专利名称：：一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂的制作方法
技术领域：
：本发明属于饲料添加剂
技术领域：
，具体涉及一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。
背景技术：
：我国人民食蟹有久远的历史，蟹类中可供食用的主要有三疣梭子蟹、远海梭子蟹、锯缘青蟹和中华绒螯蟹等。螃蟹含有丰富的蛋白质、微量元素等营养，对身体有很好的滋补作用。近年来研究发现，螃蟹还有抗结核作用，吃蟹对结核病的康复大有补益。中医认为螃蟹有清热解毒、补骨添髓、养筋活血、通经络、利肢节、续绝伤、滋肝阴、充胃液之功效。对于淤血、损伤、黄疸、腰腿酸痛和风湿性关节炎等疾病有一定的食疗效果。由于蟹类经济价值较高，我国蟹类养殖业发展迅速，对优质饲料的需求量也迅速增大，仅靠饲喂生蛤、野杂鱼等天然饵料已不能满足蟹类养殖业迅速发展的需要；同时，大量伺喂冰鲜鱼、虾等饵料还会导致养殖水体富营养化，进而导致传染病发生。近年来，针对中华绒螯蟹、锯缘青蟹及三疣梭子蟹的配合词料已经研制成功，并取得了较好的效显。酶是活细胞产生的具有特殊催化能力的蛋白质，它广泛存在于各种生物体内，参与机体和各种生化反应。二十世纪八十年代后期，国外开始广泛使用词料酶，九十年代美国、芬兰的一些词料酶产品先后进入中国市场，从此我国开始饲料酶的研究与应用，目前饲用酶制剂在畜禽养殖业应用已非常普遍，水产养殖业也有一些应用酶制剂的报道。饲料酶制剂可以提高营养成分消化率，节约词料资源，防止动物养殖业造成的环境污染，同时也在一定程度上能够预防动物疾病的发生。RodehIUtscordetal(1995)用添加植酸酶的饲料投喂虹鳟，结果在水温15'C时，磷的利用率从17%提高到49%。Schaferetal(1995)研究发现鲤鱼词料中加入植酸酶，显著提高鱼体增重，粪磷排泄量降低28%。将复合酶制剂添加到罗非鱼、罗氏沼虾、鳖、彭泽鲫和鲫鱼的饲料中，使罗非鱼增重提高10.3%，饲料系数降低13%，罗氏沼虾增重提高48%，鳖增重提高15.7%，饲料系数降低12.5%，显著提高彭泽鲫和鲫鱼的生长(唐文武，1996;李其才，1997;周嗣泉等，2000;陈应华，2001;周兴华，2000)。周克勇(2001)的研究认为，鲤鱼生长性能达到最佳水平需要的益生素添加量为0.57-0.69%,酶制剂为0.15-0.18%。尽管已有一些针对酶制剂水产动物饲料中的研究应用报道，但针对养殖蟹类的词料复合酶制剂尚无报道。因此，急需研制一种能明显提高蟹类对蛋白质、纤维素、淀粉、脂肪及植酸磷的消化率，提高能量的利用率，减少饲料浪费，并能够显著降低蟹类养殖水体氮、磷的排泄量，减轻养殖水体富营养化，改善水体环境，预防蟹类疾病的发生，提高成活率，具有十分明显的经济效益和社会效益的蟹类配合饲料专用复合酶制剂。
发明内容本发明针对现有技术的上述不足，提供一种能明显提高蟹类对蛋白质、纤维素、淀粉、脂肪及植酸磷的消化率，提高能量的利用率，减少饲料浪费，并能够显著降低蟹类氮、磷的排泄量，减轻养殖水体富营养化，改善水体环境，预防蟹类疾病的发生，提高成活率的蟹类配合饲料专用复合酶制剂。为了解决上述问题，本发明的技术方案为一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂它含有中性蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶、植酸酶等五种单酶，将五种单酶按比例加入到含复合稳定剂的水溶液中配制成液态的本发明的蟹类配合词料专用复合酶制剂，使得该蟹类配合饲料专用复合酶制剂中各种单酶酶活如下1)中性蛋白酶的酶活性为10003000IU/g;2)纤维素酶的酶活性为8000-16000IU/g;3)淀粉酶的酶活性为500020000IU/g;4)脂肪酶的酶活性为10-30IU/g;5)植酸酶的酶活性为500800IU/g。本发明上述的含复合稳定剂的水溶液为含有1.5g/L山梨醇、0.5g/L蔗糖、0.15g/L氯化钠、5g/L山梨酸钾和体积百分比为10%甘油的水溶液，山梨醇、蔗糖、氯化钠、山梨酸钾和甘油的加入，是用以保证复合酶活力。蟹类配合饲料制粒后，将本发明的复合酶制剂喷涂到饲料颗粒表面，以避免失活；常温保存6个月后，该复合酶制剂的酶活损失不超过20%;按全价配合饲料计，其添加量为500~1000克/吨。本发明的优点本发明从蟹类的消化生理特点和商业酶的性质出发，运用营养学和生物化学方法，将中性蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶和植酸酶等单酶通过合理配伍，研制了一种蟹类饲料专用复合酶制剂。