0-2000U/mL的过氧化物酶、10-1000U/mL肌酐酰胺水解酶，0. 1 % -10 %的显色剂1， 5-500臟〇1/1口!16.0-8.0的缓冲液，0.005%-50%的稳定剂；
[0028] 优选地，下垫溶液中过氧化物酶活力为800-1500U/mL，肌酐酰胺水解酶活力为 500-1000U/mL；
[0029] 所述显色剂1为4-氨基安替吡啉、3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐水合物 (MBTH)中的一种或多种；优选所述显色剂1为0. 5 % -2 %的4-氨基安替吡啉；
[0030] 所述5-500mmol/LpH6. 0-8. 0的缓冲液为磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、 Tris-HCl缓冲液或PIPES缓冲液的一种或几种，优选所述缓冲液为50-200mm〇l/LpH 7. 0-8. 0的磷酸钾缓冲液；
[0031] 所述0.005% -50%的稳定剂为D-海藻糖、蔗糖、葡聚糖T70、β-环糊精、牛血清 白蛋白、甘露醇、聚乙二醇、明胶、肌醇、木糖、阿拉伯糖醇、乳糖、马来酸、酒石酸或者柠 檬酸中的一种或多种，优选所述稳定剂为1% -20%蔗糖和肌醇。
[0032] 本发明的同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒中的反应基板中的肌酐反应孔的 上垫由上垫溶液滴加在载体上制备而成；上垫溶液以水为溶剂，含有10-2000U/mL的肌 氨酸氧化酶、10_2000U/mL的肌酸脒基水解酶，0. 1 % -10%的显色剂2,5-500mmol/LpH 6· 0-8. 0的缓冲液，0· 005% -50%的稳定剂；
[0033] 优选地，上垫溶液中肌氨酸氧化酶活力为10-500U/mL，肌酸脒基水解酶活力为 20-500U/mL〇
[0034] 所述显色剂2为2, 4, 6-三溴-3-羟基苯甲酸（TBHB)、3, 5-二氯-2-羟基苯磺 酸（DCHBS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺（TOOS)、N-乙基-N-(3-磺丙 基）-3-甲基苯胺（TOPS)、N，N-双（4-磺丁基）-3-甲基苯胺二钠盐中的一种或多种。优选 显色剂2为1% -10%的TBHB、DCHBS中的一种或多种。
[0035] 所述5-500mmol/L pH6. 0-8. 0的缓冲液为磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、Tris-HCl 缓冲液或PIPES缓冲液的一种或几种，优选缓冲液为50-200mmol/L pH7. 0-8. 0的磷酸钾缓 冲液；
[0036] 所述0.005% -50%的稳定剂为D-海藻糖、蔗糖、葡聚糖T70、β-环糊精、牛血清 白蛋白、甘露醇、聚乙二醇、明胶、肌醇、木糖、阿拉伯糖醇、乳糖、马来酸、酒石酸或者柠 檬酸中的一种或多种，优选稳定剂为1% -20%蔗糖和葡聚糖Τ70。
[0037] 本发明的一种同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒中的反应基板中的钠反应孔和 肌酐反应孔所采用的载体为滤纸、玻璃纤维或者层析纸。
[0038] 本发明试剂盒的钠反应孔和肌酐反应孔的尺寸可为q)2-5mm，优选φ4mm。
[0039] 本发明提供的一种同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒中，所述钠稀释液为pH 8. 0-9. 0的0. 1-1. 5mol/L的磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、柠檬酸缓冲溶液、Tris-HCl缓 冲液或PIPES缓冲液的一种或几种；优选所述缓冲液为pH 8. 0-8. 8的0. 5-1. 2mol/L的 Tris-HCl缓冲液。
[0040] 所述肌酐稀释液为pH 6. 5-8. 0的0· 1-1. 2mol/L的磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、 柠檬酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲液或PIPES缓冲液的一种或几种。优选所述缓冲液为pH 7. 0-8. 0的0· 5-1. 2mol/L的磷酸钾缓冲液。
[0041] 本发明提供了上述试剂盒在检测尿液中钠离子含量和肌酐含量中的应用。
