专利名称：一种培养茯苓子实体的培养方法
技术领域：
本发明涉及一种培养方法，具体的说是一种培养茯苓子实体的培养方法。
背景技术：
茯苓(Wolfiporia cocos)又名茯菟，别称松茯苓、松柏芋、松腴等，属于担子菌门， 层菌纲，非褶菌目，多孔菌科，茯苓属。是我国传统的名贵药食两用真菌菌，具有益脾促胃、 安神生津等功能。研究报道，茯苓子实体同其他食(药)用菌相比小很多，子实体平伏贴生于菌核、 段木和土壤的表面，是茯苓的有性繁殖器官。茯苓子实体大小不一，初为白色，成熟或干后变成浅淡黄色。担孢子近圆柱形或长方形，表面光滑，透明无色。子实体的形态特征是茯苓分类的重要依据。而要获得孢子，作为遗传育种以及分类的材料，就必须先得到能够产生孢子的子实体。在自然界中茯苓子实体的形成长受到季节和环境条件的限制，在实验室的条件下也较难获得稳定的子实体。熊杰(2006)曾用茯苓菌核组织分离所得的菌丝体培养形成子实体，日本富永保人(2006)用试管和三角瓶纯培养以及木屑培养得到茯苓子实体，诸发会等(2008)通过比较不同固体培养基获得过茯苓子实体产生的最适固体培养条件。但固体培养基培养茯苓时间较长，产生的数量较少，增加生产成本，降低劳动效率。
发明内容
本发明针对上述问题的不足，提供一种培养茯苓子实体的培养方法，能够快速的培养出茯苓子实体。本发明为解决上述问题所采用的技术方案是一种培养茯苓子实体的培养方法， 利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、 茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是400—500mg的土豆、20—30的麸皮、1一 3g的茯苓母种、2 — 5g的酵母膏、15 — 30g的葡萄糖和130— 160mL的麦粒；
利用茯苓子培养基培养茯苓子实体的方法，其培养方法为
步骤一、在250mL三角瓶内加入130— 160mL的煮熟后麦粒种子和1一3g的茯苓母种， 在条件下，培养3天，将培养过程中出现结成块的麦粒种子震碎，再继续培养3天，得到茯苓菌种，备用；
步骤二、在2000mL水中加入400—500g的去皮土豆和20—30g的麸皮，将土豆煮熟后， 过滤，得到滤液，备用；
步骤三、在IOOOmL的滤液中加入2 — 5g的酵母膏和15 — 30g的葡萄糖，混合均勻，在 121°C条件下，灭菌30分钟，冷却至40—50°C，得到液体接种培养基，备用；
步骤四、按重量百分比在97%的液体接种培养基中加入3%的茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30°C的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在条件下，静置培养2天，然后在温度为20_^TC，光照强度为1600—2000勒克斯的条件下， 培养15d—25d，得到茯苓子实体。
有益效果
本发明的培养方法，采用麦粒菌种有利于茯苓子菌株的接种，且接种后茯苓子的实体生长比较均勻。本发明的培养方法，将麦粒菌种在摇床中发酵分散接种，加快了发酵速度，可以提前得到茯苓子实体。本发明的培养方法，采用液体培养基比固体培养基早20—30天培养得到茯苓子实体。本发明的培养方法，因为采用液体培养，培养基中的水分能充分保障子实体分化和成长的需要，不需人工加湿，有利于防止污染。本发明的培养方法，操作简单，便于利用，提高生产成本，降低劳动消耗，提高经济效益。
具体实施例方式一种培养茯苓子实体的培养方法，利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是400— 500mg的土豆、20— 30的麸皮、1 一3g的茯苓母种、2 — 5g的酵母膏、15 — 30g的葡萄糖和130— 160mL的麦粒；
利用茯苓子培养基培养茯苓子实体的方法，其培养方法为
步骤一、在250mL三角瓶内加入130— 160mL的煮熟后麦粒种子和1一3g的茯苓母种， 在条件下，培养3天，将培养过程中出现结成块的麦粒种子震碎，再继续培养3天，得到茯苓菌种，备用；
步骤二、在2000mL水中加入400—500g的去皮土豆和20—30g的麸皮，将土豆煮熟后， 过滤，得到滤液，备用；
步骤三、在IOOOmL的滤液中加入2 — 5g的酵母膏和15 — 30g的葡萄糖，混合均勻，在 121°C条件下，灭菌30分钟，冷却至40—50°C，得到液体接种培养基，备用；
步骤四、按重量百分比在97%的液体接种培养基中加入3%的茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30°C的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在条件下，静置培养2天，然后在温度为20_^TC，光照强度为1600—2000勒克斯的条件下， 培养15d—25d，得到茯苓子实体。实施例一
一种培养茯苓子实体的培养方法，利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是 400mg的土豆、20的麸皮、Ig的茯苓母种、2g的酵母膏、15g的葡萄糖和130mL的麦粒； 利用茯苓子培养基培养茯苓子实体的方法，其培养方法为
步骤一、在250mL三角瓶内加入130mL的煮熟后麦粒种子和Ig的茯苓母种，在条件下，培养3天，将培养过程中出现结成块的麦粒种子震碎，再继续培养3天，得到茯苓菌种，备用；
步骤二、在2000mL水中加入400g的去皮土豆和20g的麸皮，将土豆煮熟后，过滤，得到滤液，备用；
4步骤三、在IOOOmL的滤液中加入2g的酵母膏和15g的葡萄糖，混合均勻，在121°C条件下，灭菌30分钟，冷却至40°C，得到液体接种培养基，备用；
