预处理后提取其RNA，并通过半定量PCR检测环氧合酶1、环氧合酶2 mRNA表达；(/0J2骨髓源性巨噬细胞经过与(义幻一致预处理后，通过免疫印迹实验检测环氧合酶I蛋白表达水平，GAPDH作为对照组。
[0029]数据代表了 3个独立的实验。p〈0.05 (t检验)，在三个独立的实验中得到相似的结果:ρ〈(λ 05并且Ρ〈0.01 (t检验)参见图11图12。
[0030]图11显示为短时间预处理受体激动剂并没有改变I型干扰素及其下游基因的表达。
[0031]图12显示为RXR和RAR激动剂诱导环氧合酶I的表达。
[0032]图6显示为环氧合酶I调节RXR对干扰素产生的抑制作用:CA)环氧合酶I和环氧合酶2的标准化探针强度基因数据如图4A所示。根据430.2基因芯片的设计，标准化探针强度与基因的绝对复制呈正相关。基因表达数据表现为均数土标准差(** ^0.0Lt检验);(B)J2骨髓源性巨噬细胞给予DMSO或9cRA预处理或者在9cRA中加入环氧合酶1/2泛抑制剂吲哚美辛/双氯芬酸(1nM)处理24小时后转染lug/mlpoly I:C2小时或4小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测干扰素I和干扰素4mRNA表达；(O J2骨髓源性巨噬细胞转染对照组干扰RNA、干扰环氧合酶1、干扰环氧合酶2、干扰环氧合酶1&2，24小时后给予DMSO或9顺式维甲酸预处理16小时，转染lug/mlpoly I:C2小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测干扰素4mRNA表达；(仍J2骨髓源性巨噬细胞给予DMSO或9顺式维甲酸或者在9顺式维甲酸中加入环氧合酶I特异性抑制剂SC560 (1nM)或加入环氧合酶2特异性抑制剂NS398 (1nM)预处理24小时后，转染lug/mlpoly I:C2小时或4小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测干扰素4mRNA表达；(幻来自于野生型的原代骨髓源性巨噬细胞或环氧合酶I敲除的小鼠给予DMS0、9顺式维甲酸、HX531预处理72小时后(每24小时更换培养基并增加配方)转染lug/mlpoly I:C4小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测干扰素I和干扰素4mRNA表达；(/0病毒感染通过病原体识别受体下游信号来激活干扰素调节因子3，然后引起多个抗病毒基因的转录。同时干扰素调节因子3的激活抑制核受体RXR，通过诱导环氧合酶I抑制抗病毒基因的表达。
[0033](B-F)数据表现为均数土标准差(η = 3)，上图作为其代表性实验。在三个独立的实验中得到相似的结果< 0.05且< 0.01 (t检验)
图13显示为在9顺式维甲酸预处理组以及Poly 1:C激活巨噬细胞组，环氧合酶I在前列腺素(PGE2)生物合成中起主要作用:(A)将Coxl或Cox2进行梯度稀释，以其作为模板，分别进行qPCR。结果显示Coxl及Cox2标准曲线中扩增循环值(Ct值)及拷贝数可得出该细胞模型中环氧合酶I及环氧合酶2的绝对表达量；(B) J2骨髓源性巨噬细胞在9顺式维甲酸预处理16小时后，转染lug/mlpoly I:C2小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测环氧合酶I以及环氧合酶2的绝对表达量(标准曲线如图13A所示)，两个独立实验的实验数据已在图中显示；(C) J2骨髓源性巨噬细胞在转染空白对照(siRNA)，s1-Coxl,s1-Cox2或s1-Coxl与s1-Cox224小时后，随后用DMSO或9顺式维甲酸处理16小时后，再转染lug/mlpoly 1:C2小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测环氧合酶ImRNA及环氧合酶2mRNA的绝对表达量(D)野生型细胞或Coxl缺失型J2骨髓源性巨噬细胞在DMS0，9cRA或HX531处理16小时后，转染lug/mlpoly I:C2小时后提取其RNA并通过半定量PCR检测Ifn β mRNA表达量。(E) J2骨髓源性巨噬细胞在DMSO或9cRA处理16h后，收集细胞上清液，ELISA检测PGE2表达量。(F) J2骨髓源性巨噬细胞用DMSO或9cRA预处理16h，收集上清作为对照组。随后，在指定时间转染lug/ml poly 1:C，通过ELISA检测对照组与poly I:C转染组上清中PGE2表达量。
