的常规技术，具体可参见实施例2。
[0038] 在本文中，术语"另一种服P90 α -1抗原"即为服P90 α -1抗原似。当本发明的 人服Ρ90 α -1抗体由服Ρ90 α -1抗原（2)(即，另一种服Ρ90 α -1抗原）制备而得时，该抗 体可W称为"人服Ρ90α-1抗体（2)"(或简称抗体（2))或"另一种人服Ρ90α-1抗体"。
[0039] 本发明的服Ρ90 α -1单克隆抗体和多克隆抗体可W用于制备人服Ρ90 α -1体外诊 断试剂盒，该试剂盒可W基于免疫方法对人体组织、细胞或体液中的HSP90 α -1进行检测， 优选对血液标本中的服Ρ90 α -1进行检测。
[0040] 因此，本发明提供了一种人服Ρ90α-1体外诊断试剂盒，其包含本发明的人 HSP90 α -1单克隆抗体或多克隆抗体。
[0041] 目前已知可用于临床检验的免疫实验方法主要包括W下几种；ELISA法、化学发 光法、英光层析法、胶体金免疫测定法等。
[0042] 而ELISA法包括W下几种类型；双抗体夹必法检测抗原、双抗原夹必法检测抗体、 间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体等。
[0043] 本发明的人服P90 α -1体外诊断试剂盒优选采用ELISA双抗体夹必法来检测 HSP90 α -1蛋白。该试剂盒可W包含包被抗体、结合抗体、酶标记的抗抗体和/或必要的工 具和试剂等。
[0044] 优选的是，所述人服Ρ90 α -1体外诊断试剂盒采用本发明的人服Ρ90 α -1单克隆 抗体作为包被抗体。在此，术语"包被抗体"是指包被于固相的酶标板上的抗体。此外，所 述人服Ρ90 α -1体外诊断试剂盒还优选包含人服Ρ90 α -1多克隆抗体W作为结合抗体，其 中，当所述结合抗体来源于本发明的人服Ρ90α-1抗原表位肤（1)和（2)中的一者时，所述 包被抗体来源于所述抗原表位肤（1)和（2)中的另一者。在此，术语"结合抗体"是指试剂 盒中可与待测抗原及酶标记的抗抗体结合的特异性抗体。所述试剂盒还可W包含酶标记的 抗抗体，该抗抗体可W为羊抗兔IgG抗体，所述酶标记可W为辣根过氧化物酶、碱性磯酸酶 等。
[0045] 在本发明的试剂盒中，还可W包含检测所需的任何试剂或工具，例如预包被板、洗 涂液、显色剂、终止液等。
[0046] W下通过例子的方式进一步解释或说明本发明的内容，但送些例子不应被理解为 对本发明的保护范围的限制。
[0047] 实施例
[0048] 除非另有说明，W下所述溶液均为水溶液，溶液中的百分数均为体积百分数。
[004引实施例1 ;服P90 α -1抗原表位肤（1)和似的制备。
[0050] 制备方法用化学合成法：利用美国ΑΒΙ431Α型多肤自动合成仪，通过固相法分别 合成服Ρ90 α -1抗原表位肤（1)和（2)。抗原表位肤的纯度用高效液相色谱进行评定，并测 定肤段的浓度。本发明的抗原表位肤（1)和（2)的分子量分别为1898. 9U2483. 39,利用质 谱进行确定，通过多肤序列测定鉴定所合成的多肤序列。
[005。 一、服Ρ90 α -1抗原表位肤（1)和似的合成
[0052] 上述肤段采用固相法合成。固相肤合成的主要思想是：先将所要合成肤链的駿基 末端氨基酸的駿基W共价键形式同一个不溶性的高分子化合物（树脂）相连接，然后W此 结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份，经过脱去氨基保护基并同过量的活化駿基组份 反应，接长肤链。送样的步骤可W反复地多次进行下去，最后达到所需要合成的肤链的长 度。送个合成过程如下所示。
[0053]
[0054] 本发明的服Ρ90 α -1抗原表位肤（1)和似的各自的具体制备步骤如下：
[00财 1.所用原料：
[005引 HMP树脂（P-居甲基苯氧甲基多聚己帰树脂，可购自sigma公司）
[0057] Fmoc-AA (9-巧基甲氧撰醜基保护的氨基酸，可购自Merck公司）
