专利名称：高效复合有机物料腐熟剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种加速有机物料腐熟的高效复合有机物料腐熟剂，属微生物技术领域。尤其适用于对生物有机肥料的腐熟。
背景技术：
随着养殖业的集约化加剧，大型养殖场越来越多，畜禽粪便的无害化处理或循环利用成为制约养殖业发展的一大障碍。目前，畜禽粪便和各类有机的生活垃圾都是通过高温烘干或自然堆腐或直接回田使用的方式处理，自然堆腐一般要3个月以上时间方可降解。但是这些处理方式不仅浪费煤炭能源还不能完全的腐熟和杀死其中的有害病原菌，导致农作物的病害发生，或直接烧根烧苗
发明内容
为了解决日益严重的有机废弃物对环境的污染，在最短的时间内降解畜禽粪便及农作物秸杆等有机废弃物，达到生产有机肥料的无公害标准。本发明提供一种高效复合有机物料腐熟剂。利用多年筛选出的三株高活性微生物菌种，通过在发酵罐中高密度纯培养，按照科学的比例配比后，采用人工接种的方式使有机废弃物快速升温杀死其中的有害微生物，分泌的各类胞外酶可以降解大分子有机物，达到高效回收利用并可被农作物吸收的目的。有机物料腐熟剂的发酵速度和效果主要由发酵菌剂的菌种类别、菌种搭配比例以及活菌数量决定。其中活菌的数量主要由发酵的培养基配方和发酵生产的工艺流程决定。本发明是以如下技术方案实现的一种高效复合有机物料腐熟剂，它是由产黄纤维单胞菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的发酵菌液按比例混合而成；各发酵菌液的体积百分比为产黄纤维单胞菌30%、嗜热脂肪芽孢杆菌30%、枯草芽孢杆菌40% ；
上述三类菌株的活菌总数为10亿/毫升，菌剂类型为液体。上述的高效复合有机物料腐熟剂的制备方法采用将各株菌分别在无杂菌的发酵罐中培养后进行复配的方法制备，制备流程为试管斜面种子一茄子瓶斜面一一级种子罐—二级种子罐一生产发酵罐一菌液的复配；
枯草芽孢杆菌液培养方法是将250ml规格的两只茄子瓶菌种接种于100L种子发酵罐，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌；各控制参数为转速200转/分钟，通气比为O. 5 (V / V · min)，温度为35°C，培养时间8小时，即可接种在二级种子罐培养；所述一级种子罐培养基为一级牛肉膏O. 5%、蛋白胨O. 5%、NaCI O. 6%，pH 7. 0—7. 5 ;所述二级种子培养方式与上面所述的一级种子的培养方式相同，其发酵罐的容积为Im3 ;然后进行生产发酵罐的培养发酵生产培养基为玉米浆O. 8%、豆柏粉1%、食用淀粉1%、KH2PO4 O. 2%、硫酸锰O. 02%, PH7. 0—7. 5 ;灭菌；将上面的二级种子转接于各发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I (V / V · min)，培养时间为25小时；嗜热脂肪芽孢杆菌液培养方法是将250ml规格的两只茄子瓶菌种接种于100L种子发酵罐，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌；各控制参数为转速200转/分钟，通气比为O. 5
V/ V · min，温度为40°C，培养时间8小时，即可接种在二级种子罐培养；所述一级种子罐培养基为一级牛肉膏O. 5%、蛋白胨O. 5%、NaCI O. 6%，pH 7. 0—7. 5 ;所述二级种子培养方式与上面所述的一级种子的培养方式相同，发酵培养基为玉米衆O. 8%、豆柏粉1%、食用淀粉1%、KH2PO4 O. 2 %、硫酸锰O. 02%, PH7. 0—7. 5 ;其发酵罐的容积为Im3 ;然后进行生产发酵罐的培养按照发酵培养基的配方配置并灭菌，将上面的二级种子转接于各发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I V / V · min，培养时间为25小时；
产黄纤维单胞菌液培养方法是将250ml规格的两只爺子瓶菌种接种于100L种子发酵罐，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌；各控制参数为转速200转/分钟，通气比为O. 5 V/ V · min，温度为35°C，培养时间12小时，即可接种在二级种子罐培养；所述一级种子罐培养基为NaCI O. 6%、硫酸铵O. 2%、磷酸二氢钾O. 05%、硫酸镁O. 01%、磷酸氢二钾O. 2%、氯化钙O. 01%、羧甲基纤维素钠2%，PH 7. 0-7. 5;所述二级种子培养方式与上面所述的一级种子的培养方式相同，其发酵培养基为羧甲基纤维素钠CMC-Na 2% ；Na2HPO4 0.25% ；KH2PO4 O. 15 % ;蛋白胨O. 25 % ； pH 7. 0—7. 5 ;发酵罐的容积为Im3 ;然后进行生产发酵罐的培养按照发酵生产培养基的配方配置并灭菌，将上面的二级种子转接于发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I (V / V · min)，培养时间为25小时；
