一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法
【专利摘要】本发明公开了一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，包括如下步骤：设定色谱条件；样品测定：采用外标法：系统适用性实验、精密度实验、线性实验、回收率实验、检测限及定量限实验、样品检验。本发明采用有机溶剂和水的混合溶剂作为溶媒，能够提高原料药中残留有机溶剂的释放，提高方法的检测灵敏度。同时采用小比例有机溶剂：水作为溶媒能够减少分析过程中有机溶剂的使用量，从而能够减少试验过程对环境和实验人员的伤害。
【专利说明】
一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法
技术领域
[0001] 本发明属于药物分析检测领域，具体涉及一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残 留的方法，尤其是顶空进样气相色谱同时检测苯磺顺阿曲库铵中乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲 醇、乙酸乙酯、乙醚和丙酮残留的方法。
【背景技术】
[0002] 苯横顺阿曲库铵(Cisatracurium besilate)是阿曲库铵十种同分异构体中的一 种，是最新一代肌松剂。具有与苯磺酸阿曲库铵相似的肌松效应及代谢过程。苯磺顺阿曲库 铵具有通过非肝脏途径代谢的特点和心血管稳定性，肌松作用比阿曲库铵作用强3倍，且不 释放组胺，心血管反应小，是较为理想的中时效非去极化肌松药。苯磺顺阿曲库铵主要适用 于全身麻醉，并能广泛应用在气管插管、肝肾功能障碍、心血管手术及老年和儿科病人。该 药自1996年在英国首次上市后，国外已逐渐代替维库溴铵，成为临床肌松的主流。
[0003] 各国药典均要求对原料药进行残留溶剂检查，以控制生产过程中使用的有机溶剂 和挥发性杂质在原料药中的残留量，以保证用药安全。本发明针对苯磺顺阿曲库铵中，由合 成工艺引入的乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮7种有机溶剂残留，利用顶 空进样气相色谱法，并选择在合适的色谱条件下同时检测这7种有机溶剂残留。
【发明内容】
[0004] 发明目的：为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种检测苯磺顺阿曲库铵中 有机溶剂残留的方法，是一种简便、准确、耗费小且对环境和人体伤害小的，并能同时检测 苯磺顺阿曲库铵中的乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮7种有机溶剂残留量 的方法。
[0005] 技术方案:一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，包括如下步骤：
[0006] 1.设定色谱条件：
[0007] 色谱柱：08-1顺0歡父（30111*0.32臟*0.2511111);
[0008] 柱温:起始温度30°C，维持10分钟，再以每分钟10°C的速率升温至200°C，维持5分 钟；
[0009] 进样 口温度：190 ~210°C;
[0010] 检测器温度:220~260 °C;
[0011] 载气:N2;
[0012] 载气流速:0.8~1.2ml/min;
[0013] 分流比：5:1;
[0014]进样方式:顶空进样法；
[0015] 平衡时间：25~35min;
[0016] 平衡温度:75~90 °C;
[0017] 2.样品测定
[0018] 采用外标法，其具体步骤为：
[0019] (1)系统适用性实验
[0020] 取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮对照品溶液和以上7种有机溶 剂的混合对照品溶液，分别进样，绘制谱图；
[0021] (2)精密度实验
[0022]分别取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合对照品溶液各6份进 样，纪录各对照品的相对标准偏差RSD;
[0023] (3)线性实验
[0024]分别取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮对照品配制成高浓度混 合对照品贮备液，稀释到不同浓度后，进样，分别以乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、 乙醚、丙酮对照品的峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标建立线性回归曲线；
[0025] (4)回收率实验
[0026]取苯磺顺阿曲库铵适量，精密称量，加入不同浓度乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙 酸乙酯、乙醚、丙酮混合对照品溶液作为回收率样品溶液，进样，纪录色谱图，计算回收率：
[0028] (5)检测限及定量限实验
[0029]依次分别以稀释剂稀释乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合对 照品溶液，以信噪比S/N=3计算检测限，以信噪比S/N= 10计算定量限；
[0030] (6)样品检验
[0031 ]取苯磺顺阿曲库铵适量，精密称量，加稀释剂溶解制成供试品溶液，混合对照品溶 液和供试品溶液分别进样，纪录色谱图，按外标法以峰面积计算苯磺顺阿曲库铵中乙腈、二 氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的含量。
[0032]作为优化:所述（1)系统适用性实验中对照品溶液为:分别称取82mg乙腈，120mg二 氯甲烧，178mg甲苯，600mg甲醇，lOOOmg乙酸乙酯，lOOOmg乙醚，lOOOmg丙酮于100ml容量瓶 中。
[0033]作为优化:所述(6)样品检验中稀释剂为：5~35%比例的N，N-二甲基甲酰胺的水 溶液。
