专利名称：一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法
技术领域：
本发明属于鱼类杂交繁殖技术领域，具体为一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁 殖方法。
背景技术：
杂交是最经典的育种方法之一。通过杂交获得在生长、抗病等方面具有优势的杂 交Fl是应用最为广泛和行之有效的杂交育种方式。根据杂交亲本间的亲缘关系，杂交可分 为远缘杂交和近缘杂交。远缘杂交指种间、属间乃至亲缘关系更远的生物类型之间的杂交， 而近缘杂交指同种内不同品系或不同地理群体间的杂交。鱼类是最容易进行远缘杂交的脊 椎动物。自1558年Germer用鲤与金鱼杂交得到世界上第一个有记录的杂种以来，据 Schwartz统计，从1558 1980年，已有56科1080种鱼类做过杂交试验，其中主要是太阳 鱼科(Centrachidae)、鲤科(Cyprinidae)、胎鏘科(Poecilidae)和鲑科(Salmonidae)，共 发表论文3759篇。自20世纪50年代末开始，中国也进行了大量的鱼类杂交试验，据不完 全统计，迄今共做了至少112个杂交组合，主要涉及3个目(鲤形目、鲈形目、鲇形目)、7个 科(鲤科、鱼骨科、丽鱼科、鲷科、鲇科、胡子鲇科、鱼旨科)，共40多种鱼类，其中大多数是鲤 科不同亚科之间以及同一种亚科不同属之间的杂交，不少杂交组合具有杂种优势。斑鳢(Channa maculata)隶属鲈形目(Perciformes)、攀鲈亚目(Anabantoidei) > 鳢科(Charmidae)、鳢属(Charma)，乌鳢(Charma argus)同为鳢属，与斑鳢为同属不同种。 斑鳢(雌鱼)与乌鳢(雄鱼)的杂交为属内种间远缘杂交。斑鳢人工养殖经饵料驯化可在 商品鱼养殖阶段全程摄食人工配合饲料，但生长速度相对较慢；乌鳢人工养殖以活鱼或冰 鲜鱼作为饵料，饵料利用率低，养殖水体水质差，导致病害频发，高温季节须大量换水，面源 污染严重。通过斑鳢(雌鱼)、乌鳢(雄鱼)杂交获得杂交鳢F1，生长速度较斑鳢、乌鳢明 显提高，经人工驯食可在成鱼养殖阶段全程摄食人工配合饲料，饵料利用率大幅提升，养殖 水体水质明显改善。经济效益、社会效益、生态效益得到体现。因此，杂交鳢成为斑鳢、乌鳢养殖的替代品种是行业可持续发展的大势所趋，而斑 鳢(雌鱼)与乌鳢(雄鱼)杂交规模化人工繁殖是产业发展的关键技术之一。而目前大规 模的进行斑鳢(雌鱼)、乌鳢(雄鱼)杂交育种的方法还没有报道过。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种规模化且快速的雌性 斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法的技术方案。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于包括以下步骤1)斑鳢和乌鳢性成熟季节，挑选性成熟、健康的雌性斑鳢和雄性乌鳢作为亲本；2)对雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本进行第一次人工激素催产，分别对 两种亲本注射催产药物HCG与LRH-A2的混合物，每1000克雌性斑鳢激素注射剂量为(HCG) 100-500IU+(LRH-A2) 1-5 μ g，每1000克雄性乌鳢激素注射剂量为 (HCG) 50-300IU+ (LRH-A2) 0. 5-3 μ g ；3)第一次人工激素催产10-15小时后进行第二次人工激素催产，分别对两种亲本 注射催产药物HCG、LRH-A2和DOM的混合物，每1000克雌性斑鳢激素注射剂量为(HCG) 100 0-2000IU+ (LRH-A2) 5-15 μ g+ (DOM) 5_15mg，每 1000 克雄性乌鳢激素注射剂量为(HCG) 500-1000IU+ (LRH-A2) 2-7 μ g+ (DOM) 2_7mg ；4)第二次人工激素催产后，将雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本1配1置于加水的泡 沫箱中，加盖，水温控制为27°C -30°C，使亲本自行交配、产卵；5)配对24-30小时后，收集雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本杂交的受精卵，将一对 亲鱼所产受精卵置于一个加水泡沫箱内，静水孵化，水温控制为27°C -30°C ；6)受精卵孵化出膜，至卵黄囊消失、杂交鱼苗集群在水中平游时，即可转入池塘中 进行杂交鱼苗的培育。