，充分混匀 后，分装在滴瓶中保存。
[0066](6)肌酐稀释液的制备：lmol/LpH7.3的磷酸钾缓冲溶液1000mL，充分混匀后， 分装在滴瓶中保存。
[0067] (7)标准比色板的制备：具体配制方法如下：
[0068] 1)基础尿液制备收集尿液：收集三日内未摄入高钠尿液5份（晨尿8:00-9:00最 佳），采用本产品按照说明书测定尿中钠浓度应（应<20mmol/L)、肌酐浓度（应〈0. 15g/L)， 充分混匀，经0. 45μm膜抽滤，作为基础尿液，2°C~8°C保存。同时基础尿液可以作为"阴 性样品"使用。
[0069] 2)标准液的配制
[0070] a氯化钠标准液的配制称取0. 585g氯化钠加入到2ml纯化水中溶解，制成 5000mmol/L氯化钠标准液。
[0071 ]b肌酐标准液的配制称取0.lg肌酐加入到2ml纯化水中溶解，制成50g/L肌酐标 准液。
[0072] 3)各色标标本的制备
[0073]a钠标准色板的标本的制备：依次量取基础尿液4、20、40μ1放入三个离心管中， 按顺序加入996、980、960μ1 5000mmol/L氯化钠标准液，混匀，密封保存在2°C~8°C，24小 时内使用，终浓度见下表1。
[0074]b肌酐标准色板的样本的制备：依次量取基础尿液3、10、20、40μ1放入四个离心 管中，按顺序加入997、990、980、960μ1 50g/L肌酐标准液，混匀，密封保存在2°C~8°C，24 小时内使用，终浓度见下表1。
[0075] 表1各色标标本浓度表
[0076]
[0077] 将上述不同色标的标准液滴加到反应孔上进行显色，由3-5个人目测，并与标准 比色板进行比较，选出标准色，进行印刷，并进行验证，经过反复几次，最终确定标准比色 板。
[0078] 实施例2本发明的能同时检测尿液钠和肌酐的干化学试剂盒的应用
[0079] 本发明的试剂盒是一种半定量检测尿液钠、肌酐的干化学试剂盒，可以对临床上 高血压病人的尿液样本进行检测，也可对健康人群的尿液样本进行检测，以检查待测人群 的盐摄取量是否超标，可作为高血压病人的诊断、鉴别诊断和疗效评价的辅助指标，也可作 为健康人群日常饮食控制盐摄取量的辅助工具。
[0080] 本发明实施例1制备的试剂盒的具体使用方法如下：
[0081] 1)在使用时，首先将试剂盒从保存温度下取出，平衡到室温开始使用；
[0082] 2)撕掉铝箱包装，取出反应基板；
[0083] 3)尿液处理：取25μ1尿液分别加入钠、肌酐稀释液中充分混勾；稀释液与尿液的 体积比为1:20-35 (本实施例选用1:30)。
[0084] 4)吸取上述稀释后的尿液25μ1分别于钠反应孔、肌酐反应孔；
[0085]5)在干浴器（设置温度为48°C)上反应7min，将反应结果与比色板进行比较，可 以半定量得到被测物浓度。本领域技术人员应当理解，根据本领域的现有技术，在使用其他 保温容器如培养箱、烘箱、水浴容器等的设置温度为35-50Γ的条件下反应后，也能够实现 结果的对比判断。
[0086] 采用本发明的试剂盒对临床上对每日食盐量〈6克，6~12克以及>12克的90位 志愿者（每30名对应不同的食盐量组）进行检测，检测结果准确率达100%。
[0087] 本发明的试剂盒性能稳定，保质期为18个月。
[0088] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒，其特征在于，包括： (1) 具有钠反应孔和肌酐反应孔的反应基板； (2) 钠稀释液和肌酐稀释液； (3) 具有不同浓度钠离子标准显色和不同浓度肌酐标准显色的标准比色板。2. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述钠反应孔从孔底部起依次放有底物 垫和酶垫； 所述底物垫由底物溶液滴加在载体上制备而成；底物溶液以100-1000mm〇l/LpH 7. 5-9. 0的缓冲液为溶剂，含有0. 001-0.Olg/mL的β-半乳糖苷酶底物、20-80mmol/L的穴 醚、0. 005% -50%的稳定剂和0. 005% -50%的表面活性剂； 所述酶垫由酶溶液滴加在载体上制备而成；酶溶液以100-1000mm〇l/LpH7.0-9.0的 缓冲液为溶剂，含有200-3000U/mL的β-半乳糖苷酶和0. 01-100g/L酶稳定剂。3. 根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，缓冲液选自磷酸钾缓冲液、Tris-HCl缓冲 液或PIPES缓冲液的一种或几种。4. 