植物生长的增强的制作方法

专利名称：：植物生长的增强的制作方法
技术领域：
：本发明涉及增强植物的生长。
背景技术：
：几个世纪以来，人们已经知道并实行施用有机肥料来改善植物生长(H.Marschner，"MineralNutritionofHigherPlants,"AcademicPress:NewYork第674页(1986))。现代人类已经发展了复杂的无机肥料生产系统，生产出栽培者和农民可以施用于土壤或生长中的作物、通过增强生长来改善生产性能的易用产品。通过施用肥料产品，植林大小、着色、成熟和产量都可以得到改善。无机肥料包括普遍使用的化学品如硝酸铵。有机肥料可以包括厩肥和堆肥草渣(compostedlawndebris)以及许多其它资源。在最近几年，研究者已经寻求通过使用生物制品来改善植物生长。^口白j量菌(5eawven'a6asw'awfl)-口7h'c/oc/er附a/^n'zawww的病虫害防治剂已经注册用于防治病虫害问题，并因此间接改善植物的生长及生产性能(Fravel等人，"防治植物病害的微生物制剂，"FormulationofMicrobialBiopesticides、BeneficialMicroorganisms,andNematodes.H.D.Burges编辑，ChapmanandHaU:London(1996))。现在有一些通过应用微生物或微生物副产品来直接增强植物生长的迹象。人们已经在将豆科作物的种子引入一个新生境(site)时，向其加入结瘤细菌(Weaver等人，"根瘤菌(A/z/zo6z'ww)，，，MethodsofSoilAnalysis,第2部分，ChemicalandMicrobiologicalProperties,第二版，AmericanSocietyofAgronomy:Madison(1982))。这些纟田菌可以改善植物的结瘤效率，并因此改善植物将游离氮转化为一种可利用形式的能力(这个过程叫固氮作用)。通常非豆科作物并不从这样的处理中受益。加入的细菌如根瘤菌(W/2/Z0^WW)直接寄生于根毛，然后开始一种互利共生关系提供给植物好处，同时获得保护与支持。菌根真菌被认为是许多作物(特别是在营养缺乏的土壤中的针叶树)随意生长(optionalgrowth)所必需的徵生物。人们已经提出了包括植物激素的生物合成(Frankenberger等人，'DEctomycorrhizal真菌彩色豆马勃(尸^o/"/zw生物合成吲哚-3-乙酸，"Appl.Environ.Microbiol.53:2908-13(1987))、矿物质的摄入增加(Harley等人，"切下的山毛榉的菌根根摄入磷酸盐,"NewPhytologist49:388-97(1950)和Harley等人，"切下的山毛榉的菌根根摄入磷酸盐，IV.氧浓度对宿主和真菌的影响，"NewPhytologist52:124-32(1953))和水的摄入增加(A.B.Hatch,"松属(尸/m^)菌根营养的物理基础，"BlackRockForestBull.No.6，第168页(1937))等机制。由于对于任何给定的菌根菌抹都有可变和不一致的结果，以及对这类生物研究的困难，菌根真菌并未获得象结瘤细菌一样的使用频率。近年来已经认定植物生长促进根瘤细菌("PGPR")能改善植物的生长和发育。假说的机制从直接影响(如营养摄入增加)到间接机制(如病原体排代(pathogendisplacement)置换)都有。应用PGPR得到的生长增强通常是指将一种活细菌接种到根系统，通过細菌产生的激素作用、铁载体获得改善的生长，或通过产生抗生素或竟争而预防病害，从而获得改善的生长。在所有上面的情况中，结果都是通过根定居，有时是通过应用种子包被产生的。有有限信息表明，一些PGPR菌株可能是直接的生长促进剂，在悉生条件下增强根的延长(Anderson等人，"在水培系统中菜豆对恶臭假单胞菌(尸"w^wortas^"&)根部定居的应答,"Phytopathology75:992-95(1985),Lifshitz等人，"在悉生条件下恶臭假单胞菌菌抹对Canola(油菜籽)幼苗的生长促进作用，"Caiki^Mfimbiol33:390-95(1987),Young等人，"PGPR:在植物生长调节剂和植物生长刺激或生物活性之间有关系吗？,"PromotingRhizobacteria:ProgressandProspects.SecondInternationalWorkshoponPlantGrowth-promotingRhizobacteria,第182-86页(1991)，Loper等人，"吲哚-3-乙酸的细菌来源对糖甜菜根延伸的影响,"Phytopathology76:386-89(1986)，和MiiHer等人，"玉米(Zeama_^丄.)根际中的激素相互作用以及它们对植物发育的作用，，，PflanzenernahrungBodenkinde152:247-54(198Q));然而，也有人已经提出植物生长调节剂的产生是介导这些作用的机制。许多细菌在体外产生各种植物生长调节剂(Atzorn等人,"菜旦根瘤菌(i/z/z。6/画//2a化o/)产生赤霉素和吲哚-3-乙酸与尸/^化o/wvw/g"n、根部结瘤有关，"Planta175:532-38(1988)和M.E.Brown，"固体和根际微生物(MicroorganismofSolidandRhizosphiere)产生的植物生长刺浮t素，"LAppl.Bact.35:443-51(1972))或抗生素(Gardner等人，"产生抗生素的荧光假单胞菌对柑桔类根部的生长促进和抑制，"PlantSoil77:103-11(1984))。铁载体的产生是针对一些PGPR菌株提出的另一种机制(Ahl等人，"参与荧光假单胞菌(i^e^fcwowoyy7wor^ce""菌株对根串珠霉(77^^//0尸^6aw'co/a)抑制的铁结合铁载体、氰酸和抗生素,"LPhyt叩athol.116:121-34(1986),Kloepper等人，"促进植物生长的根瘤细菌产生的铁载体增强植物生长，，'Nature286:885-86(1980),和Kloepper等人，"假单月包菌铁载体(/^ez^iomo"w^Wero;/jomy):解释病害抑制性土壤的机制，"Curr.Microbiol.4:317々0(1980))。在根表面定居并因此在表面与病原细菌直接竟争是另一种作用机制(Kloepper等人，"促进植物生长的根瘤细菌在体外对植物生长的抗生作用和根部微生物区系的排代作用的关系,"Phytopathology71:1020-24(1981)，Weller等人，"通过用荧光假单胞菌处理种子提高小麦的生长以及腐霉属(/y/2/wm)防治的含意，"Can.J.Microbiol.8:328-34(1986)，和Suslow等人，"糖甜菜的根瘤细菌种子施肥和根部定居对产量的影响,"Phytopathology72:199-206(1982))。Canola(油菜籽)研究已经表明PGPR增强植物的生长参数，包括产量、出苗率和活力、早季植物生长(叶的数目和主长匐技的长度)以及叶面积(Kloepper等人，"Canola(油菜籽)上促进才直物生长的根瘤细菌，"PlantDisease72:42-46(1988))。对土豆的研究表明，当将假单胞菌属CP"Womomy)菌株应用于种用马铃薯时，产量提高(Burr等人，"用特殊的荧光假单胞菌CP化i^owo"oyF/womycew)和恶臭假单胞菌CP.PwfW力菌株处理块茎提高马铃薯的产量,"Phytopathology68:1377-83(1978),Kloepper等人，"块茎接种促进植物生长的根瘤细菌对马铃薯根部上和子块茎中胡萝卜软腐欧文氏菌(￡rw/m'acaratowra)群体的作用，"Phytopathology73:217-19(1983),Geels等人，"在用拮抗的种名待定的荧光假单胞菌(Fluorescent尸化t^owo"oyspp.)处理种用块茎后使高频马铃薯种植土壤中的产量降低还原，"Phytopathol.Z.108:207-38(1983)，Howie等人，"根瘤细菌栽培品种和土壤类型对马铃薯的植物生长和产量的影响，"SoilBiol.Biochem.15:127-32(1983)，和Vrany等人，"接种根际细菌的马铃薯植抹的生长和产量，"FoliaMicrobiol.29:248-53(1984))。增产明显地是由于PGPR的竟争作用(有可能是抗生作用)除去了种用块茎上的病原细菌(Kloepper等人，"块茎接种促进植物生长的根瘤细菌对马钤薯根部上和子块茎中胡萝卜软腐欧文氏菌群体的作用，"Phytopathology73:217-19(1983)，Kloepper等人，"促进植物生长的根瘤细菌在根际定居对马钤薯植物发育和产量的作用，"Phytopathology70:1078-82(1980),Kloepper等人，"促进出土的根瘤细菌对于农业的描述和含意，"第155-164页，IronfSiderophores.andPlantDisease.T,R,Swinburne编辑,Plenum,NewYork(1986)，和Kloepper等人，"促进植物生长的根瘤细菌对植物生长的抗生作用和根徵生物区系的排代作用的关系，"Phytopathology71:1020-24(1981》。在一些研究中，使用PGPR后植抹的出土得到改善(Tipping等人，"促进出土的根瘤细菌对于超甜玉米的发育,"Phytopathology76:938-41(1990)(搞要)和Kloepper等人，"促进出土的根瘤细菌对于农业的描述和含意,"第155-164页，Iron.Siderophores:andPlantDiseaseT.R.Swinburne编辑,Plenum,NewYork(1986))。许多其它研究表明，用根瘤细菌处理后，由于对植物病原体进行生物防治，植物健康得到改善(B.Schippers，"用根瘤细菌生物防治病原体,"Phil.Trans.R.Soc.Lond.B.318:283-93(1988),Schroth等人，"病害抑制性土壤和根部定居的细菌，，，Science216:1376-81(1982)，Stutz等人，"参与抑制烟草青霉病的天然存在的荧光假单胞菌，"Phytopathology76:181-85(1986)，和D.M.Weller，"用细菌生物防治根际中的土传植物病原体，，，Annu.Rsv.Phytopathol.26:379-407(l柳))。已经发现对植物的病原体诱导的免疫促进生长。外部注射Pera"o^orato6acz>w到烟草木质部不仅減轻矮化，而且促进生长和发育。免疫后的烟草植物在温室试验和大田试验中，比对照植物约高40%，干重增加40%，鲜重增加30%，并多4-6片叶子(Tuzun,S.等人，"茎注射尸ero"cw;orato6a"Vw并且进行Metalaxyl处理对大田中烟草生长和抵抗青霉病的保护作用的影响,"Phytopathology,74:804(1984))。这些植株大约比对照植株早升花2-3周(Tuzun，S.等人，"系统保护抵抗青霉病的因子在接种尸era"os/orato&d;wAdam的烟草中的运动，"PhysiologicalPlantPathology.26:321-30。985、、。本发明涉及在先前的植物生长增强方法范围内的改进。发明概述本发明涉及一种增强植物生长的方法。这种方法涉及在一定条件下施用非感染型的过敏反应诱发剂(elicitor)多肽或蛋白于植物或植物种子，以赋予所述植物或由所述植物种子长成的植物以增强的生长。为赋予植物或由植物种子长成的植物以增强的生长，除施用过敏反应诱发剂多肽或蛋白于所述植物或所述植物种子外，一种可以选择的方法是可以利用转基因植物或植物种子。当利用转基因植物时，这涉及到提供用编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化的转基因植物，并在有效允许所述DNA分子增强生长的条件下培育所述植物。用另一种方法，可以提供用编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化的转基因植物种子并种植在土壤中。然后在有效允许所述DNA分子增强生长的条件下，由种植的种子繁殖出植物。本发明的目标在于产生任<可形式的植物生长增强或促进。这可以发生在早至从种子开始的植物生长，迟至植物的生活中。例如，依照本发明的植物生长包括产量更高、所产生种子的质量提高、种子发芽率提高、植物大小增加、生物量更高、果实更多和更大、果实着色更早、以及果实和植株成熟更早。结果是本发明为栽培者提供显著的经济效益。例如，早发芽和早成熟使得作物能够生长在生长季节短暂的地区，而在其它情况下短暂的生长季节会阻碍它们在当地的生长。种子发芽率的提高导致改善的作物林分(stand)以及更有效的种子使用。产量更高、大小增加和生物量生产增强使得给定的小块土地上年产出(revenuegeneration)更髙。因此显然，本发明抅成农业效率上的一个显著进步。附图筒述图1是质粒载体pCPP2139的图，所述质粒载体包含解淀粉欧文氏菌(五rvW"/a<aw_y/ovora)过每t反应诱发剂基因图2是质粒pCPP50的图，所述质粒载体不包含解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂基因，但其它方面则与图1所示的质粒载体pCPP2139相同。参见Masui等人，Bio/Technology2:81-85(1984)，特此通过引用结合到本文中。发明详述本发明涉及一种增强植物生长的方法。这种方法涉及在一定条件下将非感染型的过敏反应诱发剂多肽或蛋白施用于整株植物或植物部分、或施用于植物种子，以赋予所述植物或由所述植物种子长成的植物以增强的生长。或者，可以用这种方法处理植物来产生种子，然后种下种子，赋予子代植物增强的生长。为赋予植物或由植物种子长成的植物以增强的生长，除施用过敏反应诱发剂多肽或蛋白于所述植物或所述植物种子外，一种可选择的方法是利用转基因植物或植物种子。当利用转基因植物时，这就涉及到提供用编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化的转基因植物，并在有效允许所述DNA分子增强生长的条件下培育所述植物。或者，可以提供用编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化的转基因植物种夺并浙其种植在土壤中。然后在有效允许所述DNA分子增强生长的条件下，从所述种植的种子繁殖出植物。本发明中利用的过敏反应诱发剂多肽或蛋白可以对应于由广泛种类的真菌病原体或细菌病原体得到的过敏反应诱发剂多肽或蛋白。这样的多肽或蛋白能在所述诱发剂接触的植物組织中诱发(dicit)局部坏死。合适的多肽或蛋白诱发剂的细菌来源的例子包括欧文氏菌属、假单胞菌属以及单胞菌属(如下列细菌解淀粉欧文氏菌、萄欧文氏菌c/z^sa"f/zem/)、斯氏欧文氏菌(五rvWm'aWevpaW/)、胡萝卜软腐欧文氏菌、丁香假单胞菌(i^ew^mo"w^n、gae)、茄假单胞菌(尸化W(iomo"asso/a"ce(37-ww)、野油菜黄单月包菌(vY"a"f/2omo"oscawpeWn》及它们的组合)。过敏反应诱发剂多肽或蛋白的真菌来源的一个例子是疫霉属CP—top/zf/zora)，合适的疫霉属幹包括Pto;7;^/20rap"Www、隐地疫霉(尸/z,/7她orac/yptogea)、樟瘦霉(尸/z7鄉/z^zoracz'朋調簡/)、辣椒疫霉(P/7yf0p脑0raca拜'ci)、大维疫霉(P一0;/7/20rawegos/ema)以及柑桔褐腐疫霉(/V^to;/zz^ora。可以用多种方法实施本发明的将过敏反应诱发剂多肽或蛋白施用于植物或植物种子的实施方案，包括l)施用一种分离的诱发剂多肽或蛋白；2)施用不致病并且用编码过敏反应诱发剂多肽或蛋白的基因转化的细菌；以及3)施用在一些植物种中致病(但并不在其所施用的物种中致病)、并且天然包含編码所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白的基因的细菌。另外，从用依照本发明的过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的植株上，可以回收依照本发明的种子。在本发明的一个实施方案中，所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白可以从它们相应的生物中分离得到，并施用于植物或植物种子。这样的分离程序是广为人知的，如Arlat，M.，F.VanGijsegem，J.C.Huet，J.C.Pemollet,和C.A.Boucher,"PopAl，为在特殊牵牛花基因型中诱导过敏样反应的一种蛋白，它通过茄假单胞菌的Hrp途径分泌,"EMBOJ.13:543-553(1994);He,S.Y.,H.C.Huang,和A.Collmer,"丁香假单月包菌丁香致病变种(尸5^wd0w0"wsy〃'"gaepv.iS)W"gae)的harpinpss:通过Hrp途径分泌、并在植物中诱发过敏反应的一种蛋白，"Cdl73:1255-1266(1993);和Wei,Z.-M.,R.J.Laby,C.H.Zumoff,D.W.Bauer，S.—Y.He，A.Collmer,和S.V.Beer,"由植物病原体解淀粉欧文氏菌产生的过敏反应的harpin诱发剂，"Sdmcs257:85-88(1992)所述，特此通过引用结合到本文中。还可参见未决的美国专利申请序号08/200,024和08/062,064，特此通过引用结合到本文中。然而,本发明分离得到的过敏反应诱发剂多肽或蛋白最好如下所述重组产生并纯化。