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤1)中斑鳢 和乌鳢性成熟季节为每年的4或5月份水温达到20°C -25°C时。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤1)中挑选 2-3龄的雌性斑鳢和雄性乌鳢作为亲本，亲本个体无伤病、鳍条及体表完整、体型正常无畸 形和活泼健壮。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤2)中每 1000克雌性斑鳢激素注射剂量为(HCG) 200-400IU+(LRH-A2) 2-4 μ g，每1000克雄性乌鳢激 素注射剂量为(HCG) 100-200IU+(LRH-A2) 1-3 μ g。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤3)中第一 次人工激素催产12-13小时后进行第二次人工激素催产，每1000克雌性斑鳢激素注射剂量 为(HCG) 1200-1800IU+ (LRH-A2) 5-10 μ g+ (DOM) 5-10mg,每 1000 克雄性乌鳢激素注射剂量为 (HCG) 600-800IU+ (LRH-A2) 3-6 μ g+ (DOM) 3_6mg。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤4)中泡沫 箱规格为60cmX 60cmX 40cm，加水至深度为25cm，水温控制为28°C -30°C。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤5)中配对 25-28小时后收集受精卵，孵化泡沫箱规格为60CmX60CmX40cm，加水至深度为25cm，静水 水温控制为28°C -30°C。所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤6)中孵化 出膜时间为40-50小时，孵化出膜至卵黄囊消失、鱼苗能平游时间为55-60小时。本发明适用于规模化杂交鳢鱼苗生产，与现有技术相比本发明存在以下优点① 泡沫箱的使用使操作简便、成本降低，适用于规模化育苗生产，同时泡沫箱保温、遮光效果 好，有利于亲本发情、产卵；②通过两场催产，雌雄发情同步性好，催产率达到96%以上，受 精率达到85%以上；③第二次催产后配对，减少了雄鱼对雌鱼的伤害，雌鱼产后死亡率在 5%以下；④每对亲本所产鱼卵在一个泡沫箱内单独孵化，降低了坏卵的影响，提高了孵化 率；⑤孵化水温的控制在28°C -30°C，有效提高孵化率，孵化率可达到85%以上。
具体实施例方式以下通过具体实施例来进一步说明本发明。实施例11) 2008年4月30日，在561尾斑鳢雌鱼，570尾乌鳢雄鱼中挑选性成熟、健康的个 体斑鳢雌鱼498尾和乌鳢雄鱼498尾作为亲本，性成熟雌性斑鳢选择标准为腹部明显膨大 松软、卵巢轮廓明显、生殖孔稍有扩大、微凹、呈三角形，可挖出成熟卵粒，雄性乌鳢选择标 准为腹部膨大不明显，但生殖孔红润，略外突。2)分两次进行人工催产激素，第一次注射剂量为雌性斑鳢每1000克鱼体HCG (绒 毛膜促性腺性激素)300IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)2μ g，雄性乌鳢每公斤 鱼体HCG(绒毛膜促性腺性激素)150IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)lyg，第 一次人工催产12小时后进行第二次人工催产激素注射，注射剂量为雌性斑鳢注射剂量 为每1000克鱼体HCG(绒毛膜促性腺性激素)1500IU+LRH-A2 (促黄体素释放激素类似 物)10 μ g+D0M(马来酸地欧酮)10mg，雄性乌鳢注射剂量为每公斤鱼体HCG (绒毛膜促性腺 性激素)750IU+LRH-A2 (促黄体素释放激素类似物)5 μ g+D0M(马来酸地欧酮)5mg ；3)将繁殖用亲本雌性斑鳢与雄性乌鳢1配1置于泡沫箱中，共498组，泡沫箱规格 为60cmX60cmX 40cm，加水至深度为25cm，泡沫箱内控制水温在28°C，并且对泡沫箱加盖， 亲本自行交配、产卵；4)配对后24小时，收集雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本杂交的受精卵，将一对亲 鱼所产受精卵置于一个加水泡沫箱内，泡沫箱规格为60cmX 60cmX 40cm，加水至深度为 25cm,最终催产成功490对，催产率98. 4%，收集鱼卵480万粒，，显微镜观察、统计，受精率 为86. 2%，孵化水温28°C ；5)50小时后，鱼苗孵化出膜，孵化出膜后72小时后，卵黄囊消失、鱼苗可平游，即 得到鱼苗353. 4万尾，孵化率85. 