一种提高油茶种子萌发率及成活率的方法

专利名称：一种提高油茶种子萌发率及成活率的方法
技术领域：
本发明涉及一种经济林的栽培方法，具体地说是一种提高油茶种子萌发率及成活率的方法。
二背景技术：
油茶(Came///a 是我国特有油料树种，主要分布地区为桂、湘、皖、赣等17
个省区。油茶集生态效益、经济效益和社会效益于一身，对于推进山区综合开发、促进农民 就业增收、维护国家粮油安全、改善人民健康状况、加快国土绿化进程都具有十分重要的作 用，但油茶的常规育种周期很长，还受到远缘杂交不亲和性等条件的限制。长期以来，都是 以自然种子实生繁殖和多化苗生材为主，品种良莠不齐，单位面积产量很低，全国现有油茶 栽培面积约367X10"hm2，年产油茶仅15X104 20X104t ，约占国内油脂消费量的1.5% ， 从油茶栽培面积和产量来看，平均产油茶40 60Kg hm2 。 20世纪80年代以来颜慕勤等人 不仅首次报道油茶体细胞胚状体的发生研究，结果表明，通过利用油茶种子中子叶茎部诱导 出胚状体再长成完整植株，而且用油茶腋芽诱导获得再生植株，用组织培养和快速繁殖幼苗 造林后，各项生长指标均等于或超过实生苗；卢天玲利用油茶未成熟子叶、幼胚离体培养获 得植株，各地油茶工作者都致力于油茶高产新品种的培育，开展了油茶优良树种选择和优良 无性系选育研究，培育出了一批高产优良无性系，并在生产上逐渐推行新造林良种化，但良 种的应用还不到油茶栽培总面积的15%，包括低产林需现改造的丰产林成在内还不到40%。 反观油茶整体产量的水平仍很低，主要原因在于优良无性系苗木技术繁殖难度高，造林成效 率极不稳定，极大地制约油茶优良无性系的应用，2004年周盛等最早将产油量指标用于杂 交育禾中，以普通油茶(Ca附e〃/ao/e^ra)江西油茶(C.me/oca^a)越南油茶(C.v/emamera/iO 等3个品种间杂交实验，从中选出丰产性能好的杂交种，同样能取得优良的杂种单株，丰富 了油茶良种资源，实现杂交组合苗木当年出圃。2008年方利荣，潘国永开拓了徽州区油茶 快繁基地，采用浙江省富阳县芽苗钻嫁接技术选用自培育的74-18、 74-21优良无性系为良种 穗条，采用芽苗嫁接技术，快速繁育幼茶优良无性嫁接苗，解决了油茶育苗成活问题。
然而，广大的沿江、江南及以南地区的芽苗嫁接，在谷雨前后，正值采茶忙、插秧忙、 午收忙的"三忙"季节及高温高湿天气，严重影响油茶初嫁接幼苗的生长和移栽，从而使其 嫁接成活率大大降低。
三
发明内容
本发明旨在提高油茶种子萌发率和嫁接成活率，所要解决的技术问题的对油茶种子进行 处理，通过提前萌发，使嫁接时间也同步提前，从而避开"三忙"季节和高温高湿天气以提 高嫁接成活率。
本发明的技术方案包括油茶种子处理、育苗和嫁接，所述的种子处理是指冷藏、氮离子
3(N+)束注入和温育处理，冷藏是指对选育的种子于0 4'C低温下冷藏10 15天，N+束注入 是指对冷藏复苏后的种子在20Kev下用30d或40d剂量N+束注入8 12分钟，所述的温育 就是用稀释50倍的木霉发酵液室温下浸泡5 7天，油茶种子经上述处理后播入通风透气的 沙床中于22 25"C、 60% 65%湿度条件下育苗，经上述处理的油茶种子出芽率达80 85°/0， 当子叶呈深绿色或墨绿色、形成层发育完全、胚轴转硬时选穗嫁接。
所述的木霉发酵液是将木霉接种在液体培养基中进行发酵培养后分离得到发酵液。 所述的液体培养基以麦麸或/和稻糠或/和马铃薯为基料(碳源)几丁质、蛋白胨为诱导 物，辅之其他基础营养成分和水配制而成。麦麸或/和稻糠经干燥粉碎后加适量水煎煮，分 离，取其汁液配制液体培养基，而马铃薯是鲜品去皮后粉碎，取鲜粉配制液体培养基，麦麸、 稻糠、马铃薯以下简称碳源粉。各组分有以下百分比-
碳源粉1 5%
几丁质0. 5 3. 5%
蛋白胨1. 5 2. 5%
FeS04O.O卜O. 03%
KH2P 040. 02 0. 2%
K2HP 040. 05 0. 25%
Mg S040. 05 0. 25%
水余量。
将配制好的液体培养基调pH5.7 6.5，高压灭菌后接种，于25 4(TC条件下发酵培养 5 10天。发酵结束后过滤分离，若发酵终止时pH〉4，则调pH《4，沉降过滤，滤液pH5.8 6.2，即是木霉发酵液。该发酵液稀释50倍后用于温育。
上述液体培养基(除蛋白胨外)和木霉发酵液均公开在申请人的另一发明专利中(专利号 ZL200510039128. X，公告号CN10041150C)，在该专利中，木霉发酵液是作为抗灰霉病的生 物杀菌剂。