[0034]作为优化:所述(4)回收率试验中，精密称量苯磺顺阿曲库铵O.lg共9份，分别置于 顶空瓶中，并在在其中加入指标量80%、100%、120%三个不同浓度各溶剂混合物5ml。顶空 进样，纪录色谱图，由下式计算回收率。
[0035]作为优化:所述(6)样品检验中具体操作为:精密称定苯磺顺阿曲库铵O.lg，加入 稀释剂5ml，作为供试品溶液。精密量取混合对照品溶液5ml，作为对照品溶液。顶空进样，纪 录色谱图，按外标法计算峰面积，含乙腈不得过0.041%、含二氯甲烷不得过0.060%、含甲 苯不得过0.089%、含甲醇不得过0.3%、含乙酸乙酯不得过0.5%、含乙醚不得过0.5%、含 丙酮不得过0.5%;照上述方法检测样品的残留溶剂，供试品含二氯甲烷0.001%、乙腈 0.001 %，其余溶剂均未检出。
[0036] 有益效果:本发明的具体优势如下：
[0037] 1、本发明采用有机溶剂和水的混合溶剂作为溶媒，能够提高原料药中残留有机溶 剂的释放，提高方法的检测灵敏度。同时采用5~35%的小比例有机溶剂:水作为溶媒能够 减少分析过程中有机溶剂的使用量，从而能够减少试验过程对环境和实验人员的伤害。 [0038] 2、本发明采用气相色谱法同时检测乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、 丙酮7种有机溶剂的含量，灵敏度改，重复性好，精密度高。
[0039] 3、本发明的方法适用于苯磺顺阿曲库铵原料药及制剂中乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲 醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的检测。
【附图说明】
[0040] 图1为乙醚系统适用性气相色谱图；
[0041 ]图2为丙酮系统适用性气相色谱图；
[0042]图3为乙酸乙酯系统适用性气相色谱图；
[0043] 图4为甲醇系统适用性气相色谱图；
[0044] 图5为二氯甲烷混合系统适用性气相色谱图；
[0045] 图6为乙腈混合系统适用性气相色谱图；
[0046] 图7为甲苯混合系统适用性气相色谱图；
[0047]图8为乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合系统适用性气相色谱 图。
【具体实施方式】
[0048] 下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
[0049] 实施例 [0050] 1 ?仪器与试药
[0051 ] 仪器:岛津GC-2014色谱仪，FID检测器，自动顶空进样器DANI HSS 86.50PLUS。
[0052]试药:所有试剂均为分析纯;苯磺顺阿曲库铵。
[0053] 色谱条件：
[0054] 色谱柱:Agilent DB-INN0WAX(30m*0 ? 32mm*0? 25um);柱温:起始温度30°C，维持 10 分钟，再以每分钟10°C的速率升温至200°C，维持5分钟;进样口温度：190~210°C ;检测器温 度:220~260°C ;载气:N2;载气流速:0.8~1.2ml/min;分流比：5:1;进样方式:顶空进样法； 平衡时间：25~35min;平衡温度:75~90°C。
[0055] 2 ?溶液配制
[0056] 稀释剂(水:N，N-二甲基甲酰胺80:20)
[0057] 分别称取82mg乙腈，120mg二氯甲烧，178mg甲苯，600mg甲醇，lOOOmg乙酸乙酯， lOOOmg乙醚，lOOOmg丙酮于100ml容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度，混勾。
[0058] 精密量取lml储备溶液到100ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，混匀;再准确移取 5.0ml该溶液到20ml顶空瓶中，加盖密封。
[0059] 3.样品测定
[0060] (1)系统适用性实验
[0061] 精密量取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮对照品溶液、混合对照 品溶液5ml，顶空进样。
[0062] 在上述色谱条件下各组分可以得到较好的分离，各组分保留时间及分离度见表1， 系统适用性图谱见附图1~8。
[0063] 表1各有机溶剂保留时间及分离度测定结果
[0065]在该方法中，相邻溶剂峰之间的最小分离度为2.25(多2.0)，即各组分峰完全分 离。
[0066] (2)精密度试验
[0067] 见表2。结果表明，RSD均在5%以内。
[0068]表2精密度试验数据结果(n = 6)
[0071] (3)检测限及定量限
[0072]以信噪比S/N=3计算检测限，以信噪比S/N=10计算定量限，稀释混合对照品贮备 液。取5ml顶空进样，纪录色谱图，检测限及定量限测定结果见表3。
[0073]表3各组分检测限及定量限结果
[0075] (4)线性试验
[0076]对各个溶剂，在L0Q浓度至200%指标浓度的范围内取5个浓度点进行研究，线性关 系以测得的相应信号（峰面积)对被分析物浓度的函数作图，用最小二乘法进行线性回归， 结果表明各溶剂的线性回归系数R2的数值均在0.990-1.000,证明线性关系良好。
[0077]表4线性试验测定结果
[0080] (5)回收率试验
[0081]精密称量苯磺顺阿曲库铵O.lg共9份，分别置于顶空瓶中，并在在其中加入指标量 80 %、100 %、120 %三个不同浓度各溶剂混合物5ml。顶空进样，纪录色谱图，由下式计算回 收率。可接受的回收率应在90%~110% (100% ±10%)。测定结果见表5。
[0082]表5回收率试验测定结果
[0085] (6)样品检验结果
[0086]精密称定苯磺顺阿曲库铵0 . lg，加入稀释剂5ml，作为供试品溶液。精密量取混合 对照品溶液5ml，作为对照品溶液。顶空进样，纪录色谱图，按外标法计算峰面积，含乙腈不 得过0.041 %、含二氯甲烷不得过0.060 %、含甲苯不得过0.089 %、含甲醇不得过0.3 %、含 乙酸乙酯不得过0.5%、含乙醚不得过0.5%、含丙酮不得过0.5%。
