0秒。合成好的种子放置于28-30°C (最优为29°C )水浴中2小时以上，3小时以内(最优为2小时30分钟)。
[0027]其次，配置金纳米棒生成所需反应液:配置10mM的CTAB溶液、0.92M的硫酸溶液、1mM的硝酸银溶液、10mM的维生素C溶液以及1mM的HAuCl4溶液。向锥形瓶中分别加入100毫升CTAB溶液、5毫升HAuCl4溶液、I毫升硝酸银溶液、2毫升硫酸溶液及0.8毫升的维生素C溶液，并混匀约2分钟。再向锥形瓶中加入0.24毫升种子溶液，利用涡旋振荡器混匀约2分钟。最后将该锥形瓶置于29度水浴锅12小时，离心终止反应，得到金纳米棒。
[0028]B.聚乙二醇修饰金纳米棒
[0029]取20mg分子量为5000的巯基化聚乙二醇溶入到10mL金纳米棒中，涡旋振荡器混匀，置于29度水浴锅中反应8小时。离心终止反应，并用双蒸水洗涤3次，最后重悬于双蒸水中，得到聚乙二醇修饰的金纳米棒。
[0030]本发明提供了依据上述方法制备得到的聚乙二醇修饰的金纳米棒。
[0031]本发明的第三方面，提供了该聚乙二醇修饰的金纳米棒在制备抑制新生血管生成药物中的应用。
[0032]所述抑制新生血管生成药物为特异性的抑制视人网膜血管内皮细胞增殖的药物。
[0033]所述抑制新生血管生成药物为可抑制人血管内皮细胞的管样形成的药物。
[0034]本发明的有益效果如下:
[0035]本发明制备了毒性低的、聚乙二醇包裹的金纳米棒，并评估了其作为靶向药物治疗视网膜新生血管性疾病的可能性。
【附图说明】
[0036]图1:金纳米棒特性。A刚合成的金纳米棒投射电镜照片聚乙二醇修饰的金纳米棒投射电镜照片；C刚合成金纳米棒与聚乙二醇修饰的金纳米棒吸收光谱；D刚合成金纳米棒与聚乙二醇修饰的金纳米棒的zeta电位。
[0037]图2:聚乙二醇修饰的金纳米棒对细胞增殖的影响。A聚乙二醇修饰的金纳米棒对人视网膜血管内皮细胞(HREC)增殖的影响出聚乙二醇修饰的金纳米棒对人色素上皮细胞(RPE cells)增殖的影响；C聚乙二醇修饰的金纳米棒对人胚肾细胞(293T cells)增殖的影响。
[0038]图3:聚乙二醇修饰的金纳米棒对HREC迀移的影响:A对照组细胞迀移的代表性照片；B 50 μ g/mL的金纳米棒处理后的细胞迀移的代表性照片；C 100 μ g/mL的金纳米棒处理后的细胞迀移的代表性照片；D细胞迀移相对量的统计图。
[0039]图4:聚乙二醇修饰的金纳米棒对细胞管样形成的影响:A对照组细胞管样形成的代表性照片；B 50 μ g/mL的金纳米棒处理后的细胞管样形成的代表性照片；C 100 μ g/mL的金纳米棒处理后的细胞管样形成的代表性照片；D细胞管样形成相对量的统计图。
[0040]图5:不同条件下合成金纳米棒形状及纯度。A合成种子2小时、金浓度为20mM时合成的金纳米棒合成种子2.5小时、金浓度为20mM时合成的金纳米棒；C合成种子2小时、金浓度为1mM时合成的金纳米棒；D合成种子2.5小时、金浓度为1mM时合成的金纳米棒。
【具体实施方式】
[0041]现结合实施例和附图，对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此。
[0042]实施例1
[0043]金纳米棒合成:
[0044]首先合成金纳米棒生长所需种子液。配置1mM HAuCI4溶液，1mM NaBH4溶液以及10mM的CTAB溶液。将0.2毫升HAuCl4溶液加入到7.5毫升的CTAB中，利用涡旋振荡器混匀，并加水补齐至9.4毫升，接着将冰冷的0.6毫升NaBH4S液加入到上述液体中，利用涡旋振荡器混匀约30秒。合成好的种子放置于29度水浴锅2小时30分钟后使用。其次配置金纳米棒生成所需反应液。配置10mM的CTAB溶液、0.92M的硫酸溶液、1mM的硝酸银溶液、10mM的维生素C溶液以及1mM的HAuCl4溶液。向锥形瓶中分别加入100毫升CTAB溶液、5毫升HAuCl4溶液、I毫升硝酸银溶液、2毫升硫酸溶液及0.8毫升的维生素C溶液，并混匀约2分钟。再向锥形瓶中加入0.24毫升种子溶液，利用涡旋振荡器混匀约2分钟。最后将该锥形瓶置于29度水浴锅12小时，离心终止反应，得到金纳米棒。
