专利名称：一种提取精制苦杏仁苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种从植物原料中提取有效成分苦杏仁苷的方法，特别是指从马蛋果、欧李籽、杏仁、桃仁中提取苦杏仁苷的分离精制方法。
背景技术：
苦杏仁苷是以一种芳香族氰苷，存在于大风子科马蛋果、蔷薇科欧李、杏及桃等的种子中。研究发现，苦杏仁苷是治疗呼吸系统疾病的有效成分，它通过在体内缓慢释放氢氰酸而麻痹抑制呼吸中枢系统，从而起到平喘的作用，在中医治疗中被广泛使用，用以治疗咳嗽等。但大量口服苦杏仁、苦杏仁苷易导致严重中毒，苦杏仁苷在苦杏仁酶水解下生成野樱皮苷和杏仁氰，杏仁氰不稳定，遇热易分解生成苯甲醛和氢氰酸。氢氰酸与细胞粒体内的细胞色素化酶三价铁起反应，抑制酶活性引起组织细胞呼吸抑制，甚至导致死亡。
苦杏仁苷也是一种治疗癌症的有效成分，在岛国裴济的居民中，癌症的发生率很低，这与该国种有大量的杏树，居民常食用其果实和种子有关，现代医学研究证明，苦杏仁苷对癌细胞具有很强的杀伤力。包括西方国家在内的许多癌症患者，常选用含有苦杏仁苷的制剂作为药物。而这些制剂也给患者带来了许多奇特的疗效。生产苦杏仁苷提取物无疑在医药及保健品方面有着极大的市场。
自然界含苦杏仁苷最多的大风子科马蛋果，其含量达6～8％，欧李种子中苦杏仁苷含量约6％，苦杏仁和桃仁中苦杏仁苷含量约为3.0％。因此以这些原料提取高纯度苦杏仁苷具有较好的应用前景。
目前，有关苦杏仁苷提取物的研究较少，CN02100460.9从苦杏仁压榨饼开始提取苦杏仁苷，该方法油脱除率不高，导致下一步的醇提工艺得到的产品纯度不高；同时压榨过程中高温挤压使得苦杏仁酶与底物苦杏仁苷长时间接触，产生分解；CN02146618.1报道了从欧李籽原料提取欧李油的方法，使用己烷等有机溶剂提取欧李油，己烷价格昂贵，易燃易爆，工业化安全生产困难，而且产品会有较高的溶剂残留，随后涉及用低碳醇提取苦杏仁苷，但未给出具体工艺。
发明内容
本发明的目的是提供一种通过超临界二氧化碳萃取结合溶剂萃取、结晶制备苦杏仁苷的方法。
本发明的目的按下述方案实现(1).将富含苦杏仁苷的植物原料粉碎成10-40目的粉状物，制备成原料粉；(2).将原料粉装入萃取器，以食品级CO2为萃取剂对原料粉进行油脂脱除，控制萃取压力15～35MPa，温度在31.1～60℃；含有植物油脂的二氧化碳从萃取器顶部流出，进入分离器减压分离去除，分离压力4～10MPa，分离温度10～80℃；(3).含有苦杏仁苷的渣粉从分离器底部放出，按固液比1∶3～10在渣粉中加入食用酒精，搅拌，抽滤，得抽滤液；(4).抽滤液经蒸馏、干燥，得苦杏仁苷粗品；(5).将苦杏仁苷粗品溶解在乙醇中，低温结晶，过滤干燥后得高纯度苦杏仁苷。
如上所述的含苦杏仁苷的植物原料为马蛋果、欧李籽、杏仁或桃仁等。
如上所述的(3)步溶剂干燥中是普通干燥、真空干燥、喷雾干燥等。
如上所述的(4)步溶解过程中还可使用超声波手段，促进快速溶解。
如上所述的(5)步结晶过滤干燥中还可以直接采用超声溶解，常温静置过滤干燥。
本发明具有如下优点(1)苦杏仁苷是极性物质，不溶解于超临界二氧化碳流体中。超临界二氧化碳流体可以较完全地脱除原料中的脂溶性成分。而压榨法脱脂不干净，残留脂溶性成份会随着乙醇提取过程进入溶液，使产品纯度下降。与传统溶剂法相比，超临界CO2为绿色溶剂，操作条件温和，不污染环境、现场无火灾危险。
(2)植物种子中同时含有苦杏仁酶，压榨脱脂过程中产生的挤压和局部高温会促进苦杏仁酶与苦杏仁苷的接触及反应，导致苦杏仁苷收率降低，而超临界CO2流体介质具有温和的操作条件和较高的萃取效率，操作温度低，萃取时间短，萃取前后物料形态不变，苦杏仁酶始终处于较低的活性状态，原料中的苦杏仁苷成分基本不分解。
具体实施例方式
实例1取欧李种子，粉碎成10-40目，称取原料200克，置萃取器中通过超临界CO2流体萃取后进行脱油，萃取压力30MPa，萃取温度40℃，分离压力8MPa，分离温度50℃，4小时后，将渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇1200毫升，分三次提取，每次400毫升，合并滤液，减压回收乙醇至适量，65℃真空干燥3小时，得棕黄色提取物11克，经过HPLC法测定含量为55％。