在本发明的其它实施方案中，可以通过施用包含编码过敏反应诱发剂多肽或蛋白的基因的细菌，将本发明的过敏反应诱发剂多肽或蛋白施用于植物或植物种子。这样的细菌必须能够分泌或输出所述多肽或蛋白，以便所述诱发剂能接触植物细胞或植物种子细胞。在这些实施方案中，所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白由所迷細菌在植株中或种子上产生，或恰好在将所述细菌引入所述植物或植物种子之前产生。在本发明的细菌应用模式的一个实施方案中，所述细菌并不致病，并且已经用编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的基因转化(如通过重组)。例如，大肠杆菌并不在植物中诱发过敏反应，可以用編码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的基因转化大肠杆菌，然后将其施用于植物。大肠杆菌外的其它细菌物种也可用于本发明的这个实施方案中。在本发明的细菌应用模式的另一个实施方案中，所述细菌致病，并且天然包含编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的基因。这样的细菌的例子已经在上面提过。然而，在该实施方案中，这些细菌施用于对所述细菌导致的疾病并不易感的植物或其种子。例如，解淀粉欧文氏菌在苹果或梨中致病，但并不在番茄中致病。然而，这样的细菌会在番茄中诱发过敏反应。因此，依照本发明的该实施方案，解淀粉欧文氏菌可以施用于番茄植株或种子以增强生长，而不会在该物种中致病。得自萄欧文氏菌的过敏反应诱发剂多肽或蛋白具有对应于SEQ.ID.No.1的氨基酸序列，如下所示MetGinlieThrlieLysAlaHis工leGlyGlyAspLeuGlyValSer1S10.isGlyLeuGlyAlaGinGlyLieuLysGlyLeuAsnSerAlaAlaSerSer202S30LeuGlySerSerValAspLysLeuSerSerThrlieAspLysLeuThr35404SSerAlaLeuThrSerMetMetPheGlyGlyAlaLeuAlaGinGlyLeu5055.SOGlyAlaSerSerLysGlyLeuGlyMetSerAsnGinLeuGlyGinSer65707580PheGlyAsnGlyAlaGinGlyAlaSerAsnLeuLeuSerValProLysS59035SerGlyGlyAspAlaLeuSerLysMetPheAspLysAlaLeuAspAsp100105110LeuLeuGlyHisAspThrValThrLysLeuThrAsxiGinSerAsnGin115120125LeuAlaAsnSerMetLeuAsnAlaSerGinMetThrGinGlyAsnMet130135140AsiiAlaPheGlySerGlyValAsnAsnAlaLeuSerSer工leLeuGly1451501S5ISOAsnGlyLeuGlyGinSerMetSerGlyPheSerGinProSerLeuGly1SS170175AlaGlyGlyLeuGinGlyLeuSerGl、yAlaGlyAlaPheAsnGinLeu18018SISOGlyAsnAla工leGlyMetGlyVal195200LeuSer210AspLys225GinTyrProGlu工lePheGlyLys245SerSerProLysThrAspAspLys2S0GlyGinAsnAlaAlaLeuSerAla205ProGluTyrGinLysAspGlyTrp25D255SerTrpAlaLysAlaLeuSerL>ys2S5270AsnValSerThrHisValAspGlyAsnAsnArgHisPheVal215220GluAspArgGlyMetAlaLysGlu工leGlyGinPheMetAsp230235240ProAspAspAspGlyMetThrGlyAlaSerMetAspLysPheArgGin275280285AlaMetGlyMetlieLysSerAlaValAlaGlyAspThrGlyAsnThr2302SS300AsnLeuAsnLeuArgGlyAlaGlyGlyAlaSerLeuGly工leAspAla305310315320AlaValValGlyAspLys工leAlaAsnMetSerLeuGlyLysLeuAla325330335AsriAla这种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的分子量为34kDa,对热稳定，其甘氨酸含量大于16%,并且基本不包含半胱氨酸。菊欧文氏菌的过敏反应诱发剂多肽或蛋白是由其核普酸序列对应于SEQ.ID.No.2的DNA分子编码，如下所示CGATTTTACCCGC3GTGAACGTGCTATGACCGACAGCATCACGGTATTCGACACCGTTACGSOGCGT丁TATGGCCGCGATGAACCGGCA丁CAGGCGGCGCGCTGGTCGCCGCAATCCGGCGTC120GATCTGGTATTTCAGTTTGGGGACACCGGGCGTGAACTCATGATGCAGATTCAGCCGGGG1B0CAGCAATATCCCGGCATGTTGCGCACGCTGC丁CGCTCGTCGTTATCAGCAGGCGGCAGAG240TGCGATGGCTGCCATCTGTGCCTGAACGGCAGCGA丁GTATTGATCCTCTGGTGGCCGCTG300CCGTCGGATCCCGGCAGTTATCCGCAGGTGATCGAACGTTTGTTTGAACTGGCGGGAA丁G3SOACGTTGCCG丁CGCTATCCATAGCACCGACGGCGCGTCCGCAGACAGGGAACGGACGCGCC420CGATCATTAAGATAAAGGCGGCTTTTTTTATTGCAAAACGGTAACGGTGAGGAACCCTTT480CACCGTCGGCGTCACTCAGTAACAAG丁ATCCA丁CATGA丁GCCTACA丁CGGGATCGGCGTG540GGCATCCGTTGCAGATACTTTTGCGAACACC了GACATGAATGAGGAAACGAAATTA丁GCASO0AATTACGA丁CAAAGCGCACATCGGCGGTGAT丁TGGGCGTCTCCGGTCTGGGGCTGGG丁GC"0TCAGGGACTGAAAGGAC丁GAAT丁CCGCGGCT丁CATCGC丁GGGTTCCAGCGTGGATAAACT720GAGCAGCACCATCGATAAGTTGACCTCCGCGCTGACTTCGATGATGT丁TGGCGGCGCGCT7B0GGCGCAGGGGCTGGGCGCCAGCTCGAAGGGGCTGGGGATGAGCAATCAACTGGGCCAGTC840TT丁CGGCAATGGCGCGCAGGG丁GCGAGCAACCTGCTATCCGTACCGAAATCCGGCGGCGA900TGCGT丁GTCAAAAATGTTTGATAAAGCGCTGGACGATCTGCTGGGTCATGACACCGTGAC960CAAGCTGAC丁AACCAGAGCAACCAACTGGCTAA丁TCAATGCTGAACGCCAGCCAGATGAC1020CCAGGGTAATA丁GAATGCG丁TCGGCAGCGGTGTGAACAACGCACTGTCGTCCATTCTCGG1080CAACGGTCTCGGCCAGTCGATGAG丁GGCTTCTCTCAGCCTTCTCTGGGGGCAGGCGGCTT1140GCAGGGCCTGAGCGGCGCGGGTGCATTCAACCAGTTGGGTAATGCCATCGGCATGGGCGT1200GGGGCAGPATGCTGCGCTGATAACGTCAGCACCCACGTAGACGGTAACAA12SOCCGCCACTTTGTAGA丁AAAGAAGATCGCGGCATGGCGAAAGAGATCGGCCAGTTTATGGA132QTCAGTATCCGGAAATATTCGGTAAACCGGAATACCAGAAAGATGGCTGGAGTTCGCCGAA13GACGGACGACAAATCCTGGGCTAAAGCGCTGAGTAAACCGGATGATGACGGTATGACCGG1440CGCCAGCATGGACAAATTCCGTCAGGCGATGGGTATGATCAAAAGCGCGGTGGCC3GGTGA1500TACCGGCAATACCAACCTGAACCTGCGTGGCGCGGGCGGTGCATCGCTGGGTATCGATGC1SS0GGCTGTCGTCGGCGATAAAATAGCCAACATGTCGCTGGGTAAGCTGGCCAACGCTTGATAATCTGTGC丁GGCCTGATAAAGCGGAAACGAAAAAAGAGACGGGGAAGCCTGTCTC丁TTTC0TTATTATGCGGTTTTiTGCGGTTACC丁GGACCGGTTAATCATCGTCATCGATCTGGTACAA1740ACGCACATTTTCCCGTTCATTCGCGTCGTTACGCGCCACAATCGCGA丁GGCA丁CTTCCTCIB00GTCGCTCAGATTGCGCGGCTGATGGGGAACGCCGGG丁GGAATATAGAGAAACTCGCCGGCCAGATGGAGACACGTC丁GCGATAAATCTGTGCCGTAACG丁GTTTCTATCCGCCCCTTTAG1S20CAGATAGA丁TGCGG丁T丁CGTAA丁CAACA丁GGTAATGCGGTTCCGCC丁GTGCGCCGGCCGGGATCACCACAATATTCATAGAAAGCTGTCTTGCACCTACCGTATCGCGGGAGATACCGAC2040AAAATAGGGCAGTTTTTGCGTGGTATCCGTGGGGTGTTCCGGCCTGACAATC丁TGAGTTGG丁TCGTCATCATCT丁TCTCCATCTGGGCGACCTGATCGGTT2141得自解淀粉欧文氏菌的过每殳反应诱发剂多肽或蛋白的氨基酸序列对应于SEQ.ID.No.3，如下所示MetSerLeuAsnThrSerGlyLeuGlyAlaSerThrMetGin工leSer1510IS工leGlyGlyAlaGlyGlyAsnAsnGlyLeuLeuGlyThrSer'ArgGin202530AsnAlaGlyLeuGlyGlyAsnSerAlaLeuGlyLeuGlyGlyGlyAsn354045GinAsnAspThrValAsnGinLeuAlaGlyLeuLeuThrGlyMetMetSOS5SO-MetMetMetSerMetMetGlyGlyGlyGlyLeuMetGlyGlyGlyLeu"707580GlyGlyGlyLeuGlyAsnGlyLeuGlyGlySerGlyGlyLeuGlyGlu8S30GlyLeuSerAsnAlaLeuAsnAspMetLeuGlyGlySerAsnThr100105110LeuGlyLieuThr145XjeuGinGlyLeuAsp130LieuAspGluMet210Gly225GlyGlyGlyAlaLieuGlyLeuValAsp305GlyLysIjysGlyAla3B5AsriGinGinProIISGinGlyLysGlyGinGlyGinLysAsnAsn27SLysTyrGluAspLysAlaThrMetThr180AsnGlyGlyAla2S0AspGlyProValAlaGlyAspPhe1S5GinAlaGlyGlyLieu245VallieAspGluLysAsp3403S5AsnLeu370MetMetGlyGly150GlyTyrLeuAsn230Asnlie135ThrGlu120SerThrThrThrSerThrThrAsnSer12SSe::GinAsnAspAsp140AspSer工leMetGin170SerAsp1SSSerLeuProMe仁GinPheGlyAsp175SerSerIBSL<ysSerAlaGinAsnGlyThrGlyVal310AlaPheAspGlyMetGinAlaThrAspGlyMet200GinGlyIjeuGlyHis280MetGlyAspThrGlyGlyValLieuLieuThrGlySerlieArgAlaLysLysGly2S0GlyHisLysProSer330ProAla345GlyThrGlyLeu235ProMetSerGluGinTrpSerLysAspAsn220AspValLysSerlie300TyrAlaMetGinProAlaLeu205GlyGlyGlySerAspTyxAlaGly270ThrArg285GlyGinGinLysLysAlaGluGin350ThrSerLeuProSerGinISOGlyGluGlyGlyLeu240Gin255Gin工leGinSerPheGlyLeu335PheMetPro320SerlieArg360AlaGlyAsp3S0GlyAlaAlalieProMetAlaGlyGlySerAsnAsnMet335GlyAspThrSerLeuGly3B0PheAsnGlyAsn工leAspAlaLeuGlyLysLeu400GlyAlaAla这种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的分子量约为39kDa，pi约为4.3，可在100。C热稳定至少10分钟。这种过敏反应诱发剂多肽或蛋白基本不含半胱氨酸。得自解淀粉欧文氏菌的过敏反应诱发剂多肽或蛋白在Wei,Z.—M.,R.J.Laby，C.H.Zumoff,D.W.Bauer,S.-Y.He,A.Collmer,和S.V.Beer，"harpin,由植物病原体解淀粉欧文氏菌产生的过敏反应的诱发剂，"Science257:85-88(1992)中有更完全的描述，特此通过引用结合到本文中。編码这种多肽或蛋白的DNA分子具有对应于SEQ.ID.No.4的核苷酸序列，如下所示<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage20</formula>得自丁香假单胞菌的过敏反应诱发剂多肽或蛋'白具有对应于SEQ.ID.No.5的氨基酸序列，如下所示MetGinAlaXjeuSerLysArgAsn50SerValAla3SGlyLeuSerLeuAsnSerSerSer10LyslieGlyThrThrLeu1"SerMetAlaAlaGinLysAsnL<ysProAspLeuGlyThrAlaSerVal115GinLysAspGlyI^uVal20LeuGinGinLeuAlaAlaLeuAspB5AlaAsp100LieuAsnGinGinGly210Val225MetGlyGlyGlyAsnThrArgGlyLeuAsnThrPro275AspGly工leAlaSerGlyAspGlu180LeuGlyGlyl^euAspProArgGluAspAspLysSerGlyGlyGin150SerAsnGlyLeu230ArgGlyGlu245GinSerVal2S0ProGluValVal40AspSerS5GlyLyslieu工leAlaSerLeuAIel120ThrSeir135PheMetTrpValAlaAlaGinGin200ThrPro215工leAspAlaGlyLeuAlaAla25LeuThrGinThrGluValLysLeuAlaSerProLeuAlaGlyHisGlu90GlyThr105LysSerPheSerAspAspAsnGlu170PheArg1B5'SsrAspSerSerGly75LysGlyGlySOGlyL<euGinMetLeuGlu155LeuSerAlaPheAsp140ProLysAlaGlySer220ThrGlyGlu45L<ys工leGlyGinAsp125AspAlaGluSer205ProAlaMetISSerThrSer30GluLeuMetLe、LeuAlaGluAspVal80AspAsnPheS5AspLeuMet110AspLeuLeuMetProMetGinPheProISOAspAsn175AsplieLjeuAlaPhelieGlyAsnAsnSerSerAlaAsnThr235GlyProGlyAspGinThrGlyThrSer*2B0GinLeulieGlyGluLeu工le2S0255GlyGlyGlyLeuGlyThrPro2S5270AlaAsnGlyGlyGinSerAla2B5Ser240AspValGinAspLeuAspGinLeuLeuGlyGlyLeuLeuLeuLysGlyLeuGluAla230255300ThrLeuLysAspAlaGlyGinThrGlyThrAspValGinSerSerAla30531031S320AlaGinlieAlaThrI^uLeuValSerThrLeuLeuGinGlyThrArg325330335AsnGinAlaAlaAla340这种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的分子量为34-35kDa。含丰富的甘氨酸(约13.5%),缺乏半胱氨酸和酪氨酸。关于得自丁香假单胞菌的过敏反应诱发剂的其它信息可以在He，S.Y.,H.C.Huang,和A.Colhner,"丁香假单胞菌丁香致病变种的harpinpss:通过Hrp途径分泌、并在植物中诱发过敏反应的一种蛋白,"Cell73:1255-1266(1993)中找到，特此通过引用结合到本文中。