根据权利要求3所述试剂盒，其特征在于，底物溶液的缓冲液为800-1000mmol/ LρΗ8· 0-9. 0 的Tris-HCl缓冲液；酶溶液的缓冲液为 100-200mmol/LpH7. 0-8. 0 的 Tris-HCl缓冲液。5. 根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述β-半乳糖苷酶底物为0-硝 基-β-D-吡喃糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷、氯酚红-β-D-吡喃半乳 糖苷、PNPG、IPTG。6. 根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述穴醚为4, 7, 13, 16, 21-五氧 杂-1，10-二氮杂双环[8. 8. 5]廿三烷、18-Crown-8或者是15-Crown-5中的一种或几种。7. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述肌酐反应孔从孔底部起依次放有下 垫和上垫； 所述下垫由下垫溶液滴加在载体上制备而成；下垫溶液以水为溶剂，含有10-2000U/mL的过氧化物酶、10-1000U/mL肌酐酰胺水解酶，0. 1 % -10 %的显色剂1，5-500mmol/LpH 6· 0-8. 0的缓冲液，0· 005% -50%的稳定剂； 所述显色剂1为4-氨基安替吡啉、3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐水合物中的一种 或多种； 所述上垫由上垫溶液滴加在载体上制备而成；上垫溶液以水为溶剂，含有10-2000U/mL的肌氨酸氧化酶、10-2000U/mL的肌酸脒基水解酶，0. 1 % -10 %的显色剂2, 5-500mmol/L pH6. 0-8. 0的缓冲液，0· 005% -50%的稳定剂； 所述显色剂2为2, 4, 6-三溴-3-羟基苯甲酸、3, 5-二氯-2-羟基苯磺酸、N-乙 基-N-(2-羟基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺、N-乙基-N-(3-磺丙基）-3-甲基苯胺、N，N-双 (4-磺丁基）-3-甲基苯胺二钠盐中的一种或多种。8. 根据权利要求1-7任一所述的试剂盒，其特征在于，所述载体为滤纸、玻璃纤维或者 层析纸。9. 根据权利要求1-7任一所述的试剂盒，其特征在于，所述钠稀释液为pH8. 0-9. 0的 0. 1-1. 5mol/L的磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、柠檬酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲液或PIPES 缓冲液的一种或几种； 所述肌酐稀释液为pH6. 5-8. 0的0. 1-1. 2mol/L的磷酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液、柠檬 酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲液或PIPES缓冲液的一种或几种。10.权利要求1-9任一所述的试剂盒在检测尿液中钠含量和肌酐含量的应用。
【专利摘要】本发明提供一种能同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒。本发明的试剂盒包括：具有钠反应孔和肌酐反应孔的反应基板，钠稀释液，肌酐稀释液和标准比色板；所述钠反应孔从底至上放有底物垫和酶垫，底物垫由底物溶液滴加在载体上制得；酶垫含有β-半乳糖苷酶和酶稳定剂；所述肌酐反应孔从底至上放有下垫和上垫，下垫由酶液和显色剂滴加载体制得，下垫含有过氧化物酶、肌酐酰胺水解酶、显色剂、稳定剂等；标准比色板包括不同浓度钠离子标准显色和不同浓度的肌酐标准显色。本发明试剂盒制备方法简单，性能稳定，易保存，不同尿钠和肌酐含量对应的色阶明显，便于判定被检测人员的盐量是否超标，同时适用于医院检验科及非专业检验人员使用。
【IPC分类】G01N21/78
【公开号】CN105334211
【申请号】CN201510684102
【发明人】孙宁玲, 马志毅, 王加义, 王鸿懿, 喜杨, 张丽梅, 陈源源, 王及华, 董婷婷, 王维, 韩伟中, 赵立超, 张志丽, 桂春爽, 杨路
【申请人】北京中生金域诊断技术股份有限公司
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年10月20日