高剂量粘膜粘附甲硝唑水基凝胶制剂及其治疗细菌性阴道病的用途

高剂量粘膜粘附甲硝唑水基凝胶制剂及其治疗细菌性阴道病的用途
【专利摘要】本公开提供可用于多种目的的甲硝唑的粘膜粘附水基凝胶制剂，所述目的包括作为治疗方法治疗患有和／或被诊断具有细菌性阴道病的个体的阴道内施加。
【专利说明】高剂量粘膜粘附甲硝唑水基凝胶制剂及其治疗细菌性阴道
病的用途
[0001]I.相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2011年6月28日提交的美国临时申请No. 61 / 502，285和2011年7月14日提交的美国临时申请No. 61 / 508，058的权益，所述专利的内容通过引用整体并入本文。本申请还涉及2011年6月28日提交的美国临时申请No. 61 / 502，288和2011年7月14日提交的美国临时申请No. 61 / 508，054，所述专利的内容通过引用整体并入本文。
[0003]2.领域
[0004]本公开涉及甲硝唑的水基凝胶制剂及其用途，例如治疗细菌性阴道病。
[0005]3.背景 [0006]细菌性阴道病（以下为“BV”）据报道为在生育年龄的妇女中发现阴道炎的最常见原因，引起40-50%的所有阴道感染(Sobel, 1997,“Review Article =VaginitisZ^New EnglJ Med337 :1896-1903)。BV可引起麻烦的症状且有时可增加获得性传播疾病（诸如HIV)的危险。BV被认为表示协同的多种细菌感染，特征为最常见作为一部分正常阴道微生物区系的细菌菌种的过度生长（ΙΟΟχ-ΙΟΟΟχ),包括阴道加德纳菌（Gardnerella vaginalis)、拟杆菌属某些种（Bacteroides spp.)(现在一些被分为普氏菌属某些种（Prevotella spp·))、厌氧革兰式阳性球菌、动弯杆菌属某些种（Mobihuncus spp.)和人型支原体（mycoplasmahominis)。伴随着这种增长通常存在的乳杆菌属（Lactobacilhus)菌种显著下降,据信该菌种调节其它阴道菌群的生长。此外，在健康妇女的阴道菌群中占优势的产过氧化氢的乳杆菌属被妇女中具有BV的非产过氧化氢菌株替换（Amsel等人，1983，Am J. Med74 :14 ；Sobel等人1990，Infect Med May :24)。一般来讲，研究显示与健康妇女相比，具有BV的妇女的阴道微菌群存在较大量的定量差异，表明BV的一些临床体征和症状可能与一种或多种天然存在的微生物菌种的定量差异相关（Masfari等人，1986，Genitourin Med62 :256)。导致阴道生态环境中菌种平衡的初始破坏和最终改变的因素未得到很好理解，并且精确的感染位置为未知的，使研发合适的治疗方法的努力复杂化。
[0007]甲硝唑（由FDA在1963年7月18日批准）和克林霉素为两种最古老和最常用的抗生素，它们被开处方用于治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女（(CDC2006STD TreatmentGuidelines MMWR2006 ；55(No. RR-7))。
[0008]甲硝唑可获得自多种来源如口服片剂和胶囊、可注射溶液、0.75重量％的局部用洗剂、乳膏剂和凝胶、1.0重量％的局部用凝胶和0. 75重量％的阴道凝胶。局部用乳膏剂、洗剂和凝胶一般被用于治疗酒渣鼻，其中所述阴道凝胶，例如0. 75重量％的甲硝唑阴道凝胶由Medicis以商标名METROGEL VAGINAL?出售，被用于治疗BV。
[0009]尽管其常见用途，用0. 75重量％的阴道甲硝唑凝胶诸如METROGEL VAGINAL?治疗并不理想。为有效，必须将凝胶每天施加一次或两次持续五天。
[0010]此外，无论口服还是阴道，通常在多达30%的妇女中于三个月治疗内观察到BV的复发。复发的原因仍不清楚。参见，如，Larsson, 1992, Int J Std Aids3 :239-247 ；ffilson,2004, Sex Transm Infect80 :8_11。在双盲、安慰剂对照交叉实验中已显示用0· 75%甲硝唑凝胶的阴道内治疗在治疗之后一个月内产生约15%的复发率。参见，Hillier等人，1993年 6 月，“Efficacy of IntravaginalO. 75% Metronidazole Gel for the Treatment ofBacterial Vaginosis,’’Obstet Gynecol81 (6) :963_967。外阴道念珠菌病，通常被称为酵母菌感染，也在BV治疗之后大约10%的妇女中观察到。
[0011]鉴于BV为当前生育年龄的妇女中阴道感染的最普遍形式的事实，实际和立即需要解决当前可用的BV治疗的一个或多个缺点的新疗法。例如，期望利用在单次施加中提供有效的疗法，和/或提供比当前利用O. 75重量％的阴道内甲硝唑凝胶更有效的疗法，降低在成功的治疗过程之后BV的复发率，和/或降低在成功的BV治疗过程之后外阴道念珠菌病的发病率的阴道内治疗。
[0012]4.概述
[0013]已经令人惊讶地发现，在粘膜粘附水基凝胶媒介物中以高于那些当前使用来治疗细菌性阴道病（“BV”）的浓度配制的甲硝唑（“MTZ”）获得克服当前阴道内BV治疗（诸
如METROGEL VAGINAL?)的若干缺点的治疗。例如，如将在下文更详细论述，包含约1_2
重量％ ( iiWt0Zon的MTZ的“高剂量”粘膜粘附MTZ水基凝胶递送令人惊讶地显著高于MTZ的预期局部浓度以及显著高于通过与用人类尸体皮肤进行的体外皮肤渗透实验中的METROGEL VAGINAL?类似的0. 75重量％的MTZ凝胶递送的MTZ的局部浓度。当用于治
疗患有和/或被诊断具有BV的妇女时，与METROGEL VAGINAL?相比，包含I. 3重量％的
MTZ的高剂量粘膜粘附水基凝胶的实施方案获得更优的结果。例如，当每天施加一次持续三天时，用本公开的I. 3重量％的高剂量的MTZ凝胶实现的功效约与用当前可用的FDA-批准的0. 75重量％的MTZ凝胶根`据其标准的5-天治疗方案的治疗在妇女中实现的功效相同。相当令人惊讶地，发现本公开的高剂量的I. 3重量％的MTZ凝胶的单次施加与每天施加一次持续五天的0. 75重量％的MTZ凝胶的过程同样有效。该发现为重大的，因为其用暴露于低得多的总MTZ提供BV的有效治疗，降低了不良的甚至危险的副作用的危险。
[0014]尽管并非旨在受任何操作理论的束缚，据信示例性I. 3重量％的MTZ水基凝胶的令人惊讶的功效可能部分是由于本文所述的新型粘膜粘附水基凝胶局部释放的上述出人意料的高水平的MTZ。
[0015]也令人惊讶地发现，当将I. 3重量％的MTZ高剂量凝胶以每天一次持续五天施加至患有和/或被诊断具有BV的妇女的阴道时，与METROGEL VAGINAL?相比功效显著地
增加，如由例如，增加的治愈速率、增加症状的分辨时间、增加症状的复发时间和/或降低复发的发病率中的任一者来确定。因此，已经令人惊讶地发现当将高剂量的粘膜粘附MTZ水基凝胶以每天一次持续五天施加至患有和/或被诊断具有BV的妇女的阴道时，与用当前可用的FDA-批准的0. 75重量％的甲硝唑凝胶根据其标准的5天治疗方案的治疗的妇女相比，所实现的功效优越的多并且BV复发的发病率显著降低。
[0016]此外，用本文所述的高剂量的I. 3重量％的組7制剂治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女持续五天表现出出人意料的和引人关注的结果-处理后外阴道念珠菌病的几乎零发病率。根据 申请人:的知识，该结果为空前的。