编码得自丁香假单胞菌的过敏反应诱发剂的DNA分子具有对应于SEQ.ID.No.6的核苷酸序列，如下所示A丁GCAGAGTCTCAG丁CTTAACAGCAGCTCGCTGCAAAC:CCCGGCAATGGCCCTTGTCC丁GSOGTACGTCCTGAAGCCGAGACGACTGGCAGTACGTCGAGCAAGGCGCTTCAGGAAGTTGTC120G丁GAAGC丁GGCCGAGGAACTGATGCGCAATGGTCAAC丁CGACGACAGC丁CGCCATTGGGA1B0AAACTGTTGGCCAAGTCGATGGCCGCAGATGGCAAGGCGGGCGGCGGTATTGAGGA丁GTC:240ATCGCTGCGCTGGACAAGCTGATCCATGAAAAGC丁CGG丁GACAACTTCGGCGCGTCTGCG300GACAGCGCCTCGGGTACCGGACAGCAGGACCTGATGACTCAGGTGCTCAATGGCCTGGCC3S0AAGTCGATGCTCGA丁GATCTTCTGACCAAGCAGGATGGCGGGACAAGCTTCTCCGAAGAC420GATATGCCGATGCTGAACAAGATCGCGCAGTTCATGGATGACAATCCCGCACAG丁丁TCCC480AAGCCGGACTCGGGCTCCTGGGTGAACGAACTCAAGGAAGACAACT丁CCTTGATGGCGACS40GAAACGGCTGCGTTCCG丁TCGGCACTCGACATCATTGGCCAGCAACTGGGTAATCAGCAGSOOAGTGACGCTGGCAGTC丁GGCAGGGACGGGTGGAGG丁CTGGGCACTCCGAGC人GTT丁TTCC"0AACAACTCGTCCGTGATGGGTGATCCGCTGATCGACGCCAATACCGGTCCCGGTGACAGC720GGCAATACCCG了GG丁GAAGCGGGGCAACTGATCGGCGAGCTTATCGACCGTGGCC丁GCAA780TCGGTATTGGCCGGTGGTGGACTGGGCACACCCGTAAACACCCCGCAGACCGGTACtSTCG8^0GCGAATGGCGGACAGTCCGCTCAGGATCTTGATCAGTTGCTGGGCGGCTTGCTGCTCAAG900GGCCTGGAGGCAACGCTCAAGGATGCCGGGCAAACAGG.CACCGACGTGCAGTCGAGCGCT9S0GCGCAAATCGCCACCTTGCTGGTCAGTACGCTGCTGCAAGGCACCCGCAATCAGGCTGCA1020GCCTGA102S得自茄假单胞菌的过敏反应诱发剂多肽或蛋白具有对应于SEQ.ID.No，7的氨基酸序列，如下所示MetSerValGlyAsn工leAsnThrAsnLeuAsnValGinAsp3520AlaAsnAsnAlaGinAlaGlyGluGlyAlaAspAla22SAla50LeuValThrGlyAsnAspProSerAsnLysAlaLeu130GlyAlaAlaAspGly210GlyLeulisThr100MetlieGinAlaLys8SGlyGinLysPro70AsnGinSerAsnTh:rGinVal40AlaAlaAlaLysAspValProLieuLeuMetGinGinHisAlaAsnGlyLeuGinGlu1S5GlyAlaGly180Ala150lieGlyPro135GluAlaGly195GlyAspGlySerGlyAlaGlyValAspGlu120GlyGlyGinGlyGly200AsnGly230AsnGly215AlaAsnProSer10AsiaSer25GluLysGinSerAspGlySerLysAspAla105AspLeuGlyAsnAlaGlylieLeu170GlyGlyGlyAlaAsnGinGlyAlaAsnLeuProGinGinSerAspAlaAsn75lieLeu4SGlyAlaAsiaGlySOGlylieu15GlyGlra30-Asn工leAsnThrAlaGlySerGinAlaAsnAsnGinValLysLreu125GlyGlyAlaGinLeuGlyGlyProGinAspPro110GinSerlieGlyAlaB0SerMetAlaAspGly155Val140GinValAlaISOGlyAlaAsp235220AspI;euLysAsnGlyGlyLeuGlyGlyAsnGlyAlaGlyProGinAsnGlyGlyGlyAlaGly190Ala205GlySerGluAsp240GinGlyGlylieuThrGlyValAlaLeuValGinMetMetGinAlaGinGlyGlySerLysGly275AlaGly305ValGin290GinGinSerProGlyAlaAsiiGin2S5AsnAsnLeuGinSer310工leLeuGinGinMet325ThrSerThrGinPro340LeuGinliysLieu250GinGlyGlyLeuAlaGlyAsnAla280ProGlySerAlaGinlieMetAsp31SLeuAlaAlaGin330MetMetLys工leLeuAsn25SGlyGlyGlyAsnGin270SerProAlaSerGly28SAspAspGinSer*Ser300ValValLysGluVal320AsnGlyGlySerGin335它由其核普酸序列对应于SEQ.ID.No.8的DNA分子编码，如下所示ATG丁CAGTCGGAAACATCCAGAGCCCGTCG-AACCTCCCGGGTCTGCAGAACCTGAACCTCSOAACACCAACACCAACAGCCAGCAATCGGGCCAGTCCGTGCAAGACCTGATCAAGCAGG丁C120GAGAAGGACATCCTCAACATCA丁CGCAGCCCTCGTGCAGAAGGCCGCACAGTCGGCGGGC180GGCAACACCGGTAACACCGGCAACGCGCCGGCAATGCCAACGCGGGCGCC240AACGACCCGAGCAAGAACGACCCGAGCAAGAGCCAGGCTCCGCAGTCGGCCAACAAGACC300GGCAACGTCGACGACGCCAACAACCAGGATCCGATGCAAGCGCTGATGCAGCTGCTGGAA3S0GACCTGGTGAAGCTGC丁GAAGGCGGCCC丁GCACATGCAGCAGCCCGGCGGCAATGACAAG420GGCAACGGCGTGGGCGGTGCCAACGGCGCCAAGGGTGCCGGCGGCCAGGGCGGCCTGGCC480GAAGD3CTGCAGGAGATCGAGCAGA丁CCTCGCCCAGCTCGGCGGCGGCGGTGCTGGCGCCS40GGCGGCGCGGGTGGCGG丁GTCGGCGG丁GC丁GGTGGCGCGGATGGCGGCTCCGGTGCGGGTSOOGGCGCAGGCGGTGCGAACGGCGCCGACGGCGGCAATGGCGTGAACGGCAACCAGGCGAAC"0GGCCCGCAGAACGCAGGCGATGTCAACGGTGCCAACGGCGCGGATGACGGCAGCGAAGAC720CAGGGCGGCC丁CACCGGCGTGCTGCAAAAGCTGATGAAGATCCTGAACGCGCTGGTGCAG780ATGATGCAGCAAGGCGGCCTCGGCGGCGGCAACCAGGCGCAGGGCGGCTCGAAGGGTGCC840GGCAACGCCTCGCCGGCTTCCGGCGCGAACCCGGGCGCGAACCAGCCCGGTTCGGCGGAT300GA丁CAATCGTCCGGCCAGAACAATCTGCAATCCCAGATCA丁GGATGTGGTGAAGGAGGTC9S。GTCCAGATCC丁GCAGCAGATGCTGGCGGCGCAGAACGGCGGCAGCCAGCAGTCCACCTCG1020ACGCAGCCGATGTAA1035关于得自茄假单胞菌的过^c反应诱发剂多肽或蛋白的其它信息在Arlat，M.，F.VanGijsegem,丄C.Huet，J.C.Pemollet,和C.A.Boucher,"PopAl，为在特殊牵牛花基因型中诱导过敏样反应的一种蛋白，它通过茄假单胞菌的Hrp途径分泌,"EMBOJ,13:543-533(1994)中陈述，特此通过引用结合到本文中。得自野油菜黄单胞菌大豆致病变种(Xanf/zomo"mcamp^sf^pv.glycines)的过敏反应诱发剂多肽或蛋白具有对应于SEQ.ID.No.9的氨基酸序列，如下所示ThrLeulieGluLeuMetlieValValAlalielieAlalieLeuAla151015AlalieAlaLeuProAlaTyrGinAspTyr2025该序列是得自野油菜黄单胞菌大豆致病变种的过敏反应诱发剂多肽或蛋白的仅含有26个残基的氨基末端序列。它对应于在其它野油菜黄单胞菌致病变种中确定的菌毛亚基蛋白。得自野油菜黄单胞菌天竺葵致病'变种(Zcm^2omona5campesfn'5pv.尸e/wgom7)的过敏反应诱发剂多肽或蛋白对热稳定、对蛋白酶敏感、分子量为20kDa。它包含一段对应于SEQ.ID.No.10的氨基酸序列，如下所示SerSerGinGinSerProSerAlaGlySerGluGinGinLeuAspGin151015LeuLeuAlaMet20.胡萝卜软腐欧文氏菌过敏反应诱发剂蛋白或多肽的分离在Cui等人，"TheRsmAMutantsof胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种(五rw/m'acwotovomsubsp.carafovora)菌抹Ecc71的RsmA突变体在烟草叶中过量表达hrpNEee并诱发过敏反应样应答,"MPMI.9(7):565-73(1996)中陈述，特此通过引用结合到本文中。所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽在Ahmad等人，"harpin对于斯氏欧文氏菌对玉米的致病性不是必需的，"8thInt，1.Cong.Molec.Plant-MicrobeInteract.,July14-19,1996和Ahmad等人，"harpin对于斯氏欧文氏菌对玉米的致病性不是必需的，"Ann.Mtg.Am.Phytopath.Soc7月27-31,1996中展示，特此通过引用结合到本文中。得自寄生疫霉CP/^to;/^om/^raWf/ca)、隐地疫霉、樟疫霉、辣椒疫霉、大雄疫霉和柑桔褐腐疫霉的过敏反应诱发剂蛋白或多肽在Kaman等人，"来自疫霉属的胞外蛋白诱发剂对细菌性和真菌性植物病原菌抗性的大多数特异性和诱导,"Molec.Plant-MicrobeInteract"6(1):15-25(1993),Ricci等人，"来自致病真菌疫霉属、在烟草中读发坏死和获得性抗性的蛋白的结构和活性，"Eur..T.Biochem"183:555-63(1989),Ricci等人，"寄生疫霉分离菌在烟草中差别性产生parasiticein以及坏死和抗性的诱发剂,"PlantPath.41:298-307(1992)，Baillreul等人，"一种新的烟草过敏反应的诱发剂一种真菌糖蛋白诱发细胞死亡、表达防御基因、产生水杨酸并诱导系统获得性抗性,"PlantL8(4):551-60(1995),和Bonnet等人，"诱发剂在烟草和其它植物中触发的获得性抗性,"Eur.J.PlantPath..102:181-92(1996)中陈述，特此通过引用结合到本文中。上面的诱发剂都是典型的。其它诱发剂可以如下鉴定在编码诱发剂的基因得到表达的条件下，培养诱发过敏反应的真菌或细菌。将从培养物上清得到的无细胞制备物浸润合适的植物组织，測试诱发剂活性(即局部坏死)。在本发明的方法中，还有可能使用上述过敏反应诱发剂多肽或蛋白的片段以及来自其它病原体的全长的诱发剂的片段。可以用几种方法产生合适的片段。第一种方法，采用常规分子遗传操作，亚克隆编码一种已知诱发剂蛋白的基因的片段，产生该基因的亚克隆。然后将所述亚克隆体外表达或在细菌细胞内体内表达，产生小一些的蛋白或肽，所述蛋白或肽可以依照后面所述程序測试诱发剂活性。另一种可选择的方法是用蛋白酶如胰凝乳蛋白酶或葡萄球菌A蛋白酶、或胰蛋白酶消化全长的诱发剂蛋白，产生所述诱发剂蛋白的片段。根据所述诱发剂蛋白的氨基酸序列，不同的蛋白酶有可能在不同位点切割所述诱发剂蛋白。一些得自蛋白水解的片段可能是抗性的活性诱发剂。在另一种方法中，根据对所迷蛋白的一級结抅的知识，使用PCR技术以及选定的代表所述蛋白特定部分的特异性引物組，可以合成所述诱发剂蛋白基因的片段。然后将这些片段克隆进一种合适的载体，以增殖和表达一种截短的肽或蛋白。也可以使用化学合成来制备合适的片段。使用要产生的诱发剂的已知氨基酸序列来进行这样的合成。或者，将全长的诱发剂在高温高压下处理也会产生片段。然后可以用常规程序(如层析、SDS-PAGE)分离这些片段。有用片段的一个例子是来自茄假单胞菌的过敏反应诱发剂多肽或蛋白的popAl片段，参见Arlat,M.,F.VanGijsegem，J.C.Huet，J.C.Pemollet，和C.A.Boucher,"popAl，为在特殊牵牛花基因型中诱导过敏样反应的一种蛋白，它通过茄假单胞菌的Hrp途径分泌,"E固OL13:543-553(1994),特此通过引用结合到本文中。至于解淀粉欧文氏菌，一种合适的片段可以是，例如，或者SEQ.ID.No.3的从氨基酸1延伸到98并且包括氨基酸1和氨基酸98的多肽，或者SEQ.ID.No.3的从氨基酸137延伸到204并且包括氨基酸137和氨基酸204的多肽，或者二者都是。也(或者)可以用例如那些对所述多肽的特性、二級结构和亲水性有最小影响的氨基酸的缺失或添加来修饰变异体。例如，可以将一段多肽连接到所述蛋白N末端指导所述蛋白共翻译转运或翻译后转运的信号(或前导)序列上。所述多肽也可以连接于一个接头或其它序列，以便于所述多肽的合成、纯化或鉴定。本发明的蛋白或多肽最好是用常规技术以纯化过的形式产生(纯度优选至少约60%,更优选约80°/。)。本发明的蛋白或多肽产生后一般并不分泌入重组宿主细胞的生长培养基中。另一种情况下，本发明的蛋白或多肽分泌入生长培养基中。在蛋白不分泌的情况下，为分离所述蛋白，繁殖带有重组质粒的宿主细胞(如大肠杆菌)，用超声处理、热处理或化学处理裂解细胞，离心匀浆物以去除细菌残渣。然后对上清液进行热处理，并通过离心分离过敏反应诱发剂蛋白。在一根尺寸合适的葡聚糖柱或聚丙烯酰胺柱上，对含有本发明的多肽或蛋白的上清液部分进行凝胶过滤，分离所述蛋白。如果需要，可以进一步用离子交换或HPLC纯化蛋白组分。可以使用常规的重组DNA技术，将编码过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子引入细胞。通常这涉及将所述DNA分子插入一个表达系统，对该表达系统来说所述DNA分子是异源的(即非正常存在的)。将所述异源DNA分子以正确的有义取向并在正确的阅读框中插入所述表达系统或载体。所述载体包含插入的蛋白编码序列转录和翻译所必需的元件。'Cohen和Boyer的美国专利第4,237,224号描述了使用限制酶切割和用DNA连接酶连接，产生重组质粒形式的表达系统，特此通过引用结合到本文中。然后将这些重组质粒通过转化引入单细胞培养物并复制，其中所述单细胞培养物包括原核生物以及在组织培养中培育的真核细胞。重组基因也可以引入病毒中，如痘苗病毒,用质粒转染已感染病毒的细胞，可以产生重组病毒。合适的载体包括但不限于下面的病毒载体，如;i载体系统gtll、gtWES.tB、Charon4,以及质粒载体，如pBR322、pBR325、pACYC177、pACYC1084、pUC8、pUC9、pUC18、pUC19、pLG339、pR290、pKC37、pKC101,SV40、pBluescriptHSK+/-或KS+/-(参见Stratagene,LaJolla，Calif的"Stratagene克隆系统"目录(1993)'特此通过引用结合到本文中)、pQE、pIH821、pGEX、pET系列(参见F.W.Studier等人，"使用T7RNA聚合酶指导克隆基因的表达,"GeneExpressionTechnology第185巻(199Q),特此通过引用结合到本文中)，以及它们的任何衍生物。可以通过转化、特别是转导、细胞接合作用、带动转移(mobilization)或电穿孔，将重組分子引入细胞。使用本领域内的标准克隆程序将所述DNA序列克隆进载体，本领域内的标准克隆程序如Sambrook等人，MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringsLaboratory,ColdSpringsHarbor,NewYork(1989).所述，特此通过引用结合到本文中。可以利用各种宿主-载体系统来表达单个或多个蛋白编码序列。主要是所述载体系统必须与所使用的宿主细胞相亲和。宿主-载体系统包括但不限于以下所列用噬菌体DNA、质粒DNA或粘粒DNA转化的细菌；微生物如包含酵母载体的酵母；感染病毒(如痘苗病毒、腺病毒等)的哺乳动物细胞系统；感染病毒(如杆状病毒)的昆虫细胞系统；以及感染细菌的植物细胞。这些载体的表达元件在其强度和特异性上有所不同。根据所利用的宿主-载体系统，可以使用多种合适的转录和翻译元件中的任何一个。不同的遗传信号和加工事伴控制基因表达的多个水平(如DNA的转录和信使RNA(mRNA)的翻译)。DNA的转录依赖于启动子的存在，启动子就是一段指导RNA聚合酶的结合并因此促进mRNA合成的DNA序列。真核启动子的DNA序列与原核启动子的DNA序列不同。而且真核启动子及其伴随的遗传信号可能在原核系统中不被识别或不发揮功能，此外，原核启动子在真核细胞中不被识别并且不发挥功能。