应用本发明的饲料添加剂能够明显提高蟹类对蛋白质、纤维素、淀粉、脂肪及植酸磷的消化率，提高能量的利用率，减少饲料浪费，并能够显著降低蟹类养殖水体氮、磷的排泄量，减轻养殖水体富营养化，改善水体环境，预防蟹类疾病的发生，提高成活率，具有十分明显的经济效益和社会效益。经多项饲养试验及实验室分析，本复合酶制剂安全、高效、无公害，应用该酶制剂养殖的中华绒螯蟹、锯缘青蟹及三疣梭子蟹完全符合食品卫生要求。具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明做进一步详细描述，但本发明不仅仅局限于以下实施例。本发明的蟹类配合饲料专用复合酶制剂使用的中性蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶等四种单酶是由丹麦诺维信有限公司提供，其中中性蛋白酶的活性为120000IU/g、纤维素酶的活性100000IU/g、淀粉酶的活性为80000IU/g、脂肪酶的活性为2500IU/g;植酸酶由丹麦丹尼斯克公司提供，其活性为5000IU/g(本发明的下述实施例中采用的单酶即为上述购买的五种单酶)。将上述五种单酶按照比例溶于含复合稳定剂的水溶液中，该复合稳定剂中含有1.5g/L山梨醇、0.5g/L蔗糖、0.15g/L氯化钠、5g/L山梨酸钾和体积百分比为10%甘油。蟹类配合饲料制粒后，将本发明的复合酶制剂喷涂到饲料颗粒表面，以避免失活。常温保存6个月后，该复合酶制剂的酶活损失不超过20%。按全价配合饲料计，其添加量为500~1000克/吨。实施例1:按复合酶制剂中中性蛋白酶1000IU/g、纤维素酶8000IU/g、淀粉酶20000IU/g、脂肪酶10IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成本发明的一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。配置过程如下以配置1000g复合酶制剂为例中性蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶、植酸酶五种单酶加入的质量设为x!、x2、x3、x4、x5，则120000IU/gxXl=l000IU/gxl000g;lOOOOOIU/gxx2=8000IU/gxl000g;80000IU/gxx3=20000IU/gxl000g;2500IU/gxX4=lOIU/gxl000g;5000IU/gxx5=800IU/gxl000g;得到x「25/3g"8.3g;X2=80g;X3=250g，X4=4g，X5=160g，则再称取含有1.5g/L山梨醇、0.5g/L蔗糖、0.15g/L氯化钠、5g/L山梨酸钾和体积百分比为10%甘油的复合稳定剂的水溶液1000-X3+X4+X5)-497.7g，将上述五种单酶溶于该含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成本发明的蟹类配合饲料专用复合酶制剂(本发明实施例218的蟹类配合饲料专用复合酶制剂的配置方法亦同)。实施例2:按复合酶制剂中中性蛋白酶1000IU/g、纤维素酶10000IU/g、淀粉酶18000IU/g、脂肪酶15IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合词料专用复合酶制剂。实施例3:按复合酶制剂中中性蛋白酶1000IU/g、纤维素酶12000IU/g、淀粉酶15000IU/g、脂肪酶20IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例4:按复合酶制剂中中性蛋白酶1000IU/g、纤维素酶14000IU/g、淀粉酶10000IU/g、脂肪酶25IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例5:按复合酶制剂中中性蛋白酶1000IU/g、纤维素酶16000IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶30IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例6:按复合酶制剂中中性蛋白酶1000IU/g、纤维素酶16000IU/g、淀粉酶5000IU/g、脂肪酶30IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例7:按复合酶制剂中中性蛋白酶2000IU/g、纤维素酶8000IU/g、淀粉酶18000IU/g、脂肪酶10IU/g、植酸酶700IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例8:按复合酶制剂中中性蛋白酶2000IU/g、纤维素酶10000IU/g、淀粉