人体bmr（基础代谢率）检测试剂盒和计算方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及基因检测，具体涉及人体BMR基因检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 基础代谢率是指在自然温度环境中，人体在非活动的状态下(包括消化系统，即禁 食两个小时W上)，维持生命所需消耗的最低能量。送些能量主要用于保持各器官的机能， 如呼吸(肺)、必跳(必脏)、腺体分泌(脑及其他神经系统)、过滤排泄（肾脏)、解毒(肝脏)、肌 肉活动等等。基础代谢率会随着年龄增加或体重减轻而降低，而随着肌肉增加而增加。疾 病、进食、环境温度变化、承受压力水平变化都会改变人体的能量消耗，从而影响基础代谢 率。
[0003] 基础代谢率不同决定了人体每天消耗的热量不同，因此如果要通过饮食来减肥， 则必须摄入能量< 消耗能量。同时，基础代谢率还决定了人体在不同的运动强度下消耗能 量的不同，因此在健身运动过程当中，如果强度过大导致能量消耗过多，会引发诸多不健康 甚至有害的病患。
[0004] BMR是人体各器官、组织能量消耗的指数，因此和基因密切相关。目前各种BMR的 计算方法主要是通过统计的方法，借助相应仪器而进行，无法反应个体间的差异。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明提供了一种BMR基因检测试剂盒，该试剂盒对受测者的相关基 因进行检测，分析得到其体内代谢水平，并计算基于基因信息的BMR数值，且PCR扩增反应 在同一台PCR仪上同步进行并具备检测的高效性、特异性。
[0006] 一种BMR基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包括： (1) 针对2个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS16892496的引物组： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 针对SNP RS7832552的引物组： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0007] 本发明提供的BMR基因检测试剂盒的有益效果是；通过PCR引物的设计使多个 PCR扩增反应在同一台PCR仪上同步进行，对受测者的相关基因进行检测，并实现检测的高 效性、特异性，分析得到其BMR的遗传因素，从而为受测者获得一个合适的健康方案，了解 自身的代谢水平，指导其科学合理的运动强度和日常饮食管理，在健身运动和减肥中采取 相应的策略避免对其无效甚至是有害的方法。
【附图说明】
[0008] 图1是反应产物琼脂糖凝胶电泳图。
【具体实施方式】
[0009] BMR基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包括： (1) 针对2个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS16892496的引物组： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 针对SNP RS7832552的引物组： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0010] 下面将结合实施例对本发明提供的方法予W进一步的说明。
[0011] 测试者基本状况为；男性，身高175cm，体重100公斤。本实施例对测试者采用BMR 基因检测试剂盒同时检测2个基因的SNP多态位点，并根据基因分型结果，分析得到其 BMR的遗传因素，从而为受测者获得一个合适的健康方案，了解自身的代谢水平，指导其科 学合理的运动强度和日常饮食管理，在健身运动和减肥中采取相应的策略避免对其无效甚 至是有害的方法。
[0012] 使用到的BMR基因检测试剂盒内试剂由W下组成： (1)针对2个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS16892496的引物组： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 针对SNP RS7832552的引物组： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2)PCR扩增试剂；lOXPCR缓冲液，该PCR缓冲液为lOOmM Tris-肥1 p册.3,500mM KCl，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，该dNTPs混合物为Η磯酸鸟嘿岭脱氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿岭脱氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脱氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脱氧核巧酸 dCTP四种核巧酸，各组分浓度为2. 5mM ;5υ/μ 1热启动Taq酶。
[001引（3)琼脂糖凝胶电泳分析试剂谅脂糖、TAE缓冲液、DNA分子量标准、Goldview 染色液和DM上样缓冲液，该缓冲液W漠酪藍为指示剂稀释至IX后使用。
[0014] 使用上述BMR基因检测试剂盒按如下步骤进行检测： (1)提取样本基因组DNA。
[0015] 采集该测试者唾液，向l-2ml唾液样品中加入500ul提取缓冲溶液，该DNA提取 缓冲溶液溶剂为50mM的化is-肥1 pH7. 4、0. 5mM的邸TA和50mM的化C1，反复吹打混匀 后，8000Xg离必5分钟，弃去上清，此步骤重复一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 该裂解液溶剂为 50mM Tris-肥 1 pH7. 4,50mM Tris-肥 1 pH7. 4，150mM 化Cl，lmM 邸TA，1% Triton χ-100，1% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,蛋白酶 K20mg/mL,彻底悬浮沉淀并 充分混匀后，室温放置30分钟，期间来回颠倒离必管数次；得到的混合液中，加入浓度为 lOmg/mLRNA酶的水溶液10 μ L，37°C下静置lOmin ;得到的上清液中，加入等体积苯酪-氯 仿混合溶液，苯酪和氯仿体积比为1 : 1，充分混匀，混合液4°C，12000Xg离必5分钟，上清 液移入干净离必管内；加入等体积苯氛-氯仿-异戊醇混合溶液，苯酪、氯仿和异戊醇体积 比为25 : 24 : 1，充分混匀后，4°C，12000Xg离必5分钟，上清液移入干净离必管内；加 入等体积氯仿-异戊醇混合溶液，充分混匀后，4°C，12000Xg离必5分钟，上清液移入干 净离必管内；加入0. 6倍体积的冰浴异丙醇溶液及0. 1倍的3mol/L醋酸钢溶液，-2(TC静 置60分钟后，4°C，12000 X g离必10分钟，弃上清液；得到的沉淀物中