[0017]因此，在一个方面，本公开提供新型“高剂量”粘膜粘附MTZ水基凝胶，其可以被局部施加特别是阴道内施加于妇女以治疗（除了其它以外）BV。高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶一般包含约I重量％至约2重量％的MTZ，在一些具体实施方案中，约1.0重量％、约I. I重量％、约I. 2重量％、约I. 3重量％、约I. 4重量％、约I. 5重量％、约I. 6重量％、约I. 7重量％、约I. 8重量％、约I. 9重量％或约2. O重量％的MTZ和一种或多种胶凝聚合物和/或试剂。MTZ可以游离碱或盐的形式（诸如与药学上可接受的酸形成的盐）包括在凝胶中。
[0018]凝胶通常包括总量的胶凝聚合物在25 °C下足以获得约200，000-400，OOOmPa的粘度，例如在25°C下约250，000-350, OOOmPa，使用受控的剪切率扫描法，Bholin CV0100流变仪和在表11 (以下）中提供的流变仪设置。取决于具体的胶凝聚合物和使用的凝胶条件，粘度在该范围内的水基凝胶一般通过将约O. 5重量％至约5重量％的总量的胶凝聚合物包括在凝胶中来实现。在一些具体实施方案中，本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶将包括约I重量％至约3重量％的总胶凝聚合物，以及在一些具体实施方案中约2重量％的总胶凝聚合物。
[0019]熟练的技术人员将了解不同的胶凝聚合物表现出不同的粘膜粘附度。对于被设计用于阴道内施加以治疗BV的凝胶，胶凝聚合物可为粘膜粘附的。选择的具体的粘膜粘附胶凝聚合物并不是成功的关键且可选自能够在水基溶液中形成凝胶的任何粘膜粘附聚合物。示例性合适的粘膜粘附胶凝聚合物更详细的描述于详述部分。所有这些粘膜粘附胶凝聚合物可单独使用或组合使用。
[0020]一般来讲，应选择粘膜粘附胶凝聚合物使得当用于制备粘度在上述范围内水基凝胶时，获得在用示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶MG33PB在相同的测定条件下观察到的粘膜粘附度的表现出约± 10%内的粘膜粘附度的凝胶。在具体的示例性实施方案中，粘膜粘附聚合物选自羟烷基纤维素、卡波姆、聚卡波非及其混合物。在另一具体的示例性实施方案中，粘膜粘附聚合物为聚卡波非。
[0021]熟练的技术人员将了解尽管在许多实施方案中一种或多种胶凝聚合物将具有粘膜粘附特性，但是它并不是必须的。能`够在水基溶液中形成凝胶的聚合物可以与粘膜粘附剂联合使用（不管是否形成凝胶）获得如本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶，所述聚合物不具有粘膜粘附性质或获得不足的粘膜粘附度。
[0022]高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还包含针对MTZ的溶剂系统。众所周知，当试图配制可用于局部用和阴道与由FDA批准用于人体的赋形剂施加的凝胶时，MTZ存在溶解度问题。其它的已经试图在大于O. 75重量％或1.0重量％的浓度的水溶液中溶解MTZ。例如，美国专利No. 6，881，726描述使用环糊精和β -环糊精以增强MTZ在水基溶液中的溶解度。美国专利No. 7，348，317描述另外使用烟酸和烟酰胺以增强MTZ在水基溶液中的溶解度。另外的其它化合物已经试图使用表面活性剂来增加MTZ在水基溶液中的浓度。可以使用这些溶剂系统的任一者以将MTZ溶解至本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的所需浓度。
[0023]尽管可以使用溶解度增强剂，但是已经令人惊讶地发现可以以足以获得含有约I重量％至约2重量％ MTZ的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的浓度溶解MTZ而不必使用诸如上文所述的那些溶解度增强化合物。这是有利的，因为在许多情况下试剂诸如环糊精和β -环糊精通过形成复合物以增强化合物的水溶性，获得复合制剂，其中所述化合物未均匀地溶解于制剂中，试剂诸如烟酸和烟酰胺自身在某些浓度下可具有不利的药理学性质，并且试剂诸如表面活性剂可引起凝胶呈多相。
[0024]因此，还提供可用于制备如本文所述的高剂量MTZ凝胶的新型溶剂系统。所述新型溶剂系统获得均匀的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶，即MTZ溶于凝胶，并且，当储存在约25°C至约40°C范围内的温度时，其在较长的一段时间（诸如六个月或更长）内为稳定的。事实上，已经发现当储存在25°C和40°C时稳定至少18个月的包含I. 3重量％的MTZ的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的具体示例性实施方案。
[0025]新型溶剂系统一般利用在25°C下共同地具有足以获得含有MTZ的所需浓度的凝胶的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。一般来讲，在25°C下此类溶剂将各自具有至少约IOmg / g的饱和MTZ溶解度，尽管熟练的技术人员将了解当选择具有相当高的饱和MTZ溶解度的溶剂时，新型溶剂系统可包括具有较低的饱和MTZ溶解度的溶剂。具有可以用作新型溶剂系统的组分的合适的饱和MTZ溶解度的非限制性列表的溶剂提供于实施例部分。
[0026]已经发现某些类别的溶剂在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度。例如，已经发现某些醇，例如低级脂肪族醇（诸如乙醇）和低级芳族醇（诸如苯甲醇）、某些二醇，诸如，例如低级脂肪族二醇（包括，例如，低级脂肪族二醇诸如乙二醇和丙二醇）和某些聚醚，诸如，例如，分子量为约200至约600的聚氧化烯（“低级聚氧化烯”）(包括，例如，PEG400)在25°C下在该范围内具有饱和MTZ溶解度。事实上，某些低级芳族醇在25°C下具有显著较高的饱和MTZ溶解度，例如，至少约50mg / g。作为具体的实例，苯甲醇在25°C下具有约72mg / g的饱和MTZ溶解度。所有的这些溶剂和在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度的其它溶剂可以在新型溶剂系统中单独使用和以各种组合使用以在本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶中溶解MTZ。
[0027]在一些实施方案中，新型溶剂系统包含在25°C下具有至少约50mg / g的饱和MTZ溶解度的至少一种溶剂以及任选地在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。在一些 实施方案中，新型溶剂系统包含在25°C下具有至少约50mg / g的饱和MTZ溶解度的至少一种溶剂和在25°C下共同地具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。在一些具体实施方案中，各个溶剂在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度。
[0028]在一些具体实施方案中，新型溶剂系统包含约I重量％至约5重量％的在25°C下具有至少约50mg / ml的饱和MTZ溶解度的至少一种溶剂，剩下的约95重量％至约99重量％的由在25°C下共同地具有至少约20mg / ml饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂组成。在一些具体实施方案中，溶剂系统包含约1.0重量％的、约I. 5重量％的、约2. O重量％的、约2. 5重量％的、约3. O重量％的、约3. 5重量％的、约4. O重量％的、约4. 5重量％的或约5.0重量％的（或由这些值中的任一者所括在一起的任一范围）在25°C下具有至少约50mg / ml饱和MTZ溶解度的至少一种溶剂并且剩余物由在25°C下共同地具有至少约20mg / ml的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂组成。