酶16000IU/g、脂肪酶15IU/g、植酸酶600IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例9:按复合酶制剂中中性蛋白酶2000IU/g、纤维素酶12000IU/g、淀粉酶14000IU/g、脂肪酶20IU/g、植酸酶500IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例10:按复合酶制剂中中性蛋白酶2000IU/g、纤维素酶10000IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶25IU/g、植酸酶600IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例lh按复合酶制剂中中性蛋白酶2000IU/g、纤维素酶8000IU/g、淀粉酶10000IU/g、脂肪酶30IU/g、植酸酶600IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例12:按复合酶制剂中中性蛋白酶2000IU/g、纤维素酶8000IU/g、淀粉酶14000IU/g、脂肪酶30IU/g、植酸酶500IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例13:按复合酶制剂中中性蛋白酶3000RJ/g、纤维素酶8000IU/g、淀粉酶20000IU/g、脂肪酶10IU/g、植酸酶600IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例14:按复合酶制剂中中性蛋白酶3000IU/g、纤维素酶10000IU/g、淀粉酶18000IU/g、脂肪酶15IU/g、植酸酶650IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例15:按复合酶制剂中中性蛋白酶3000IU/g、纤维素酶12000IU/g、淀粉酶14000IU/g、脂肪酶20IU/g、植酸酶700IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例16:按复合酶制剂中中性蛋白酶3000IU/g、纤维素酶15000IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶25IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例17:按复合酶制剂中中性蛋白酶3000IU/g、纤维素酶16000IU/g、淀粉酶10000IU/g、脂肪酶30IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。实施例18:按复合酶制剂中中性蛋白酶3000IU/g、纤维素酶16000IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶30IU/g、植酸酶800IU/g，将五种酶复配，溶于含有复合稳定剂的水溶液中，混合均匀，制备成一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂。应用效果课题组在浙江杭州、宁波、台州等地20余个中华绒螯蟹、锯缘青蟹及三疣梭子蟹养殖场进行的对比试验表明在全价配合词料中添加5001000克/吨本发明的蟹类配合词料专用复合酶制剂后，对中华绒螯蟹、锯缘青蟹及三疣梭子蟹等生长性能的影响分别见表13。_表1复合酶制剂对中华绒螯蟹生长性能的影响_指标_对照组_加酶组i组加酶组n组加酶组in组初始体重(g)5.55±0.235.76土0.095.49±0.105.75士0.13结束体重(g)10.27±0.61a12,45±0.59b13.87±0.72b14.02±0.21b成活率(％)65.99±2.0369.52±1.9971.23±2.5572.58±2.78饲料系数___^_1.75注同一行中右上角小写字母不同代表组间差异显著(尸<0.05)，小写字母相同则代表差异不显著(P>0.05)。由表1可见，在中华绒螯蟹全价日粮中添加500-1000克/吨的复合酶制剂，经62天饲养试验，结果表明，与对照组相比，本发明的复合酶制剂能够显著提高中华绒螯蟹增重率，降低饲料系数，并能够提高其成活率(^<0.05)。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注同一行中右上角小写字母不同代表组间差异显著(户<0.05),小写字母相同则代表差异不显著(i^0.05)。