)搅拌6h后，将液体进行离心，取出底部微球，用去离子水清洗5次，再把取出的微球进行冻干处理，去除微球中的水分，得到粒径为200μπι的载药PLGA/MS-RIF微球。
[0043]实施例3
I)将Ig PLGA(聚乳酸羟基乙酸)和0.3gRIF(利福平)溶于16ml CH2Cl2中，超声振动15min直至PLGA完全溶解。
[0044]2)称取3g PVA溶于300ml去离子水中，在PVA完全溶解后加入步骤I)所得溶液，并不断搅拌进而生成微球。
[0045]3)搅拌6h后，将液体进行离心，取出底部微球，用去离子水清洗5次，再把取出的微球进行冻干处理，去除微球中的水分，得到粒径为200μπι的载药PLGA-RIF微球。
[0046]实施例4
I)称取0.5g利福平溶于4ml CH2Cl2溶液中，超声振动使其分散均匀。
[0047]2)称取0.6g MS(介孔硅)加入到步骤I)所得溶液中，超声振动lOmin。
[0048]3)将步骤2)所得溶液放置于4°C的冰箱中5天。
[0049]4)将冰箱的溶液取出放置于真空干燥箱内，温度设为40°C，进行抽真空，直至使CH2Cl2完全挥发，得到MS-RIF。
[0050]5)将0.5g PLGA(聚乳酸羟基乙酸)溶于16ml CH2Cl2中，超声振动15min直至PLGA完全溶解。
[0051 ] 6)称取0.1g的MS-RIF置于步骤5)所得液体中，用均质机在5000 rpm/min条件下均质5分钟，使其均勾分散在液体中。
[0052]7)称取3g PVA溶于300ml去离子水中，在PVA完全溶解后加入步骤6)所得溶液，并不断搅拌进而生成微球。
[0053]8)搅拌6h后，将液体进行离心，取出底部微球，用去离子水清洗5次，再把取出的微球进行冻干处理，去除微球中的水分，得到粒径为50μπι的载药PLGA/MS-RIF微球。
[0054]实施例5
I)分别称取0.4,0.5和0.6g利福平溶于4ml CH2Cl2溶液中，超声振动使其分散均匀。
[0055]2)称取0.6g MS(介孔硅)加入到步骤I)所得溶液中，超声振动lOmin。
[0056]3)将步骤2)所得溶液放置于4°C的冰箱中5天。
[0057]4)将冰箱的溶液取出放置于真空干燥箱内，温度设为40°C，进行抽真空，直至使CH2Cl2完全挥发，得到3组MS-RIF。
[0058]实施例6
图1为实施例5制得的不同MS-RIF药物释放的曲线图，可以看出添加不同量的RIF对MS的药物释放不会造成较为明显的影响，所以本发明中采用的是载有0.5g RIF的MS进行载药微球的制备。
[0059]实施例7
称取等量实施例1-4的4组载药微球样品分别加入到装有20ml PBS缓冲液的样品瓶中，将样品瓶密封放置于摇床中进行药物释放实验。摇床的温度设为37°C，转速为90rpm。载药微球进行药物释放期间，每隔一定时间将样品瓶取出，取1ml上清液装入离心管中，同时向样品瓶中加入I Oml新鲜的PBS缓冲液，密封后放置于摇床中继续进行药物释放实验。将离心管中上清液进行紫外光谱分析，根据上清液的吸光度进而判断上清液中药品的浓度，根据样品中溶液的体积得出样品释放药物的百分率。载药微球的药物释放实验的时间为50天，根据每次测出上清液中药物的浓度绘制出整个药物释放阶段药物释放的曲线。由图2可以得到PLGA/MS-RIF微球(50μπι)的药物释放曲线具有明显的突释现象，PLGA-RIF微球(200μπι)的药物释放曲线有明显的二次释放现象。PLGA/MS-RIF/0-TCP微球(200μπι)和PLGA/MS-RIF微球(200μπι)的药物释放曲线在整个释放阶段较为平稳，没有突释和二次释放现象，且β-TCP的引入没有对药物释放造成明显影响。
[0060]实施例8
分别称取0.5g PLGA-RIF、PLGA/MS-RIF 和PLGA/MS-RIF/0-TCP微球(粒径均为200μπι)，放置在3个均装有1ml PBS溶液的容器中，将容器均放置于转速为90rpm/min、温度为37°C的摇床中。每7天取一次样品，每种样品有3个平行样，用酸度计测量PBS溶液的pH值。由图3可以得到，PLGA/MS-RIF微球降解过程中酸性变化最剧烈，PLGA/MS-RIF/f3-TCP微球降解过程中酸性变化最缓慢。
【主权项】
1.一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)称取0.4-0.6g RIF溶于CH2Cl2中，超声振动直至分散均匀，得分散液； 2)称取0.5~0.78MS加入到步骤I)所得分散液中，超声振动； 3 )将步骤2 )所得溶液放置于3~5 V的冰箱中4?6天； 4)将冰箱中的溶液取出放置于真空干燥箱内，进行抽真空，直至使CH2Cl2完全挥发，得到MS-RIF; 5)将0.8~1.28PLGA溶于CH2Cl2中，超声振动直至PLGA完全溶解； 6)称取0.08-0.12gMS-RIF和0.08-0.12g β-TCP置于步骤5)所得液体中，用均质机均质，直到均匀分散在液体中，得载药溶液； 7)称取2.5?3.5gPVA溶于去离子水中，在PVA完全溶解后加入载药溶液，并不断搅拌进而生成微球； 8)搅拌5?8h后，将液体进行离心，取出底部微球，用去离子水清洗，再把取出的微球进行冻干处理，去除微球中的水分，得到载药PLGA/MS-RIF/i3-TCP微球。2.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤1)所述CH2Cl2 为 3?5ml。3.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤2)所述超声振动时间为8?12min。4.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤4)所述真空干燥箱内的温度设为39?41°C。5.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤5)所述CH2Cl2 为 15?20ml。6.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤5 )所述超声振动的时间为15?20min。7.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤6)所述均质机均质的速率为4088?5200rpm/min，时间为4?6分钟。8.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤7)所述去离子水为280~320ml。9.根据权利要求1所述的一种持续释放药物的载药微球的制备方法，其特征在于，步骤8)所述用去离子水清洗4?6次。
【专利摘要】本发明公开了一种持续释放药物的载药微球的制备方法。本发明先制备载有利福平（RIF）的介孔硅（MS），再通过聚乳酸羟基乙酸（PLGA）与载药介孔硅（MS-RIF）以及β型磷酸三钙（β-TCP）结合，制备复合载药微球。通过调节PLGA量来调节复合微球粒径的大小，对药物释放曲线进行分析，进而获取药物释放过程中没有出现突释和二次释放的载药微球。
【IPC分类】A61K9/16, A61K31/496, A61P19/08, A61K47/04, A61P31/06, A61K47/02, A61K47/34
【公开号】CN105640894
【申请号】
【发明人】魏坤, 梁猛
【申请人】华南理工大学
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2015年12月30日