为7.0;所述种子液的接种量为2%，在10ml的基础发酵培养基中加入2ml的种子液。此基础发酵培养基的生物量00600达到17.83，芽孢形成率为70 %，有效提升了中药材的利用率。
[0022]实施例2
本发明公开了一种中药微生态制剂，以中药超微粉作为发酵培养基的主要成分，以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺制备所得，所述中药超微粉包括粒径I?60μπι的黄芪、女贞子和淫羊藿组合物。其具体制备方法包括以下步骤:
S1、分离纯化，将黄芪、女贞子和淫羊藿粉碎得到为粒径I?60μπι的中药超微粉，所述中药超微粉中黄芪40份，女贞子20份，淫羊藿40份，把中药超微粉加入到无菌试管中，加入蒸馏水进行灭菌，震荡摇匀，静置后取上层清液体加入到分离培养基中，36 °C静置培养，然后从60 °C水浴5 min后用生理盐水稀释到10—1?10—8分别转接到乳酸菌增殖培养固体平板上，37 °C培养，待菌落长出；
S2、接斜面活化，将分离的菌种转接到种子斜面的固体培养基，40 °C培养36 h,备用；
53、种子液的制备，取S2步活化后的菌种，接入装有乳酸菌增殖培养基的容器中，控制温度为40 °C,210 r/min搅拌培养20 h，得到种子液；
54、发酵培养，将S3步制的种子液，接入盛有发酵培养基的容器中，，控制温度、空气流量、搅拌转速及罐压培养即可得到中药微生态制剂发酵液；
55、成分提取，采用超滤、纳滤分离纯化S4步所得的发酵液，得到提取浓缩液；
56、造粒成型，在S5步所得的浓缩液中加入活性添加物，喷雾干燥法，直接制粒，即可得到最终的中药微生态制剂。
[0023]在本实施例中，所述分离培养基包括以下质量份的组分:胰蛋白胨10质量份、牛肉膏10质量份、梓檬酸二钱2质量份、乙酸钠5质量份、酵母粉5质量份、葡萄糖5质量份、磷酸二氢钾2质量份、吐温80 I质量份、碳酸钙20质量份、硫酸镁0.58质量份、硫酸锰
0.25质量份、α-甲基葡萄糖苷10质量份、山梨酸钾I质量份、水1000质量份，控制所述分离培养基的pH值6.2?6.5然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0024]在本实施例中，所述乳酸菌增殖培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、水1000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0025]在本实施例中，所述固体培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、琼脂0.75质量份、水I 000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0026]在本实施例中，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:蔗糖10g/L、蛋白胨10 g/ L、磷酸氢二钠2 g/、磷酸二氢钠2 g/ L，所述基础发酵培养基的pH为7.0;所述种子液的接种量为2%，在10ml的基础发酵培养基中加入2ml的种子液。
[0027]在本实施例中，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:酵母粉3g/L、蛋白胨5g/L，牛肉膏2g/L、MnS040.005g/L、NaCl 2g/L,K2HPO4 3g/L,MgSO4 0.02g/L;培养温度为40°C，初始pH值为7.0，转速210r/min，发酵时间48h ；所述种子液的接种量为6%，在10ml的基础发酵培养基中加入6ml的种子液。
[0028]在本实施例中，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:麸皮4g/L、豆柏粉1.5g/L，NaCl 0.5g/L,K2HP044g/L,MnSO4 30.8mg/L；培养温度为37°C，初始pH值为7.0，转速180r/min，发酵时间56h;所述种子液的接种量为4%，在10ml的基础发酵培养基中加入4ml的种子液。此基础发酵培养基的生物量OD600达到18.13，芽孢形成率为73 %，有效提升了中药材的利用率。
[0029]实施例3
本发明公开了一种中药微生态制剂，以中药超微粉作为发酵培养基的主要成分，以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺制备所得，所述中药超微粉包括粒径I?60μπι的黄芪、女贞子和淫羊藿组合物。其具体制备方法包括以下步骤:
