专利名称：一种日本囊对虾家系构建与选育方法
技术领域：
本发明涉及对虾的选育，尤其是涉及一种日本囊对虾的家系构建与选育方法。
背景技术：
良种是水产养殖业可持续发展的重要基础。凡纳滨对虾这一优良品种已创造了超 1000亿的产值，为全世界的对虾养殖贡献了约40 %的产量。2004年，我国培育出了第一个海水养殖动物新品种——中国对虾“黄海1号”，为我国对虾种质创新研究谱写了新篇章。家系选育作为动物品种改良的重要手段，在对虾育种研究中发挥了重要作用，已经培育出中国对虾“黄海2号”，凡纳滨对虾“科海1号”、“中科1号”和“中兴1号”等多个新品种。育种值估算和遗传评定是家系选育研究的重要内容，常规的BLUP法遗传评定，一般是通过建立父系半同胞家系的方案来进行遗传参数估计和育种值计算。但是由于日本囊对虾的人工精荚移植技术难度较大，目前尚没有建立半同胞家系的稳定成熟技术。迄今，中国水产科学研究院黄海水产研究所(孔杰等，海洋水产研究，2008， 29(3) :27-34)提出了 3种育种模式，即精细育种模式(即半同胞育种模式)、全同胞育种模式及群组育种模式。在家系选择水平上，这3种育种模式对育种值估计无明显差异，一致性较高；但在个体选择水平上，由于后2种育种模式缺乏清楚的谱系资料，育种值的估计与精细育种模式相比，有相当的差距，可信度稍低。日本囊对虾由于缺乏建立半同胞家系的成熟技术，比较适合采用全同胞育种模式。但半同胞系谱信息的缺乏，在个体选择水平上影响了可信度。因此，本发明提出了“亲堂兄妹家系”的育种模式，在全同胞系谱信息基础上增加了亲堂兄妹系谱信息，有助于增加育种值估计的准确性，增强个体选择的可信度和选择效率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种日本囊对虾家系构建与选育方法。本发明包括以下步骤1)构建基础群体选择海捕虾苗1万尾以上进行人工养殖，待到商品规格时按 10%以上的选择强度挑选海捕虾构建Ftl代基础群体；2)构建F1代家系按Ff^xFod1的自然交配方式培育全同胞F1代家系，选择留种家系进行标准化分池培育；3)同池培养长成3cm以后，采用荧光个体标识技术，将每个家系标记200 500 尾的虾苗，混合放到虾池中，补进未经选育的虾苗进行同池培养以达到正常养殖密度，当生长至商品虾规格时，挑选出留种亲本专池养殖，直至亲虾规格；4)构建F2代亲堂兄妹家系从1个F1代家系中挑选出20 50尾留种雄虾；从与之无血缘关系的其它5 10个F1代家系中各选择3 5尾虾，用荧光个体标识技术标记进行家系区分后，再与雄虾一起混合同池培养，进行营养强化和自然交配，按步骤2、的方法选留F2代家系，继而进一步按步骤幻的方法进行标准化同池培育自然交配受精，每一尾 Fl代受精雌虾产生的F2子代具有全同胞血缘关系，组成1个全同胞家系，具有共同的Fl代
3父母；不同Fl代雌虾所产生的F2子代之间具有亲堂兄妹关系，即它们的F1父本来自于同一个家系，具有一对共同的Ftl祖父母；具有同一对Ftl祖父母的所有F2孙代构成1个亲堂兄妹家系，即1个亲堂兄妹家系中包含有多个全同胞家系，构建8 16个堂兄妹家系；5)长成3cm之后，按照步骤幻的方式进行同池培养，达到商品规格时，挑选出留种亲本，总共构建8 16个堂兄妹家系，每1个堂兄妹家系保留5 8个全同胞家系，留种家系总数(全同胞家系)维持60 80个，每个家系内的留种亲本继续养殖至成熟亲本；再按步骤4)的方法采用多代连续杂交(不同的亲堂兄妹家系间)系统，继续构建下一代亲堂兄妹家系直到达成育种目标形成速生新品种；6)在步骤4)中，若需要建立自群交配家系，则选择F1代留种雄虾所在家系中的留种雌虾与之交配，正常情况下，避免同胞及堂兄妹间的亲本之间交配，而采用不同家系间的亲本交换的交配方式，建立明晰的谱系资料。在步骤1)中，所述海捕虾苗的规格最好基本一致；所述挑选海捕虾，最好挑选个体较大的海捕虾。在步骤2)中，所述留种家系可选择产卵量大、孵化率高的家系作为留种家系；所述标准化分池培育的条件可为无节幼体育苗密度为3000尾/0. 5L桶，Pltl仔虾放苗密度为 600 尾/5m3 池。