[0045]聚乙二醇修饰金纳米棒:取20mg分子量为5000的巯基化聚乙二醇溶入到10mL金纳米棒中，涡旋振荡器混匀，置于29度水浴锅中反应8小时。离心终止反应，并用双蒸水洗涤3次，最后重悬于双蒸水中，得到聚乙二醇修饰的金纳米棒。
[0046]合成金纳米棒特性见图1。A刚合成的金纳米棒透射电镜照片聚乙二醇修饰的金纳米棒透射电镜照片；C刚合成金纳米棒与聚乙二醇修饰的金纳米棒吸收光谱；D刚合成金纳米棒与聚乙二醇修饰的金纳米棒的zeta电位。透射电镜照片结果表明我们合成的金纳米棒纯度较高(根据电镜和光谱较低的峰值估算)以及修饰聚乙二醇并未明显影响金纳米棒的形态。吸收光谱中530nm左右的峰相对较低，进一步表明我们合成的纳米金棒纯度较高，而吸收光谱的蓝移也说明修饰巯基聚乙二醇成功。修饰聚乙二醇后纳米金棒电位发生了变化，进一步表明聚乙二醇修饰成功改变了金纳米棒的性状。该实验结果证明了我们合成的金纳米棒纯度高以及修饰聚乙二醇成功。
[0047]该制备方法合成金纳米棒形状见图5D，纯度根据530nm吸收波普高低以及透射电镜照片中金纳米棒的比例计算。
[0048]实施例2长纵横比、高纯度金纳米棒的探索
[0049]我们利用种子生长法来合成金纳米棒，其中金浓度的高低及合成种子的时间可以影响最终金纳米棒的长短及纯度。我们选择了 2小时和2.5小时的种子合成时间，以及1mM和20mM两个金浓度来合成金纳米棒，其他条件未做变动。不同条件下合成的金纳米棒特征如图5:A合成种子2小时、金浓度为20mM时合成的金纳米棒；该方法合成得到的金纳米棒长径较短(28.1+3.8nm，8.0+1.4nm，纵横比是3.5)，球形颗粒多，金纳米棒的纯度较低。B合成种子2.5小时、金浓度为20mM时合成的金纳米棒；该制备方法合成金纳米棒形状见图5B。该制备方法合成的金纳米棒长径较短(25.4+4.4nm，8.8+1.6nm，纵横比是2.9)，长短不一，有较多的球形颗粒。C合成种子2小时、金浓度为1mM时合成的金纳米棒；该制备方法合成的金纳米棒长径合适(68.8+10.0nm, 17.6+1.3nm,纵横比是3.9)，然而球形颗粒仍较多，金纳米棒的纯度较低。D合成种子2.5小时、金浓度为1mM时合成的金纳米棒。该方法合成的金纳米棒纯度高、纵横比长。纵径:77.48+6.468，横径:15.45+1.079，纵横比是:5.00
[0050]实施例3 CCK-8方法检测细胞增殖
[0051]实验材料:人视网膜血管内皮细胞(Humanretinal endothelial cells, HREC)，内皮细胞培养基购自ScienCell公司；人色素上皮细胞(RPE)，人胚肾细胞(293T)购自美国ATCC公司；CCK-8试剂购自日本同仁公司；检测吸光值利用B1tek公司的多功能酶标仪。
[0052]实验方法:
[0053](I)收集对数生长期细胞，以每孔2000个的密度接种于96孔板。
[0054](2)细胞过夜贴壁后，向细胞培养液中加入不同浓度(Oug/mL，50ug/mL和10ug/mL)的实施例1所得的聚乙二醇修饰的金纳米棒，72h后检测细胞增殖情况。
[0055](3)吸弃原有培养基，每孔加入含1yL CCK-8的新鲜培养基110 μ L，培养2h后用多功能酶标仪在450nm波长检测各孔吸光度值。
[0056]实验结果:
[0057]结果如图2所示，聚乙二醇修饰的金纳米棒特异性的抑制视人网膜血管内皮细胞增殖，而对人胚肾细胞、人色素上皮细胞无明显影响。该结果证明经聚乙二醇修饰后的金纳米棒对正常细胞几乎没有毒性，而对人视网膜血管内皮细胞具有特异