[0042] 考虑到试剂盒保存的需要，所制备的反应垫必须具备相当高的稳定性，发明人在 大量实验研究的基础上，确定了上述酶液、显色液和各种底物液的组成及其配方，使得试剂 盒具有理想的稳定性，能够在实际应用中推广。
[0043] 本发明中，钠和肌酐指标用来衡量预测24小时摄入钠的变化，从而反映摄入盐 量，基于这些研究结果，本发明建立了一种简便、快速的同时检测尿钠和肌酐的干化学测定 试剂盒，包括钠和肌酐浓度的检测。本领域技术人员应当理解，本发明所述的检测钠，是指 检测钠离子的含量。
[0044] 本发明包括两项指标的检测，可以配合相关检测来达到预测肾源性高血压的目 的。通过检测尿钠的排泄来预测水钠潴留、肾小球排泄情况及钠盐的摄入情况，对肾源性高 血压特别是容量依赖型高血压有较好的预测作用。采用上述技术方案，本发明的优点在于： 本发明解决了液体试剂的不稳定问题，通过加入激活剂、酶稳定剂等物质，在既保证试剂垫 上试剂稳定的前提下，又能够快速的提高反应的灵敏度和准确性；试剂盒操作简便快速，准 确性高，适用于临床常规检测特别是临床病人床旁检测使用，进而指导合理临床用药。只需 将收集的尿液进行稀释，加到对应反应孔中，反应一段时间进行比色，测定被测尿液所在钠 值（肌酐值）区间范围，评估测试者摄入钠的多少，不需大型仪器设备，操作简便，可在医院 急诊室、基层医疗与保健单位及病人家庭使用。本发明试剂盒避免了单独观察单一指标产 生的片面性和干扰因素；而且相对的，收集单次尿具有简单、快捷等优点。
【具体实施方式】
[0045] 以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离 本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明 的范围。
[0046] 若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0047] 实施例1同时检测尿钠和肌酐的干化学试剂盒的制备
[0048] 本实施例的同时检测尿钠和肌酐的试剂盒包括：具有钠反应孔和肌酐反应孔的反 应基板；钠稀释液和肌酐稀释液；具有不同浓度钠离子标准显色和不同浓度肌酐标准显色 的标准比色板。
[0049] 上述同时检测尿钠和肌酐试剂盒的制备方法如下：
[0050] (1)反应基板的结构：
[0051] 本实施例的反应基板选自ABS工程塑料制成，其上设有钠反应孔和肌酐反应孔； 反应孔的尺寸为φ4ηιηι。
[0052] (2)钠反应孔中底物垫的制备：
[0053] 钠反应孔从孔底部起依次放有底物垫和酶垫。
[0054] 底物垫由底物溶液1μL滴加在(p4mm层析纸上，避光条件下，25°C流动空气干燥 4小时后制得，密封保存在4°C。
[0055] 底物溶液以1000mmol/LpH8. 7的Tris-HCl缓冲液为溶剂，含有0·005g/mL的 β-半乳糖苷酶底物CPRG、50mmol/L的穴醚【4, 7, 13, 16, 21-五氧杂-1，10-二氮杂双环 [8.8.5]廿三烷（1(巧?切打1)】、10%的0-海藻糖和0.05%的吐温80。
[0056] 酶垫由酶溶液1μL滴加在q>4mm,层析纸上，避光条件下，25°C流动空气干燥4小 时后制备而成，密封保存在4°C。
[0057] 酶溶液以100mmol/LpH7. 5的Tris-HCl缓冲液为溶剂，含有800U/mL的β-半 乳糖苷酶和l〇g/L酶稳定剂
[0058](3)肌酐反应孔中下垫和上垫的制备：
[0059] 肌酐反应孔从孔底部起依次放有下垫和上垫。
[0060] 下垫的制备：将1μL下垫溶液滴加在层析纸上，避光条件下，25°C流动空 气干燥4小时后，密封保存在4°C。
[0061] 下垫溶液以水为溶剂，含有1000U/mL的过氧化物酶、800U/mL肌酐酰胺水解酶， 1%的4-氨基安替吡啉，100mm〇l/LpH7.3的磷酸钾缓冲液，10%的蔗糖。
[0062] 上垫的制备：将1μL上垫溶液滴加在(p4mm层析纸上，避光条件下，25°C流动空 气干燥4小时后，密封保存在4°C。
[0063] 上垫溶液以水为溶剂，含有300U/mL的肌氨酸氧化酶、200U/mL的肌酸脒基水解 酶，1%的TBHB，100mmol/LpH7. 3的磷酸钾缓冲液，10%的蔗糖。
[0064] (4)将步骤（2)~（3)制备的反应垫填入相应的反应孔中，用冲压机压实，然后贴 上铝箱贴条，装入铝箱袋中，即得具有钠反应孔和肌酐反应孔的反应基板。
[0065] (5)钠稀释液的制备：0.8mol/LpH8. 7的Tris-HCl缓冲溶液1000mL