[0034]iC-F)数据表现为均数土标准差(n=3)，上图作为其代表性实验。在三个独立的实验中得到相似的结果:*/"< 0.05且** P< 0.01 (t检验)
【具体实施方式】:
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的【具体实施方式】加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
[0035]在进一步描述本发明【具体实施方式】之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围；在本发明说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。
[0036]当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
[0037]除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规的分子生物学、生物化学、染色质结构和分析、分析化学、细胞培养、重组DNA技术及相关领域的常规技术。这些技术在现有文献中已有完善说明，具体可参见Sambrook等 MOLECULAR CLONING:A LABORATORY MANUAL, Second edit1n，Cold Spring HarborLaboratory Press,1989 and Third edit1n,2001 ；Ausubel 等，CURRENT PROTOCOLSIN MOLECULAR B1LOGY， John Wiley & Sons， New York,1987 and per1dic updates ；the series METHODS IN ENZYM0L0GY， Academic Press, San Diego ；ffolffe, CHROMATINSTRUCTURE AND FUNCT1N, Third edit1n， Academic Press, San Diego，1998 ;METH0DSIN ENZYM0L0GY，Vol.304，Chromatin (P.M.Wassarman and A.P.ffolffe, eds.)，AcademicPress, San Diego,1999 ；和 METHODS IN MOLECULAR B1LOGY, Vol.119，ChromatinProtocols (P.B.Becker, ed.) Humana Press, Totowa, 1999 等。
[0038]核受体超家族(nuclear receptor superfamily)是一组配体激活的转录因子家族，通过在信号分子与转录应答间建立联系，调控着细胞的生长和分化。RXR在抵御病毒感染的宿主防御中的作用仍然是未知的。我们发现RXR的过度表达以及其配体的刺激会导致宿主细胞的易感性的水泡口炎病毒VSV的功能缺失或RXR拮抗剂治疗使其病毒感染。与这些功能型研究相一致的是，配体刺激RXR在巨噬细胞显著抑制抗病毒基因的表达，其中包括一型干扰素以及多种干扰素刺激基因。我们的研究已经提供了进一步证据表明，COXl在RXR刺激巨噬细胞中显著诱导产生，介导RXR对一型干扰素的抑制作用，因此我们发现了一种新型的RXR-Cox-1依赖性途径，其在抑制一型干扰素-调节抗病毒免疫中起到重要作用。这说明，RXR在病毒感染的自身免疫反应中通过下调其表达来抑制抗病毒基因的表达，并在宿主抗病毒反应中起到优势作用。
[0039]各实施例中所使用的RAW264.7细胞系从ATCC公司购得，并给与DMEM加百分之十的FBS以及百分之一的青霉素或链霉素共同培养。RAW264.7细胞系从ATCC公司购得，并给与DMEM加百分之十的FBS以及百分之一的青霉素或链霉素共同培养。
[0040]本发明实施例中所使用的水泡型口炎病毒毒株(毒株编号)由UCLA的Lee博士提供。
[0041 ] 将RAW264.7细胞植入6孔板中铺成6*105，给予DMSO或RXR激动剂或RXR拮抗剂处理16-24小时。病毒传播同之前描述的一致(Doyle等2002)。在培养基中细胞感染VSV(感染复数=0.01) I小时后，重新更换含有百分之一胎牛血清的DMEM。VSV-G假病毒包含reniila荧光素酶受体由UCLA的Lee博士提供。感染方式同前描述一致，并由荧光素酶检测试剂盒进行定量检测(Promega)。
[0042]稳定的细胞系的构建方法:人RXR克隆到pBABE -嘌呤霉素逆转录载体中，重组pBABE-人RXR，pBABE空载体，或pBABE-人RXR共转染载体psiA48小时。收集病毒上清液用来将人RXR转换为RAW264.7或F9胚胎癌细胞。感染细胞通过嘌呤