S1、分离纯化，将黄芪、女贞子和淫羊藿粉碎得到为粒径I?60μπι的中药超微粉，中药超微粉中黄芪20份，女贞子40份，淫羊藿30份，把中药超微粉加入到无菌试管中，加入蒸馏水进行灭菌，震荡摇匀，静置后取上层清液体加入到分离培养基中，35 °(:静置培养，然后从80°C水浴5 min后用生理盐水稀释到10—1?10—8分别转接到乳酸菌增殖培养固体平板上，37°C培养，待菌落长出；
S2、接斜面活化，将分离的菌种转接到种子斜面的固体培养基，40 °C培养24 h,备用；
53、种子液的制备，取S2步活化后的菌种，接入装有乳酸菌增殖培养基的容器中，控制温度为40 °C, 195r/min搅拌培养18 h，得到种子液；
54、发酵培养，将S3步制的种子液，接入盛有发酵培养基的容器中，，控制温度、空气流量、搅拌转速及罐压培养即可得到中药微生态制剂发酵液；
55、成分提取，采用超滤、纳滤分离纯化S4步所得的发酵液，得到提取浓缩液；
56、造粒成型，在S5步所得的浓缩液中加入活性添加物，喷雾干燥法，直接制粒，即可得到最终的中药微生态制剂。
[0030]在本实施例中，所述分离培养基包括以下质量份的组分:胰蛋白胨10质量份、牛肉膏10质量份、梓檬酸二钱2质量份、乙酸钠5质量份、酵母粉5质量份、葡萄糖5质量份、磷酸二氢钾2质量份、吐温80 I质量份、碳酸钙20质量份、硫酸镁0.58质量份、硫酸锰0.25质量份、水1000质量份，控制所述分离培养基的pH值6.2?6.5然后121 °C灭菌20min制备所得。
[0031]在本实施例中，所述乳酸菌增殖培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、水1000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0032]在本实施例中，所述固体培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、琼脂0.75质量份、水I 000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0033]在本实施例中，所述基础发酵培养基包括以下质量浓度的组分:酵母粉3g/L、蛋白胨5g/L，牛肉膏2g/L、MnS040.005g/L、NaCl 2g/L,K2HPO4 3g/L,MgSO4 0.02g/L;培养温度为40°C，初始pH值为7.0，转速210r/min，发酵时间48h ；所述种子液的接种量为6%，在10ml的基础发酵培养基中加入6ml的种子液。此基础发酵培养基的生物量0D600达到18.03，芽孢形成率为72 %，有效提升了中药材的利用率。
[0034]实施例4
本发明公开了一种中药微生态制剂，以中药超微粉作为发酵培养基的主要成分，以凝结芽孢杆菌作为生产菌，采用发酵工艺制备所得，所述中药超微粉包括粒径I?60μπι的黄芪、女贞子和淫羊藿组合物。其具体制备方法包括以下步骤:
51、分离纯化，将黄芪、女贞子和淫羊藿粉碎得到为粒径I?60μπι的中药超微粉，中药超微粉中黄芪50份，女贞子25份，淫羊藿35份，把中药超微粉加入到无菌试管中，加入蒸馏水进行灭菌，震荡摇匀，静置后取上层清液体加入到分离培养基中，36 °(:静置培养，然后从75°C水浴5 min后用生理盐水稀释到10—1?10—8分别转接到乳酸菌增殖培养固体平板上，37°C培养，待菌落长出；
52、接斜面活化，将分离的菌种转接到种子斜面的固体培养基，40°C培养24 h,备用；
53、种子液的制备，取S2步活化后的菌种，接入装有乳酸菌增殖培养基的容器中，控制温度为40 °C, 190 r/min搅拌培养18 h，得到种子液；
54、发酵培养，将S3步制的种子液，接入盛有发酵培养基的容器中，，控制温度、空气流量、搅拌转速及罐压培养即可得到中药微生态制剂发酵液；
55、成分提取，采用超滤、纳滤分离纯化S4步所得的发酵液，得到提取浓缩液；
56、造粒成型，在S5步所得的浓缩液中加入活性添加物，喷雾干燥法，直接制粒，即可得到最终的中药微生态制剂。
[0035]在本实施例中，所述分离培养基包括以下质量份的组分:胰蛋白胨10质量份、牛肉膏10质量份、梓檬酸二钱2质量份、乙酸钠5质量份、酵母粉5质量份、葡萄糖5质量份、磷酸二氢钾2质量份、吐温80 I质量份、碳酸钙20质量份、硫酸镁0.58质量份、硫酸锰
0.25质量份、α-甲基葡萄糖苷10质量份、山梨酸钾I质量份、水1000质量份，控制所述分离培养基的pH值6.2?6.5然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0036]在本实施例中，所述乳酸菌增殖培养基包括以下质量份的组分:葡萄糖20质量份、胰蛋白胨20质量份、酵母粉10质量份、水1000质量份，控制所述乳酸菌增殖培养基的pH值为7.0，然后121 °C灭菌20 min制备所得。
[0037]在本实施例中，所述