专利名称：馥芳艾纳香种苗快速繁育与栽培方法
技术领域：
本发明涉及一种馥芳艾纳香种苗快速繁育与栽培方法。
背景技术：
馥芳艾纳香(拟腫⑶aromatica DC.)，为菊科多年生草本植物，又名山风、香艾、 香艾纳。全草入药，味辛、微苦，性温，气香。有祛风消肿，活血止痒功效，用于主治风湿性关节痛、湿疹、皮肤瘙痒、外出血等症，是国家中药保护品种“华佗风痛宝”的主要原料药。目前馥芳艾纳香药材只依靠采集野生资源，随着人们用药的不断增加，医药企业对有限的野生资源进行大量采集，造成了资源严重匮乏，致使被迫使用疗效相差甚远的代用品艾纳香。 因此，迫切需要尽快进行馥芳艾纳香种苗繁育与栽培以满足人们的日常用药和工业的原料药需求。馥芳艾纳香在自然状态下依靠种子繁殖，但种子发芽率极低，不到0. 1%，且种子在传播过程中很难遇到能够满足其发芽生根的环境条件。经查阅文献和深访了解药材收购店 (站)及制药企业，目前尚未有馥芳艾纳香种苗繁育与栽培方面的研究。
发明内容
为了保护和可持续利用馥芳艾纳香药材的野生资源，同时又保障医药企业生产的用药需求，我们对馥芳艾纳香种苗快速繁殖与栽培进行了系统研究，包括外植体灭菌、初代诱导、继代增殖、生根移栽等技术环节，能在短时间内生产大量种苗，并栽培出挥发油有效成分含量高的药材。
本发明的技术方案
本发明以馥芳艾纳香的带腋芽茎段作为外植体诱导丛生芽，丛生芽诱导的最适培养基为 MS (Murashige and skoog(1962)培养基，下同)+2.0 mgdBA (6-苄基嘌呤， 下同)+0.2 mg-L^NAA (萘乙酸，下同)，诱导率为100% ；最佳继代增殖培养基为MS+2. 0 mg.Ll-BA+O. Smg-L^1KT (激动素，下同)+0. 2 mg·I^1NAA,增殖倍数为 6. 83/20d ；最适的生根培养基为1/2MS+0. 3 mg·L^1NAA,生根率100%，移栽成活率84. 07%。最适培养条件为温度^±2°C、光照强度为2000LX、光照时间10h。栽培方法
包括种植密度为40X40cm，种植最佳时间2-3月；种植前进行选地和整地，种植后进行排灌、施肥、病虫害防治、采收等栽培管理。施用基肥厩肥、堆肥、草木灰混合肥0. 5kg Ikg或未施基肥时分两次施用尿素。用50%多菌灵500倍液进行灌根防治根腐病，用50%辛硫磷乳油1000倍或35% 辛齐乳油1500倍喷施防治斜纹夜蛾幼虫。采收时间为10月份进入花期之前，采收方法为留地上部分2cm有待第二年根茎基部萌芽。本发明的优点或积极效果
本发明提供的整套馥芳艾纳香种苗快速繁殖与栽培方法，能在短时间内生产出大量种苗，并生产出挥发油有效成分含量高的药材。种苗的繁殖速度块，周期短，成本低廉，适用于工厂化生产。人工栽培技术完整，栽培措施简便可靠，保证药材的有效成分含量。
图1为丛生芽诱导情况图。
图2为丛生芽增殖情况。
图3为组培苗生根培养情况。
图4为组培苗生根情况。
图5为组培苗移栽情况。
图6为4月份除草后的馥芳艾纳香生长情况。
图7为7月山风生长情况。
图8为10月山风生长情况。
图9为宿根春季萌芽情况。
具体实施例方式(1)种苗快速繁育方法
配置配方为 MS+2. 0 mg.Ll-BA+O. 2 mg·L^1NAA 的培养基 IL 1.用移液管量取MS基本培养基母液
(1)大量元素50ml，其中含硝酸钾(KNO3)1900mg、硝酸铵(NH4NO3) 1650mg、七水合硫酸镁(MgSO4. 7H20) 370mg、磷酸二氢钾(KH2PO4) 170mg、无水氯化钙(CaCl2) 332. 24mg ；
