一种中药微生态制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药技术和微生态技术领域，具体为一种中药微生态制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]目前，传统的中药制剂的制备方法一般包括采用浸泡、冲洗、干燥、冲击、碰撞、摩擦、剪切、研磨和断裂等步骤最终制备得到超细粉体，存在加工效率低、药材利用率低、药材有效成分流失严重等问题，对于中药制剂的推广应用造成较大的制约。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种中药微生态制剂及其制备方法，具有药效好、提取效率高和药材利用率高的特点。
[0004]本发明可以通过以下技术方案来实现:
本发明公开了一种中药微生态制剂，以中药超微粉作为发酵培养基的主要成分，以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺制备所得，所述中药超微粉包括粒径I?60μπι的黄芪、女贞子和淫羊藿组合物。
[0005]凝结芽孢杆菌是兼性厌氧菌，在有氧及无氧的环境下都可生长，能适应低氧的肠道环境，对酸和胆汁有较高的耐受性，能够进行乳酸发酵，产生的L-乳酸能降低肠道pH值，抑制有害菌，并能促进双歧杆菌等有益菌的生长和繁殖。凝结芽孢杆菌能够形成芽孢，与其他不产乳酸的芽孢杆菌相比有利于恢复胃肠道的微生态平衡。凝结芽孢杆菌芽孢在人体中约4_6h便可萌发，其中85%的菌体可顺利通过消化系统，最终于肠道中萌发并繁殖。但值得关注的是，凝结芽孢杆菌不同于其它的益生菌，由于菌体在肠道上皮细胞的粘附性较弱，所以在自然条件下一般很难在肠道中存在。因此，作为肠道内的“移民”，凝结芽孢杆菌只能在肠道内做短暂的停留，一次性口服凝结芽孢杆菌后，经过大约4?7d时间肠道内的凝结芽孢杆菌便会通过排便而消失殆尽。所以只有持续服用凝结芽孢杆菌菌剂，才能使得该菌在肠道中充分发挥其益生作用。以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺进行中药成分的提取，使最终得到的中药制剂具有微生态的特点，通过益生菌和中药活性成分的的协同作用，延缓药效释放，提升中药材的药效，且没有残留副作用。同时，从工艺上，采用发酵工艺，既有效避免了传统工艺的繁琐，简化制备过程，提高提取额效率;也避免了药材有效成分在繁琐制剂成型过程中的流失，提高了药材的利用率。
[0006]进一步地，所述中药超微粉中按质量份计黄苗20?60份，女贞子20?40份，淫羊藿20?40份。
[0007]—种中药微生态制剂的制备方法，包括以下步骤:
分离纯化，将黄芪、女贞子和淫羊藿粉碎得到为粒径I?60μπι的中药超微粉，把中药超微粉加入到无菌试管中，加入蒸馏水进行灭菌，震荡摇匀，静置后取上层清液体加入到分离培养基中，接入凝结芽孢杆菌35?37 °(:静置培养，然后在60?80 °C水浴5 min后用生理盐水稀释到10—1?10—8分别转接到乳酸菌增殖培养固体平板上，37 °C培养，待菌落长出；
52、接斜面活化，将分离的单菌落转接到种子斜面的固体培养基，30?40°C培养12-36 h，备用；
53、种子液的制备，取S2步活化后的菌种，接入装有乳酸菌增殖培养基的容器中，控制温度为40 °C, 160?200 r/min搅拌培养16?24h，得到种子液；
54、发酵培养，将S3步制的种子液，接入盛有发酵培养基的容器中，，控制温度、空气流量、搅拌转速及罐压培养即可得到中药微生态制剂发酵液；
55、成分提取，采用超滤、纳滤分离纯化S4步所得的发酵液，得到提取浓缩液；
56、造粒成型，在S5步所得的浓缩液中加入活性添加物，喷雾干燥法，直接制粒，即可得到最终的中药微生态制剂。
[0008]优选地，所述分离培养基包括以下质量份的组分:胰蛋白胨10质量份、牛肉膏10质量份、梓檬酸二钱2质量份、乙酸钠5质量份、酵母粉5质量份、葡萄糖5质量份、磷酸二氢钾2质量份、吐温80 I质量份、碳酸妈20质量份、硫酸镁0.58质量份、硫酸猛0.25质量份、水1000质量份，控制所述分离培养基的pH值6.2?6.5然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0009]优选地，所述分离培养基还包括以下质量份的组分:α-甲基葡萄糖苷10质量份、山梨酸钾I质量份。
[0010]优选地，所述乳酸菌增殖培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、水1000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0,然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0011]优选地，所述固体培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、琼脂0.75质量份、水I 000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0012]优选地，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:蔗糖10g/L、蛋白胨10g/ L、磷酸氢二钠2 g/、磷酸二氢钠2 g/ L，所述基础发酵培养基的pH为7.0;所述种子液的接种量为2%，在10ml的基础发酵培养基中加入2ml的种子液。
