细胞产生作用，霜霉威为局部 内吸性杀菌剂，施用后也会进入植物组织或细胞，由于此类结合较为紧密，或者深入植物组 织或细胞内部，在卷烟的燃烧过程中，不容易被热蒸馏出来，一般可能会通过高温分解或者 直接生成其它物质。
[0084] 表5自制尚残留样品中五种杀菌剂向主流烟气总粒相物和滤嘴中的转移率
[0087] 注:n.d.表示未检出。
[0088] 本实施例对烟草中常用杀菌剂残留进行同时快速分析，采用基质分散固相萃取法 提取捕集过烟气总粒相物的滤片、滤嘴、烟蒂烟丝和烟灰，内标定量，UPLC-MS/MS分析检测， 总分析时间为12min。建立的方法分析时间短，灵敏度高，应用此方法研究加标卷烟样品和 自制卷烟样品五种杀菌剂的烟气转移率。结果表明，主流烟气气相物和烟灰中未见杀菌剂 转移，不同种类杀菌剂的转移率差异较大;加标卷烟中除多菌灵外，其它四种杀菌剂的转移 率达到30% ;自制卷烟中，杀菌剂的烟气转移率普遍低于20%。
[0089]此外，术语"第一"、"第二"仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性 或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有"第一"、"第二"的特征可以明示或者 隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，"多个"的含义是两个或两个以上， 除非另有明确具体的限定。
[0090]以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对 本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改 进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，所述烟蒂包括滤嘴和残留烟丝，所述杀菌剂 为多菌灵、霜霉威、稻瘟灵、三唑醇和三唑酮中的一种或多种，其特征在于，包括以下步骤： 步骤a)根据ISO 8243:2006来选取样品烟支，按照ISO 3402:1999来平衡烟支;采用ISO 标准抽吸模式（ISO 3308:2000)来抽吸5支卷烟，收集抽吸卷烟后的烟蒂； 步骤b)将烟蒂中的滤嘴和烟丝进行拆分，分别提取； 将卷烟烟丝合并放入第一旋盖离心管中，加入超纯水，静置充分浸润，向第一离心管中 加入乙腈和内标，第一涡旋震荡，完成后冷冻保存； 将滤嘴分为多瓣，合并放入第二旋盖离心管中，向离心管中加入甲醇，振荡到样品被甲 醇充分浸润，静置，向第二离心管中加入内标，第二涡漩振荡，完成后冷冻保存； 步骤c)经过涡漩振荡冷冻后的第一旋盖离心管和第二旋盖离心管中分别依次加入无 水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠，第三次涡旋振荡后离心，离心完成后冷冻保 存； 步骤d)N-丙基乙二胺(PSA)纯化： 在第一旋盖离心管中移取其上清液于第三旋盖离心管中，在第二旋盖离心管中移取其 上清液于第四旋盖离心管中，分别向第三旋盖离心管和第四旋盖离心管中加入无水硫酸镁 及PSA吸附剂，第四次漩涡振荡混合，然后高速离心;吸取上清液经有机相滤膜过滤，移取滤 液，并用超纯水稀释定容后待测； 步骤e)配制标准溶液 分别准确称取杀菌剂标准品，精确至O.OOOlg，用乙腈溶解定容，制得单一标准储备液； 用乙腈准确配制混合标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，冷冻保存备用； 稀释混合标准储备液得到混合标准工作液，储存于棕色玻璃瓶中，冷冻保存备用； 准确配置TPP内标标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，冷冻保存;取一定量的内标标准 储备液，用乙腈稀释定容，制得内标工作液； 所有的冷冻的储备液使用前将其恢复到室温； 步骤f) LC-MS/MS分析测定 色谱条件:Atiantis UPLC HSS T3(100mmX2.1mm，1.8ym);流动相A:体积分数为0.1% 的甲酸水溶液，流动相B:体积分数为0.1 %的甲酸甲醇溶液;流速0.4mL/min;柱温35 °C ;进 样量2此； 梯度洗脱条件：〇 ~2min，90%A ~50%A;2~2.4min，50%A ~30%Α;2·4~4.0min，30% A~20%Α;4·0~6.0min，20%A~5%Α;6·0~9.8min，5%A~5%A;9.8~10.0min，5%A~ 90%A;10.0 ~12.0min，90%A ~90%A; 质谱条件：电喷雾离子源(ESI)，喷雾电压（IS):2.6kV;离子化温度350°C ;雾化气流量： 1000L/Hr;锥孔气（cone)流量50L/Hr;碰撞气流量为0.15ml/min;碰撞气为氩气，其余气体 为氮气;驻留时间为30msec，正离子MRM模式采集。2. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，所述冷冻温度 为-20。。。3. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，所述单一标准 储备液的浓度为1. 〇mg/mL;所述混合标准储备液中，霜霉威:0.20mg/mL、多菌灵和稻瘟灵： 0 · 04mg/mL、三唑醇和三唑酮:0 · 10mg/mL;所述混合标准工作液中，霜霉威:0 · 020mg/mL;多 菌灵和稻瘟灵:0.004mg/mL;三唑醇和三唑酮:0.010mg/mL。4. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，所述内标标准 储备液为〇.99mg/mL TPP。5. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，所述第一旋盖 离心管的容积为50mL;所述第二旋盖离心管的容积为50mL;所述第三旋盖离心管的容积为 1.8mL，所述第四旋盖离心管的容积为1.8mL。6. 根据权利要求7所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，所述第一旋盖 离心管中加入超纯水的体积为10mL，静置浸润的时间为lOmin;加入乙腈和内标的体积分别 为10mL和100yL;所述第二离心管中加入甲醇和内标的体积分别为20mL和200yL;所述内标 浓度为lOyg/mL。7. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，所述第一涡旋 震荡速率为2000r/m，时间为2min;所述第二涡旋震荡速率为2000r/m，时间为5min;所述第 三涡旋震荡速率为2000r/m，时间为2min;所述第四涡旋震荡速率为2000r/m，时间为2min。8. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，步骤(c)中，依 次加入的无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠的质量分别为4g、lg、lg和0.5g。9. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，步骤(d)中，加 入无水硫酸镁及PSA吸附剂的质量为150mg和25mg。10. 根据权利要求1所述的烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，其特征在于，步骤(e)中， 移取滤液体积为200yL，加入超纯水定容到lmL。
【专利摘要】本发明公开一种烟蒂中杀菌剂截留量的检测方法，所述烟蒂包括滤嘴和残留烟丝，所述杀菌剂为多菌灵、霜霉威、稻瘟灵、三唑醇和三唑酮中的一种或多种，包括以下步骤：选取样品烟支,收集抽吸卷烟后的滤嘴；将烟蒂中的滤嘴和烟丝进行拆分,分别提取；经过涡漩振荡冷冻后的第一旋盖离心管和第二旋盖离心管中分别依次加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠，第三次涡旋振荡后离心，离心完成后冷冻保存；再经过N?丙基乙二胺纯化：最后使用LC?MS/MS分析测定。本发明既保留了较好的提取效果，又不会将滤嘴中聚丙烯纤维或醋酸纤维溶解，从而降低了从提取溶剂中提取所述杀菌剂的难度。
【IPC分类】G01N30/88
【公开号】CN105717251
【申请号】CN201610250977
【发明人】陶晓秋, 熊巍, 黄玫, 韶济民, 张海燕, 庞夙, 杨雪
【申请人】中国烟草总公司四川省公司
【公开日】2016年6月29日
【申请日】2016年4月20日