(2)微量元素5ml，其中含四水合硫酸锰(MnSO4.4H20) 22. 3mg,七水合硫酸锌 (ZnSO4. 7H20) 8. 6mg、硼酸(H3BO3) 6. 2mg、碘化钾(ΚΙ) 0. 8;3mg、二水合钼酸钠(NaMoO4. 2H20) 0. 25mg、五水合硫酸铜(CuSO4. 5H20) 0. 025mg、六水合氯化钴(CoCl. 6H20) 0. 025mg;
(3)铁盐5ml，其中含乙二胺四乙酸纳(Na2-EDTA)37. :3mg、七水合硫酸铁(FeSO4. 7H20) 27. 8mg;
(4)肌醇25 ml，其中含肌醇(C6H12O6) IOOmg;
(5)有机物5ml，其中含烟酸(C6H5NO2)O. lmg、盐酸硫胺素(Vit. B1)0. lmg、盐酸吡哆醇 (Vit. B6) 0. 5mg、甘氨酸(NH2CH2COOH) 2. Omg。2.用移液管量取各种激素母液；
(1)0.5mg/ml 的 6-BA 母液 4ml ；
(2)0. 2 mg/ml 的 NAA 母液 1 ml。
3.称量琼脂5g和蔗糖25g ；
4.将500ml蒸馏水煮沸后加入上述称量的琼脂和蔗糖，待琼脂和蔗糖溶解后加入上述量取的MS基本培养基和激素混合；
5.用蒸馏水定容至1L，并将PH值调节至6.0 ；
6.分装培养基至培养瓶中，20ml/瓶；
7.将分装好的培养瓶放入高压灭菌锅，121°C灭菌20分钟；
8.将灭菌好的培养基取出移至接种室，冷却后即可使用。
①外植体选择与灭菌将带腋芽的茎段放在烧杯中，用0. 05%洗洁精溶液浸泡lOmin，浸泡过程中用毛笔轻轻刷洗茎段和嫩叶的表面以去除表面污垢，再经流水冲洗15min。在超净工作台上用 0. l%HgCl2溶液灭菌8min，然后用无菌水摇荡洗涤4次，再用无菌吸水纸将水分吸干后，将茎段切成0. 5cm左右带一个腋芽的茎段。此灭菌方法的污染率为13. 33%，成活率为80. 00%。②初代诱导
将灭菌好的外植体接种至初代诱导培养基MS+2. O mg-L^e-BA+O. 2 mg.I^NAA上进行丛生芽诱导培养，诱导率100%。培养25d后，在叶腋处诱导出具有4-5个小芽的丛生芽。利用该配方进行丛生芽诱导所需的时间最短，芽生长速度快，无玻璃化现象。③继代增殖
将初代诱导培养获得的丛生芽切下单个芽转接到继代培养基MS+2. 0 mg'L^e-BA+O. Smg'L^KT+O. 2 mg·L^1NAA中进行增殖培养，增殖倍数为6. 83/20d,丛生芽生长快，无玻璃化现象。④生根
当继代增殖芽苗长至2cm以上，从基部切成单个芽，转接到生根培养基1/2MS+NAA0. 3 mg-r1中诱导生根，培养7d开始长根，15d后可以开盖炼苗。生根率100%，根数>30条，新叶多。⑤培养条件
初代和继代增殖培养的基本培养基为MS，生根培养的基本培养基为1/2MS，培养基均附加3. 0%蔗糖和0. 5%琼脂，pH6. 0，配制分装后，于121°C灭菌20分钟。培养条件为 26士2°C、光照强度2000Lx、光照时间10 h/d。⑥炼苗移栽
把生根的瓶苗搬到炼苗棚，打开瓶盖炼苗4d，然后用镊子将瓶苗取出，用清水洗去粘附在根部的培养基，移栽到泥炭土 细河沙(3 1)的基质上，移栽后IOd内保持相对湿度95% 左右，温度白天控制在23-25°C，夜间15-18°C，没有直射光的条件，移栽成活率为84. 07%。 移栽15d后即可进行大田栽培。(2)栽培方法 ①选地和整地
选择土层深厚、土质疏松、排水良好、光照充足的沙壤土或壤土地块。种植前一个月深耕翻晒。种植前犁耙土块细碎，起畦宽70 cm，高15 cm 20 cm，整平畦面。按行距40 cm 、株距40 cm挖穴，穴长、深、宽为20 cm X 15 cm X 15 cm，每穴最好施入厩肥、堆肥、草木灰混合肥0. 5kg Ikg，肥土拌勻后，即可种植。②种植
