视图；
图18B是根据某些实施例的图18A的歧管框架和载片保持器流槽的横截面透视图，其中流槽就位；
图18C是图18B的组件的横截面侧视图；
图19是根据某些实施例的载片保持器流槽和载片的分解图； 图20A是根据另一个实施例的流槽和载片的透视分解图；
图20B是根据某些实施例的图20A的流槽的透视图，其中载片就位；
图20C是根据某些实施例的、处于组装好的状态的图20A的流槽的透视图；
图21是根据某些实施例的、显示为定位在真空歧管中的图20A的流槽的示意图；以及图22是根据某些实施例的、显示为定位在真空歧管中的图20A的流槽的下区域的示意图。
【具体实施方式】
[0009]首先转到图1，显示了载片10，其上具有样本11，诸如组织样本。典型地，组织样本置于载片10上之前已经经过固定处理。载片10是常规的样本保持器，并且可为平坦的，并且由例如玻璃制成。还显示了样本或载片保持器组件夹具20，其接收处于安装接合的载片10。在某些实施例中，样本11定向在载片10的顶侧上，并且当布置就位时，驻留在载片保持器组件夹具20的预定的样本目标区域(箭头A)内。在某些实施例中，一个或更多个液面指示器12(显示了三个)定位在样本目标区域中，其协助操作者将样本以如下方式定位使得确保样本甚至覆盖半填满的样本腔室，因而使用最少量的一级抗体。
[0010]在某些实施例中，载片保持器组件夹具20是伸长部件，其具有大体平的顶部表面21、端壁22和相对的端壁23。在某些实施例中，端壁22在表面21上方沿竖向延伸超过端壁23的距离。端壁22和23的朝内表面之间的长度略微长于载片10的长度，以使载片10在端壁22、23之间配合，如图2中显示的。短侧壁24、25以及对齐翅片26、27布置在表面21的周边上，并且从表面21沿竖向向上延伸，并且还用来将载片容纳在载片保持器组件夹具20的表面21上的位置。对齐翅片26、27还用作用于定位载片保持器30的对齐部件，如下面更详细地论述的。在某些实施例中，间隔开的切口 28(显示了四个)形成于夹具20的表面21中。在某些实施例中，各个切口 28成形为局部截顶锥形，其中其向内最深的切口部分定位在表面21处，在切口接近夹具20的底部时向外朝侧周边渐缩。切口 28构造成接收载片保持器30的相应的压缩夹43，如