4%。实施例21) 2009年5月15日，在504尾斑鳢雌鱼，493尾乌鳢雄鱼中挑选性成熟个体斑鳢 雌鱼480尾作为母本，乌鳢雄鱼480尾作为父本；2)分两次进行人工催产激素，第一次注射剂量为母本斑鳢每1000克鱼体HCG(绒 毛膜促性腺性激素)iooiu+lrh-a2 (促黄体素释放激素类似物)1 μ g，父本乌鳢每1000克 鱼体HCG (绒毛膜促性腺性激素)50IU+LRH-A2 (促黄体素释放激素类似物)0. 5 μ g，10小时 后进行第二次人工催产激素注射，注射剂量为母本斑鳢注射剂量为每1000克鱼体HCG (绒 毛膜促性腺性激素)1000IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)5μ g+D0M(马来酸地欧 酮)5mg,父本乌鳢注射剂量为每1000克鱼体HCG (绒毛膜促性腺性激素)500IU+LRH_A2 (促 黄体素释放激素类似物)2 μ g+D0M(马来酸地欧酮)2mg ；3)将繁殖用亲本雌性斑鳢与雄性乌鳢1配1置于泡沫箱中，共480组，放置于温室 大棚内，水温在29°C，亲本自行交配、产卵；4)配对26小时后，催产成功460对，催产率为95. 8%，收集鱼卵496万粒，泡沫箱 内孵化，通过现显微镜观察、统计受精率为85%，水温控制在29°C，5)40小时后，鱼苗孵化出膜，孵化出膜后48小时，卵黄囊消失、鱼苗可平游，得到 鱼苗363. 8万尾，孵化率为86. 3%。
实施例31) 2009年5月19日，在567尾斑鳢雌鱼，546尾乌鳢雄鱼中挑选性成熟、健康的个 体斑鳢雌鱼500尾和乌鳢雄鱼500尾作为亲本；2)分两次进行人工催产激素，第一次注射剂量为雌性斑鳢每1000克鱼体HCG (绒 毛膜促性腺性激素)500IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)5μ g，雄性乌鳢每公斤 鱼体HCG(绒毛膜促性腺性激素)300IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)3yg，第 一次人工催产15小时后进行第二次人工催产激素注射，注射剂量为雌性斑鳢注射剂量 为每1000克鱼体HCG(绒毛膜促性腺性激素)2000IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似 物)15 μ g+D0M(马来酸地欧酮)15mg，雄性乌鳢注射剂量为每公斤鱼体HCG (绒毛膜促性腺 性激素)1000IU+LRH-A2 (促黄体素释放激素类似物)7 μ g+D0M(马来酸地欧酮)7mg ；3)将繁殖用亲本雌性斑鳢与雄性乌鳢1配1置于泡沫箱中，共500组，泡沫箱规格 为60CmX60CmX40Cm，加水至深度为25cm，泡沫箱内通过加热控制水温在30°C，亲本自行 交配、产卵；4)配对后24小时，成功催产475对，催产率95%，收集鱼卵536. 5万粒，泡沫箱内 静水孵化，经显微镜观察、统计，受精率为85%，泡沫箱内静水孵化，水温30°C ；5)46小时后，鱼苗孵化出膜，孵化出膜后58小时，卵黄囊消失、鱼苗可平游，得到 鱼苗388万尾，孵化率为85. 1 %。实施例41)2010年5月25日，在600尾斑鳢雌鱼，611尾乌鳢雄鱼中挑选性成熟、健康的个 体斑鳢雌鱼527尾和乌鳢雄鱼527尾作为亲本；2)分两次进行人工催产激素，第一次注射剂量为雌性斑鳢每1000克鱼体HCG (绒 毛膜促性腺性激素)400IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)4μ g，雄性乌鳢每公斤 鱼体HCG(绒毛膜促性腺性激素)200IU+LRH-A2(促黄体素释放激素类似物)3yg，第 一次人工催产15小时后进行第二次人工催产激素注射，注射剂量为雌性斑鳢注射剂量 为每1000克鱼体HCG(绒毛膜促性腺性激素)1800IU+LRH-A2 (促黄体素释放激素类似 物)10 μ g+D0M(马来酸地欧酮)10mg，雄性乌鳢注射剂量为每公斤鱼体HCG (绒毛膜促性腺 性激素)800IU+LRH-A2 (促黄体素释放激素类似物)6 μ g+D0M(马来酸地欧酮)6mg ；3)将繁殖用亲本雌性斑鳢与雄性乌鳢1配1置于泡沫箱中，共527组，泡沫箱内通 过加热控制水温在29°C，亲本自行交配、产卵；4)配对后30小时，成功催产506对，催产率96%，收集鱼卵523万粒，泡沫箱内静 水孵化，经显微镜观察、统计，受精率为85. 7%，水温29°C ；5)46小时后，鱼苗孵化出膜，孵化出膜后62小时，卵黄囊消失、鱼苗可平游，得到 鱼苗386万尾，孵化率为86. 1 %。
权利要求