[0029]已经发现利用一种或多种低级芳族醇；一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯的三元溶剂系统获得良好的结果。因此，在一些具体实施方案中，本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶利用针对MTZ的新型溶剂系统，其包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯。
[0030]在一些具体实施方案中，本文所述的溶剂系统不包括或基本上不含已知增强MTZ在水基溶液中的溶解度（诸如环糊精、环糊精、烟酸、烟酰胺和/或表面活性剂）的其它试剂。在一些具体实施方案中，溶剂系统为仅由一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级亚烷基二醇和一种或多种聚氧化烯组成的三元溶剂系统且不包括任何其它另外的试剂或溶剂。
[0031]一种或多种低级芳族醇可以为酚、伯、仲、叔醇且因此可以包括除了芳族基团之外的脂肪族或杂脂肪族基团。所述一种或多种低级脂肪族二醇和低级聚氧化烯可以为饱和的或不饱和的且可以包括伯、仲和/或叔醇。本文所述的可用于该具体的实施方案的新型溶剂系统和高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的示例性的低级芳族醇、低级脂肪族二醇和低级聚氧化烯更详细的描述于详述部分。在一些具体实施方案中，一种或多种低级芳族醇为苯甲醇，一种或多种低级脂肪族二醇为丙烷-1，2-二醇（丙二醇）以及一种或多种低级聚氧化烯为MW为约400的聚乙二醇（PEG400)。
[0032]在一些具体实施方案中，溶剂系统包含约3. 5重量％至约5重量％的总低级芳族醇和约95重量％至约96. 5重量％的总低级脂肪族二醇，约95重量％至约96. 5重量％的总低级聚氧化烯或约95重量％至约96. 5重量％的总低级脂肪族二醇和总低级聚氧化烯的混合物。当使用混合物时，总低级脂肪族二醇与总低级聚氧化烯的重量比率可以通常为约I ：1至约I :2，在一些具体实施方案中为约I :1. 67。
[0033]溶剂系统一般将由约30重量％至约60重量％的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶组成。精确用量将取决于，至少部分地取决于待包括于凝胶中的MTZ的所需量。在一些具体实施方案中，溶剂系统表示约40-45重量％的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。
[0034]相对于高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还可以描述溶剂系统的组分的量。在一些具体实施方案中，高剂量水基粘膜粘附MTZ凝胶包含约I. 5重量％至约2重量％的总低级芳族醇（例如，苯甲醇）、约15重量％至约25重量％的总低级脂肪族二醇（例如，丙烷-1，2- 二醇）和/或约15重量％至约25重量％的总低级聚氧化烯（例如，PEG400)。在一些具体实施方案中，高剂量粘 膜粘附MTZ水基凝胶包含约I. 5重量％至约2重量％总低级芳族醇（例如，苯甲醇）、约15重量％的总低级脂肪族二醇（例如，丙烷-1，2-二醇）和/或约25重量％的总低级聚氧化烯（例如，PEG400)。其它具体的实施方案描述于详述部分，如用于溶解与本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶结合的MTZ的另外的溶剂和试剂。
[0035]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的pH —般应与预期施加领域的pH相匹配，例如，当预期用于阴道内施加时，PH为健康阴道的pH。尽管不希望受任何特定理论的束缚，据信与健康阴道的PH相匹配允许有益的乳杆菌属繁盛。因此，对于预期用于阴道内施加的凝胶，pH —般应在约pH3至约pH5，例如pH为约pH4。可以在酸、碱或缓冲液的辅助下调节和/或维持PH，这为本领域熟知的。例如，可以通过利用凝胶的水相作为具有合适的当量浓度和PH的缓冲液调节和/或维持凝胶的pH。可选地，可以在加入凝胶剂之前用酸或碱调节水相的pH。在凝胶之后，可以用酸或碱进一步调节pH。后者方法可能对于利用凝胶剂制备凝胶有利，该凝胶在所得凝胶的所需pH范围之外最有效。例如，卡波姆凝胶在中性pH附近最有效。适用于阴道内施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶可以通过以下获得，将凝胶溶液的PH调节至大约中性用于凝胶，然后将所得凝胶的pH用酸调节至约pH3至约pH5。然而，已经发现利用某些PH-敏感性粘膜粘附胶凝聚合物（诸如，例如，卡波姆和聚卡波非聚合物）的PH在用于阴道内施加的所需范围内的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶可以在无缓冲液或PH调节的辅助下获得。
[0036]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还可包括其它的另外的组分，诸如，例如，本领域熟知的一种或多种防腐剂。当使用时，防腐剂一般应包含不超过约I重量％或2重量％的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。防腐剂的选择并不是关键的。合适的有用的防腐剂更详细地描述于详述部分。在一些具体实施方案中，一种或多种防腐剂为4-羟基苯甲酸的酯，也称为对羟苯甲酸酯。合适的对羟苯甲酸酯包括4-羟基苯甲酸的低级烷基酯，诸如，例如，4-羟基苯甲酸甲酯（对羟苯甲酸甲酯）、4_羟基苯甲酸乙酯（对羟苯甲酸乙酯）和4-羟基苯甲酸丙酯（对羟基苯甲酸丙酯）。
[0037]熟练的技术人员将了解用于将MTZ溶于本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的溶剂还可以具有防腐剂性质。作为具体的实例，苯甲醇具有熟知的防腐剂性质。当在新型溶剂系统中用作溶剂时，可以使用防腐剂性质以获利。事实上，包括具有防腐剂性质的溶剂的凝胶不一定必须包括另外的防腐剂。在溶剂可能随着时间降解或氧化的情况下，利用系统溶剂的防腐剂性质的凝胶应当包括考虑降解和/或氧化的过剩的量使得在所需一段时间之后凝胶保留具有有效的防腐剂性质的未经降解或未氧化的溶剂的量。例如，已知苯甲醇可以氧化成苯甲醛，所述苯甲醛不具有防腐剂性质。在本文所述的使用苯甲醇作为MTZ溶剂和作为防腐剂的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的实施方案中，相当数量的苯甲醇应当包括在凝胶中，除了溶解MTZ之外，获得用于凝胶的预期贮存期限期间的防腐剂效果。在溶剂系统中使用的部分用作防腐剂的苯甲醇或其它溶剂的过剩量可以基于降解和/或氧化性质以及特定溶剂在所需储存条件下的动力学来确定。
[0038]包括具有防腐剂性质的溶剂的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的实施方案还可以包括一种或多种另外的防腐剂和/或设计保护溶剂免于降解和/或氧化的防腐剂。例如，在苯甲醇的情况下，本文所述的高剂量凝胶可以包括一种或多种另外的防腐剂，所述防腐剂具有抗氧化性质，部分保护苯甲醇免于氧化。在具体的实施方案中，包含苯甲醇或其它氧化溶剂的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包括一种或多种对羟苯甲酸酯作为另外的防腐剂。在一些具体实施方案中，高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包含约O. I重量％的总对羟苯甲酸酯，以及在一些具体实施方案中，约0.02重量％对羟苯甲酸甲酯和约0.08重量％对羟苯甲酸丙酯。