所述菌液的复配是指通过显微镜和平板培养计数后，将按上面方法生产的三种菌液按产黄纤维单胞菌30%、嗜热脂肪芽孢杆菌30%、枯草芽孢杆菌40%混合和包装，菌数控制在10亿 /ml。本发明的有益效果是通过上述三株菌的配合，各类有机物料都能够在15天左右迅速降解转化为可利用的有机肥料，并且含有多功能的益生菌，打破了传统发酵需要3个月以上时间的弊端。
具体实施例方式三种菌株产黄纤维单胞菌(Cellulomonas. flavigena )、嗜热脂肪芽孢杆菌{Bacillus, s tearo thermophi Ius )和枯草芽抱杆菌 Cfeci77w5·· Subti I is.、。生产工艺及流程试管斜面种子一茄子瓶斜面一一级种子罐一二级种子罐一生产发酵罐一菌液的复配。斜面种子的保藏和培养上面三株菌种都通过试管斜面于4摄氏度保藏，在需要生产时，转接在200ml的茄子瓶斜面上培养一天保藏备用。一级种子培养
(I)、枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌将两只茄子瓶(250ml规格的)菌种接种于100L种子发酵罐，发酵培养基的配置按下面的配方，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌。各控制参数为转速200转/分钟，通气比为O. 5 (V / ν·π η)，温度为枯草芽孢杆菌35°C，嗜热脂肪芽孢杆菌40°C。培养时间8小时，即可接种在二级种子罐培养。一级种子罐培养基为一级牛肉膏0.5%、蛋白胨O. 5%、NaCI O. 6%，pH 7. O—7. 5 ；
发酵培养基为玉米浆O. 8%、豆柏粉1%、食用淀粉1%、KH2PO4
O.2 %、硫酸锰 O. 02%, PH7. 0—7. 5 ；
(2)、产黄纤维单胞菌接种方式、接种量、转速、通气比及培养温度同枯草芽孢杆菌，培养时间为12小时。一级种子培养基(摇瓶和一级种子罐)=NaCI O. 6%、硫酸铵O. 2%、磷酸二氢钾
O.05%、硫酸镁O. 01%、磷酸氢二钾O. 2%、氯化钙O. 01%、羧甲基纤维素钠2%，PH 7. 0-7. 5。发酵培养基羧甲基纤维素钠(CMC-Na)2% ;Na2HP04 O. 25% ;KH2PO4 O. 15 % ;蛋白胨 O. 25 % ； pH 7. 0—7. 5。
二级种子培养
同上面一级种的培养方式一样，只是发酵罐的容积为lm3。
生产发酵罐的培养
按照发酵培养基的配方配置并灭菌，将上面准备好的各二级种子转接于各发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I (V / V · min)。各株菌的培养时间为25小时。菌液的复配
通过显微镜和平板培养计数后，将按上面步骤生产的三种菌液混合和包装，菌数控制在10亿/ml。试验结果
产品中的三株菌分别为产黄纤维单胞菌Wellulomonas.嗜热脂肪芽孢
杆菌{Bacillus.和枯草芽抱杆菌{Bacillus.将这三株
菌的复合物制剂人工接种于有机物料后，它们分别有不同的效果。接种初期，枯草芽孢杆菌能够快速启动发酵迅速繁殖，使堆体的温度升高到35度左右，并且枯草芽孢杆菌的蛋白酶和淀粉酶分泌能力极强，能够降解物料中的蛋白和多糖类物质转变为氨基酸和寡糖和单糖，利于在土地里被植物吸收。在温度升高到40°C时，激活了嗜热脂肪芽孢杆菌的繁殖和代谢活力，使发酵温度继续升高，最高能达到76°C，能够充分的杀灭物料中的病害菌和各类虫卵。同时在高温条件下产黄纤维单胞菌分泌的胞外纤维素、半纤维素酶和木质素酶对木质素和纤维素等难降解的大分子物质能够有效的分解，并使该类物质迅速转化为腐殖质，缩短腐熟的时间。通过上述三株菌的配合，各类有机物料都能够在15天左右迅速降解转化为可利用的有机肥料，并且含有多功能的益生菌，打破了传统发酵需要3个月以上时间的弊端。
权利要求
1.一种高效复合有机物料腐熟剂，其特征在于，它是由产黄纤维单胞菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的发酵菌液按比例混合而成；各发酵菌液的体积百分比为产黄纤维单胞菌30%、嗜热脂肪芽孢杆菌30%、枯草芽孢杆菌40% ； 上述三类菌株的活菌总数为10亿/毫升，菌剂类型为液体；采用将各株菌分别在无杂菌的发酵罐中培养后进行复配的方法制备。