[0013]优选地，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:酵母粉3g/L、蛋白胨5g/1^，牛肉膏28/1、]\1113040.0058/1、恥(:1 2g/L,K2HPO4 3g/L,MgSO4 0.02g/L;培养温度为40°C，初始pH值为7.0，转速180?210r/min，发酵时间48h ；所述种子液的接种量为6%，在10ml的基础发酵培养基中加入6ml的种子液。
[0014]优选地，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:麸皮4g/L、豆柏粉1.5g/L，NaCl 0.5g/L、K2HP044g/L、MnS04 30.8mg/L ；培养温度为37 °C，初始pH值为7.0，转速 180r/min，发酵时间56h ；所述种子液的接种量为4%，在10ml的基础发酵培养基中加入4ml的种子液。
[0015]本发明一种中药微生态制剂及其制备方法，具有如下的有益效果:
第一、药效好，以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺进行中药成分的提取，使最终得到的中药制剂具有微生态的特点，通过益生菌和中药活性成分的的协同作用，延缓药效释放，提升中药材的药效，且没有残留副作用。同时，从工艺上；
第二、提取效率高，采用发酵工艺，既有效避免了传统工艺的繁琐，简化制备过程，提高提取额效率；
第三、药材利用率高，采用中药超微粉培养基能有效减少用药剂量，节约原料药材，单罐罐产可提高15%以上。
【具体实施方式】
[0016]为了使本技术领域的人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例及对本发明产品作进一步详细的说明。
[0017]实施例1
本发明公开了一种中药微生态制剂，以中药超微粉作为发酵培养基的主要成分，以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺制备所得，所述中药超微粉包括粒径I?60μπι的黄芪、女贞子和淫羊藿组合物。其具体制备方法包括以下步骤:
51、分离纯化，将黄芪、女贞子和淫羊藿粉碎得到为粒径I?60μπι的中药超微粉，所述中药超微粉中黄芪60份，女贞子30份，淫羊藿20份，把中药超微粉加入到无菌试管中，加入蒸馏水进行灭菌，震荡摇匀，静置后取上层清液体加入到分离培养基中，37 °C静置培养，然后从70 °C水浴5 min后用生理盐水稀释到10—1?10—8分别转接到乳酸菌增殖培养固体平板上，37 °C培养，待菌落长出；
52、接斜面活化，将分离的菌种转接到种子斜面的固体培养基，40°C培养24 h,备用；
53、种子液的制备，取S2步活化后的菌种，接入装有乳酸菌增殖培养基的容器中，控制温度为40 °C, 180 r/min搅拌培养18 h，得到种子液；
54、发酵培养，将S3步制的种子液，接入盛有发酵培养基的容器中，，控制温度、空气流量、搅拌转速及罐压培养即可得到中药微生态制剂发酵液；
55、成分提取，采用超滤、纳滤分离纯化S4步所得的发酵液，得到提取浓缩液；
56、造粒成型，在S5步所得的浓缩液中加入活性添加物，喷雾干燥法，直接制粒，即可得到最终的中药微生态制剂。
[0018]在本实施例中，所述分离培养基包括以下质量份的组分:胰蛋白胨10质量份、牛肉膏10质量份、梓檬酸二钱2质量份、乙酸钠5质量份、酵母粉5质量份、葡萄糖5质量份、磷酸二氢钾2质量份、吐温80 I质量份、碳酸钙20质量份、硫酸镁0.58质量份、硫酸锰0.25质量份、水1000质量份，控制所述分离培养基的pH值6.2?6.5然后121 °C灭菌20min制备所得。
[0019]在本实施例中，所述乳酸菌增殖培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、水1000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0020]在本实施例中，所述固体培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、琼脂0.75质量份、水I 000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0021]在本实施例中，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:蔗糖10g/L、蛋白胨10 g/ L、磷酸氢二钠2 g/、磷酸二氢钠2 g/ L，所述基础发酵培养基的pH