[0039]高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还包括可以呈纯化水形式或呈水缓冲液形式的水。通常，包括在凝胶中的水量将小于约70重量％，更通常小于约60重量％，以及在一些具体实施方案中在约45重量％至约55重量％的范围内。
[0040]如上所述，用本文所述的新型溶剂系统制备的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的若干实施方案递送出人意料的局部浓度高的MTZ，并且在Franz细胞中用人类尸体皮肤（以及还有硅酮膜）进行的体外皮肤渗透实验中显著高于常规的O. 75重量％的MTZ凝胶的局部浓度的MTZ。事实上，如更详细地描述于实施例部分，几乎每个测试的至角质层的高剂量水基MTZ凝胶，当被归一化为浓度时，比常规的O. 75重量％的MTZ凝胶局部递送高约25-至约55-倍MTZ。尽管通过本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶递送较高局部MTZ浓度，但是与常规的O. 75重量％的MTZ凝胶相比在Franz细胞中用人类尸体皮肤进行的体外皮肤渗透实验中于接受液中观察到显著较少的MTZ。如更详细地描述于详述部分，在该实验中几乎每个于接受液中测试的高剂量MTZ凝胶，当被归一化为浓度时，比常规的O. 75重量％的MTZ凝胶获得低约I-至约20-倍MTZ。
[0041]尽管并非旨在受任何理论的束缚，据信这些性质可能对于治疗施加有意义和/或重要的，因为它们允许递送可能增加功效的局部浓度高的MTZ，同时在某些局部施加中减少全身性暴露，从而减少不良的副作用。因此，在一些实施方案中，选择高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的各种组分以便获得高剂量凝胶，其中用人类尸体皮肤或硅酮膜进行的体外Franz细胞皮肤渗透研究中测量的MTZ的表面水平，当被归一化为浓度，比用常规的O. 75重量％的MTZ凝胶（诸如METROGEL VAGINAL?)测量的水平高至少约25倍以及在一些具
体实施方案中高约55倍。在一些实施方案中，选择高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的各种组分以便获得高剂量凝胶，其中用人类尸体皮肤或硅酮膜进行的体外Franz细胞皮肤渗透研究中于接受液中测量的MTZ水平，当被归一化为浓度时，比用常规的O. 75重量％的MTZ凝胶（诸如METROGEL VAGINAL?)测量的水平低至少约I倍以及在一些具体实施方案中低约20倍。可用于比较研究的具体的体外Franz细胞实验描述于实施例6。
[0042]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶可以用于任何目的，其中用MTZ的局部治疗是可取的。由于其粘膜粘附度，它们可特别地用于治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女。
[0043]因此，在另一方面，本公开提供使用本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女的方法。所述方法一般涉及向患有和/或被诊断具有BV的妇女阴道内施加如本文所述的足以提供治疗益处的相当数量的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。诊断的临床标准以及建立治疗益处的标准更详细地描述于详述部分。在一些具体实施方案中，在单次施加中 施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约60mg至约IOOmg MTZ0在其它具体实施方案中，在单次施加中施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约60mg至约90mg MTZ，在又其它具体实施方案中，约60mg至约80mg MTZ，以及在又其它具体实施方案中，约60mg至约70mg MTZ。在又其它具体实施方案中，在单次施加中施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约65mg MTZ。
[0044]施加的频率和持续时间可变化且可能取决于所需的结果。一般来讲，将凝胶每天施加一次持续一天、两天、三天、四天或五天。已经发现用含有约65mg MTZ的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的单次施加来实现有意义的治疗益处。因此，在一些实施方案中，高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶以单次施加施加。也已经发现每天施加一次持续五天施加含有约65mgMTZ的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶比用FDA-批准的O. 75重量％的MTZ凝胶治疗的类似的过程获得较低的BV复发的发病率，和几乎不存在治疗后外阴道念珠菌病的发病率。因此，在一些实施方案中，将高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶每天施加一次持续五天。
[0045]为了使用，可以将高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包装成对于所需的施加方式便利的任何形式。在可用于阴道内施加的具体的实施方案中，可以将高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包装成单位剂型，以预装、单剂量注射器型涂药器作为具体实例。
[0046]当用于治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女时，本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶提供许多令人惊讶的优点，包括，例如：（I)在单次施加之后BV的有效治疗，不像用O. 75重量％的MTZ凝胶的现有治疗，例如，METROGEL VAGINAL?,其需要每天施加一次或两次持续5天以实现治疗效果；(2)与每天施加一次持续5天之后的METROGEL VAGINAL?相比增加的功效，如由增加治愈率、减少症状的分辨时间、增加症状的复发时间和/或降低外阴道念珠菌病的发病率中的任一者确定。[0047]应当理解以上概述并不预期描述本文公开的各种发明的每个实施方案或每个实施方式。详述和实施例部分进一步例示示例性实施方案。本文所述的各种实施方案预期组合公开，如同每个具体的组合被明确地公开。实施例仅为代表性的且不应解释为排他性的或限制本文公开的各种发明的范围。
[0048]5.附图简述
[0049]图I提供示出示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶MG32PB和MG33PB至猪胃粘膜的粘膜粘附性质的图表。数据示出胃粘膜中留下的MTZ的百分比作为时间函数。对于本实验，对于第一个5分钟，每15秒采集一次数据。
[0050]图2提供示出示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶MG32PB和MG33PB至猪胃粘膜的粘膜粘附性质的图表。数据示出胃粘膜中留下的MTZ的百分比作为时间函数。对于本实验，对于第一个15分钟，每分钟采集一次数据。
[0051]图3A-3B提供示出用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中从来自各种示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶各种皮肤层回收的14C-标记的MTZ平均量（μ g ;土SEM)的图表。