油茶种子经上述处理后萌发率(出芽率)由原来的30% 40%提高到80% 85%，不仅萌发 率提高，而且萌发的时间提前及至选穗嫁接的时间也提前至清明前后，从而避开了采茶忙、 插秧忙和午收忙的"三忙"季节，也避开了高温高湿的天气导致的积水烂根现象，使嫁接的 成活率提高至95%以上。具体实施例方式
(一)、木霉发酵液的制备
1、 碳源粉的制备
取麦麸或稻糠干燥后粉碎，或者马铃薯去皮后粉碎、备用。
2、 几丁质的制备取蟹壳、虾皮或贝壳剔除残余(剩)腐肉，洗净后烘干、粉碎，投入工业盐酸中浸泡24 小时，并不断搅拌，水洗至中性，再蒸馏水洗去氯离子，干燥后粉碎，备用。 为方便企业生产，可用市售的几丁质粉代替。
3、 培养液配制与发酵培养
取麦麸或稻糠粉25 30g，加入200 350ml，煮沸0. 5 1小时，过滤，待滤液冷却后 加入0. 2g FeS04 、 lg KH2P 04、 1. 5g K2HP04 、 2g Mg S04、 20g几丁质和20g蛋白胨或者 取鲜马铃薯粉25 30g、加入200 350ml水中，然后加入0. 2g FeS04 、 lg KH2P04、 1. 5g K2HP04 、 2gMgS04、 20g几丁质和20g蛋白胨，用蒸馏水稀释定容至1000 ml，最后用柠檬 酸钠溶液调pH至6. 0 6.2。
将上述配制的培养液高压灭菌后接种，加入无杂菌木霉孢子悬浮液1 ml，含孢子1 x 106 个/ ml。于26 28'C条件下发酵1周左右，测定终点pH，当pH《5. 3时过滤分离，并用草 酸调pH《4,沉降过滤分离，用三聚磷酸钠溶液调pH5.8 6.2，即是木霉发酵液。l(TC以下 低温忙藏。备用。
(二) 、油茶种子处理
1、 冷藏
将当年收获的油茶种子经水浮选剔除空壳、破损和有病虫害的种子，水选后凉干，使含 水率<10%，置入冰箱中，0 4。C下冷藏12天。
2、 N+束注入
采用N'束注入机(ibbe/device型)在20Kev下用30d的剂量注入10分钟。
4、 温育
将经N+束注入后的种子于5天内用上述木霉发酵液稀释50倍的液体浸泡6天，分离取 出种子凉干备用。
(三) 育苗与嫁接
取用水清洗后的河砂铺15 20cm厚作为沙床，清洗的目的是使沙床通风透气，将处理 后的油茶种子播种在沙床上，于22 24°C，湿度60% 65%条件育苗，油茶种子出芽率达80 85%。待幼苗的子叶显墨绿色、形成层发育完成，以此芽苗为砧木选穗嫁接，此时正值清明 前后。
嫁接后的管理与移栽同现有技术。
权利要求
1、一种提高油茶种子萌发率及成活率的方法，包括种子处理、育苗和嫁接，其特征在于所述的种子处理是将种子于0～4℃条件下冷藏10～15天，冷藏复苏后的种子在20kev下用30d或40d剂量进行N+束注入8～12分钟，经N+束注入后的种子用稀释50倍的木霉发酵液室温下浸泡5～7天；将上述处理后的种子播种在通风透气的沙床上，于22～25℃、60％～65％湿度条件下育苗，直至幼苗子叶呈深绿色或墨绿色、形成层发育完成时选穗嫁接。
2、 根据权利要求1所述的方法，所述的木霉发酵液是将木霉接种在pH5. 7 6. 5的液体 培养基中于25 4(TC条件下发酵培养5 10天，分离后调滤液pH5. 8 6. 2即是木霉发酵液， 所述的液体培养基各组分有以下百分比:碳源粉1 5%、几丁质0.5 3.5%、蛋白胨1.5 2. 5%、 FeS04、 0 . 01 0. 03%、 KH2P04 0. 02 0, 2%、 K2HP04 0. 05 0. 25%、 Mg S04 0. 05 0. 25%、水
全文摘要
一种提高油茶种子萌发率及成活率的方法，首先将选育的种子于0～4℃条件下冷藏10～15天，冷藏复苏后的种子在20Kev下用30d或40d剂量N⁺束注入处理，最后用稀释50倍的木霉发酵液室温下浸泡5～7天，将上述处理后的种子播种在通风透气的沙床上，于22～25℃，60％～65％湿度下育苗。直至幼苗子叶呈深绿色或墨绿色、形成层发育完成时选穗嫁接。经上述处理的油茶种子不仅出芽率提高至80～85％，而萌发时间提前，及至选穗嫁接的时间也提前到清明前后，从而避开“三忙”季节和高温天气导致的积水烂根现象，使嫁接的成活率提高至95％以上。
文档编号A01G1/00GK101637093SQ200910144700
公开日2010年2月3日 申请日期2009年8月26日 优先权日2009年8月26日
发明者刘朝良, 张宽朝, 束床龙, 程备久, 蒋立科, 芳 陶, 魏练平 申请人:安徽农业大学