由表2可见，在锯缘青蟹全家配合饲料中添加500-1000克/吨的复合酶制剂，结果表明，三个加酶组的产量分别比对照组提高5.96%、10.45%和10.25%，回捕率分别提高9.64%、13.25%和12.05%,饲料系数则分别降低7.5%、9.0%和12.0%(尸<0.05)。表3复合酶制剂对三疣梭子蟹生长性能的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注同一行中右上角小写字母不同代表组间差异显著(i30.05)，小写字母相同则代表差异不显著(P>0.05)。由表3可见，在三疣梭子蟹全价配合饲料中添加500-1000克/吨的复合酶制剂，经122天饲养试验，结果表明，与不添加酶制剂的对照组相比，本发明的复合酶制剂能够显著提高三疣梭子蟹养殖产量，提高成活率，显著降低饲料系数(P<0.05)，具有十分明显的经济效益。为了研究本发明的复合酶制剂对蟹类氮磷排泄的影响，我们用代谢瓶，分别取6只中华绒螯蟹、锯缘青蟹和三疣梭子蟹进行研究，结果如表46所示、表4复合酶制剂对中华绒螯蟹氮、磷排泄量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注同一列中右上角小写字母不同代表组间差异显著(P<0.05)，显著(P>0.05)。小写字母相同则代表差异不由表4可见，在中华绒螯蟹日粮中添加500克/吨(加酶I组)、750克/吨(加酶组ii组)及iooo克/吨(加酶组ni组)本发明的蟹类饲料专用复合酶制剂后，中华绒螯蟹的氨氮排泄量分别比不加酶的对照组显著降低了20.0%、24.6%、30.8%;磷的排泄量则分别降低了39.0%、50.8%和57.6%，均差异显著(户<0.05)。这说明，在饲料中添加本发明的复合酶制剂后，中华绒螯蟹对饲料中蛋白质及磷的利用率显著提高，从而降低了氮、磷的排泄量，防止了养殖水体的富营养化，具有明显的生态效益。表5复合酶制剂对锯缘青蟹氮、磷排泄量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注同一列中右上角小写字母不同代表组间差异显著(P<0.05)，显著(P>0.05)。小写字母相同则代表差异不表6复合酶制剂对三疣梭子蟹氮、磷排泄量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注同一行中右上角小写字母不同代表组间差异显著(尸<0.05)，小写字母相同则代表差异不显著(iM).05)。从表5、6可以看出，本发明的复合酶制剂也能够显著降低锯缘青蟹和三疣梭子蟹氮磷的排泄量，从而防止水体富营养化，提高成活率。权利要求1、一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂，其特征在于它含有中性蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶和植酸酶五种单酶，将五种单酶加入到含复合稳定剂的水溶液中复配制得液态的复合酶制剂，该复合酶制剂中的中性蛋白酶的酶活性为1000～3000IU/g、纤维素酶的酶活性为8000～16000IU/g、淀粉酶的酶活性为5000～20000IU/g、脂肪酶的酶活性为10～30IU/g、植酸酶的酶活性为500～800IU/g。2、根据权利1所述的一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂，其特征在于所述的含复合稳定剂的水溶液为含有1.5g/L山梨醇、0.5g/L蔗糖、0.15g/L氯化钠、5g/L山梨酸钾和体积百分比为10%的甘油的水溶液。3、根据权利1所述的一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂，其特征在于该复合酶制剂在全价配合饲料中的添加量为500~1000克/吨。全文摘要本发明公开了一种蟹类配合饲料专用复合酶制剂，将中性蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶和植酸酶五种单酶溶于含复合稳定剂的水溶液中制备而成。其中，中性蛋白酶活性为1000～3000IU/g、纤维素酶活性为8000～16000IU/g、淀粉酶活性为5000～20000IU/g、脂肪酶活性为10～30IU/g、植酸酶活性为500～800IU/g。在中华绒螯蟹、锯缘青蟹、三疣梭子蟹全价配合饲料的基础上添加500～1000克/吨的本发明的复合酶制剂，可显著提高蟹类增重率、产量和饲料效率，降低氨氮、磷排泄量，减轻养殖水体富营养化程度，预防传染性疾病，提高成活率，是一种安全、无公害、无残留绿色饲料添加剂。文档编号A23K1/165GK101584419SQ20091009969公开日2009年11月25日申请日期2009年6月9日优先权日2009年6月9日发明者吴天星,王进波,齐莉莉申请人:浙江大学宁波理工学院