[0052]图4A-4B分别提供示出图3A和3B的回收数据的图表，表示为施加的总14C-标记的MTZ平均百分比（土 SEM)。
[0053]图5A-5B分别提供示出图3A和图3B的不同视图的回收数据的图表。
[0054]图6A-6B分别提供示出图4A和图4B的不同视图的回收数据的图表。
[0055]图7提供示出用猪阴道组织进行的在体外Franz细胞实验中施加示例性高剂量MTZ粘膜粘附水基凝胶和对照`凝胶24小时之后从表面和阴道组织内回收的MTZ的平均量(Ug)的图表。数据为平均值土SEM(n=5)。
[0056]图8提供示出在图7的Franz细胞实验中渗透通过猪阴道组织（yg / cm2阴道组织）的MTZ的平均量的图表。数据为平均值土SEM(n=5)。
[0057]图9提供比较用不同的示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶（对于活性凝胶n=3 ；对于安慰剂凝胶和对照n=2)处理24小时之后用阴道加德纳菌感染的表皮膜释放的ATP的图表。
[0058]图10提供比较在不同的给药时间4、8和24小时用示例性高剂量MTZ凝胶MG33PB处理之后从阴道加德纳菌感染的表皮膜样品释放的ATP的图表（对于MG33PB n=3 ;对于安慰剂凝胶和对照n=2)。
[0059]图11提供比较用不同的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶处理2小时之后从阴道加德纳菌感染的表皮膜样品释放的ATP的图表（对于活性凝胶和对照n=6 ;对于安慰剂凝胶n=3)。
[0060]图12提供示出示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶MG33PB和含有不同量的苯甲醇的各种安慰剂形式的阴道加德纳菌生长的抑菌圈的图表。
[0061 ] 6.详述
[0062]本文公开的各种发明的更完整的理解及其许多伴随的优点由以下详述提供。
[0063]6. I 定义
[0064]本文使用的在整个说明书和所附权利要求中，以下术语和表达预期具有以下意义：[0065]不定冠词“一个（a) ”和“一种（an) ”和定冠词“所述（the) ”旨在包括单数和复数两者，除非其所使用的上下文清楚地表明。
[0066]“至少一种”和“一种或多种”互换使用以意指所述冠词可以包括一种或多于一种的所列元素。
[0067]除非另外指出，否则应理解在说明书和权利要求中使用的表达数量、比率的所有数值和成分的数值性质、反应条件等预期在所有情况下能够被术语“约”修饰。
[0068]6. 2具体的示例性实施方案的详述
[0069]如概述中所指出，本公开提供（除了其它以外）高剂量粘膜粘附甲硝唑（“MTZ”）水基凝胶，所述凝胶可用于MTZ的局部用递送以治疗（除了其它以外）各种微生物感染，且在具体的实施方案中用于阴道内施加作为对于治疗患有或被诊断具有细菌性阴道病(“BV”）的妇女的治疗方法。高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶一般包含MTZ和一种或多种胶凝聚合物，在具体的实施方案中为一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物。
[0070]MTZ，也称为2-(2-甲基-5-硝基-IH-咪唑-I-基）乙醇，为熟知的抗菌剂，对以下菌种具有活性：厌氧的革兰氏阴性杆菌包括梭菌属（Fusobacterium)菌种和拟杆菌属(Bacteroides)菌种(如，脆弱拟杆菌(B. fragilis)、狄氏拟杆菌(B. distasonis)、卵形拟杆菌（B. ovatus)、多形拟杆菌（B. thetaioaomicron)和畸形拟杆菌（B. vulgates));厌氧的革兰式阳性杆菌包括梭菌属（Clostridium)菌种和真细菌（Eubacterium)的敏感菌株；和厌氧的革兰式阳 性球菌包括消化链球菌属（Peptostreptococcus)菌种。
[0071]MTZ可以包括在本文所述呈游离碱形式或与药学上可接受的酸形成的盐的高剂量凝胶中。适用于形成药学上可接受的盐的无机酸包括，例如但不限于氢卤酸（如，盐酸、氢溴酸、氢碘酸等）、硫酸、硝酸、磷酸等。适用于形成药学上可接受的盐的有机酸包括，例如但不限于，乙酸、三氟乙酸、丙酸、己酸、环戊基丙酸、乙醇酸、草酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、棕榈酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基）苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、烷基磺酸（如，甲烷磺酸、乙烷磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙烷磺酸等）、芳基磺酸（如，苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸等）、4_甲基双环[2. 2. 2]-辛-2-烯-I-羧酸、葡庚糖酸、3-苯丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等。
[0072]MTZ可商购获得或可以通过熟知的方法合成。
[0073]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶一般包含约I重量％至约2重量％的量的MTZ。在具体的实施方案中，本文所述的凝胶包含约1.0%、约1.1%、约1.2%、约1.3%、约 1.4%、约 1.5%、约 1.6%、约 1.7%、约 1.8%、约 I. 9%或约 2. O 重量％的 MTZ。
[0074]剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还包含一种或多种胶凝聚合物，且在具体的实施方案中包含赋予凝胶其粘膜粘附和凝胶样性质的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物。适用于本文所述的粘膜粘附水基凝胶在水基溶液中形成的粘膜粘附凝胶的多种聚合物在本领域为已知的，且包括例如但不限于多糖凝胶（包括，例如，粘液、树胶诸如黄原胶和黄著胶，和葡聚糖）、纤维素和修饰的纤维素（包括，例如，烷基纤维素、羟烷基纤维素、羧基纤维素和羧基纤维素钠）、泊洛沙姆（poloxomers)(聚氧乙烯和聚氧丙烯的共聚物，也称为
PLURONICS?)、卡波姆（丙烯酸的交联聚合物）、聚卡波非（与二乙烯基二醇交联的聚
丙烯酸的聚合物）、维格姆（veegum)(硅酸镁铝）、聚乙烯醇（PVA)、明胶、藻酸钠和聚乙烯批咯烧酮（PVP)。示例性合适的粘液可见于,例如，Malviya等人,2011, “Applications ofMucilages in Drug Delivery-A Review,，，Advan Biol Res5 (I) : 1-7,以及其中所引用的参考文献，所述专利的公开内容通过引用并入本文。
[0075]在一些具体实施方案中，胶凝聚合物为丙烯酸的交联的聚合物，诸如例如卡波姆或聚卡波非和/或纤维素聚合物。合适的纤维素聚合物包括但不限于羧甲基纤维素（CMC)、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素（NEC或HHX)、羟丙基纤维素（HPC)和羟丙基甲基纤维素（HPMC)。合适的卡波姆包括但不限于按商品名CARBOPOL?由LubrizolAdvanced Materials, Cleveland, Ohio 售出的各种聚合物，包括例如，CARBOPOL?均聚物（与烯丙基蔗糖或烯丙基季戊四醇交联的丙烯酸的聚合物）诸如CARBOPOL?7IG NF、CARBOPOL? 971PNF、CARBOPOL? 974P NF、CARBOPOL? 980NF和CARBOPOL? 98INF ； CARBOPOL?共聚合物(与丙烯基季戊四醇交联的丙烯酸和C10-C30烷基丙烯酸酯的聚合物）诸如PEMULEN? TR-INF和PEMULEN? TR-2NF ；CARBOPOL? §：聚合物（含有聚乙二醇和长链烷基酸酯的嵌段共聚物的卡波姆均聚物或共聚合物)诸如 CARBOPOL? ETD2020NF 和CARBOPOL? UltrezlONF ;“传统的”卡波姆诸如卡波姆 934 (CARBOPOL? 934NF)、卡波姆 934P ( CARBOPOL? 934PNF)、卡波姆 940 ( CARBOPOL? 940NF)、卡波姆 941 ( CARBOPOL? 94INF)和卡波姆1342(CARBOPOL? 1342P NF);和聚卡波非(NOVEON? AA-1USP)。
