一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法，包括以下步骤：步骤1：将桃仁粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步骤2：将萃取液离心分离后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析。本发明提供了一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法，该方法操作简单，检测精度高。
【专利说明】
一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法
技术领域
[0001] 本发明涉及实验室检测领域，特别是一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法。
【背景技术】
[0002] 2015年药典记录了提取桃仁中苦杏仁苷的方法:取本品粗粉约0.3g，精密称定，置 具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90°C)50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，弃去石油醚液，药渣 及滤纸挥干溶剂，放入原锥形瓶中，精密加入70 %甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放 冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶 中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。在15000r/min下离心3min，取上清液，进入LC测定。
[0003] 其液相色谱的参数为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（20 :80)为 流动相;检测波长为210nm〇
[0004] 药典的方法操作过程复杂，对操作人员的操作技能要求高。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法，该方法操作简单，检测精 度高，检测时间短。
[0006] 本发明提供的技术方案为:一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法，包括以下步骤：
[0007] 步骤1:将桃仁粉碎后米用ASE萃取法萃取得到萃取液；
[0008] 步骤2:将萃取液离心分离后，得到上清液；
[0009] 步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析；
[0010] 其中，液相色谱法的分析条件为：
[0011] a)仪器:双三元液相色谱仪
[0012] b)色谱柱规格:碳18色谱柱，3*100mm 3um
[0013] c)柱温:40°C
[0014] d)流速:0.5mL/min
[0015] e)流动相：甲醇-水，体积比20:80，具体来说，甲醇和水在20 °C的条件下的体积比 为20:80;
[0016] f)检测波长：210nm〇
[0017] 在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的步骤1具体为：
[0018] S11:将桃仁粉碎后，过筛；
[0019] S12:称取0.3重量份桃仁粉，与1重量份石英砂混合均匀待用；
[0020] S13:在预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的石英砂至达到萃取池的池口；盖 上萃取池的盖子；
[0021 ] S14:对萃取池内的混合物进行去酯；
[0022]去酯条件为：萃取溶剂为正己烷；萃取温度80°C;静态萃取时间5min;冲洗体积 60%;静态循环次数2次。
[0023] S15: S14结束后，对萃取池内的混合物进行提取;提取结束后得到萃取液；
[0024]提取条件为:萃取溶剂为70%甲醇;萃取温度100°C;静态萃取时间5min;冲洗体积 100%;静态循环次数1次;所述的70%甲醇为甲醇的体积百分数为70%。
[0025]在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的萃取池的体积为5ml。
[0026]在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的S14和S15的静态萃取的压力均为 1500psi〇
[0027]在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的S14和S15的吹扫时间均为90s。 [0028]在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，步骤2具体为:将萃取液在15000r/min的 条件下离心3min，取上清液。
[0029]在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的仪器为Thermo U3000UHPLC液相 色谱仪。
[0030] 在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的色谱柱为Thermo Syncronis C18〇
[0031] 在上述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法中，所述的ASE萃取法所采用的仪器为 ASE350快速溶剂萃取仪。
[0032] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：
[0033] 本发明的检测方法操作简单，精度与药典方法的精度一致，重复性好，测试时间 短。
【附图说明】
[0034] 图1为本发明采用药典方法测试得到的色谱图；
[0035] 图2为本发明的萃取和测试方法得到色谱图。
【具体实施方式】
[0036]下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0037] 实施例1:
[0038]将桃仁经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.3g，精密称定，与lg石英砂混合均匀，待用， 移入到预先放好过玻璃纤维滤膜的ASE@5ml萃取池中再加入适量石英砂，轻轻振摇使之 与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用 70%甲醇稀释至刻度，在15000r/min下离心3min，取上清液，进入LC测定。
[0039]萃取条件(见表1)为：
[0040]表 1
[0042] 70%甲醇指的是20°C条件下的甲醇水溶液中甲醇的体积百分数。
[0043] 分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：
[0044] a)仪器:Thermo双三元液相(U-3000);
[0045] b)色谱柱：Thermo Syncronis C18,3*100mm 3um，即碳 18色谱柱，直径3mm，长度 100mm，粒径3微米；
[0046]幻柱温：40。(：；
[0047] d)流速:0.5mL/min;
[0048] e)流动相：甲醇-水(体积比20:80);
[0049] f)检测波长:210nm;
[0050] 实施例1的萃取方法的重现性验证：
[00511取相同批号的样品（批号：20150801)0.3g，共4份，精密称定，按ASE提取方法提取 供试品溶液，进样量为lyL，以上述的色谱条件平行试验，测得样品中苦杏仁苷的含量见表 二，RSD为1.9%，试验表明ASE提取方法重复性良好，结果详见表2
[0052]表 2
[0054] 1.2实施例1的萃取方法的精确度测试
[0055]采用实施例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对桃仁进行萃取，桃仁为3批，批号 分别为 20150801，150701，1511028;
[0056]实施例1的ASE萃取方法对同一批次的桃仁平行测试两次，分别为ASE1和ASE2表 不。
[0057]图1为样品20150801按照药典所记载的方法得到的色谱图；
[0058]图2是样品20150801按照本发明的ASE萃取方法和LC液相色谱法测试(ASE2)得到 的色谱图。
[0059] 具体测试结果见下表3;
[0060] 表 3
[0062]以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任 何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:将桃仁粉碎后米用ASE萃取法萃取得到萃取液； 步骤2:将萃取液离心分离后，得到上清液； 步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析； 其中，液相色谱法的分析条件为： a) 仪器:双三元液相色谱仪 b) 色谱柱规格:碳18色谱柱，3*100mm 3um (：)柱温:40°〇 d) 流速:O · 5mL/min e) 流动相：甲醇-水，体积比20:80 f) 检测波长:210nm〇2. 根据权利要求1所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的步骤1具体 为： Sl 1:将桃仁粉碎后，过筛； S12:称取0.3重量份桃仁粉，与1重量份石英砂混合均匀待用； S13:在预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的石英砂至达到萃取池的池口；盖上萃 取池的盖子； S14:对萃取池内的混合物进行去酯； 去酯条件为：萃取溶剂为正己烷;萃取温度80 °C;静态萃取时间5min;冲洗体积60%;静 态循环次数2次。 S15: S14结束后，对萃取池内的混合物进行提取;提取结束后得到萃取液； 提取条件为：萃取溶剂为70%甲醇；萃取温度100°C ;静态萃取时间5min;冲洗体积 100%;静态循环次数1次;所述的70%甲醇为甲醇的体积百分数为70%。3. 根据权利要求2所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的萃取池的体 积为5ml。4. 根据权利要求2所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的S14和S15的 静态萃取的压力均为1500psi。5. 根据权利要求2所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的S14和S15的 吹扫时间均为90s。6. 根据权利要求1所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，步骤2具体为:将萃 取液在15000r/min的条件下离心3min，取上清液。7. 根据权利要求1所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的仪器为 Thermo U3000 UHPLC液相色谱仪。8. 根据权利要求1所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的色谱柱为 Thermo Syncronis C18〇9. 根据权利要求1所述的桃仁中苦杏仁苷的测定方法，其特征在于，所述的ASE萃取法 所采用的仪器为ASE350快速溶剂萃取仪。
【文档编号】G01N30/02GK105929059SQ201610254598
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】陈学松, 欧妮, 陈翠玲, 钟水桥, 李仁乔
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所