在步骤3)中，所述虾池，可采用1 2亩的虾池；所述留种亲本可采用成活率高的家系中个体较大的虾作为留种亲本，选择强度可为10%。在步骤幻中，所述留种亲本可为成活率高家系内的个体较大的虾作为留种亲本。与现有技术相比，本发明具有以下的优点1)建立了较为齐全的谱系信息在全同胞系谱信息基础上，增加了亲堂兄妹系谱信息，不仅有利于清楚阐明各家系间的血缘关系，还有利于多代连续(家系间)杂交系统的设计，避免近交。2)基于精荚移植手术的半同胞家系构建方法尚不成熟，难度较大，而采用本发明所设计的亲堂兄妹家系构建，是采用自然交配方式，大大减少了人工操作环节，简便实用， 成功率极高。3)本发明特别适合日本囊对虾速生新品种的选育以及开展其遗传学特性与品种分化的研究。本发明是一种日本囊对虾亲堂兄妹家系构建与选育方法，特别适用于日本囊对虾的遗传育种，对其它不适合精细育种模式的海洋动物的育种设计也具有重要的借鉴意义。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步说明，但并不作为本发明对权利范围的限制。实施例1 基础群体的构建从福建省诏安湾附近采捕野生虾苗5万尾，经初步挑选规格基本一致的虾苗1万尾，放在1个20m2水泥池中暂养，暂养过程中检测WSSV等病毒的携带情况。当确定这批虾苗没有病毒携带，并在池中观察1周之后，将虾苗移至1亩左右的虾池中进行人工养殖，养殖到25 40尾/500g商品规格时，挑选个体最大的300对虾继续培育为成熟亲虾，自然交配。
实施例2 =F1代家系构建与选育(I)F1代家系构建从亲虾池挑选出性腺发育良好的带精荚受精雌虾(Fq xF03) 150只，剪眼柄进行性腺促熟和人工催产，每只虾单独产卵，计算产卵量和孵化率，淘汰产卵量少、孵化率低的家系，剩下的留种家系按每0. 5m3的桶放3000尾无节幼体的密度育苗，供应充足的饵料和控制良好的水质，培育成全同胞家系60个。当虾苗培育到Pltl期之后，每个 5m2的池中定量放养虾苗600尾，进行标准化分池培育。(2)同池培养与性状测试当虾苗培育至3cm以后，采用荧光个体标识技术，将每个家系标记400尾虾苗，共2万尾虾苗，每25个家系放到1 口 1亩的虾池中，共2 口，每口池中补进未经选育的未标记虾苗5000尾作为生长对照，按常规方式进行养殖管理，当日本囊对虾生长至商品虾规格(25 40尾/500g)时，挑选出成活率高的家系作为留种家系，每个家系挑选个体较大的虾30对继续养殖至成熟亲虾。实施例3 亲堂兄妹家系的构建(1)亲堂兄妹家系的构建从1个&代家系中挑选出30条留种雄虾，从其它10 个家系中挑选30尾雌虾，即每个家系挑选3尾性腺发育良好的雌虾进行荧光标记，然后按 1 1的雌雄比，将这60尾虾放在一起进行同池培育，自然交配。按实施例2的方法选留产卵量大、孵化率高的F2代家系。每一尾受精F1代雌虾产生的所有F2子代组成1个全同胞家系，具有共同的F1代父母；不同F1代雌虾所产生的F2子代之间具有亲堂兄妹关系，即它们的F1父本来自于同一个家系，具有一个共同的Ftl祖父母；具有同一个Ftl祖父母的所有F2 孙代构成1个亲堂兄妹家系。即1个亲堂兄妹家系中包含有多个全同胞家系。参照这样的方法构建15个堂兄妹家系。(2)按照实施例2的方式从无节幼体开始标准化分池培育，在3cm以后，同池培养与性状测试，挑选出成活率高的家系中的个体较大的虾作为留种亲本按上述方法继续构建下一代亲堂兄妹家系，直到达成育种目标形成速生新品种。实施例4 自群交配家系的建立在实施例3中，从F1代留种雄虾所在家系中选择留种雌虾与之自群交配，培育成 F2代近交家系，开展相关的遗传学特性与品种分化的研究。正常情况下，避免同胞及堂兄妹间的亲本之间交配，而采用不同家系间的亲本交换的交配方式，建立明晰的谱系资料。
权利要求