类似地，mRNA在原核细胞中的翻译依赖于恰当的原核信号的存在，这些信号与真核细胞中的信号不同。mRNA在真核细胞中的有效翻译需要mRNA上一个名为Shine-Dalgamo("SD")序列的核糖体结合位点。这个序列是mRNA的一段短核苦酸序列，位于起始密码子之前，起始密码子通常是AUG,编码蛋白质氨基端的甲硫氨酸。SD序列与16SrRNA(核糖体RNA)的3'端互补，可能是通过与该rRNA形成双链体，使核耱体能正确定位，从而促进mRNA结合核糖体。关于使基因表达最大化的综述可参见Roberts和Lauer,MethodsinEnzymology，68:473(1979),特此通过引用结合到本文中。各种启动子的"强度"(即它们促进转录的能力)有所不同。为表达克隆基因的目的，为了获得高水平的转录以及进而高水平的基因表达，最好是使用强启动子。才艮据所利用的宿主细胞系统，可以使用多种合适启动子中的任何一个。例如，当在大肠杆菌、它的喧菌体或质粒中进行克隆时，可以使用以下启动子来指导邻近DNA区段的高水平转录如T7噬菌体启动子、lac启动子、&p启动子、recj启动子、核糖体RNA启动子、大肠杆菌A的PR和Pl启动子以及其它启动子，包括但不限于lacUV5、ompF、Bla、lpp等等。此外，可以使用杂种Rp-lacUV5(toc)启动子或通过重组DNA技术或其它合成DNA技术产生的其它大肠杆菌启动子，提供给插入基因的转录。可以选择除非受到特异性诱导、'否则抑制启动子作用的细菌宿主细胞抹和表达载体。在某些操作中，加入特异性诱导物对于插入DNA的有效转录是必要的。例如，加入乳糖或IPTG(异丙基-B-D-硫代半乳糖苷)，诱导toc操纵子。各种其它操纵子，如trp、pra等，处于不同的控制之下。原核细胞中的有效基因转录和翻译还需要特异性的起始信号。这些转录和翻译的起始信号可能在"强度"上有差异，它们的"强度"是分别根据合成的基因特异性的信使RNA的量以及蛋白的量来衡量的。包含一个启动子的DNA表达载体还可以包含任何組合的不同"强度"转录和/或翻译起始信号。例如，大肠扞菌中的有效翻译要求距起始密码子(ATG)5，约7-9个碱基的一个SD序列，来提供一个核糖体结合位点。因此，可以使用任何能被宿主细胞核糖体利用的SD-ATG组合。这样的组合包括但不限于得自大肠杆菌噬菌体入的cro基因或7V基因、或得自大肠杆菌色氨酸E、D、C、B或A基因的SD-ATG组合。此外，可以使用任何用重组DNA技术或其它涉及插入合成核苷酸的技术产生的任何SD-ATG组合。一旦已经将分离的编码过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子克隆进表达系统，就可以将其引入宿主细胞。根据所使用的载体/宿主细胞系统，可以采用上面提到的各种形式的转化进行这样的引入。合适的宿主细胞包括但不限于细菌、病毒、酵母、哺乳动物细胞、昆虫、植物等等。可以利用本发明的方法处E广泛种类的植物或它们的种子以促进生长。合适的植物包括双子寸植物和单子叶植物。更具体地说，有用的作物可以包括稻、小麦、大麦、黑麦、棉花、向日葵、花生、玉米、马铃薯、甘薯、菜豆、豌豆、菊苣、莴苣、苦苣、甘蓝、花椰菜、硬花球花椰菜、芜菁、小萝卜(radish)、菠菜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、芹菜、胡萝卜、南瓜(squash)、西葫芦、绿皮南瓜、黄瓜、苹果、梨、瓜、草莓、葡萄、树莓、菠萝、大豆、烟草、番茄、蜀黍以及甘蔗。合适的观赏植物的例子有玫瑰、非洲紫苣笞属0SW^aw//a)、牵牛花、天竺葵属植物、一品红、菊花、香石竹和百日草属。本发明的涉及应用过敏反应诱发剂多肽或蛋白的方法在整株植抹或植株部分，包括叶、茎、根等受到处理时，可以通过多种程序进行。这可以(但不是必须)涉及将过敏反应诱发剂多肽或蛋白渗入植株。合适的应用方法包括在即将应用诱发剂时表面施用(如高压或低压喷洒)、注入(injection)、撒粉、以及磨檫叶面。在处理植物种子时，根据本发明的应用实施方案，可以通过表面施用(高压或低压喷洒)、包被、浸渍、撒粉或注入，来应用过敏反应诱发剂多肽或蛋白。其它合适的应用方法可以由本领域内的技术人员设想出，只要它们能产生过敏反应诱发剂多肽或蛋白与植株或植物种子的细胞接触。一旦用本发明的过敏反应诱发剂处理后，种子就可以种植在天然或人工土壤中，用常规程序培育以产生植株。按照本发明处理的种子繁殖出植抹后，可以一次或多次施用过敏反应诱发剂多肽或蛋白来处理这些植株，从而增强植株的生长。这样繁殖出来的植株本身又可用于产生种子或无性繁殖体(如插条)，这些种子和无性繁殖体可产生生长增强的植株。过敏反应诱发剂多肽或蛋白可以按照本发明地单独或与其它材料混合起来应用到.植物或植物种子上。或者，可以在将过敏反应诱发剂多肽或蛋白单独应用于植物，而在不同时间施用其它材料。适于按照本发明的应用实施方案处理植物或植物种子的组合物包含处于一种载体中的过敏反应诱发剂多肽或蛋白。合适的载体包括水、水溶液、浆液或干粉。在这个实施方案中，该组合物包含多于0.5nM的过敏反应诱发剂多肽或蛋白。虽然并非必要，但这种组合物可以包含辅助的添加剂，包括肥料、杀虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、除草剂以及它们的混合物。合适的肥料包括(NH^N03。合适的杀虫剂的一个例子是马拉硫磷。可用的杀真菌剂包括克菌丹。'-其它合适的添加剂包括緩沖剂、润湿剂、包被剂和磨擦剂。这些材料可用于便利本发明的程序。另外，过敏反应诱发剂多肽或蛋白可以与其它常规种用制剂和处理材料(包括粘土和多糖)一起应用于植物种子。在本发明另一种可选择的涉及使用转基因植物和转基因种子的实施方案中，不必将一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白局部应用到植物或种子上。取而代之的是，依照本领域内广为人知的程序，如生物弹道学(biolistics)或农杆菌介导的转化，产生用编码一种过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化的转基因植物。合适的过敏反应诱发剂多肽或蛋白的例子及它们的编码DNA的核酸序列如前所公开。一旦产生了这种类型的转基因植物，就可以按照常规程序培育这些植物，而编码过敏反应诱发剂的基因的存在会导致植物的生长增强。或者，从转基因植物中回收转基因种子。然后可以将这些种子种植于土壤中，用常规程序培育产生转基因植物。在可以有效赋予增强的生长的条件下，由所种植的转基因种子繁殖出转基因植物。尽管不希望被理论所束缚，但这样的生长增强可以由RNA介导或由于表达诱发剂多肽或蛋白而得到。当依照本发明使用转基因植物和植物种子时，它们还可以另外用其它材料处理，所述材料与在应用过敏反应诱发剂多肽或蛋白物时用于处理植物和种子的材料相同。这些其它材料，包括过敏反应诱发剂，可以按上面提到的程序应用于转基因植物和植物种子，包括高压或低压喷洒、注射、包被、撒粉和浸渍。类似地，在从转基因植物种子繁殖出植物后，可以一次或多次施用过敏反应诱发剂处理这些植物来增强植物生长。这样的植物也可以用常规的植物处理剂(如杀虫剂、肥料等)进行处理。本发明的转基因植物能用于产生种子和无性繁殖体(如插条)，从所述种子或无性繁殖体可以产生生长增强的植株。实施例实施例1-用解淀粉欧文氏菌的过敏反应诱发剂处理番茄种子对发芽率的影响将Marg/o6e番茄变种的种子浸泡在40ml解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂溶液("harpin")中。harpin如下制备培养包含质粒pCPP2139(参见图1)的大肠杆菌株DH5，超声处理裂解细胞，在沸水中保持5分钟进行热处理，离心除去细胞碎片，煞后沉淀蛋白和其它热不稳定的成分。连续稀释得到的制备物("CFEP")。根据蛋白印迹分析，这些稀释物(1:40,1:80,1:160,1:320和l:640)分别含有20、10、5、2.5和1.25吗m/ml的harpin。在第0矢，在一个生长宣中，于2犷C下将种子在烧杯中的harpin或緩沖液中浸泡24小时。浸泡之后，在第1天将种子播种于装有人工土壤的萌发盆中。这个程序按每种处理IOO粒种子进行。处理1.harpin(1:40)(20|igm/ml)浸泡种子。2.harpin(l:80)(10iigm/ml)浸泡种子。3.harpin(1:160)(5吗m/ml)浸泡种子。4.harpin(l:320)(2.5吗m/ml)浸泡种子。5.harpin(1:640)(1.25吗m/ml)浸泡种子。6.緩沖液(5mMKP04,pH6.8)浸泡种子。表1-处理种子后幼苗的数目如表1所示，用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番^5种子,減少了发芽所需时间并大大增加了发芽率。实施例2-用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番茄种子对番实抹高的影响第O天，在一个生长室中，于28。C下将ikforg/o^番茄变种的种子浸泡于烧杯中的解淀粉欧文氏菌harpin(1:15，1:30，1:60以及1:120)或緩沖液中24小时。浸泡之后，在第1天将种子播种于裝有人工土壤的萌发盘中。每种处理随机选择十株表3见一致的植抹并測量。用直尺測量幼苗从土壤表面到植株顶端的高度。处理处理第0天第1天harpin(20p<gm/ml)浸泡种子dharpin(10吗m/ml)浸泡种子〗harpin(5|igm/ml)浸泡种子〗harpin(2.5figm/ml)浸泡种子jharpin(1.25ngm/ml)浸泡种子4緩沖液浸泡种子4发芽种子的数目第5天第7天第9天9525187o555472763755455333o387444432种种种种种种潜番番番喬番1-harpin(1:15)(52吗mAnl)。2harpin(1:30)(26(igm/ml)。3-harpin(1:60)(13|agm/ml)。4.harpin(l:120)(6.5|igm/nil)。5.緩沖液(5mMKP04，pH6.8)。表2-处理种子之后15天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>表3-处理种子之后21天的幼苗髙度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>表4-处理种子之后27天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>表5-概要一一处理后番茄植抹的平均高度处理番茄植株的平均高度(cm)第0天第1天第15天第21天第27天harpin(1:15)漫泡种子播种7.710.5harpin(l:30)浸泡种子播种7.08.611.6harpin(l:60)浸泡种子播种5.96.99.7harpin(1:120)浸泡种子播种5.46.79.5緩;中液浸泡种子播种5.36.510.0如表2-5所示，用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番茄种子增强了植物生长。1:30的稀释物作用最大——幼苗高度增加16%。实施例3-用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番茄植株对番茄抹高的影响当Ma《/o&番茄植抹4周大时，在一个生长室中，于28。C下，每抹植株喷洒6ml含13貼m/ml(l:60)或8.7吗m/ml(1:90)harpin的解淀粉欧文氏菌harpin溶液或喷洒6ml緩沖液(5mMKP04)。喷洒haipin2周后(6周大的番茄植株)以及2周又5天后，測量番茄植株的高度。每种处理随机选择十株表现一致的植抹并測量。用直尺測量幼苗从土壤表面到植株顶端的高度。处理1.harpin(l:60)(13|igm/ml)。2.harpin(1:90)(8.7(igm7ml)。3緩沖液(5mMKP04,pH6.8)。表6-harpin处理后番茄植林的平均高度<table>complextableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>如表6所示，用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂喷洒番茄幼苗可以增强番茄植株的生长。与緩沖液处理对照相比，记录到这两个剂量的待測过敏反应诱发剂有相似的生长增强。实施例4-用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番茄种子对番茄抹高的影响第0天，在一个生长室中，于2St:下将Margfo6e番茄种子浸泡于烧杯中的解淀粉欧文氏菌过每i反应诱发剂溶液("harpin")(1:40，1:80,1:160,1:320以及l:640)或緩沖液中24小时。在harpin或緩沖液中浸泡种子之后，在第1天将它们播种于装有人工土壤的萌发盘中。每种处理随机选择十株表现一致的植株并测量。用直尺测量幼苗从土壤表面到植株顶端的高度。处理1.harpin(l:40)(20figmyml)。-2-harpin(l:80)(10(igm/ml)。3-harpin(1:160)(5|_igm/ml)。4.ha—(1:320)(2.5pigm/ml)。5.harpin(l:640)(1.25吗m/ml)。6.緩沖液(5mMKP04，pH6.8)。表7-处理种子之后12天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>表8-处理种子之后14天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>表9-处理种子之后17天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>表10-概要一一处理后番茄植株的平均高度<table>complextableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>如表7-10所示，用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番茄种子可以增强番茄植株的生长。1:160的稀释物(5吗/mlharpin)作用最大一一幼苗高度比用緩沖液处理的植株增加超过20%。实施例5用解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理番茄种子对种子发芽率的影响第0天，在一个生长室中，于28。C下将7^^g/o6e番茄种子浸泡于烧杯中的40ml解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂("harpin")溶液(来自大肠杆菌DH5(pCPP2139)的CFEP的1:50或1:100稀释物，分别含有8fagm/ml和4pgm/ml的过敏反应诱发剂)或緩沖液中24小时。浸泡之后，在第1天将种子播种于装有人工土壤的萌发盘中。每种处理进行4盆，每盆内有20粒种子。处理1■harpin(8(igm/ml)°2■harpin(84gm/ml)°3.harpin(8]igm/ml)。4.harpin(8(igm/ml)°5.harpin(4figm/ml)°6■harpin(4(igm/ml)°7.harpin(4jigm/ml)°8harpin(4|igm/ml)。9:緩沖液(5mMKP04,pH6.8)。10緩沖液(5mMKP04,pH6.8)。11.緩沖液(5mMKP04，pH6.8)。12.緩沖液(5mMKP04,pH6.8)。表11-harpin处理后幼苗的数目如表11所示，用解淀粉欧文氏'嵐过敏反应诱发剂处理番茄种子可以提高番茄种子的发芽率和发芽水平。在试验最后看来，所使用的更高剂量看来比緩沖液更有效。实施例6-用从包含过敏反应诱发剂编码抅成物pCPP2139或质粒载体pCPP50的大肠杆菌制备的蛋白处理番茄种子对植株生长的影响将Marg/We番茄种子浸泡在解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂("harpin")(得自大肠杆菌DH5oc(pCPP2139)(图l))制备物中，或浸泡于作为对照、添加了BSA蛋白的载体制备物(得自DH5a(pCPP50)(图2》。所述对照载体制备物每ml包含33.6^1BSA(10mg/ml)，以提供与pCPP2139制备物所包含的harpin等量的蛋白。第1天，在烧杯中制备1:50(8.0吗/ml)、1:100(4.0吗/ml)和1:200(2.0^ig/ml)的稀释物，并在一个受控制的环境室中于28。C下将种子浸泡24小时。浸泡之后，在第2天将种子种植在裝有人工土壤的萌发发芽的种子的数目(样本总数为20)第5天第42第47天天平均值平均值平均值111519131720101316910.81515.01617.8操作和处理第0天harpin(8jagm/ml)harpin(8(_igm/ml)harpin(8pgm/ml)harpin(8j^gm/ml)harpin(4pgm/ml)harpin(4|agm/ml)harpin(4pgm/ml)harpin(4|ngm/ml)4544244ou9^^种种种种番番番番液液液液沖沖沖沖复爰爰爰7oo46o7724o99种种种种番番番番J^p-JvJx*J.^种种种种番番番番盘中。移栽后每幹处理随机选择表现一致的10株植抹，并在三个时间进行測量。用直尺测量幼苗从土壤表面到植抹顶端的高度。处理1.harpin150(8.0昭/ml)2.harpin1100(4.0fig/ml)3.harpin1200(2.0吗/ml)4.