一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于包括以下步骤1)斑鳢和乌鳢性成熟季节，挑选性成熟、健康的雌性斑鳢和雄性乌鳢作为亲本；2)对雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本进行第一次人工激素催产，分别对两种亲本注射催产药物HCG与LRH A2的混合物，每1000克雌性斑鳢激素注射剂量为(HCG)100 500IU+(LRH A2)1 5μg，每1000克雄性乌鳢激素注射剂量为(HCG)50 300IU+(LRH A2)0.5 3μg；3)第一次人工激素催产10 15小时后进行第二次人工激素催产，分别对两种亲本注射催产药物HCG、LRH A2和DOM的混合物，每1000克雌性斑鳢激素注射剂量为(HCG)1000 2000IU+(LRH A2)5 15μg+(DOM)5 15mg，每1000克雄性乌鳢激素注射剂量为(HCG)500 1000IU+(LRH A2)2 7μg+(DOM)2 7mg；4)第二次人工激素催产后，将雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本1配1置于加水的泡沫箱中，加盖，水温控制为27℃ 30℃，使亲本自行交配、产卵；5)配对24 30小时后，收集雌性斑鳢亲本和雄性乌鳢亲本杂交的受精卵，将一对亲鱼所产受精卵置于一个加水泡沫箱内，静水孵化，水温控制为27℃ 30℃；6)受精卵孵化出膜，至卵黄囊消失、杂交鱼苗集群在水中平游时，即可转入池塘中进行杂交鱼苗的培育。
2.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤 1)中斑鳢和乌鳢性成熟季节为每年的4或5月份水温达到20°C -25°C时。
3.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤1)中挑选2-3龄的雌性斑鳢和雄性乌鳢作为亲本，亲本个体无伤病、鳍条及体表完整、体型 正常无畸形和活泼健壮。
4.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤2)中每1000克雌性斑鳢激素注射剂量为(HCG)200-400IU+(LRH-A2) 2-4 μ g，每1000克雄 性乌鳢激素注射剂量为(HCG) 100-200IU+(LRH-A2) 1-3 μ g。
5.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤3)中第一次人工激素催产12-13小时后进行第二次人工激素催产，每1000克雌性斑鳢激素 注射剂量为(HCG) 1200-1800IU+ (LRH-A2) 5-10 μ g+ (DOM) 5-10mg,每 1000 克雄性乌鳢激素注 射剂量为(HCG) 600-800IU+ (LRH-A2) 3-6 μ g+ (DOM) 3_6mg。
6.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤4)中泡沫箱规格为60cmX60cmX40cm，加水至深度为25cm，水温控制为28°C _30°C。
7.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤5)中配对25-28小时后收集受精卵，孵化泡沫箱规格为60CmX60CmX40cm，加水至深度为 25cm，静水水温控制为28°C _30°C。
8.如权利要求1所述的一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，其特征在于步骤6)中孵化出膜时间为40-50小时，孵化出膜至卵黄囊消失、鱼苗能平游时间为55-60小时。
全文摘要
一种雌性斑鳢和雄性乌鳢杂交人工繁殖方法，属于鱼类杂交繁殖技术领域。其包括以下步骤挑选亲本；第一次人工激素催产；第二次人工激素催产；亲本自行交配、产卵；受精卵孵化；受精卵孵化出膜。本发明存在以下优点泡沫箱的使用使操作简便、成本降低，适用于规模化育苗生产，同时泡沫箱保温、遮光效果好，有利于亲本发情、产卵；通过两场催产，雌雄发情同步性好，催产率达到96％以上，受精率达到85％以上；第二次催产后配对，减少了雄鱼对雌鱼的伤害，雌鱼产后死亡率在5％以下；每对亲本所产鱼卵在一个泡沫箱内单独孵化，降低了坏卵的影响，提高了孵化率；孵化水温的控制在28℃-30℃，有效提高孵化率，孵化率可达到85％以上。
文档编号A01K61/00GK101889562SQ20101024184
公开日2010年11月24日 申请日期2010年7月30日 优先权日2010年7月30日
发明者冯晓宇, 刘新轶, 姚桂桂, 王宇希, 谢楠, 郭水荣, 马柏林 申请人:杭州市农业科学研究院