[0076]在本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶中可以单独或组合使用这些和/或其它粘膜粘附胶凝聚合物中的任一者。
[0077]通常以量使用一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物使得25°C下使用受控的剪切率扫描法，Bohlin CV0100流变仪和在表11中指出的流变仪设置（实施例5，下文）测量的所得高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶具有约200，000-400, OOOmPa的粘度，以及在一些具体实施方案中，在25°C下具有约250，000-350，OOOmPa的粘度。取决于具体的胶凝聚合物和使用的凝胶条件，粘度在该范围内的水基`凝胶一般通过将总量在约0. 5重量％至约5重量％范围内的胶凝聚合物包括在凝胶中来实现。在一些具体实施方案中，本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶将包括约I重量％至约3重量％的总胶凝聚合物，以及在一些具体实施方案中约2重量％的总胶凝聚合物。
[0078]被设计用于阴道内施加的凝胶应当理想地表现出粘膜粘附度以防止施加时凝胶的泄露。利用粘度在如上论述范围内的纤维素和/或丙烯酸粘膜粘附胶凝聚合物的凝胶应当具有合适的粘膜粘附度。不同的胶凝聚合物表现出不同的粘膜粘附度。可以合适地使用获得高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的胶凝聚合物，所述凝胶的粘膜粘附度在示例性凝胶MG33PB的粘膜粘附度的约± 10%内（描述于实施例2和表5)。在具体的示例性实施方案中，粘膜粘附聚合物选自羟烷基纤维素、卡波姆、聚卡波非及其混合物。在另一具体的示例性实施方案中，粘膜粘附聚合物为聚卡波非，诸如，例如，聚卡波非按商品名NOVEON?AA-I聚卡波非由Lubrizol, Inc售出。
[0079]利用卡波姆934、羟乙基纤维素或聚卡波非作为粘膜粘附胶凝聚合物具有合适的粘度、粘膜粘附和其它可取性质的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶提供于实施例2。
[0080]如概述指出，当试图在水基制剂（诸如水基凝胶）中配制MTZ时，MTZ的溶解度存在问题。本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的具体的实施方案利用新型溶剂系统，已经发现所述新型溶剂系统获得含有高达2重量％或更高浓度的MTZ的均匀的凝胶，当储存在约25°C至约40°C的温度下时，所述凝胶在较长的一段时间保持稳定，例如至少约6个月。令人惊讶地，可以在不含通常用于增强MTZ在水溶液（诸如环糊精、β环糊精、烟酸、烟酰胺和/或表面活性剂）中的溶解度的试剂的辅助下制备此类高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。
[0081]本文使用的“稳定的”意指凝胶表现出以下性质：（1)当储存在约25°C下持续至少6周时，至少约95%的MTZ纯度；（2)当储存在约25°C下的温度下持续至少6周时，在放大倍数为40x的显微视觉观察下晶体和/或颗粒的形成与基线值相比无可观增加（如，不超过约2倍至3倍增加），以及（3)当储存在约25°C下的温度下持续约6周时，与基线值或储存在约2-8°C范围内的温度下的对照样品相比，粘度的改变不超过在25°C下测量的约±50%。此外，稳定的凝胶表现出以下另外的性质为可取的，但不是必须的：(4)当储存在约25°C下的温度下持续6周时，与基线值或储存在约2-8°C范围内的温度下的对照样品相t匕，pH的改变小于约±0. 3pH单位；（5)当储存在约25°C下的温度下持续至少约6周时，与基线值或储存在约2-8°C范围内的温度下的对照样品相比，防腐剂功效的改变不超过约±20%。适用于测量高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的稳定性的测定提供于实施例4和5。通常，选择具体的组分和新型溶剂系统的量以便获得如本文所定义的稳定的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。通过实施例部分公开的各种示例性高剂量凝胶提供用于选择可用于制备具有具体量的MTZ的稳定的高剂量MTZ水基凝胶的溶剂系统的指导。
[0082]在一些具体的实施方案中，当储存在约40°C的温度下持续约6周时，选择新型溶剂系统的组分和量以获得具有如上论述的MTZ纯度、均匀性和粘度性质，以及任选地如上论述的PH和防腐剂功效性质的稳定的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。在其它具体的实施方案中，当储存在约25-40°`C范围内，以及在具体的实施方案中，在约25°C或约40°C的温度下持续约6个月或甚至，例如，持续约18个月时，选择新型溶剂系统的组分和量以获得具有如上论述的MTZ纯度、均匀性和粘度性质，以及任选地如上论述的pH和防腐剂功效性质的稳定的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。在再其它具体的实施方案中，当储存在约25-40°C范围内，以及在具体的实施方案中，在约25°C或约40°C的温度下持续约6个月或甚至，例如，持续约18个月时，选择新型溶剂系统的组分和量以获得具有如上论述的MTZ纯度、均匀性和粘度性质，以及如上论述的PH以及任选地防腐剂功效性质的稳定的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。
[0083]各种新型溶剂系统描述于（如上）概述部分。在一些具体实施方案中，新型溶剂系统为包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和/或MW在约200至约600范围内的一种或多种聚氧化烯（“低级聚氧化烯”）的三元系统。
[0084]本文使用的“低级醇”包括具有I至15个碳原子的饱和的和不饱和的非芳族和芳族醇且可以任选地包括一种或多种杂原子，例如，一种或多种替换碳原子的氧原子。低级非芳族醇可以包括直链、支链或环状伯、仲或叔低级脂肪族醇和低级杂脂肪族醇。低级脂肪族醇的实例包括但不限于甲醇、乙醇、丙-I-醇、丙-2-醇、丁 -I-醇、丁 -2-醇、2-甲基丙-I-醇、2-甲基丙-2-醇、戊-I-醇、戊-2-醇、戊-3-醇、3-甲基丁 -I-醇、己-I-醇、己-2-醇、己-3-醇和环己醇。低级杂脂肪族醇的实例包括但不限于亚烷基二醇单烷基醚诸如，例如，乙二醇单烷基醚、丙二醇单烷基醚和四甘醇。在一些具体实施方案中，低级非芳族醇诸如低级脂肪族和低级杂脂肪族醇含有包括任何杂原子的I至8个非氢原子。
[0085]低级芳族醇包括具有芳族特征的低级醇，这可以由在非芳族醇上的芳族（如，苯基、萘基等）侧基贡献，诸如脂肪族醇或杂脂肪族醇。因此，醇基团可以为酚、伯、仲或叔。低级芳族醇的实例包括但不限于苯酚、苯甲醇、2-甲基苯甲醇和苯氧乙醇。