载体+BSA150(0harpin)5.载体+BSA1100(0harpin)6.载体+BSA1200(0harpin)表12-种子处理后18天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>表14-种子处理后26天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>如表12-15所示，用包含编码解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂的基因的大肠杆菌处理，可以增强番茄植株的生长。1:100的稀释物(4.0pg/ml)作用最大，而更高浓度和更低浓度作用要小。用4.0pg/mlharpin处理与用含有类似量非harpin蛋白的载体对照制备物处理相比，平均幼苗高度增加了约20%。由大肠杆菌株DH5oc(pCPP50)(其帝有大肠杆菌株DH5oc(pCPP2139)的/z基因的载体)得到的细胞裂解制备物的成分并不具有与包舍harpin的制备物相同的生长促进作用，即使假设其中补充了与含大量harpin蛋白的DH5a(pCPP2139)制备物相同水平的BSA蛋白。实施例7-用从包含过敏反应诱发剂编码构成物pCPP2139或其质粒载体pCPP50的大肠杆菌制备的蛋白处理番茄种子对番茄植抹生长的影响第1天，在一个生长室中，于28t:下将il^^g/o&番茄种子浸泡于烧杯中的解淀粉欧文氏菌过敏反'应-诱发剂溶液("harpin"X得自harpin编码质粒pCPP2139载体)以及包含pCPP50载体的溶液的1:25、1:50、以及1:100的稀释物中24小时。浸泡种子之后，在第2天，将它们种植于装有人工土壤的萌发盘中。每种处理随机选择十株表现一致的植抹并測量。用直尺测量幼苗从土壤表面到植株顶端的高度。处理1.harpin16吗m/ml2.harpin8吗m/ml3.harpin4)igm/ml4.载体16吗m/ml5.载体8|igm/ml6.载体4|igm/ml表16-种子处理后11天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>表17-种子处理后14天的幼苗高度(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>*被45/79K表18-处理后番茄植抹的平均高度如表16-18所示，用解淀粉欧又氏菌过敏反应诱发剂处理可以增强番茄植抹的生长。l:50稀释物(8.0(ig/ml过敏反应诱发剂)作用最大，其中幼苗高度比对照增加了约20%。实施例8-无细胞解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂对马铃薯生长的作用在各自单独的容器中将马铃薯变种A^r/n;p由块茎培养成3周大的植抹。每株植株的叶面喷洒以1:50、1:100和1:200稀释的包含解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂("harpin，，)的溶液，或喷洒以1:50、1:100和1:200稀释的包含大肠杆菌蛋白和载体pCPP50的蛋白的对照溶液("载体")。在第20天，为以下每项处理随机选择12株表现一致的植株。将每种处理的一抹植抹在16。C下维持在一个生长室中，两株植株在18-25t:下維持在一个温室台上。处理后25天，分别测量所有植抹的苗(茎)。'处理1.harpin2.harpin3.harpin1:501:1001:2004.载体1:505.载体1:1006.载体1:20016jiigm/ml4jagm/ml0harpin0harpin0harpin操作和处理番茄植株的平均高度(cm)第l天第2夭第ll天第14天harpin浸泡种子(l6)igm/ml)播harpin浸泡种子(8(igm/ml)播harpin浸泡种子(4fxgm/ml)播载体浸泡种子(16pgm/ml)播载体浸泡种子(8jLigm/ml)播载体浸泡种子(4)agm/mi;)播jU1J1U1J43种种种种种种<table>complextableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>如表19和20所示，用解定粉欧文氏菌过敏反应诱发剂处理马铃薯植株增强了苗(茎)的生长。因此，根据茎的数目以及平均长度判断，在温室和生长室培育的植抹中，harpin处理的植株的总生长都要强。用中等剂量harpin(8.0fig/ml)处理的马铃薯植株看起来比用更髙或更低剂量处理的植抹在茎生长上增强更多。在两种生长条件下，用中等剂量的harpin处理导致更强的生长。实施例9-用包含解淀粉欧文氏菌harpin的无细胞诱发剂制备物喷洒番茄的作用将7kfa^/oZ^植株移栽后8天，喷洒harpin制备物(得自大肠杆菌DH5a(pCPP2139))，或喷洒添加了BSA蛋白的载体制备物(得自大肠杆菌DH5a(pCPP50》作为对照。所述对照载体制备物每ml包含33.6)^1BSA(10mg/ml),以提供与pCPP2139制备物所包含的harpin等量的蛋白。制备l:50(8.0吗/ml)、l:100(4.0吗/ml)和l:200(2.0吗/ml)的制备物，并用一台电动喷雾器喷洒到植株上直至形成溢流。每种处理随机选择15抹表现一致的植株并分配进行处理。将这些植株在处理前和处理后于28。C下維持在一个受控制的环境室中。处理后几次測量从土壤表面到植株顶端的总高度。在接近土壤表面切斯茎后，立即称量番茄植株地上部分的重量。处理(稀释度和tiarpin含量)1.harpin150(8.0|ig/ml)2.harpin1100(4.0)ag/ml)3.harpin1200(2.0fig/ml)4.载体+BSA150(0harpin)5.载体+BSA1100(0harpin)6.载体+BSA1200(0harpin)表21-喷洒处理后1天的番茄株高(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>表23-喷洒处理后21天的番茄抹高(cm)<table>complextableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table>通常，用harpin单次喷洒番茄幼苗比用补充了BSA蛋白的对照(载体)制备物喷洒处理导致更强的后续生长。harpin处理的植株的增强的生长在株高测量和鲜重测量中都看得出来。在三个测试过的浓度中，两个较低浓度导致比高剂量(8.0pg/ml)更强的植株生长(基于两种测量中的任一种)。用两个较低浓度(2和4昭/ml)处理的植抹之间的生长几乎没有区别。由大肠杆菌株DH5ct(pCPP50)(其带有大肠杆菌株DH5a(pCPP2139)的/wpiV基因的载体)得到的细胞裂解制备物的组分并不具有与包含harpin的制备物相同的生长促进作用，即使其中补充了与含大量harpin蛋白的DH5a(pCPP2139)制备物相同水平的BSA蛋白。因此，这个试验表明，harpin是植物生长增强的原因。实施例IO-小果的早着色和早熟进行一个大田试验以评价过敏反应诱发剂("harpin")处理对树莓栽培品种Candy产量和成熟参数的作用。在每个40英尺长X3英尺宽(l植株宽)的小区中，移植生长(established)的植株用harpin以2.5mg/10平方英尺处理、不处理("对照")、或用工业标准化学品Ronilan以推荐比率处理("Ronilan")。处理重复四次并安排在同一个试验田位点重复进行。处理在5-10Q/。开花时开始，然后以7-10天的间隔再施用两次。头两次收成用于评估病害的防治，由后两次收成收集果实产量数据。观察表明，harpin处理的果实比不处理的果实更大并显示红色更深，这表明成熟被加速了1-2周。此时确定最少有10枚果实的每个树丛上成熟果实的数目并概括在表26中。harpin处理的小区中每10-莓树丛的成熟果实比对照或Ronilan处理的小区都多。而后两次收获的合并产量表明，用harpin处理以及用Ronilan处理的小区比未处理的对照产量增加(表27)。表26-1996年6月20日在有十枚或十枚以上浆果的植抹上每丛成熟树莓果实的数目处理成熟果实/10奖果丛与对照相比的百分数％对照2.75100.0Ronilan2,75100.0harpin7.25263.6表27-综合最后两次收获的平均树莓果实产量(重量)(磅)处理总产量与对照相比的百分数o/c对照32.5100.0Ronilan37.5115.4harpin39.5121.5实施例ll-对食荚菜豆的生长增强采用各种方法处理食英菜豆变神BushBlueLake,并种植在裝满商品化盆载混合土的25cm直径的塑料盆中，放置于一个开放溫室中，评价各生长参数。处理包括不处理的菜豆种子("对照")；用以水作稀释剂制备的1.5%甲基纤维素浆液处理种子("M/C");先用1.5%甲基纤维素处理种子、再叶上施用0.125mg/ml的过敏反应诱发剂("harpin")("M/C+H，，)；以及用1.5%甲基纤维素处理加上每50粒种子5.0jigharpin喷洒harpin干粉、然后叶上施用0.125mg/ml的harpin("M/C-SD+H")。在第0天播种种子，每盒3粒种子，在发芽时间苗至每盆1株植抹。处理重复10次，并在一间开放温宣内通过重复(byrep)来随机化。64天后收获豆荚，收集具有可售大小(大小〉10cmX5cm)的豆荚的鲜重作为产量。采用用于区分处理平均值的Fisher氏LSD进行方差分析，分析数据。表28-采用各种方法用解淀粉欧文氏菌harpin处理对市售大小的食荚菜豆豆荚产量的作用处理可售产量，g1与不处理的植抹(对照)相比的百分数％M/C-SD+H70.6a452M/C-H58.5ab375M/C46.3bc297M/C+H42.3bc271M/C-SD40.0cd256对照15.6e100'可售产量包括所有10cmX0.5cm或更大的菜豆豆英。根据Fisher氏LSD,后面帝有相同宇母的平均值在P-0.05的水平上没有显著差异。如表28所示，用各种应用方法施用解淀粉欧文氏菌harpin,导致可售大小的食荚菜豆豆英增产。单独用甲基纤維素处理也导致菜豆增产，但当其与harpin组合用于种子处理(喷洒干粉)和叶处理时，产量明显增加。实施例12-对黄瓜叶施用HP-1000TM得到的黄瓜增产以15、30或60)ig/ml活个生成分(a丄)的比率叶喷洒HP-1000TM(EDENBioscience,Bothell,Washington)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)，处理黄瓜幼苗及移植体。在第一片真叶完全伸展时进行第一次喷洒。第一次喷洒后10夭进行第二次应用。所有喷洒都应用一台背携式喷雾器进行，试验还包括一个不处理的对照(UTC)。第二次施用HP-1000tm后3天，将来自每种处理的十株植抹移栽到随机化的田间小区中，重复三次。这产生了每种处理总共30株植株。移栽后七天，第三次叶喷洒HP-1000TM。虽然随后的严重干旱导致显著的用水胁迫，但遵循标准工业化(commercial)收割模式进行了总共六次收割。从每种处理收获得的果实总重都显示在表29中。结果表明，用比率为15和30jLig/ml的HP-1000TM处理的植株产出了比UTC明显更多的果实。用.HP-1000TM处理的植抹产生了中度的增产。这些结果表明，HP-1000TM处理的植株显著地比不处理的植株更耐受千旱的恶劣条件。表29-HP-1000TM处理后得到的黄瓜增产<table>complextableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>1活性成分(a.i.),2根揭Duncan氏MRT,后面帝有不同宇母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。实施例13-由HP-1000TM处理得到的棉花增产在一个随机完全区组(RCB)大田试验中，将棉花种植在四块一样的12X20英尺田间小区中。用HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)、HP-1000TM+Pix(Pix(BASFCorp.,MountOlive,N.J.)是一种生长调节剂，施用以保持棉花植株高度上的坚实(compactinheight))或EarlyHarvest(GriffenCorp.,Valdosta,Ga.)(—种竞争性生长增强剂)处理植株。试验还包括一个不处理的对照(UTC)。使用一台背携式喷雾器在作物的三个生长时期(第一片真叶、开花前、花期早期)迭行所有的叶施用处理。在所有处理中，所有肥料和除草产品都根据常规的农业实践施用。收获前十周，HP-1000顶处理的植抹与其它处理的植株相比，每抹植株上棉桃的数目要显著更高。收获时，HP-100OTM处理与UTC相比，显示出皮棉产量显著增加(43%)(表30)。当HP-1000tm与Pix⑧组合使用时，皮棉产量比UTC增加200/。。由于Pk⑧普遍应用于大面积的棉花，这个结果表明，HP-1000可以与Pk成功地进行化学液体混合(tankmixed)。与UTC相比，应用竟争性生长增强剂EarlyHarvest，皮棉产量仅增加9%。表30—用HP-1000TM、HP-1000丁M+Pix⑧或EarlyHarvest处理后得到的皮棉产量增加<table>complextableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>1HP-1000的比率是指活性成分(a.i.)的比率；EarlyHarvest⑧和Pix的比率是指制成品的比率。实施例14-由HP-lOOOTM处理得到中国茄子(Chineseeggplant)的增产向苗圃中培育的Chineseegg植株幼苗以15、30或60(ig/ml(a丄)喷洒一次HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)，然后移植到田间小区中，每种处理重复三次。移栽后两周，第二次施用HP-1000TM。第二次喷洒后约两周，第三次即最后一次施用HP-1000。所有喷洒都〗吏用一台背携式喷雾器进行；试验还包括一个不处理的对照(UTC)。隨着季节的变换，每种处理共收获八次。从这些收成得到的数据表明，用HP-IOOOTM处理导致单抹果实产量更高。表31-HP-IOOOTM处理后中囯茄子植株的增产-<table>complextableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>实施例15-由用HP-1000TM处理得到的稻增产将稻幼苗移栽进田间小区中，重复三次，然后用一台背携式喷雾器以三种不同比率叶喷洒HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)进^f亍处理。试验中还包括一个不处理的对照(UTC)。移栽后1周第一次施用HP-1000,第一次施用三周后进行第二次施用。在稻粒剛好开始灌浆之前，进行第三次即最后一次喷洒。收获的结果显示，以30和60)Lig/ml叶施用HP-1000tm分別显著增产47%和56%(表32)。表32-用HP-100QTM叶处理后得到的稻增产<table>complextableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>根据Duncan氏MRT,后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。实施例16-由HP-IOOOTM处理得到的大豆增产将大豆种植进随机化的田间小区中，每种处理重复三次。使用一台背携式喷雾器叶喷洒HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)，试马全中还包括一个不处理的对照(UTC)。在四片真叶期，植株约八英寸高吋，开始以三个比率施用HP-1000。第一次喷洒后10天第二次喷洒HP-1000TM,第二次喷洒10天后进行第三次喷洒。第一次喷洒处理IO天后测量到的株高表明，HP-1000应用导致生长显著增强(表33)。此外，用60pg/ml比率的HP-1000处理的植抹比其它处理的植抹早5天升始开花。第三次喷洒后约十天，计数每次重复的十株随机选出的植株上单抹大豆豆荚的数目。这些结果表明，由HP-1000TM处理得到的生长增强导致显著更高的产量(表34)。表33-用HP-1000TM叶处理后大豆株高的增加<table>complextableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table>根据Duncan氏MRT,后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。实施例n-由HP-ioooTM处理得到的草莓增产用HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)对两个草莓变种Ozmarasa和Se/va进行两个大田试验。在一块工业化生产草莓的田中，为每个变种的每种处理建立一个具有四个重复小区(5.33X10英尺)的随机完全区组(RCB)设计。每个小区中双行布置种植草莓植株。试验还包括一个不处理的对照。在施用开始前，所有植抹都摘净花和浆果。使用一台背携式喷雾器每六周喷洒40jig/ml比率的HP-1000TM。在每次喷洒应用之前，收获每种处理得到的所有成熟果实、称重并根据商业标准评級。对Se/ra草莓植株第一次施用HP-1000tm后三周内，生长增强可目视辨别为更大的地上生物量以及更S壮、更绿和更健康的外观。