取所提的提取物3克，加入少量乙醇溶解过滤，然后置于4℃冰箱静止10小时，析出白色结晶，过滤，用少量乙醇洗涤后干燥，得1.3克，经过HPLC检测，含量达到98.0％。
实例2取欧李种子，置剪切式粉碎机粉碎成20-40目，称取原料200克，置萃取器中通过超临界CO2流体萃取后进行脱油，萃取压力20MPa，萃取温度60℃，分离压力9MPa，分离温度70℃，6小时后，将渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇1200毫升，分三次提取，每次400毫升，合并滤液，减压回收乙醇至适量，65℃真空干燥干燥3小时，得棕黄色提取物12克，经过HPLC法测定含量为50％。
所提的提取物4克，加入少量乙醇超声溶解，然后常温下静止1小时，过滤得白色结晶，干燥，得1.6克，经过HPLC检测，含量达到92.3％。
实例3取苦杏仁种子，置剪切式粉碎机粉碎成20-40目，称取原料200克，置萃取器中通过超临界CO2流体萃取后进行脱油，萃取压力32MPa，萃取温度50℃，分离压力5Mpa，分离温度30℃，4小时后，将渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇1500毫升，分三次提取，每次500毫升，合并滤液，减压回收乙醇至适量，65℃真空干燥3小时，得棕黄色提取物5.5克，经过HPLC法测定含量为60％。
取所提的提取物4克，加入少量乙醇溶解过滤，然后置于4℃静置10小时，析出白色结晶，过滤，用少量乙醇洗涤后干燥，得1.8克，经过HPLC检测，含量达到95.4％实施例4取桃仁置剪切式粉碎机粉碎成10-40目，称取原料300克，置萃取器中通过超临界CO2流体萃取后进行脱油，萃取压力25MPa，萃取温度35℃，分离压力5MPa，分离温度20℃，4小时后，将渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇900毫升，分三次提取，每次300毫升，合并滤液，减压回收乙醇至适量，倒入白磁盘后在真空干燥器65℃干燥3小时，得棕黄色提取物5.8克，经过HPLC法测定含量为58％。
取所提的提取物4克，加入少量乙醇溶解过滤，然后置于4℃静置10小时，析出白色结晶，过滤，用少量乙醇洗涤后干燥，得2.1克，经过HPLC检测，含量达到93.0％。
权利要求
1.一种提取精制苦杏仁苷的方法，其特征在于包括如下步骤(1).将富含苦杏仁苷的植物原料粉碎成10-40目的粉状物，制备成原料粉；(2).将原料粉装入萃取器，以食品级CO2为萃取剂对原料粉进行油脂脱除，控制萃取压力15～35MPa，温度在31.1～60℃；含有植物油脂的二氧化碳从萃取器顶部流出，进入分离器减压分离去除，分离压力4～10MPa，分离温度10～80℃；(3).含有苦杏仁苷的渣粉从分离器底部放出，按固液比1∶3～10在渣粉中加入食用酒精，搅拌，抽滤，得抽滤液；(4).抽滤液经蒸馏、干燥，得苦杏仁苷粗品；(5).将苦杏仁苷粗品溶解在乙醇中，低温结晶，过滤干燥后得高纯度苦杏仁苷。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的含苦杏仁苷的植物原料为马蛋果、欧李籽、杏仁或桃仁。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的(3)步溶剂干燥中是普通干燥、真空干燥或喷雾干燥。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的(4)步溶解过程中还可使用超声波手段，促进快速溶解。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的(5)步结晶过滤干燥中还可以直接采用超声溶解，常温静置过滤干燥。
全文摘要
一种提取精制苦杏仁苷的方法是将富含苦杏仁苷的植物原料粉碎成粉状物，制成原料粉；以CO
文档编号C07H15/00GK1594340SQ20041001238
公开日2005年3月16日 申请日期2004年7月2日 优先权日2004年7月2日
发明者侯相林, 杜俊民, 齐永琴 申请人:中国科学院山西煤炭化学研究所