1.一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于包括以下步骤1)构建基础群体选择海捕虾苗1万尾以上进行人工养殖，待到商品规格时按10%以上的选择强度挑选海捕虾构建Ftl代基础群体；2)构建F1代家系按Ftl早XFO3的自然交配方式培育全同胞F1代家系，选择留种家系进行标准化分池培育；3)同池培养长成3cm以后，采用荧光个体标识技术，将每个家系标记200 500尾的虾苗，混合放到虾池中，补进未经选育的虾苗进行同池培养以达到正常养殖密度，当生长至商品虾规格时，挑选出留种亲本专池养殖，直至亲虾规格；4)构建F2代亲堂兄妹家系从1个F1代家系中挑选出20 50尾留种雄虾；从与之无血缘关系的其它5 10个F1代家系中各选择3 5尾虾，用荧光个体标识技术标记进行家系区分后，再与雄虾一起混合同池培养，进行营养强化和自然交配，按步骤2、的方法选留F2 代家系，继而进一步按步骤幻的方法进行标准化同池培育自然交配受精，每一尾Fl代受精雌虾产生的F2子代具有全同胞血缘关系，组成1个全同胞家系，具有共同的Fl代父母；不同Fl代雌虾所产生的F2子代之间具有亲堂兄妹关系，即它们的F1父本来自于同一个家系， 具有一对共同的Ftl祖父母；具有同一对Ftl祖父母的所有F2孙代构成1个亲堂兄妹家系，即 1个亲堂兄妹家系中包含有多个全同胞家系，构建8 16个堂兄妹家系；5)长成3cm之后，按照步骤幻的方式进行同池培养，达到商品规格时，挑选出留种亲本，总共构建8 16个堂兄妹家系，每1个堂兄妹家系保留5 8个全同胞家系，留种家系总数维持60 80个，每个家系内的留种亲本继续养殖至成熟亲本；再按步骤4)的方法采用多代连续杂交系统，继续构建下一代亲堂兄妹家系直到达成育种目标形成速生新品种；6)在步骤4)中，若需要建立自群交配家系，则选择F1代留种雄虾所在家系中的留种雌虾与之交配，正常情况下，避免同胞及堂兄妹间的亲本之间交配，而采用不同家系间的亲本交换的交配方式，建立明晰的谱系资料。
2.如权利要求1所述的一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于在步骤1) 中，所述海捕虾苗的规格基本一致；所述挑选海捕虾，是挑选个体较大的海捕虾。
3.如权利要求1所述的一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于在步骤2) 中，所述留种家系是选择产卵量大、孵化率高的家系作为留种家系。
4.如权利要求1所述的一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于在步骤2) 中，所述标准化分池培育的条件为无节幼体育苗密度为3000尾/0. 5L桶，P10仔虾放苗密度为600尾/5m3池。
5.如权利要求1所述的一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于在步骤3) 中，所述虾池为1 2亩的虾池。
6.如权利要求1所述的一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于在步骤3) 中，所述留种亲本为成活率高的家系中个体较大的虾作为留种亲本，选择强度为10%。
7.如权利要求1所述的一种日本囊对虾家系构建与选育方法，其特征在于在步骤5) 中，所述留种亲本为成活率高家系内的个体较大的虾作为留种亲本。
全文摘要
一种日本囊对虾家系构建与选育方法，涉及对虾的选育。构建基础群体；构建F1代家系；同池培养；构建F2代亲堂兄妹家系；长成3cm之后，进行同池培养，达到商品规格时，挑选出留种亲本，总共构建8～16个堂兄妹家系，每1个堂兄妹家系保留5～8个全同胞家系，留种家系总数维持60～80个，每个家系内的留种亲本继续养殖至成熟亲本；再采用多代连续杂交系统，继续构建下一代亲堂兄妹家系直到达成育种目标形成速生新品种。是一种日本囊对虾亲堂兄妹家系构建与选育方法，特别适用于日本囊对虾的遗传育种，对其它不适合精细育种模式的海洋动物的育种设计也具有重要的借鉴意义。
文档编号A01K67/027GK102405883SQ20111027887
公开日2012年4月11日 申请日期2011年9月16日 优先权日2011年9月16日
发明者毛勇, 王军, 苏永全 申请人:厦门大学