2.—种权利要求I所述的高效复合有机物料腐熟剂的制备方法，其特征在于，采用将各株菌分别在无杂菌的发酵罐中培养后进行复配的方法制备，制备流程为试管斜面种子—茄子瓶斜面一一级种子罐一二级种子罐一生产发酵罐一菌液的复配； 枯草芽孢杆菌液培养方法是将250ml规格的两只茄子瓶菌种接种于100L种子发酵罐，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌；各控制参数为转速200转/分钟，通气比为、0.5 (V / V min)，温度为35°C，培养时间8小时，即可接种在二级种子罐培养；所述一级种子罐培养基为一级牛肉膏0. 5%、蛋白胨0. 5%、NaCI 0. 6%，pH 7. 0—7. 5 ;所述二级种子培养方式与上面所述的一级种子的培养方式相同，其发酵罐的容积为Im3 ;然后进行生产发酵罐的培养发酵生产培养基为玉米浆0. 8%、豆柏粉1%、食用淀粉1%、KH2PO4 0. 2%、硫酸锰0. 02%, PH7. 0—7. 5 ;灭菌；将上面的二级种子转接于各发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I (V / V min)，培养时间为25小时； 嗜热脂肪芽孢杆菌液培养方法是将250ml规格的两只茄子瓶菌种接种于100L种子发酵罐，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌；各控制参数为转速200转/分钟，通气比为0. 5V/ V min，温度为40°C，培养时间8小时，即可接种在二级种子罐培养；所述一级种子罐培养基为一级牛肉膏0. 5%、蛋白胨0. 5%、NaCI 0. 6%，pH 7. 0—7. 5 ;所述二级种子培养方式与上面所述的一级种子的培养方式相同，发酵培养基为玉米衆0. 8%、豆柏粉1%、食用淀粉1%、KH2PO4 0. 2 %、硫酸锰0. 02%, PH7. 0—7. 5 ;其发酵罐的容积为Im3 ;然后进行生产发酵罐的培养按照发酵培养基的配方配置并灭菌，将上面的二级种子转接于各发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I V / V min，培养时间为25小时； 产黄纤维单胞菌液培养方法是将250ml规格的两只爺子瓶菌种接种于100L种子发酵罐，灭菌的方法按照标准的培养基灭菌；各控制参数为转速200转/分钟，通气比为0. 5V/ V min，温度为35°C，培养时间12小时，即可接种在二级种子罐培养；所述一级种子罐培养基为NaCI 0. 6%、硫酸铵0. 2%、磷酸二氢钾0. 05%、硫酸镁0. 01%、磷酸氢二钾0. 2%、氯化钙0.01%、羧甲基纤维素钠2%，PH 7. 0-7. 5;所述二级种子培养方式与上面所述的一级种子的培养方式相同，其发酵培养基为羧甲基纤维素钠CMC-Na 2% ；Na2HPO4 0.25% ；KH2PO4 0. 15 % ;蛋白胨0. 25 % ； pH 7. 0—7. 5 ;发酵罐的容积为Im3 ;然后进行生产发酵罐的培养按照发酵生产培养基的配方配置并灭菌，将上面的二级种子转接于发酵培养基中，发酵培养初期的8小时内转速为200转/分钟，后期转变为300转/分钟，在第12小时后将通气比提高到I (V / V min)，培养时间为25小时； 所述菌液的复配是指通过显微镜和平板培养计数后，将按上面方法生产的三种菌液按产黄纤维单胞菌30%、嗜热脂肪芽孢杆菌30%、枯草芽孢杆菌40%的比例混合和包装，菌数控制在10亿/ml。
全文摘要
本发明公开了一种加速有机物料腐熟的高效复合有机物料腐熟剂，属微生物技术领域。它是由产黄纤维单胞菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的发酵菌液按比例混合而成；各发酵菌液的体积百分比为产黄纤维单胞菌30%、嗜热脂肪芽孢杆菌30%、枯草芽孢杆菌40%；上述三类菌株的活菌总数为10亿/毫升，菌剂类型为液体。采用将各株菌分别在无杂菌的发酵罐中培养后进行复配的方法制备。有益效果是通过上述三株菌的配合，各类有机物料都能够在15天左右迅速降解转化为可利用的有机肥料，并且含有多功能的益生菌，打破了传统降解需要3个月以上时间的弊端。
文档编号C05F11/08GK102757916SQ201210236090
公开日2012年10月31日 申请日期2012年7月10日 优先权日2012年7月10日
发明者李峰, 王延红 申请人:徐州奇缘生态农业发展有限公司