的DMSO中，得到20mg/mL的溶液。以0? 45Um的滤 膜过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为：色谱柱为C18， 250X4. 6mm ;紫外波长254nm ;流动相，B相为乙腈，A相为水相，流速lmL/min ;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0048]
[0049] 按照上述既定程序分离，收集保留时间15min的主峰样品，获得乙腈和水的混合 液。向获得的混合液加入IOmL的二氯甲烧，分得有机相，30°C减压浓缩，残余液加入3mL三 氟乙醇，溶清后，40°C减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括XRD、 TGA、DSC、红外光谱，XRD图谱如图1所示，XRD图谱数据见表1，TGA图谱如图2所示，DSC图 谱如图3所示，红外光谱如图4所示。由图1~4可知，获得的固体为瑞加德松晶型B。
[0050]表1瑞加德松晶型B的XRD图谱数据
[0051]
[0052] 由图2可知，在109. 46°C时失重9. 81%;在175. 12°C时失重14. 61%;当温度达到 237. 48°C时，出现持续失重，之后失重比例迅速提高。分析结果认为109. 46°C应为样品中 低沸点极性溶剂残留，175. 12°C应为样品中结晶水，而237. 48°C失重应该是样品开始分解。 结果表明本发明提供的瑞加德松晶型B热在237. 48°C才分解，稳定性好，适合长期储存。
[0053] 由图3可知，温度达到72. 44°C时，样品中有热量吸收；温度达到219. 96°C时，可能 因为晶型转换或结晶水的变化，导致热量的波动；温度达到275. 80°C时，有明显的吸收。
[0054] 对该瑞加德松晶型B进行含量检测，其HPLC图谱如图5所示，HPLC图谱数据见表 2〇
[0055] 表2瑞加德松晶型B的HPLC图谱数据
[0056]
[0057]结果显示瑞加德松晶型B的含量为99. 59%，表明制得的瑞加德松晶型B的纯度高。
[0058] 实施例2瑞加德松晶型B的制备
[0059] 将IOmg瑞加德松，溶于ImL的DMF中，得到27mg/mL的溶液。以0? 45ii m的滤膜 过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为：色谱柱为C18， 250X4. 6mm ;紫外波长254nm ;流动相，B相为乙腈，A相为水相，流速lmL/min ;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0060]
[0061] 按照上述既定程序分离，收集保留时间15min的主峰样品，获得乙腈和水的混合液。 向获得的混合液加入50mL的乙酸乙酯，分得有机相，30°C减压浓缩，残余液加入ImL三氟乙 醇，溶清后，40°C减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括X-射线衍 射（XRD)、红外光谱、TGA、DSC，检测结果与实施例1的检测结果相近，可知获得的固体为瑞加 德松晶型B。对该瑞加德松晶型B进行含量检测，其HPLC图谱与实施例的检测结果相近。结 果显示瑞加德松晶型B的含量为99. 80%，表明制得的瑞加德松晶型B的纯度高。
[0062] 实施例3瑞加德松晶型B的制备
[0063] 将30mg瑞加德松，溶于2. 5mL的DMSO中，得到16mg/mL的溶液。以0? 45Um的滤 膜过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为：色谱柱为C18， 250X4. 6mm ;紫外波长254nm ;流动相，B相为乙腈，A相为水相，流速lmL/min ;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0064]
[0065] 按照上述既定程序分离，收集保留时间15min的主峰样品，获得乙腈和水的混合 液。向获得的混合液加入20mL的甲苯，分得有机相，30°C减压浓缩，残余液加入5mL三氟乙 醇，溶清后，40°C减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括X-射线 衍射（XRD)、红外光谱、TGA、DSC，检测结果与实施例1的检测结果相近，可知获得的固体为 瑞加德松晶型B。对该瑞加德松晶型B进行含量检测，其HPLC图谱与实施例的检测结果相 近。结果显示瑞加德松晶型B的含量为99. 35%，表明制得的瑞加德松晶型B的纯度高。
[0066] 实施例4瑞加德松晶型B的制备
[0067] 将50mg瑞加德松，溶于0? 5mL的DMF中，得到22mg/mL的溶液。以0? 45 ii m的滤 膜过滤，液体经进样针打入反相色谱系统的2mL定量环中，反相色谱条件为：色谱柱为C18， 250X4. 6mm ;紫外波长254nm ;流动相，B相为乙腈，A相为水相，流速lmL/min ;采用梯度洗 脱的方法，梯度洗脱程序具体为：
[0068]
[0069]按照上述既定程序分离，收集保留时间15min的主峰样品，获得乙腈和水的混合 液。向获得的混合液加入5mL的甲苯，分得有机相，30°C减压浓缩，残余液加入IOmL三氟乙 醇，溶清后，40°C减压浓缩，得到固体。对所得的固体进行定性检测，检测方法包括X-射线 衍射（XRD)、红外光谱、TGA、DSC，检测结果与实施例1的检测结果相近，可知获得的固体为 瑞加德松晶型B。对该瑞加德松晶型B进行含量检测，其HPLC图谱与实施例的检测结果相 近。结果显示瑞加德松晶型B的含量为99. 45%，表明制得的瑞加德松晶型B的纯度高。 [0070]对比例1瑞加德松晶型B的制备
[0071] 将50mg瑞加德松样品在50°C溶解在5mL三氟乙醇溶剂中，经过减压浓缩获得的晶 型B。
[0072] 对上述获得的晶型B进行含量检测，结果显示纯度为95%。
[0073] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种瑞加德松晶型B的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 取瑞加德松与第一有机溶剂混合，经反相高效液相色谱纯化，收集保留时间为15min 的组分，获得第一中间产物； 取所述第一中间产物与第二有机溶剂混合，获得有机相，经浓缩，获得第二中间产物； 取所述第二中间产物与三氟乙醇混合，经析晶，即得。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述反相高效液相色谱的条件为：色 谱柱为C18,250X4. 6mm ;紫外波长254nm ;流动相的B相为乙腈，流动相的A相为水相，流速 lmL/min ;梯度洗脱。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述梯度洗脱的方法为：4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一有机溶剂为DMSO或DMF中 的一种或两者的混合物。5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第二有机溶剂为二氯甲烷、三氯 甲烷、乙酸乙酯或甲苯中的一种或两者以上的混合物。6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，以mg/mL计，所述瑞加德松与所述第 一有机溶剂的质量体积比为（10~50) : (0· 5~2. 5)。7. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，以mg/mL计，所述瑞加德松与所述第 二有机溶剂的质量体积比为（10~50) : (5~50)。8. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，以mg/mL计，所述瑞加德松与所述三 氟乙醇的质量体积比为（10~50) : (1~10)。9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述析晶的方法为减压浓缩。10. 根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述析晶的温度为40°C。
【专利摘要】本发明涉及晶型制备领域，特别涉及一种瑞加德松晶型B的制备方法。该制备方法包括步骤：取瑞加德松与第一有机溶剂混合，经反相高效液相色谱纯化，收集保留时间为15min的组分，获得第一中间产物；取第一中间产物与第二有机溶剂混合，获得有机相，经浓缩，获得第二中间产物；取第二中间产物与三氟乙醇混合，经析晶，即得。本发明提供的制备方法可大大提高瑞加德松晶型B的纯度。
【IPC分类】C07H19/167, C07H1/06
【公开号】CN105175468
【申请号】
【发明人】刘伟, 张志刚, 任真
【申请人】上海紫源制药有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2014年6月17日