六次收获之后(即这些植株的计划寿命)，合计所有产量的数据并进行分析。对于azmflmya变种，平均最后四次采摘量时，HP-1000TM处理的植抹得到可售果实的产量比UTC显著增加(27%)(表35)。该变种各处理的头两次采摘量之间并不表现显著差异。&/va变种更易受到HP-1000TM处理的生长增强作用的影响；平均六次采摘量后，5Wva草莓变种与UTC相比，产生了具统计学显著性的多64%的可售果实。表35-用HP-1000TM叶处理后得到的草莓增产<table>complextableseeoriginaldocumentpage64</column></row><table>根据Duncan氏MRT,后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。实施例18-由HP-1000TM处理得到的番茄更早成熟和增产在一块工业化番茄生产田中，在一个随机完全区組(RCB)大田试验中将新鲜市售番茄GSb/^&f变种)种植在小区(2X30英尺)中，重复5次。处理包括HP-1000(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)、一种试验性的竞争性产品(ActigardTM(Novartis,Greensboro,N.C.))以及用于病害防治的化学标准品(Kocide⑧(GriffenCorp.,Valdosta,GA))+Maneb(DuPontAgriculturalProducts,Wilmington,D.E.))。HP-1000tm的首次施用是在移栽后立即将50ml浸液(drench)(30吗/ml活性成分)直接浇在幼苗上。此后，使用一台背携式喷雾器每11周应用叶喷洒。移栽后约六周对所有处理进行第一次收获，并且每种处理只收获完全红的、成熟的番茄。结果表明，HP-100(FM处理的植株有显著更大量的番茄可供第一次收获(表36)。由HP-1000TM处理的植抹收获到的番茄估计比其它处理的早10-14天。表36-用HP-1000TM叶处理后第一次收获时番茄产量的增加处理比率(活性成分y产量2(磅/重复)高于UTC的％UTC—0.61a—HP-100030fig/ml2.87b375Actigard14g/英亩0.45a-25,1Kocide+2磅/英亩0.31a-49.1Maneb1磅/英亩1Kocide和Maneb的比率是针对制成品而言的。2根据Duncan氏MRT，后面余i不同字母的平均值在p=o.05的水平上有显著差异。实施例19-用HP-IOOOTM处理的草莓种植在未熏蒸土壤中时早开花和生长增强在一个随机完全区組大田^C验中，将草莓植株("plugs"和"裸根")栽培品种Comwa^fer移栽到小区(2X30英尺)中，重复5次。在每块重复小区中移栽约六十抹植株。这次大田试验进行如下处理处理应用方法HP-1000(plug植抹)HP-100040(棵根植株)溴代甲烷/氯化苦75/25将植株移栽进未烟熏蒸的土壤！后，立即将40)Lig/ml(活性成分)的50-mlHP-1000(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)浸液直接浇到各植株上，然后每14天叶应用40吗/ml的HP-1000。在就要将植株移栽进未熏蒸的土壤)之前用pg/ml的HP-1000tm溶液浸泡根1小时，然后每14天叶应用40吗/ml的HP-1000TM。在移栽前通过注入法以300磅/英亩的比率进行土壤熏蒸，不应用HP-1OOOTM处理Telone/氯化苦70/30在移栽前通过注入法以45加仑/英亩的比率进行土壤熏蒸，不应用HP-1000TM处理不处理的对照(UTC)不熏蒸，不应用HP-1000TM处理此前未熏蒸的土壤已经种植野豌豆两年。在晚秋，当寒冷天气可能減緩植物生长时，进行移栽。移栽后两周'用一台背携式喷雾器以40(ig/ml(活性成分)第一次叶施用HP-1000。移栽后三周，计数每次重复中所有草莓"塞子"植株上花的数目，将HP-1000TM处理与溴代甲烷处理和UTC作比较，收集初步结果。由于"裸根"植株上还未出现开花，因此通过測量3-叶丛中间一片叶子从叶尖到茎的距离，评价每次重复该处理中每株植株的早期叶生长。结果(表37和38)表明，用HP-1000TM处理分别为"塞子"和"裸根"草莓植株提供了早期增强的花生长和叶大小。表37-HP-1000TM叶处理后得到的"plug"草莓移植体的早开花Vk^〖^S&i)扁…"IS/HY—…^不扁lS^扁^^TUTC—2.0a—HP-100040(ig/ml'7.5b275溴代甲烷/氯化苦300磅/英亩5.3b163■YKiDunc—a;—N^iV—^fi岑^S、每^丰^^bVl55扁^TA;:表38-HP-1000TM叶处理后得到的"棵根"草莓移植体的叶生长增强UTC—1.26a—HP-100040pg/ml1.81b44Vfunc;n-SK^iV^^举i扁^^承每^丰^扁f^oVoiWf丰:实施例20-施用HP-1000tm得到的Jalapeno胡椒的早期生长增强将Jalapeno胡椒(栽培品种A/故/戸)的移植体用HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)(30吗/mla丄)的根浸液处理1小时，然后移栽进随机化的田间小区中，重复四次。试验还包括一个不处理的对照(UTC)。从移栽后14天开始，用一台背携式喷雾器以14天的间隔对受处理的植株三次叶喷洒HP-1000TM。第三次施用HP-1000tm后一周(移栽后54天)'測量每个重复的四株随机选出的植株的株高。这些測量的结果表明，HP-1000TM处理过的植株约比UTC植抹高约26%(表39)。此外还计数了每株植株的芽数、花数或果实数。这些结果表明，HP-1000TM处理过的植株比UTC植株多61%以上的花、果实或芽(表40)。表39-HP-1000TM处理后得到的Jalapeno胡椒株高的增加ss..................K奉("^S^S厂…一H'(S石…—…萬Ttjfc^^rUTC—7.0a—HP-100030jig/ml8.6b23.6YK^5un.can-KIvSJ7—SS—举W匿木g扁享每^羊^f:oVoT^;J^丰iiH:表40-HP-1000TM处理后Jalapeno胡椒的花数、果实数或芽数的增加.............^"i^^:ii咸^^…—管管j^r^snS丰"版^K芽数/抹1UTC—20.6a—HP-1000TM30ng/ml12.8b61.3n^6un—can-—ivStv—s^—举w-木^享每w羊扁^iig管f=bVoy^j—;jc—丰'丄—^i、n':实施例21-应用HP-1000TM得到的烟草生长增强将烟草幼苗移栽进随机化的田间小区，重复三次。移栽后，以三个比率之一(15、30或60昭/ml活性成分)叶喷洒.HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)。六十天之后，第二次叶施用HP-1000。第二次施用后两天，对每种处理的10抹随机选出的植株测量株高、计数单抹叶数并测量叶大小(面积)。这些測量的结果表明，用HP-1000TM进行处理显著增强了烟草植物的生长(表41、42和43)。抹高增加了6-13%,同时用HP-1000tm以30和6C^g/ml处理的植抹平均单抹叶数比UTC多1片以上。然而，最显著的是，用HP-100Qtm以15、30和60jig/ml处理导致叶面积的相应增加。单抹叶数多1片和平均叶大小(面权)增加的烟草植抹表现出商业性的显著反应。表4卜HP-1000TM处理后烟草株高的增加<table>complextableseeoriginaldocumentpage68</column></row><table>表42-HP-IOOOTM处理后烟草单抹叶数的增加<table>complextableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table>表43-HP-1OOOTM处理后烟草叶面积的增加<table>complextableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table>实施例22-应用HP-1000TM得到的冬小麦生长增强以每100磅种子3盎司制成品(3%活性成分)的比率，将HP-1000(EDENBioscienceX解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)干粉"撒粉"在冬小麦种子上。然后用常规播种设备将这些种子播种进100英尺长、11.7英尺宽的随机化试验小区中。其它处理包括以每IOO磅种子1盎司制成品向种子"撒粉"HP-1000tm千粉(3。/。活性成分)；用浓度为20pg/ml活性成分的HP-1000TM溶液浸泡种子四小时、风干并种植；用标准化学品(Dividend⑧)杀真菌剂"撒粉"；以及一个不处理的对照(UTC)。种植后8天，HP-1000TM处理的种子开始出苗，而UTC和化学标准品处理的种子直到预期的正常时间，即种植后约14天才出苗。种植后41天，从田中取出幼茴并进行评估。目测并判断以3盎司/100磅"撒粉"HP-1000TM处理的小麦的根重量是其它任何一种处理的约两倍。大田试验之后，设计一个溫室试验对这些结果获得确证。处理包括种植前以每100磅种子3盎司的比率向小麦种子撒HP-1000TM(10。/。活性成分)干粉；以溶液浓度为20mg/ml的HP-1000TM浸泡种子、然后种植；以及一个不处理的对照(UTC)。将从每种处理得到的小麦种子以每盆25粒种子的比率种植，每种处理用5'盆作为重复。种植后十五天，从每个处理盆中取出十抹随机选择的幼苗，仔细地弄干净，并測量根长度。由于单株幼苗的地上部分并不表现任何处理效果，因此用HP-1000TM处理导致的根生长增强并不影响样本选择。由两种HP-1000TM处理得到的根生长增强都显著强于UTC(表49);然而撒粉处理的种子看起来表现出略好的结果。表44-HP-100QTM处理后小麦幼苗的根生长的增强处理比率根长度(cm)1高于UTC的％UTC—35.6a—HP-1000TM3盎司/100磅41.0b17.4(撒粉)HP-誦20|iig/ml40.8b14.6(浸泡)根据Duncan氏MRT,后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。实施例23-施用HP-1000TM得到的黄瓜生长增强对工业化生产的黄瓜的大曰试验包括四种处理两种比率(20或40吗/ml)的HP-1000TM(EDENBioscience)(解淀粉欧文氏菌过敏反应诱发剂制剂)，一种用于病害防治的化学标准品(Bravo(ZenecaAgProducts,Wilmington,Del.)+Maneb⑧)和一个不处理的对照(UTC)。每种处理在3X75英尺的小区中重复四次，每种处理的植抹间隔约2英尺。从长出第一片真叶升始H"喷洒HP-1000TM,并以14天的间隔重复直到最后收获，总共进行六次施用。如果条件允许，每七天或更短时间间隔施用标准杀真菌剂混合物。第一次施用HP-1000TM约两个月后(五次喷洒HP-1000TM之后)开始工业化收获，第一次收获约14天之后进行最后的收获。由第一次收获得到的结果表明，用HP-1000TM处理通过增加收获黄瓜的总数而不是单个黄瓜的平均重量而增加了黄瓜平均产量(表45-47)。在最后一次收获中也注意到有相同的趋势(表48-49)。在商业上很重要的是，由HP-1000TM处理得到的增产并非通过显著增加黄瓜的平均大小获得。表45-HP-100QTM处理后第一次收获时黄瓜产量的增加处理比率(活性成分)产量/trt'CkgO髙于UTC的。/。UTC…10.0a—Bravo+Maneb才妄标签(label)10.8a8.4HP-100020吗/ml12.3ab22.8HP-100040吗/ml13.8b,38.0'根据Duncan氏MRT，后面芾有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。表46-HP-1000TM处理后第一次收获时黄瓜果实数目的增加处理比率(活性成分)果实数/trt1高于UTC的％UTC—24.5a…Bravo+Maneb按标签27.6ab12.8HP-誦20pg/ml31.2b27.0HP-100040fig/ml34.3b39.8根据Duncan氏MRT,后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。表47-HP-100QTM处理后第一次收获时黄瓜的平均重量<table>complextableseeoriginaldocumentpage71</column></row><table>根据Duncan氏MRT，后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。表50-HP-100QTM处理后第三次收获B寸黃瓜的平均重量处理比率(活性成分)重量/果实(g)与UTC相比的变化％UTC…255—Bravo+Maneb按标签232-9HP墨誦tm20(ig/ml247-3HP-1000404g/ml237-7根据Duncan氏MRT,后面帝有不同字母的平均值在P=0.05的水平上有显著差异。实施例24-得自丁香假单胞菌丁香致病变种的harpin^诱导番茄的生长增强为測试harpin^(即得自丁香假单胞菌丁香致病变种的过敏反应诱发剂)(He,S.Y.,等人，"丁香作支单胞菌丁香致病变种的harpinpss.通过Hrp途径分泌、并在植物中诱发过敏反应的一种蛋白,"Ce!173:1255-66(1993)，特此通过引用结合紂本文中)是否也刺激植物生长，将番^种子(Mwg/oZ)e变种)播种在裝有人工土壤的8英寸盆中。播种后10天，将幼苗移栽到单独的盆中。试验的整个过程中，植抹间的肥料、水灌溉、溫度和土壤湿度雄持一致。移栽后16天，测量起始株高并第一次施用harpinpss,这一天被称为第O天。第二次施用在第15天进行。在第10天和第30天收集另外的生长数据。在第30天收集的最后一次数据包括抹高和鲜重。通过发酵包含带有编码harpin^的基因(即Zz/pZ)的质粒的大肠杆菌DH5，产生试验中所用的harpin^。收获细胞，重悬浮于5mM磷酸钾緩沖液，超声处理进行破碎。将超声处理的材料煮沸5分钟，然后10,000rpm离心10分钟。上清液可被认为是无细胞诱发剂制备物(CFEP)。使用与用来制备细胞悬浮緩沖液的相同緩沖液制备20和50吗/mlharpinpss溶液。由包含相同质粒但不包含/^/Z基因的相同菌株制备的CFEP用作对照处理的材料。将润湿剂PineneH(DrexelChemicalCo.,Memphis,Tenn.)力口入harpin^溶液中，达到0.1%的浓度，然后将harpin^喷洒到番茄植抹上直到形成溢流。表51显示在harpin^处理組和对照组间有显著差异。harpin^处理的番茄高度增加超过10%。这个数据支持harpin^与得自解淀粉欧文氏菌的过敏反应诱发剂相似地起作用的说法，因为当其应用于番茄和许多其它植物物种时，具有生长增强的作用。除番茄高度显著增加外，harpin^处理的番茄的生物量更多、叶子大、花成果(flowerseteing)早以及总体上外观更健康。表51-Harpin^增强番茄植株的生长<table>complextableseeoriginaldocumentpage73</column></row><table>抹高測量精确至0.5cm。第0天是指记录初始株高并进行第一次施用的那一天。2给出平均值的同时在圆括号中給出了SD(所有处理組的n=20)。3不同宇母(a和b)表明平均值间有显著差別(P-0.05)。首先用ANOVA，然后用FisherLSD评估差异。虽然本发明已经为例证目的详细描述；但应当理解，这些细节仅仅是为此目的，在那些方面，本领域的技术人员可以做出变更，而不会偏离由下面的杈利要求书所确定的本发明的精神和范围。序列表(1)一般资料(i)申请人:CornellResearchFoundation,Inc.(ii)发明名称植物生长的增强(iii)序列数10(iv)通信地址工(A)收信人Nixon,Hargrave,Devans&DoyleLLP(B)街道ClintonSquare,P.O.Box1051〖C)城巿Rochester(D)州纽约州(E)国家美国(F)邮政编码14603(v)计算机可读形式(A)媒体类型软盘(B)计算机IBMPC兼容机(C)操作系统PC-DOS/MS-DOS(D)软件PatentlnRelease#1.0,版本1.30(vi)当前申请数据(A)申请号(B)提交日期a(C)分类(vii)在先申请数据(A)申请号US60/036,048、(B)提交日期1997年1月27曰(viii)代理律师/代理人资料-(A)姓名Goldman,MichaelL.