一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法
【专利摘要】本发明涉及超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法。具体操作方法是：将枇杷核粉碎成枇杷核粉末；以无水乙醇为夹带剂进行超临界二氧化碳萃取，在优化条件下，苦杏仁苷得率达2.68%以上；使用无水乙醇夹带剂，能够影响枇杷核中苦杏仁苷在超临界流体中的选择性和溶解性，利用枇杷核中苦杏仁苷和蛋白质、多糖等杂质在乙醇夹带剂中的溶解性的差异，针对性的将醇溶性的苦杏仁苷萃取出来，萃取效率高；所获得苦杏仁苷产品纯度高，无有害溶剂残留，品质好。本发明工艺简单，成本低，容易实现工业化生产。
【专利说明】一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物提取领域，具体涉及从枇杷核中提取苦杏仁苷的方法。
[0002]发明背景
苦杏仁苷为生氰糖苷，由2单元葡萄糖、I单元氧氰酸和I单元苯甲酸组成，分子式为C2H27NO11,是传统中药苦杏仁的主要成分，并广泛存在于苦扁桃、桃、油桃、枇杷、李子、苹果、黑樱桃等其他果仁和叶子中。近年来，研究发现苦杏仁苷可用于治疗多种疾病，包括抗肿瘤、肾病、镇咳平喘等，苦杏仁苷在医药方面有着巨大的应用潜力。
[0003]苦杏仁苷是枇杷果核中的主要的药用成分之一。枇杷果实中苦杏仁苷以种仁含量最高，明显高于种衣、果梗、皮和果肉。不同产地、品种的枇杷核种仁中苦杏仁苷含量略有差异，约占枇杷核干粉1.5%~3%。枇杷是我国亚热带地区的大宗特产水果，中国是世界上最大的枇杷生产国，栽培面积和产量约占全球2/3，目前我国枇杷种植面积达200多万亩，年产量为40-60万吨，每年会产生8-12万吨的枇杷核副产物，加强枇杷核的综合利用，减少资源浪费具有重要价值和现实意义。
[0004]枇杷核中苦杏仁苷的提取方法主要有水提法，有机溶剂提取法，超声波辅助提取法。其中水提法用水作为提取剂，在溶解苦杏仁苷的同时，也溶解了枇杷核中的部分蛋白质和多糖等成分，提取产物纯度不高，提取效率低。现有的有机溶剂提取法主要以乙醇或甲醇为萃取有机溶剂，甲醇具有一定的毒性限制了其使用，常规乙醇提取法较为合理，但其提取物中常含有其他醇溶性成分，不利用后续分离纯化。超声波辅助提取法是常利用水作为提取溶剂，外加超声波辐射压强产生的强烈的多级效应，加速苦杏仁苷成分溶解进入水溶剂，可促进提取的进行，但超声波同时也促进了其他水溶性成分如蛋白质、多糖等的溶解，产物纯度不高，不利于后续分离纯化。
【发明内容】
[0005]为了解决现有技术提取枇杷核中苦杏仁苷的提取效率低，提取产物纯度低、有害溶剂残留的缺点，本发明提供一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法。
[0006]具体的技术解决方案如下:
将枇杷核粉碎成枇杷核粉末，以无水乙醇为夹带剂进行超临界二氧化碳萃取得到提取液，夹带剂的用量为枇杷核粉末的2~3倍。
[0007]具体的操作工艺步骤如下:
(1)将枇杷核去杂、水洗、干燥、粉碎，过10-30目筛得到枇杷核粉末；
(2)将枇杷核粉末置于超临界二氧化碳萃取釜内，萃取压力为25~30MPa、萃取温度5(T60°C、分离压力为8~lOMPa、分离温度为36°C，二氧化碳流速为2(T30L/小时，萃取过程中添加夹带剂无水乙醇，萃取30飞0分钟；收集提取液；提取液中苦杏仁苷的得率可达
2.68%以上。
[0008]本发明的有益技术效果具体体现在以下方面:
1.本发明的萃取效率高。使用无水乙醇夹带剂，能够影响枇杷核中苦杏仁苷在超临界流体中的选择性和溶解性，乙醇作为一种亲水性有机溶剂对枇杷核中苦杏仁苷的溶解度很大，而对蛋白质、多糖等杂质的溶解度较小，利用枇杷核中苦杏仁苷和蛋白质、多糖等杂质在乙醇夹带剂中的溶解性的差异，可针对性的将醇溶性的苦杏仁苷萃取出来，有利于获得高纯度苦杏仁苷提取液；
2.本发明在超临界二氧化碳条件下进行，选择性高，所获得苦杏仁苷提取液纯度高，无有害溶剂残留，品质好。苦杏仁苷提取液经减压旋转蒸发回收溶剂，低温结晶，冷冻干燥后，即可得苦杏仁苷粗品，本发明为高品质苦杏仁苷纯品的制备提供了技术基础；