步骤四、按重量百分比在97%的液体接种培养基中加入3%的茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30°C的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在条件下，静置培养2天，然后在温度为20°C，光照强度为1600勒克斯的条件下，培养7天后， 在接种培养基的上层表面上出现一层菌膜，菌膜下层出现菌丝，形成半固体状，培养10天后，出现米粒凸起，突起逐渐分化，培养15天后，得到片齿状的茯苓子实体，个别呈单片状， 大部分呈丛壮，并以三角瓶边缘居多。实施例二
一种培养茯苓子实体的培养方法，利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是 450mg的土豆、25的麸皮、2g的茯苓母种、4g的酵母膏、23g的葡萄糖和145mL的麦粒；
利用茯苓子培养基培养茯苓子实体的方法，其培养方法为
步骤一、在250mL三角瓶内加入145mL的煮熟后麦粒种子和2g的茯苓母种，在条件下，培养3天，将培养过程中出现结成块的麦粒种子震碎，再继续培养3天，得到茯苓菌种，备用；
步骤二、在2000mL水中加入450g的去皮土豆和25g的麸皮，将土豆煮熟后，过滤，得到滤液，备用；
步骤三、在IOOOmL的滤液中加入4g的酵母膏和23g的葡萄糖，混合均勻，在121°C条件下，灭菌30分钟，冷却至45°C，得到液体接种培养基，备用；
步骤四、按重量百分比在97%的液体接种培养基中加入3%的茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30°C的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在条件下，静置培养2天，然后在温度为23°C，光照强度为1800勒克斯的条件下，培养8天后， 在接种培养基的上层表面上出现一层菌膜，菌膜下层出现菌丝，形成半固体状，培养13天后，出现米粒凸起，突起逐渐分化，培养20天后，得到片齿状的茯苓子实体，个别呈单片状， 大部分呈丛壮，并以三角瓶边缘居多。实施例三
一种培养茯苓子实体的培养方法，利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是 500mg的土豆、30的麸皮、3g的茯苓母种、5g的酵母膏、30g的葡萄糖和160mL的麦粒；
利用茯苓子培养基培养茯苓子实体的方法，其培养方法为
步骤一、在250mL三角瓶内加入160mL的煮熟后麦粒种子和3g的茯苓母种，在条件下，培养3天，将培养过程中出现结成块的麦粒种子震碎，再继续培养3天，得到茯苓菌种，备用；
步骤二、在2000mL水中加入500g的去皮土豆和30g的麸皮，将土豆煮熟后，过滤，得到滤液，备用；
步骤三、在IOOOmL的滤液中加入5g的酵母膏和30g的葡萄糖，混合均勻，在121°C条件下，灭菌30分钟，冷却至50°C，得到液体接种培养基，备用；
步骤四、按重量百分比在97%的液体接种培养基中加入3%的茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30°C的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在条件下，静置培养2天，然后在温度为26°C，光照强度为2000勒克斯的条件下，培养7天后， 在接种培养基的上层表面上出现一层菌膜，菌膜下层出现菌丝，形成半固体状，培养10—15 天后，出现米粒凸起，突起逐渐分化，培养15—25天后，得到片齿状的茯苓子实体，个别呈单片状，大部分呈丛壮，并以三角瓶边缘居多。
权利要求
1. 一种培养茯苓子实体的培养方法，其特征在于利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是400— 500mg的土豆、20— 30的麸皮、1 一3g的茯苓母种、2 — 5g的酵母膏、 15—30g的葡萄糖和130— 160mL的麦粒；利用茯苓子培养基培养茯苓子实体的方法，其培养方法为步骤一、在250 mL三角瓶内加入130—160mL的煮熟后麦粒种子和1一3g的茯苓母种， 在条件下，培养3天，将培养过程中出现结成块的麦粒种子震碎，再继续培养3天，得到茯苓菌种，备用；步骤二、在2000 mL水中加入400—500g的去皮土豆和20—30g的麸皮，将土豆煮熟后，过滤，得到滤液，备用；步骤三、在IOOOmL的滤液中加入2 — 5g的酵母膏和15 — 30g的葡萄糖，混合均勻，在 121°C条件下，灭菌30分钟，冷却至40—50°C，得到液体接种培养基，备用；步骤四、按重量百分比在97%的液体接种培养基中加入3%的茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30°C的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在条件下，静置培养2天，然后在温度为20_^TC，光照强度为1600—2000勒克斯的条件下， 培养15 — 25天，得到茯苓子实体。
全文摘要
一种培养茯苓子实体的培养方法，利用茯苓子培养基得到茯苓子实体的方法，其茯苓子培养基的原料由土豆、麸皮、酵母膏、茯苓母种、葡萄糖和麦粒组成，各原料的加入量是400—500mg的土豆、20—30的麸皮、1—3g的茯苓母种、2—5g的酵母膏、15—30g的葡萄糖和130—160mL的麦粒；其培养方法，在液体接种培养基中加入茯苓菌种，将含有茯苓菌种的液体接种培养基送入30℃的摇床内，转速为160转/分钟，发酵培养3天，取出，在28℃条件下，静置培养2天，然后在温度为20—26℃，光照强度为1600—2000勒克斯的条件下，培养15—25天，得到茯苓子实体。本发明提供一种培养茯苓子实体的培养方法，能够快速的培养出茯苓子实体，其培养方法简单。
文档编号A01G1/04GK102523922SQ201210009630
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月13日 优先权日2012年1月13日
发明者侯军, 张建祥, 李爱江, 林晓民, 黄治民 申请人:河南科技大学