[005引 NMP(氮甲基[]比咯焼丽，可购自sigma公司）
[0059] DCM(二氯甲焼，可购自中原化工公司）
[0060] MeoH(甲醇，可购自中原化工公司）
[0061] 脈巧（Piperidine,可购自 sigma 公司）
[0062] DMAP(二甲基氨基[]比巧，可购自sigma公司）
[0063] H0BT (居基苯并Η哇，可购自sigma公司）
[0064] DCC (二环已基碳二亚胺，可购自sigma公司）
[006引 TFA( Η氣己酸，可购自sigma公司）
[0066] 邸T (1,2-己二硫醇，可购自sigma公司）
[0067] 硫代苯甲離，可购自广州伟伯化工有限公司
[006引结晶苯酪，可购自国药集团化学试剂有限公司 [006引己腊，可购自国药集团化学试剂有限公司 [0070] 2.使用仪器：
[007。 多肤自动合成仪，型号431A，可购自ABI公司
[0072] 旋转蒸发仪，型号R - 201，可购自上海申顺公司
[0073] 高效液相色谱仪，Waters 600,可购自美国Waters公司
[0074] 冷冻干燥机，型号V抑-2000,可购自北京博医康公司 [00巧]3.合成方法和过程：
[0076] 称取HMP树脂lOOmg，取代当量是1. Omeq，即将0.1 mmol置于美国ABI431A型多肤 自动合成仪的反应腔内，由合成仪自动将特定的氨基酸按不同的顺序连接起来，偶联率达 99%。反应如下：
[0077] (1)氨基酸的活化（HOBt/DCC法）
[0078]
[0081] (2)连接氨基酸到树脂上
[0082]
[0089] 新的偶联的肤一树脂
[0090] (6)重复步骤（3)至（5)直至合成结束。
[00川分别得到服P90 α -1肤段（1)的肤树脂214mg和服P90 A-1肤段似的肤树脂 178mg0
[009引 （7)裂解肤树脂：
[009引用TFA ( Η氣己酸）切割肤链，用邸T化5体积％ )、硫代苯甲離（2. 5体积％ )作 清除剂，在室温下反应3. 0小时，除去切割试剂，再用己離萃取，分别得到服Ρ90 α -1肤段 (1)和似的粗品。
[0094] 二、服P90 α -1抗原表位肤（1)和似粗品的纯化：
[0095] 采用高效液相色谱分离纯化：
[009引条件泡谱柱；C8 10X 100mm，可购自美国Waters公司
[0097] 色谱仪；Waters 600,美国 Waters 公司
[0098] 流动相；A ;0. 1 % TFA ( Η氣己酸）水溶液
[0099] B;0.1%TFA(H氣己酸）于60%己腊
[0100] 检测波长；214nm
[010。 流速；4ml/分钟
[0102] 洗脱梯度；20-60 % B，30分钟
[0103] HPLC (高效液相色谱）分析
[0104] 色谱柱；C18 4. 6X 150mm，可购自美国Waters公司 [010引流动相；A ;0. 1 % TFA ( Η氣己酸）水溶液
[0106] Β ;0. 1% TFA(H氣己酸）于己腊
[0107] 检测波长；214nm
[0108] 流速；1ml/分钟
[0109] 洗脱梯度；0-60 % B，30分钟
[0110] 肤段分析结果显示本发明的服Ρ90α-1抗原表位肤（1)和（2)的纯度均为95%W 上。
[01川 H、服Ρ90α -1抗原表位肤（1)和似的鉴定
[0112] 1.利用质谱分别测定纯化所得的HSP90 α -1抗原表位肤（1)和（2)的分子量。
[011引 （1)试剂原料
[0114] TFA( Η氣己酸，可购自sigma公司）
[0115] 肥CA( α -氯基-4-居基肉桂酸，可购自sigma公司）
[0116] 己腊（可购自国药集团化学试剂有限公司）
[0117] 似仪器
[0118] 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪MLDI-T0F-MS(型号；REFLEX III，德国 化址er公司）