[0086]本文使用的“低级脂肪族二醇”包括含有二至十个碳原子的饱和的或不饱和的、直链、支链或环状脂肪族二醇。所述醇基团可以为彼此独立地伯醇、仲醇或叔醇。在一些具体实施方案中，低级脂肪族二醇为饱和的或不饱和的直链或支链二醇，本文中被称为“低级亚烷基二醇”（也称为“低级二醇”）。在一些具体实施方案中，低级亚烷基二醇为饱和的直链或支链二醇，在本文中被称为“低级烷基二醇”。在一些具体实施方案中，低级烷基二醇为直链二醇，在本文中被称为“低级正烷基二醇。本文所述的可用于溶剂系统和凝胶的低级脂肪族二醇的具体的实例包括但不限于乙烷-1，2-二醇（乙二醇）、丙烷-1，2-二醇（丙二醇）、丙烷-1，3-二醇、丁烷-1，2-二醇、丁烷-1，3-二醇、丁烷-2，3-二醇、丁烷-1，4-二醇、戊烧_1，5- 二醇、戍烧-I, 2- 二醇、2-甲基-2，4-戍烧二醇等。
[0087]本文使用的“低级聚氧化烯”包括由低级脂肪族二醇形成且分子量在约200至约600范围内的聚合物。本文所述的可用于溶剂系统和凝胶的低级聚氧化烯的具体的实例包括但不限于聚乙二醇（例如，PEG200、PEG400和PEG600)、聚丙二醇（例如PPG-9)和二丙二 醇。
[0088]新型三元溶剂系统一般包含约3. 5重量％至约5重量％的总低级芳族醇，和约95重量％至约96. 5重量％的总低级脂肪族二醇和聚氧化烯的混合物，其中总低级脂肪族二醇与总聚氧化烯的重量比率在约I :1至约I :2的范围内，以及在一些具体实施方案中在约
I:1. 67。
[0089]溶剂系统可以包括另外的试剂和溶剂，诸如，例如，增强MTZ在水溶液中的溶解度的另外的试剂或溶剂，诸如，例如，环糊精、β_环糊精、烟酸和/或烟酰胺。然而，已经发现均匀的且具有良好的贮存稳定性性质的高剂量MTZ水基凝胶可以使用不包括此类另外的溶解剂的溶剂系统来制备，且在具体的实施方案中仅包括低级芳族醇、低级脂肪族二醇和低级聚氧化烯。因此，在一些具体实施方案中，溶剂系统和所得凝胶基本上不含增强MTZ在水溶液中的溶解度的试剂，诸如环糊精、环糊精、烟酸和/或烟酰胺。在其它具体实施方案中，所述溶剂系统为仅由一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯组成的三元系统。
[0090]溶剂系统一般将表示约30重量％至约60重量％的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶，在某些实施方案中，约40重量％至约50重量％的凝胶，以及在一些具体实施方案中，约40重量％至约45重量％的凝胶，尽管所述凝胶可以包括较高或较低量的总溶剂。
[0091]特别有用的三元溶剂系统包含作为一种或多种低级芳族醇的苯甲醇、作为一种或多种低级脂肪族二醇的丙烷-1，2-二醇（丙二醇）和作为一种或多种低级聚氧化烯的MW为400的聚乙二醇（PEG400)。
[0092]在一些具体实施方案中，相对于所得高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶，用于将MTZ溶解于本文所述的高剂量粘膜粘附水基凝胶的溶剂系统包含：(a)聚氧化烯诸如聚乙二醇，如，PEG400，浓度为约10重量％至约50重量％，例如约20重量％至约40重量％或约20重量％至约30重量％，且在具体的实施方案中约25重量％ ； (b)低级芳族醇诸如苯氧乙醇或苯甲醇，在具体的实施方案中，约I. 3重量％至约2. 5重量％或约I. 5重量％ -2. O重量％且在具体的实施方案中约2.0重量％的苯甲醇；和/或（c)低级脂肪族二醇，诸如丙烷-1，2-二醇，浓度大于约3重量％至约20重量％，例如约15重量％ -20重量％，且在具体的实施方案中约15重量％。
[0093]在又其它具体的实施方案中，溶剂系统包含：（a)PEG400 ;(b)PEG400和低级芳族醇，诸如苯甲醇；（c)PEG400，低级芳族醇，诸如苯甲醇和丙烷-1，2-二醇；（d)低级芳族醇，诸如苯甲醇；和/或（e)丙烷-1，2-二醇。
[0094]在又其它具体的实施方案中，相对于所得高剂量MTZ粘膜粘附水基凝胶，溶剂系统包含：(a)约25重量％的PEG400 ； (b)约25重量％的PEG400和约2重量％的苯甲醇；或
(c)约25重量％的PEG400，约2重量％的苯甲醇和约15重量％的丙烷-1，2- 二醇。
[0095]对于被设计用于阴道内施加的凝胶，优选使用在阴道区域中的靶位置处不会引起刺激的苯甲醇的浓度。因此，在一些具体实施方案中，其中所述溶剂系统包括苯甲醇，包括在凝胶中的苯甲醇的量的范围为约I. 3%至约2. 5重量％，例如约I. 5重量％至约2重量％，且在具体的实施方案中约2重量％。
[0096]在又其它具体 的实施方案中，本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包含浓度为至少约3%至高达约20重量％，例如约15重量％至约20重量％，且在具体的实施方案中约15重量％的丙烷-1，2-二醇。在再其它具体的实施方案中，凝胶包含约1.3重量％的MTZ和约25重量％的PEG400。在再其它具体的实施方案中，它们包含约I. 3重量％的組7、约25重量％的PEG400和约2重量％的苯甲醇。在再其它具体的实施方案中，它们包含约I. 3重量％的MTZ、约25重量％的PEG400、约2重量％的苯甲醇和约15重量％的丙二醇。
[0097]在又其它具体的实施方案中，相对于凝胶，本文所述的可用于制备高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的溶剂系统包含以下中的任一者（a)浓度为约10重量％至约50重量％，例如约20重量％至约40重量％或约20重量％至约30重量％且在具体的实施方案中约25重量^^^PEG400 ;(b)约I. 3重量％至约2. 5重量％，例如约I. 5重量％至约2重量％且在具体的实施方案中约2重量％的苯甲醇；（c)浓度为至少约3重量％至高达约20重量％，例如约15重量％至约20重量％且在具体的实施方案中约15重量％的丙烷-1，2-二醇；（d)约25重量％的PEG400 ； (e)约25重量％的PEG400和约2重量％的苯甲醇；以及（f)约25重量％的PEG400、约2重量％的苯甲醇和约15重量％的丙二醇。
[0098]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的pH —般应当与预期施加的区域的pH相匹配，例如，当预期用于阴道内施加时，PH为健康阴道的pH。因此，对于预期用于阴道内施加的凝胶，pH—般应当在约pH3至约pH5，例如pH约pH4的范围内。可以在酸、碱缓冲液和其它PH-调节剂的辅助下调节和/或维持pH，如本领域熟知的和在概述部分所讨论的。
[0099]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还可以包括其它另外的组分，诸如，例如，如本领域熟知的一种或多种防腐剂。当使用时，防腐剂一般应当包含不超过约I重量％或2重量％的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶，且通常将包含约O. 25重量％至约1.0重量％的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。防腐剂的选择并不是关键的。适用于药物制剂的许多防腐剂对技术人员为熟知的。可以单独使用这些防腐剂中的任一者和在一些具体实施方案中具有抗菌性质的那些或与本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶组合使用。在一些具体实施方案中，一种或多种防腐剂为4-羟基苯甲酸的酯，也称为对羟苯甲酸酯。合适的对羟苯甲酸酯包括4-羟基苯甲酸的低级烷基酯，诸如，例如，4-羟基苯甲酸甲酯（对羟苯甲酸甲酯）、4_羟基苯甲酸乙酯（对羟苯甲酸乙酯）和4-羟基-苯甲酸丙酯（对羟苯甲酸丙酯）。