3.本发明更为绿色环保。在超临界二氧化碳条件下使用安全无害的乙醇溶剂为夹带剂，避免使用其他有害有机溶剂，无污染排放，绿色环保，真正实现了清洁生产；
4.本发明操作简单，所需时间短(仅需20-40分钟)，实现了二氧化碳的循环利用，降低了成本，提高了效率，适用于工业化生产；
5.从枇杷核中分离苦杏仁苷入药，药效成分更为确定，满足中医临床用药需求，符合我国中药现代化和国际化的产业政策及趋势；
6.本发明工艺简单，成本低，容易实现工业化生产。
【具体实施方式】
[0009]下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。
[0010]以下实施例所用主要仪器和试剂说明如下:
超临界CO2萃取系统:南通市华安超临界萃取设备有限公司HA121-50-01C ；
752型紫外分光光度计:南京麒麟分析仪器有限公司；
冷冻干燥机:北京四环科学仪器厂有限公司；
HANGPING JA2003N 电子天平；
无水乙醇(国产分析纯)。
实施例
[0011]将枇杷核，挑选去杂，水洗，干燥，粉碎，过10-30目筛，取粉末。
[0012]实验方法
1.1苦杏仁苷标准曲线的绘制
1.1.1准确称取50mg苦杏仁苷样品，以无水乙醇定容到10mL容量瓶中，配置母液。由母液进行稀释定容，分别配置浓度为10，20，30，40，50mg/mL苦杏仁苷标准溶液；
1.1.2在紫外分光光度计207nm处以无水乙醇为对照，测定苦杏仁苷标准溶液的吸光值。以测得的吸光度为纵坐标(10、苦杏仁苷质量浓度为横坐标Cf，Pg/mL)绘制标准曲线，得标准曲线方程为:r= 0.0155 1 + 0.0966，Zte=0.9998。说明苦杏仁苷在所取的质量浓度范围内，其质量浓度和吸光度呈良好的线性关系；
1.2超临界二氧化碳提取苦杏仁苷的正交实验设计
以超临界二氧化碳提取的萃取压力(A)，萃取温度(B)，萃取时间(C)为考察因素，以苦杏仁苷得率(苦杏仁苷得率=提取液中苦杏仁苷总质量g/枇杷核用量g)为考察指标，优化最佳提取条件，按L9 (33)正交表进行试验，因素和水平设定见表1。超临界二氧化碳提取的其他相关参数分别调整为:分离压力为flOMPa ;分离温度为36°C ;二氧化碳流速为20~30L/小时。
[0013]表1因素与水平
【权利要求】
1.一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法，其特征在于:将枇杷核粉碎成枇杷核粉末；以无水乙醇为夹带剂进行超临界二氧化碳萃取得到提取液；提取液中苦杏仁苷的得率可达2.68%以上。
2.根据权利要求1所述的一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法，其特征在于具体的操作工艺步骤如下: (1)将枇杷核去杂、水洗、干燥、粉碎，过10-30目筛得到枇杷核粉末； (2)将枇杷核粉末置于超临界二氧化碳萃取釜内，萃取压力为25~30MPa、萃取温度5(T60°C、分离压力为8~lOMPa、分离温度为36°C，二氧化碳流速为2(T30L/小时，萃取过程中添加夹带剂无水乙醇，萃取30-60分钟；收集提取液；提取液中苦杏仁苷的得率可达2.68%以上。
3.根据权利要求1或2所述的一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法，其特征在于:所述夹带剂的用量为枇杷核粉末的2~3倍。
4.根据权利要求2所述的一种超临界二氧化碳萃取枇杷核中苦杏仁苷的方法，其特征在于步骤(2)中:将200g枇杷核粉末置于超临界二氧化碳萃取釜内，萃取条件:萃取压力为25-27.5MPa、萃取温度55°C、分离压力为8~lOMPa、分离温度为36°C，二氧化碳流速为2(T30L/小时，萃取过程中添 加450g夹带剂溶剂，萃取40分钟。
【文档编号】C07H1/08GK104163837SQ201410398432
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年8月14日 优先权日:2014年8月14日
【发明者】庞敏, 何曙剑, 操丽丽, 姜绍通 申请人:合肥工业大学