专利名称：一种槟榔种质资源离体保存的方法
技术领域：
本发明属于植物细胞工程技术领域，涉及一种棕榈科植物的资源离体保存方法，尤其是一种槟榔种质资源离体保存的方法。
背景技术：
槟榔(Areca catechu L.)属棕榈科槟榔属植物,是我国热带地区主要的经济作物及热带园林绿化树种，也是我国重要的南药资源之一，被列为四大南药之首，具有很高的经济价值。在亚州及太平洋地区，槟榔果主要用作当地群众的咀嚼嗜好品，槟榔栽培已逐渐向商品化、规模化发展。槟榔在我国主要分布在海南省，总产量占大陆槟榔产量的99%以 上。目前在海南的种植面积已达103万亩，产量达14. 36万吨，鲜果年产值20亿元以上，力口工产值达50 60亿元，是海南东部、中部和南部地区近200万农民主要的经济来源。组织培养是植物快速繁殖最有效的方法，胚培养作为种质资源保存繁殖的重要手段已被广泛应用，利用胚培养获得的胚培苗不仅运输成本低，还可避免在种质交换过程中的病虫害传播，利用胚或胚培苗作为种质保存可以解决大田保存占地面积大、费用高等问题。槟榔为单杆棕榈科植物，常规的营养繁殖方法如扦插、嫁接、高空压条等不适用于槟榔繁殖，而主要靠种子繁殖，但该方法容易传播病虫害。至目前为止，在国内外槟榔组织培养虽有报道，但尚未建立较为完善的培养体系，槟榔组织培养快繁技术研究还处于起步阶段。
发明内容
本发明的目的是提供一种槟榔种质资源离体保存的方法，通过在保存培养基中提高糖用量可很好地延缓植株的生长速度，有利于国内外种质资源的交换，避免在种质交换过程中发生病虫害传播，同时还可解决大田保存占地面积大、费用高等问题,为离体快繁技术提供理论支撑，对槟榔种质资源收集保存以及种苗的工厂化生产提供一条有效途径。本发明所采用的技术方案一种槟榔种质资源离体保存的方法，其步骤如下I、选取15年树龄以上的种质资源结果树，采集7 8个月的槟榔种果，切除大部分果皮和胚乳，留取包裹着完整胚的胚乳块；将胚乳块洗净后消毒，置于灭菌滤纸上吸干水分，然后取出胚。2、将胚置于预培养基中培养40 50天，待胚萌发形成芽和茎，生根培养形成完整植株，在植株生长至I. 5 2cm高度时即进行离体保存。所述预培养基是以MS培养基为基础培养基，并添加AC lg/L、蔗糖50 g/L。3、将槟榔I. 5 2cm高的植株转接入保存培养基中保存培养，即可实现槟榔种质资源离体保存。所述保存培养基是以1/2MS培养基为基础培养基，并添加BA 2mg/L、NAAO. 5mg/L、鹿糖 120g/L、AC lg/L、琼脂 8g/L。
本发明エ艺简单，通过在保存培养基中提高糖用量可很好地延缓槟榔植株的生长速度，其生长期比未使用保存培养基的转接培养长6 8个月，有利于种质资源的保存，有利于国内外种质资源的交換，避免在种质交换过程中发生病虫害传播，同时还可解决大田保存占地面积大、费用高等问题，为离体快繁技术提供理论支撑，对槟榔种质资源收集保存以及种苗的エ厂化生产提供一条有效途径。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明的具体实施方式
作进ー步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例一I、胚的获得及预培养选取15年树龄以上的种质资源结果树进行跟踪调查，确定目标株后从雌花受粉 后开始到果实7-8个月时及时采收(槟榔胚的成熟度影响胚的萌发率，胚成熟度高则出苗率也高，槟榔种果一般成熟时间为12个月，但12个月的槟榔种果不利于种胚的获取，由于在成熟时胚乳坚硬如石，不易取胚，一般在7-8个月时种胚容易获取且易培养)。收集后先把种果用流水冲洗，切除果皮后留有包被着胚的胚乳块，大小约为2X2cm，留含胚的胚乳块经自来水洗净后，再用70%的酒精表面消毒30S，再以O. 1%的升汞溶液消毒8min，最后用无菌水冲洗3 5次。将洗净的胚乳块置灭菌滤纸上吸干水分，用解剖刀取出嫩种胚置于预培养基中培养40 50天，待胚萌发形成芽和茎，生根培养形成完整植株，在植株生长至I. 5 2cm高度时即进行离体保存，(先消毒再取胚可防止灭菌液直接接触胚对胚体造成伤害，影响后期胚萌发及生长发育)。预培养基是以MS培养基为基础培养基，并添加AC lg/L、鹿糖50 g/Lo2、保存培养2. I、保存培养基的设计首先采用三种可能延缓生长的方式降低温度培养、添加矮壮素、提闻糖浓度水平；在初次的实验中，通过对根、芽及莖基部等生长指标的测定，确定其保存期，结果将表I。研究结果表明，提高糖浓度水平可明显延缓槟榔胚苗的生长。表I不同处理方法对槟榔资源的保存影响
权利要求
1.一种槟榔种质资源离体保存的方法，其特征在于，其步骤如下 I )、选取15年树龄以上的种质资源结果树，采集7 8个月的槟榔种果，切除大部分果皮和胚乳，留取包裹着完整胚的胚乳块；将胚乳块洗净后消毒，置于灭菌滤纸上吸干水分，然后取出胚； 2)、将胚置于预培养基中培养40 50天，待胚萌发形成芽和茎，生根培养形成完整植株，在植株生长至I. 5 2cm高度时即进行离体保存；所述预培养基是以MS培养基为基础培养基，并添加AC lg/L、蔗糖50 g/L ； 3)、将槟榔1.5 2cm高的植株转接入保存培养基中保存培养，即可实现槟榔种质资源离体保存；所述保存培养基是以1/2MS培养基为基础培养基，并添加BA 2mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖 120g/L、AC lg/L、琼脂 8g/L。全文摘要
本发明属于植物细胞工程技术领域，涉及一种槟榔种质资源离体保存的方法，是选取15年树龄以上的种质资源结果树的槟榔种果，取出胚置于预培养基中培养，待胚萌发成完整植株，在植株生长至1.5～2cm高度时转接入保存培养基中保存培养，即可实现槟榔种质资源离体保存。本发明工艺简单，可操作性强，通过在保存培养基中提高糖用量可很好地延缓槟榔植株的生长速度，有利于种质资源的保存，有利于国内外种质资源的交换，避免在种质交换过程中发生病虫害传播，同时还可解决大田保存占地面积大、费用高等问题，为离体快繁技术提供理论支撑，对槟榔种质资源收集保存以及种苗的工厂化生产提供一条有效途径。
文档编号A01H4/00GK102726293SQ201210213429
公开日2012年10月17日 申请日期2012年6月27日 优先权日2012年6月27日
发明者刘立云, 周焕起, 李 杰, 范海阔, 黄丽云 申请人:中国热带农业科学院椰子研究所