每年春季2-3月，每穴放种苗1株。放苗时要让其根自然伸展开，覆土过根茎为宜，把土稍压实，并浇足定根水。③田间管理 A.除草
春季气温较低，且雨水充足容易生长杂草，宜在畦面铺上稻草或蕨草，既可防止杂草滋生，又起到保墒作用。4月份和7-8月份各除草一次。为了避免伤害其根部，锄草宜浅。B.排灌馥芳艾纳香生长较快，叶片大蒸腾作用强，保持土壤湿润，有利于植株生长。所以，应及时淋(灌)水。但是，如果土壤湿度过大，也容易发生根部病害。因此，在雨季(灌水后)要及时排水，畦沟里不能有积水。C.施肥
在施足基肥的情况下，整个生长周期均可以不再进行追肥。若种苗时未施用基肥，则可在幼苗生长期(3-5月份)薄施一次尿素，每株5 g ；第二次在7-8月份除完草后施，每株2g 尿素。D.病虫害防治
馥芳艾纳香常见病虫害有以下三种 a.根腐病
症状表现为病植株地上部枝叶萎缩，拔出根部可见根部变腐烂，有的黑腐，有的腐烂伴有白色菌丝索。发病严重时，病苗干枯死亡。地下害虫危害可加重该病发生。发病期选用50%多菌灵500倍液等药剂进行灌根防治。b.病毒病
症状病叶扭曲畸变并有下卷曲趋向，叶组织皱缩不平增厚呈花叶状，或呈绿色浓淡不均勻的斑驳花叶状。由病毒感染引起。蚜虫、叶蝉等是该病虫媒，病害通过虫媒、摩擦等方式传播。一旦发现病毒株应立即拔除。c.斜纹夜蛾幼虫
症状初龄幼虫在叶背群集危害，被食叶片仅留叶脉及上表皮，老龄幼虫把叶片吃成缺口或全叶吃光。可用50%辛硫磷乳油1000倍或35%辛齐乳油(克蛾宝)1500倍喷施，也可人工进行捕杀。E.采收
馥芳艾纳香是一年生的药用植物，进入花期后叶片从下部开始逐渐向上干枯脱落，同时经检测结果表明山风开花前采收植株其挥发油得率最高，因此，山风以10月份进入花期之前进行采收为宜。采收方法为用刀将离地2cm以上的地上部分收割，留下根和茎基部待
第二年萌芽。
权利要求
1. 一种馥芳艾纳香种苗快速繁育与栽培方法，其特征是以馥芳艾纳香的带腋芽茎段作为外植体诱导丛生芽，(1)培养基配方丛生芽诱导的最适培养基为MS+2. 0 mg-L^e-BA+O. 2 mg-L^1NAA ；最佳继代增殖培养基为 MS+2. 0 mg'L^e-BA+O. Smg'L^KT+O. 2 mg·L^1NAA ；最适生根培养基为1/2MS+0. 3 mg-L^1NAA ；(2)培养条件为温度^±2°C、光照强度为2000Lx、光照时间IOh；(3)栽培方法包括种植密度为40X40cm，种植最佳时间为春季2-3月；施用基肥厩肥、堆肥、草木灰混合肥0. 5kg Ikg或未施基肥时分两次施用尿素；用50%多菌灵500倍液进行灌根防治根腐病，用50%辛硫磷乳油1000倍或35%辛齐乳油1500倍喷施防治斜纹夜蛾幼虫；采收时间为10月份进入花期之前，采收方法为留地上部分2cm有待第二年根茎基部萌芽。
全文摘要
本发明涉及一种馥芳艾纳香种苗快速繁育与栽培方法，是以馥芳艾纳香的带腋芽茎段作为外植体诱导丛生芽，提供了整套馥芳艾纳香种苗快速繁殖与栽培方法，包括外植体灭菌、初代诱导、继代增殖、生根移栽等技术环节，能在短时间内生产出大量种苗，并生产出挥发油有效成分含量高的药材。种苗的繁殖速度块，周期短，成本低廉，适用于工厂化生产。人工栽培技术完整，栽培措施简便可靠，保证药材的有效成分含量。
文档编号A01G1/00GK102550421SQ201210051539
公开日2012年7月11日 申请日期2012年3月1日 优先权日2012年3月1日
发明者凌征柱, 刘丽辉, 姚绍嫦, 李翠, 潘丽梅, 蓝祖栽 申请人:广西壮族自治区药用植物园