(B)注册号30,727(C)参考/档案号19603/1502(ix)电訊资料(A)电话(716)263-1304(B)传真(716)263-1600(2)SEQlDNO:l的信息(i)序列特征(A)长度338个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓朴学线性分子类型蛋白质(xi)序列描述SEQIDN0:1:MetGinlieThr工leLysAlaHisGlyLeuGlyAlaGinGlyLieuLys20LeuGlySerSerValAspLysLeu3540SerAlaLeuThrSerMetMetPhe5055GlyAlaSerSerLysGlyIjeuGlySS70PheGlyAsnGlyAlaGinGlyAla85SerGlyGlyAspAlaLeuSerLysLeuLeuGlyHisAspThrValThr*115120LeuAlaAsnSerMetLeuAsnAla13013SAsnAlaPheGlySerGlyValAsn145150AsnGlyLeuGlyGinSerMetSer155AlaGlyGlyLeuGinGlyLeuSer180GlyAsnAlalieGlyMetGlyVal13S200LeuSerAsnValSerThrHisVal210215AspLysGluAspArgGlyMetAla225230GinTyrProGlu工lePheGlyLys245SerSerProLysThrAspAspLys2S0工leGlyGlyAspLeuGlyValSer1015GlyLeuAsnSerAlaAlaSerSer2530SerSerThr工leAspLysLeuThr4SGlyGlyAlaLeuAlaGinGlyLeu60MetSerAsnGinLeuGlyGinSer7580SerAsnLeuLeuSerValProLysMetPheAspLysAlaLieuAspAsp105*110LysLeuThrAsnGinSerAsnGin12SSerGinMetThrGinGlyAsnMetAsnAlaLeuSerSer工leLeuGly155ISOGlyPheSerGinProSerLeuGly170175GlyAlaGlyAlaPheAsnGinLeu1B5190GlyGinAsnAlaAlaLeuSerAlaAspGlyAsnAsnArgHisPheVal220LysGlu工leGlyGinPheMetAsp235'240ProGluTyrGinLysAspGlyTrp2502S5SerTrpAlaLysAlal^uSerLys270ProAspAspAspGlyMetThrGlyAlaSerMetAspLysPheArgGin27528026SAlaMetGlyMetlieLysSerAlaValAlaGlyAsp了hrGlyAsn-Thr290295300AsnLeuAsnLeuArgGlyAlaGlyGlyAlaSerLeuGlylieAspAla30S310.315320AlaValValGlyAspLyslieAlaAsriMetSerLeuGlyLysLeuAla32533033SAsnAla(2)SEQIDNO:2的信息(i)序列特征(A)长度2141个碱基对(B)类型:核酸(C)链型单链(D)拓朴学线性分子类型DNA(基因組)序列描述SEQIDNO:2:GO(xi)CGA丁TTTACCCGGGTGAACG丁GCTATGACCGACAGCATCACGGTATTCGACACCGTTACG60GCGTT丁ATGGCCGCGATGAACCGGCATCAGGCGGCGCGCTGGTCGCCGCAATCCGGCGTC120GATCTGGTATTTCAGTTTGGGGACACCGGGCGTGAACTCATGATGCAGATTCAGCCGGGG180CAGCAATATCCCGGCATGTTGCGCACGCTGCTCGCTCGTCGTTATCAGCAGGCGGCAGAG240丁GCGATGGCTGCCATCTG丁GCCTGAACGGCAGCGATGTATTGATCCTCTGGTGGCCGCTG300CCGTCGGATCCCGGCAGTTATCCGCAGGTGATCGAACGTTTGTTTGAACTGGCGGGAATG3S0ACGTTGCCGTCGCTATCCATAGCACCGACGGCGCGTCCGCAGACAGGGAACGGACGCGCC420CGATCATTAAGATAAAGGCGGCTTTTTTTATTGCAAAACGG丁AACGGTGAGGAACCGTTT480CACCGTCGGCGTCACTCAGTAACAAGTATCCATCATGATGCCTAiATCGGGATCGGCGTG540GGCATCCG丁TGCAGATACTTTTGCGAACACCTGACATGAATGAGGAAACGAAAT丁ATGCAGOOAATTACGATCAAAGCGCACATCGGCGGTGATTTGGGCGTCTCCGGTCTGGGGCTGGGTGCTCAGGGACTGAAAGGACTGAATTCCGCGGCTTCATCGCTGGGTTCCAGCGTGGATAAAC了720GAGCAGCACCATCGATAAGTTGACCTCCGCGCTGACTTCGATGATGTTTGGCGGCGCGCT780qGCGCAGGGGCTGGGCGCCAGCTCGAAGGGGCTGGGGATGAGCAATCAACTGGGCCAGTC840TTTCGGCAATGGCGCGCAGGGTGCGAGCAACCTGCTATCCGTACCGAAATCCGGCGGCGA300TGCGTTGTCAAAAATGTT丁GATAAAGCGCTGGACGATCTGCTGGGTCATGACACCGTGACCAAGCTGACTAACCAGAGCAACCAACTGGCTAATTCAATGCTGAACGCCAGCCAGATGAC1020CCAGGGTAATATGAATGCGTTCGGCAGCGGTGTGAACAACGCACTGTCGTCCATTCTCGG1080CAACGGTCTCGGCCAGTCGATGAGTGGCTTCTCTCAGCCTTCTCTGGGGGCAGGCGGCTT114.0GCAGGGCC丁GAGCGGCGCGGGTGCATTCAACCAGTTGGG11AATGCCATCGGCATGGGCGT1200GGGGCAGAATGCTGCGCTGAGTGCGTTGAGTAACGTCAGCACCCACGTAGACGGTAACAA工2S0CCGCCACTTTGTAGATAAAGAAGATCGCGGCATGGCGAAAGAGATCGGCCAGTTTATGGA1320TCAGTATCCGGAAATATTCGGTAAACCGGAGATGGCTGGAGTTCGCCGAA1380GACGGACGACAAA丁CCTGGGCTAAAGCGCTGAGTAAAC,CGGATGATGACGGTA丁GACCGG1440CGCCAGCATGGACAAATTCCGTCAGGCGATGGGTATGATCAAAAGCGCGG1500TACCGGCAATACCAACCTGAACCTGCGTGGCGCGGGCGGTGCATCGCTGGGTATCGATGC15S0GGCTCTCGTCGGCGATAAAATAGCCAACATGTCGCTGGGTAAGCTGGCCAACGCCTGATAA丁CTGTGCTGGCCTGATAAAGCGGAAACGAAAAAAGAGACGGGGAAGCCTGTCTCTTTTC1S80TTATTATGCGGTTTATGCGGTTACCTGGACCGGTTAATCATCGTCA丁CGATCTGGTACAA1740ACGCACATT丁TCCCGTTCATTCGCGTCGTTACGCGCCACAATCGCGATGGCATCTTCCTC1B00GTCGCTCAGATTGCGCGGCTGATGGGGAACGCCGGGTCGAATATAGAGAAACTCGCCGGC1BS0CAGATGGAGACACGTCTGCGATAAATC丁GTGCCGTAACGTG7TTCTATCC1S20CAGATAGATTGCGGTTTCGTAATCAACATGGTAATGCGGTTCCGCCTGTGCGCCGGCCGGGATCACCACAATATTCATAGAAAGCTGTCTTOCACCTACCGTATCGCGGGAGATACCGAC2040AAAATAGGGCAGTTTTTGCGTGGTATCCGTGGGGTGTTCCGGCCTGACAATCTTGAGTTG2100G丁TCGTCATCATCTTTCTCCATCTGGGCGACCTGATCGGTT2141(2)SEQIDNO:3的信息①(xi)MetSer工leGlyAsnAlaGinAsnSO序列特征(A)长度403个氛基酸(B)类型氨基酸(C)链型:(D)拓朴学:线性分子类型蛋白质序列描述SEQIDNO:3:L>euAsnThrSerGlyLeuGlyAlaSerThrMetGinlie51015SerGlyA"GlyGlyAsnAsnGlyLeuLeuGlyThrSerArgGin202S30GlyLeuGlyGlyAsnSerAlaLeuGlyLeuGlyGlyGlyAsn354045AspThrValAsnGinLeuAlaGlyLeuLeuThrGlyMetMetSSSDMetGlyGlyLeuLeuThrGinGlyL>euGly225GlyAlaValAsp305GlyLysMetMetSerGlyGlyLeuLeuSerAsn100GlySerLys115Asp-GinAla130SerGlyThrLieuLysMetAspGlyThr180GluGinAsnMetGlyAsn210GlyGinGlyGly!LysGlyGlyAsnAla2S0LeuAsnAsp27SAsnLysGlyGinTyrProGinGluValProAspAsp340AlaLysGly355GlyAsnLeuGin370MetMet70GlyAsn85AlaLeuGlyGlyLeuGlyAspSer150PheSerGinGlyAlaTyrGlyLeuGlyAsn230LeuGin245ValGly工leGlyAspArgGluVal310LysThr32SAspGlyMetlieAlaArgGlyGlyGlyGlyIjeuGlyAsnAspMet105AsnAsnThr120lieAsnSer135ThrSerAspGlu工leMetSerSerSer18SLysLysGly200SerGinlieu215AlaGlyThr*Asn!>euSerThrGlylie2S5ThrHisArg280AlaMetAlaPheGlyLysAspAspLysGlyGlyLeuThrThrSerGin170GlyValLeuGlyGly250GlyHisLysProSer330LeuMetGly7SSerGlyGlyGlyGlySerSerThrThr12SSerGinAsn140SerAspPro155SerIjeuPheGlyL>ysGinThrAspAla205GlyAsnGly220LeuAspGly235ProValAspMet!>ysAlaSerSerThr285GlyGlyLeuGlyL>euAsn110Leu80GluThrAsnSerProAspAspMetGinGlyAsp175ProThrUeuSerGlyLeuSerSerTyrGin2S5Glylie270SerGinISOGlyGluGlyGlyLeu240GinGinArgSerPheGlu工leGlyGinPhe300MetGinTyrGinLysGlyPro315320TrpAla.LysAlaLeuSer33SMetThrProAla345SerMetGluLysArgProMetAlaGlyAsp3S0365GlyAlaGlyGlySerSerLieu375380GinPheAsn350ThrGlyAsnGlylieAspAlaMetMetAlaGlyAsp3BS390GlyAlaAlaAla工leAsnAsnMetAlaLeuGlyLysLeu395'400(2)SEQIDNO:4的信息(i)序列特征(A)长度1288个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓朴学:线性(ii)分子类型DN八(基因組)(xi)序列描述SEQIDNO:4:AAGCTTCGGCATGGCACGTTTGACCGTTGGGTCGGCAGGGTACGTTTGAATTAT丁CATAASOGAGGAATACGTTATGAGTCTGAATACAAGTGGGCTGGGAGCGTCAACGATGCAAATTTCT120ATCGGCGGTGCGGGCGGAAATAACGGGT丁GCTGGGTACCAGTCGCCAGAATGCTGGGTTG180GGTGGCAATTCTGCACTGGGGCTGGGCGGCGGTAATCAAAATGATACCG丁CAATCAGCTG240GCTGGCTTACTCACCGGCATGATGATGATGATGAGCATGATGGGCGG丁GGTGGGCTGATG300GGCGGTGGCTTAGGCGGTGGC丁TAGGTAATGGCTTGGGTGGCTCAGGTGGCCTGGGCGAA3S0GGACTGTCGAACGCGCTCAACGATA丁GTTAGGCGGTTCGCTGAACACGCTGGGC丁CGAAA"0GGCGGCAACAATACCACTTCAACAACAAATTCCCCGCTGGACCAGGCGCTGGGTATTAAC-480TCAACGTCCCAAAACGACGATTCCACCTCCGGCACAGATTCCACCTCAGAC丁CCAGCGAC540CCGATGCAGCAGCTGCTGAAGATG丁TCAGCGAGA亇AATGCAAAGCCTGTTTGGTGATGGG600CAAGATGGCACCCAGGGCAGTTCCTCTGGGGGCAAGCAGCCGACCGAAGGCGAGCAGAACSSOGCCTATAAAAAAGGAGTCAC丁GATGCGC丁GTCGGGCC丁GATGGGTAATGGTCTGAGCCAG720CTCCTTGGCAACGGGGGACTGGGAGGTGGTCAGGGCGGTAATGCTGGCACGGGTCTTGAC780GGTTCGTCGCTGGGCGGCAAAGGGCTGCAAAACCTGAGCGGGCCGGTGGACTACCAGCAG840TTAGGTAACGCCGTGGGTACCGG丁ATCGGTATGAAAGCGGGCATTCAGGCGC丁GAATGAT900ATCGGTACGCACAGGCACAGTTCAACCCGTTCTTTCGTCAATAAAGGCGATCGGGCGATGGCGAAGGAAATCGGTCAG丁TCATGGACCAGTATCCTGAGGTGTTTGGCAAGCCGCAGTAC1020CAGAAAGGCCCGGGTCAGGAGGTGAAAACCGATGACAAATCATGGGCAAAAGCACTGAGC1080AAGCCAGATGACGACGGAATGACACCAGCCAGTATGGAGCAGTTCAACAAAGCCAAGGGC1140A丁GATCAAAAGGCCCATGGCGGGTGATACCGGCAACGGCAACCTGCAGGCACGCGGTGCC1200GGTGGTTCTTCGCTGGGTATTGATGCCATGATGGCCGGTGATGCCATTAACAATATGGCA12S0CT丁GGCAAGCTGGGCGCGGCTTAAGCTT1288(2)SEQIDNO:5的信息(i)序列特征(A)长度341个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓朴学:线性(ii)分子类型蛋白质(xi)序列描述SEQIDNO:5MetGinSerAlaLeuValSerLysAla35ArgAsnGly50LysSerMet工leAlaAlaGlyAlaSerThrGinVal115ThrlysGin130LeuAsnLys145LysProAspLeuAspGlyGlyGinGinThrGlyGly210ValMetGly225GlyAsnThrLieuSerLeuAsnSerSerSerLeuGin10LeuValArgProGluAlaGluThrThr2025LeuGinGinLeuAlaLeuAlaAsp85Ala100AspI^euAsnAsp工leSerAsp180GlyAlaGly165GluGluValVal40AspAspSerS5AspGlyLys70LysLeulieSerAlaSerGlyLeuAla120GlyThrSer*13SGinPheMet150SerTrpValThrAlaAlaLeuAspArgValLrysljeuAlalieuGlyGlyAsnGinGin200GlyThrPro215SerAlaHisGly105LysPheAspAsn185SerProLeiiGlySOGlyGlyGly75GluLysLeuThrGlyGinSerMetLeuSerGluAsp140AspAsnPro155GluLeuLys170ArgSerAlaThrProAlaMet15GlySerThrSer30GluGluLeuMet45LysLeuLeuAlalieGluAspVal80GlyAspAsnPhe95GinAspLeuMet110AspAspLeuLeu12SAspMetProMetAlaGinPheProISOGluAspAsnPhe17SLeuAsplie工le130SerAspAlaGlySerLeuAlaGly205SerPheSerAsnAsnSerSer220ProGly245Leu工leAspAlaAsnThrGlyProGlyAspSer230235240GluAlaGlyGinLeu工leGlyGluLeulieAsp250255ArgGlyLeuGinSer2S0AsnThrProGliiThr275AspLeuAspGinLeu290ThrLeuLysAspAla305AlaGinlieAlaThr325AsnGinAlaAlaAla340(2)SEQIDNO:6的信息(i)序列特征(A)长度1026个碱基对(B)类型:核酸(C)链型:单链(D)拓朴学:线性(ii)分子类型DNA(基因组)(xi)序列描述SEQIDNO:6:ATGCAGAGTCTCAGTCTTAACAGCAGCTCGCTGCAAACCCCGGCAATGGCCC丁TGTCCTGSOGTACGTCCTGAAGCCGAGACGACTGGCAGTACGTCGAGCAAGGCGC丁TCAGGAAGTTGTC120G丁GAAGCTGGCCGAGGAACTGATGCGCAATGGTCAACTCGACGACAGCTCGCCATTGGGA180AAACTGTTGGCCAAGTCGATGGCCGCAGATGGCAAGGCGGGCGGCGGTATTGAGGATGTC240ATCGCTGCGCTGGACAAGCTGATCCATGAAAAGCTCGGTGACAACTTCGGCGCGTCTGCG300GACAGCGCCTCGGGTACCGGACAGCAGGACCTGATGACTCAGGTGCTCAATGGCCTGGCC3S0AAGTCGATGCTCGATGATCTTCTGACCAAX3CAGGATGGCGGGACAAGCTTCTCCGAAGAC420GATATGCCGATGCTGAACAAGATCGCGCAGTTCATGGATGACAATCCCGCACAGTTTCCC480AAGCCGGACTCGGGCTCCTGGGTGAACGAACTCAAGGAAGACAACTTCCTTGATGGCGAC540GAAACGGCTGCGTTCCGTTCGGCACTCGACATCATTGGCCAGCAACTGGGTAATCAGCAG600AGTGACGCTGGCAGTCTGGCAGGGACGGGTGGAGGTCTGGGCACTCCGAGCAGTTTTTCCSSOAACAACTCGTCCGTGATGGGTGATCCGCTGATCGACGCCAATACCGGTCCCGGTGACAGC720GGCAATACCCGTGGTGAAGCGGGGCAACTGATCGGCGAGCTTATCGACCGTGGCCTGCAA'780TCGGTATTGGCCGGTGGTGGACTGGGCACACCCGTAAACACCCCGCAGACCGGTACGTCG84.0ValLeuAlaGlyGlyGlyLeuGlyThrProVal2S5270GlyThrSerAlaAsnGlyGlyGinSerAlaGin280285LeuGlyGlyLeuLeuLeuLysGlyLeuGluAla295300—GlyGinThrGlyThrAspValGinSerSerAla310315320LeuLeuValSerThr*LeuLeuGinGlyThrArg33033SGCGAATGGCGGACAGTCCGCTCAGGATCTTGATCAGTTGCTGGGCGGCTTGCTGCTCAAG300GGCCTGGAGGCAACGCTCAAGGATGCCGGGCAAACAGGCACCGACGTGCAGTCGAGCGCTS60GCGCAAATCGCCACCTTGCTGGTCAGTACGCTGCTGCAAGGCACCCGCAATCAGGCTGCA1020GCCTGA102S(2)SEQIDNO:7的信息(i)序列特征(A)长度344个氛基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓朴学:线性(ii)分子类型蛋白质(xi)序列描述SEQIDNO:7:MetSerValGlyAsnlie5AsnLeuAsnValAlaAsn65AsnAlaGinAlaGly145GluGlyGinAsp35AlaLeu50ThrGlyAspProAsnLysAlaLeu115L>euHis130GlyAlaAlaLeuAlaGlyLeu20LeuValAsilSerThr100MetMetAsnAsnThrlieGinAlaLys85GlyGinGinGlyGluAla180Glu1S5GlyLysLysPro70AsnAsnLeuGinAla150工leGinSerProSerAsnLeuProGlyLeuGin10,15AsnThrAsnSerGinGinSerGlyGinSer2530GinValGluLysAsplieLeuAsn工lelie4045AlaAlaGinSerAlaGlyGlyAsnThrGly55'_SOAlaLysAspGlyAsnAlaAsnAlaGlyAla7580AspProSerLysSerGinAlaProGinSerSO35ValAspAspAlaAsnAsnGinAspProMet105110LeuGluAspLeuValLysLeuLeuLysAla12012SProGlyGlyAsnAspLysGlyAsnGlyVal135140LysGlyAlaGlyGlyGinGlyGlyLeuAla155ISOGluGin工leLeuAlaGinLeuGlyGlyGly170.175GlyAlaGlyGlyGlyValGlyGlyAlaGlyGly18S130AlaAspAla225GinAlaAlaAlaGly30SAspGly210GlyGlyLeuGinAsn290Gly195GlyAspGlyValGly27SProGlySerGlyAsnGlyValAlaAsn215ValAsnLeuGin260Thr245Gly230GlyGlyGly20OGlyAsnAsnGlyAlaValLeuGinMetMetGinGinGlySerLysGlyGlyAlaAsnGin255GinAsnAsnLeuGin310ValGinlieLeuGinSerThrSer340Gin325Thr(2)SEQIDNO:8的信息:(i)(ii)(xi)序列特征(A)长度1035个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓朴学线性分子类型DNA(基因組)序列描述SEQIDNO:8:AlaGlyGlyGinAlaAla205AlaAsn220AsnGlyProGinGly2S5280GlyGlySerGin工leProGinMetLeuAlaGinProMet250GlyAsiiSerMetAla330AspAsp235LeuMetLieuGlyAlaSerGlyGlySerGluLysGlylieL>eu25SGlyAsn270AlaAsp240AsnGinPro285AlaSerGlyAlaAsp300AspValGinAsnGlyAspVal31SGinSerLysGluGlySer33SSerVal320GinATGTCAGTCGGAAACATCCAGAGCCCGTCGAACCTCCCGGGTCTGCAGAACCTGAACCTCSOAACACCAACACCAACAGCCA.GCAATCGGGCCAGTCCGTGCAAGACCTGATCAAGCAGGTC120GAGAAGGACATCCTCAACATCATCGCAGCCCTCGTGCAGAAGGCC亡CACAGTCGGCGGGC1B0GGCAACACCGGTAACACCGGCAACGCGCCGGCGAAGGACGGCAATGCCAACGCGGGCGCC240AACGACCCGAGCAAGAACGACCCGAGCAAGAGCCAGGCTCCCCAGTCGGCCAACAAGACC300GGCAACGTCGACGACGCCAACAACCAGGATCCGATGCAAGCGCTGATGCAGCTGCTGGAA3S0GACCTGGTGAAGCTGCTGAAGGCGGCCCTGCACATGCAGCAGCCCGGCGGCAATGACAAG420GGCAACGGCGTGGGCGGTGCCAACGGCGCCAAGGGTGCCGGCGGCCAGGGCGGCCTGGCC480GAAGCGCTGCAGGAGATCGAGCAGATCCTCGCCCAGCTCGGCGGCGGCGGTGCTGGCGCC540GGCGGCGCGGGTGGCGGTGTCGGCGGTGCTGGTGGCGCGGATGGCGGCTCCGGTGCGGGTsooGGCGCAGGCGGTGCGAACGGCGCCGACGGCGGCAATGGCGTGAACGGCAACCAGGCGAAC"0GGCCCGCAGAACGCAGGCGATGTCAACGGTGCCAACGGCGCGGATGACGGCAGCGAAGAC720CAGGGCGGCCTCACCGGCGTGC丁GCAAAAGCTGATGAAGATCCTGAACGCGCTGGTGCAG780ATGATGCAGCAAGGCGGCCTCGGCGGCGGCAACCAGGCGCAGGGCGGCTCGAAGGGTGCCB40GGCAACGCCTCGCCGGCT丁CCGGCGCGAACCCGGGCGCGAACCAGCCCGGTTCGGCGGATSOOGATCAATCGTCCGGCCAGAACAATCTGCAATCCCAGATCATGGATGTGGTGAAGGAGGTC9g0GTCCAGATCCTGCAGCAGATGCTGGCGGCGCAGAACGGCGGCAGCCAGCAGTCCACCTCG1020ACGCAGCCGATGTAA1035(2)SEQIDNO:9的信息:(i)序列特征(A)长度26个氛基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓朴学:线性(ii)分子类型蛋白质(xi)序列描述SEQIDNO:9:-ThrLeu工leGluLeuMetlieValValAlalielieAlalieLeuAla1_51015Ala工leAlaLeuProAlaTyrGinAspTyr202S(2)SEQIDNO:10的信息(i)序列特征CA)长度20个氛基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓朴学线性.(ii)分子类型蛋白质(xi)序列描述SEQIDNO:IO:SerSerGinGinSerProSerAlaGlySerGluGinGinLeuAspGin151015LeuLeuAlaMet20权利要求1.一种增强植物生长的方法，包括向植物或植物种子施用来源于细菌性植物病原体的过敏反应诱发剂多肽或蛋白，其中所述施用能增强所述植物或由所述植物种子长成的植物的生长。2.权利要求1的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于选自以下的细菌性植物病原体欧文氏菌属、假单胞菌属、黄单胞菌属以及它们的混合物。3.权利要求2的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于菊欧文氏菌或解淀粉欧文氏菌。4.权利要求2的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于茄假单胞菌或丁香假单胞菌。5.权利要求2的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于野油菜黄单胞菌。6.权利要求1的方法，其中所述植物选自双子叶植物和单子叶植物。7.权利要求6的方法，其中所述植物选自稻、小麦、大麦、黑麦、棉花、向日葵、花生、玉米、马铃薯、甘薯、菜豆、豌豆、菊苣、莴苣、苣萝菜、甘蓝、花椰菜、硬花5求花椰菜、芜菁、萝卜、菠菜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、芽菜、胡萝卜、南瓜、西葫芦、绿皮南瓜、黄瓜、苹果、梨、瓜、草莓、葡萄、树莓、菠萝、大豆、烟草、番茄、蜀黍以及甘蔗。8.权利要求1的方法，其中在通过喷洒、注入或磨擦叶面进行所述施用期间，在接近所述施用开始的时刻处理植物。9.权利要求l的方法，其中在通过喷洒、注入、包被、撒粉或浸渍进行所述施用期间处理植物种子。10.权利要求1的方法，其中以还包含一种载体的组合物将所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白施用于植物或植物种子。11.权利要求10的方法，其中所述载体选自水、水溶液、浆液和粉末。12.权利要求10的方法，其中所述组合物包含浓度大于0.5nM的过敏反应诱发剂多肽或蛋白。13.权利要求10的方法，其中所述组合物还包含选自以下的添加剂肥料、杀虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂以及它们的混合物。14.权利要求1的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白是以已分离的形式施用的。15.权利要求1的方法，其中所述施用导致所述多肽或蛋白渗透进植物。16.权利要求1的方法，其中所述施用导致林高增加。17.权利要求16的方法，其中在所述施用期间植林受到处理。18.权利要求16的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，所述方法另外还包括中，并从种植在土壤中的种子繁殖出才i^朱。19.权利要求1的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，来增加发芽的植物种子的数量，所述方法还包括将用所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的种子种植在天然或人工土壤中，并从种植在土壤中的种子繁殖出植林。20.权利要求l的方法，其中所述施用导致产量提高。21.权利要求20的方法，其中在所述施用期间植抹受到处理。22.权利要求20的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，所述方法另外还包括将用所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的种子种植在天然或人工土壤中，并从种植在土壤中的种子繁殖出植抹。23.权利要求1的方法，其中所述施用导致发芽更早。24.权利要求23的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，所述方法另外还包括将用所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的种子种植在天然或人工土壤中，并从种植在土壤中的种子繁殖出植抹。25.权利要求23的方法，其中所述施用导致成熟更早。26.权利要求25的方法，其中在所述施用期间植株受到处理。27.权利要求25的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，所述方法另外还包括将用所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的种子种植在天然或人工土i裏中，并从种植在土壤中的种子繁殖出植抹。28.权利要求1的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，所述方法另外还包括将用所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的种子种植在天然或人工土壤中，并从种植在土壤中的种子繁殖出植株。29.权利要求28的方法，所述方法另外还包括将所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽以非感染的形式施用于所繁殖出的植4朱以进一步增强生长。30.权利要求1的方法，其中所述施用导致果实和植;昧着色更早31.权利要求30的方法，其中在所述施用期间植物种子受到处理，所述方法另外还包括将用所述过敏反应诱发剂蛋白或多肽处理过的种子种植在天然或人工土壤中，并从种植在土壤中的种子繁殖出植抹。32.—种增强植物生长的方法，包括用编码一种来源于细菌性^1物病原体的过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化植物或植物种子，其中过敏反应诱发剂蛋白被表达，并增强被转化的植物或由被转化的种子长成的植物的生长。33.权利要求32的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于选自以下的细菌性植物病原体欧文氏菌属、假单胞菌属、黄单胞菌属以及它们的混合物。34.权利要求33的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于菊欧文氏菌或解淀4分欧文氏菌。35.权利要求33的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于茄假单胞菌或丁香假单胞菌。36.权利要求33的方法，其中所述过敏反应诱发剂多肽或蛋白来源于野油菜黄单胞菌。37.权利要求32的方法，其中所述植物选自双子叶植物和单子叶植物。38.权利要求37的方法，其中所述植物选自稻、小麦、大麦、黑麦、棉花、向日葵、花生、玉米、马铃薯、甘薯、菜豆、豌豆、菊苣、莴苣、苣萝菜、甘蓝、花椰菜、硬花5求花椰菜、芜菁、萝卜、菠菜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、芽菜、胡萝卜、南瓜、西葫芦、绿皮南瓜、黄瓜、苹果、梨、瓜、草莓、葡萄、树莓、菠萝、大豆、烟草、番茄、蜀黍以及甘嚴。39.权利要求32的方法，其中转化在植物中进行。40.权利要求32的方法，其中转化在植物种子中进行。41.权利要求32的方法，所述方法还包括向被转化的植物或植物种子施用来源于细菌性植物病原体的过敏反应诱发剂多肽或蛋白，所述施用进一步增强被转化的植物或由被转化的植物种子长成的植物的生长。全文摘要本发明涉及植物生长的增强。这涉及在一定条件下施用非感染型的过敏反应诱发剂多肽或蛋白于植物或植物种子，其中所述条件能有效增强所述植物或由所述植物种子长成的植物的生长。或者，可以提供用编码过敏反应诱发剂多肽或蛋白的DNA分子转化的转基因植物或转基因植物种子，并在有效增强植物生长的条件下，培育所述转基因植物或由所述转基因植物种子产生的植物。文档编号A01N37/46GK101341886SQ200810081508公开日2009年1月14日申请日期1998年1月27日优先权日1997年1月27日发明者D·W·丘,S·V·贝尔,Z·-M·韦申请人:康乃尔研究基金会有限公司