[0087]照上述方法检测样品的残留溶剂，供试品含二氯甲烷0.001%、乙腈0.001%，其余 溶剂未检出。
[0088]本发明的具体优势如下：
[0089] 1、本发明采用有机溶剂和水的混合溶剂作为溶媒，能够提高原料药中残留有机溶 剂的释放，提高方法的检测灵敏度。同时采用5~35%的小比例有机溶剂:水作为溶媒能够 减少分析过程中有机溶剂的使用量，从而能够减少试验过程对环境和实验人员的伤害。
[0090] 2、本发明采用气相色谱法同时检测乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、 丙酮7种有机溶剂的含量，灵敏度改，重复性好，精密度高。
[0091] 3、本发明的方法适用于苯磺顺阿曲库铵原料药及制剂中乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲 醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的检测。
[0092] 本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种 形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技 术方案，均落在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，其特征在于:包括如下步骤：1. 设定色谱条件： 色谱柱:DB-INN0WAX(30m*0 · 32mm*0 · 25um); 柱温:起始温度30°C，维持10分钟，再以每分钟10°C的速率升温至200°C，维持5分钟； 进样口温度：190~210°C; 检测器温度:220~260 °C; 载气:N2; 载气流速:0.8~1.2ml/min; 分流比：5:1; 进样方式:顶空进样法； 平衡时间：25~35min; 平衡温度:75~90 °C;2. 样品测定 采用外标法，其具体步骤为： (1) 系统适用性实验 取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮对照品溶液和以上7种有机溶剂的 混合对照品溶液，分别进样，绘制谱图； (2) 精密度实验 分别取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合对照品溶液各6份进样， 纪录各对照品的相对标准偏差RSD; (3) 线性实验 分别取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮对照品配制成高浓度混合对 照品贮备液，稀释到不同浓度后，进样，分别以乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、 丙酮对照品的峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标建立线性回归曲线； (4) 回收率实验 取苯磺顺阿曲库铵适量，精密称量，加入不同浓度乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙 酯、乙醚、丙酮混合对照品溶液作为回收率样品溶液，进样，纪录色谱图，计算回收率：(5) 检测限及定量限实验 依次分别以稀释剂稀释乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合对照品 溶液，以信噪比S/N=3计算检测限，以信噪比S/N= 10计算定量限； (6) 样品检验 取苯磺顺阿曲库铵适量，精密称量，加稀释剂溶解制成供试品溶液，混合对照品溶液和 供试品溶液分别进样，纪录色谱图，按外标法以峰面积计算苯磺顺阿曲库铵中乙腈、二氯甲 烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的含量。2.根据权利要求1所述的检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，其特征在于:所 述（1)系统适用性实验中对照品溶液为：分别称取82mg乙腈，120mg二氯甲烷，178mg甲苯， 600mg甲醇，lOOOmg乙酸乙酯，lOOOmg乙醚，lOOOmg丙酮于100ml容量瓶中。3. 根据权利要求1所述的检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，其特征在于:所 述(6)样品检验中稀释剂为:5~35%比例的N，N-二甲基甲酰胺的水溶液。4. 根据权利要求1所述的检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，其特征在于:所 述(4)回收率试验中，精密称量苯磺顺阿曲库铵O.lg共9份，分别置于顶空瓶中，并在在其中 加入指标量80%、100%、120%三个不同浓度各溶剂混合物5ml。顶空进样，纪录色谱图，由 下式计算回收率。5. 根据权利要求1所述的检测苯磺顺阿曲库铵中有机溶剂残留的方法，其特征在于:所 述(6)样品检验中具体操作为:精密称定苯磺顺阿曲库铵O.lg，加入稀释剂5ml，作为供试品 溶液。精密量取混合对照品溶液5ml，作为对照品溶液。顶空进样，纪录色谱图，按外标法计 算峰面积，含乙腈不得过0.041 %、含二氯甲烷不得过0.060 %、含甲苯不得过0.089%、含甲 醇不得过0.3 %、含乙酸乙酯不得过0.5 %、含乙醚不得过0.5 %、含丙酮不得过0.5 % ;照上 述方法检测样品的残留溶剂，供试品含二氯甲烷0.001%、乙腈0.001%，其余溶剂均未检 出。
【文档编号】G01N30/02GK105929045SQ201610238000
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月18日
【发明人】张鑫, 贺乾辉, 杜芳, 潘鸿燕, 王小镒
【申请人】上药东英（江苏）药业有限公司