[0100]熟练的技术人员将了解本文所述的溶剂用于将MTZ溶于高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的溶剂还可以具有防腐剂性质。例如，苯甲醇具有熟知的防腐剂性质。当在新型溶剂系统中用作溶剂时，可以使用防腐剂性质以获利。事实上，包括具有防腐剂性质的溶剂的凝胶不需要包括另外的防腐剂。在溶剂可能随着时间的推移降解和/或氧化的情况下，利用包括在溶剂系统中的防腐剂性质的凝胶应当包括考虑降解和/或氧化的过剩量使得凝胶保留相当数量的未经降解和/或未氧化的溶剂，除了有效的MTZ-溶解性质之外，所述溶剂在所需的一段时间之后具有有效的防腐剂性质。例如，已知苯甲醇可以被氧化成不具有防腐剂性质的苯甲醛。在本文所述的使用苯甲醇作为MTZ溶剂和作为防腐剂的高剂量MTZ凝胶的实施方案中，应当将相当数量的苯甲醇包括在凝胶中，苯甲醇不但溶解MTZ，获得用于凝胶的预期贮存期限期间的防腐剂效果。在溶剂系统中使用的部分用作防腐剂的苯甲醇或其它溶剂的过剩量可以基于降解和/或氧化性质以及特定溶剂在所需储存条件下的动力学来确定。
[0101]包括具有防腐剂性质的溶剂的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的实施方案还可以包括一种或多种另外的防腐剂和/或设计保护溶剂免于降解和/或氧化的防腐剂。例如，在苯甲醇的情况下，本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶可以包括一种或多种具有抗氧化性质的另外的防腐剂，部分来保护苯甲醇免于氧化。在具体的实施方案中，包含苯甲醇的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包括一种或多种对羟苯甲酸酯作为另外的防腐剂。在一些具体实施方案中，高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包含约O. I重量％的总对羟苯甲酸酯，以及在一些具体实施方案中约0.02重量％的对羟苯甲酸甲酯和约0.08重量％的对羟苯甲酸丙酯。
[0102]高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶还包括可以呈纯化水形式或呈水缓冲液形式的水。通常，包括在凝胶中的水量 将小于约70重量％，更通常小于约60重量％，以及在一些具体实施方案中在约45重量％至约55重量％的范围内。
[0103]具体的示例性高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包含：
[0104](a)至少I. 3重量％的MTZ ;约I. 2重量％至约2重量％的]\07 ;约3重量％至约I. 5重量％的MTZ;或约I. 3重量％的MTZ以及
[0105](b) 一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物。
[0106]另一具体的不例性闻剂量粘I旲粘附MTZ水基凝I父包含：
[0107](a)约I. 2重量％至约2重量％的]\07，例如约I. 3重量％至约I. 5重量％的]\07，以及在具体的实施方案中，约I. 3重量％的MTZ;以及
[0108](b) 一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物以及
[0109]⑴约25重量％的PEG400 ;和/或
[0110](ii)约2重量％的苯 甲醇；和/或
[0111](iii)约15重量％的丙烷-1，2-二醇。[0112]另一具体的不例性闻剂量粘I吴粘附MTZ水基凝I父包含：
[0113](a)约 1·3重量％的MTZ和25重量％的PEG400 ；
[0114](b)约1.3重量％的]\07、约25重量％的PEG400和约2重量％的苯甲醇；或
[0115](c)约1.3重量％的]\07、约25重量％的PEG400、约2重量％的苯甲醇和约15重量％的丙烷-1，2-二醇。
[0116]6.3.制备凝胶的方法
[0117]本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶一般可以通过以下制备：将凝胶的水溶性组分溶于水或缓冲液中以获得水溶液，将MTZ溶剂系统的组分混合并将所需量的MTZ溶于MTZ溶剂系统以获得MTZ溶液，将所需量的水溶液和MTZ溶液一起混合，并将所需量的凝胶剂加入至混合物中。取决于使用的胶凝聚合物，在加入胶凝聚合物然后将所得凝胶的PH用酸或碱调节至所需的指定范围之前，将MTZ溶液的pH用酸和/或碱调节至指定范围为可取的。用于制备高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的具体的方法提供于实施例2。
[0118]6.4.用途
[0119]在任何情况下可以使用本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶以局部施加MTZ，其中此类使用将为有益的。在以下进一步描述的具体的实施方案中，可以方便地阴道内使用所述凝胶以治疗患有或被诊断具有BV的妇女。
[0120]本文使用的如果经历一种或多种与BV相关的公认的症状、病患或显示，据说该妇女“患有”或被诊断具有BV。具有BV的个体通常表现出（除了其它以外）使人不快的“鱼腥味”灰白色、薄且均匀的阴道分泌物而无炎症应答。个体还表现出乳酸杆菌（特别是形成产过氧化氢）的流行和浓度的下降且伴有阴道加德那菌、动弯杆菌属某些种、厌氧的革兰式阳性杆菌（拟杆菌属、普氏菌属和紫单胞菌属（Porphyromonas))、消化链球菌属某些种(Peptostreptococcus spp)和支原体人型（Mycoplasma hominis.)的增加。倾向因素为非白人种族、怀孕前、IUD的使用、性活动、新的性伴侣和近来抗生素的使用。BV还与并发的滴虫病相关。
[0121]对于建立BV的临床诊断的标准提供于（除了其它文献之外）草案FDA指导，标题为“Guidance for Industry ：Bacterial Vaginosis-Developing Antimicrobial Drugsfor Treatment，”起草日期为1998年7月，其通过引用整体并入本文（下文“FDA指导”）。按以下FDA指导，BV的临床诊断包括以下观察：
[0122]I.灰白色（乳白色或灰色）、薄、均匀的分泌物，具有极微的或不存在瘙痒症以及外阴和阴道的炎症；
[0123]2.在盐水“湿涂片”的显微镜检查下在总上皮细胞中存在≥20%的“线索细胞”；
[0124]3.阴道分泌物ρΗ>4·5;且
[0125]4.加入一滴10% Κ0Η,阴道分泌物散发出鱼腥味（即，阳性“嗅测试”）。
[0126]这些观察通常被称为“Amsel标准”以及呈现所有四个标准的妇女在本文中被称为“Amsel 阳性”。
[0127]经历被认为为BV的阴道病的妇女通常也具有≥4的革兰氏染色涂片纽金特分数。纽金特分数基于以下三种细菌形态型分数的加权和，所述形态型分数由在放大倍数为1000x的油浸下由涂片检查计算：
[0128]·乳杆菌属：大的革兰式阳性杆菌[0129]?加德纳菌属/拟杆菌属某些种：小的革兰氏可变球杆菌（coccobacilli) /小的革兰氏阴性杆菌
[0130]·动弯杆菌属某些种：细的、弯曲的、革兰氏可变杆菌
[0131]根据纽金特标准对于BV的标准为≥7的总分数；4_6的分数被认为是中间的以及0-3的分数被认为是正常的。> 3的分数被FDA认为是不正常的。
[0132]形态型得分为每一油浸领域可见的平均数（应当调查最少10-20个领域）。然后对每个形态型给予如下的数值分数：
[0133]0=无可见的形态型；1+=〈1形态型/领域；2+=1至4形态型/领域；3+=5至30形态型/领域；以及4+=>30形态型/领域。总纽金特分数通过将个体形态型的分数进行求和来计算。关于纽金特得分系统的更多信息参见Nugent等人，1991, “Reliability ofDiagnosing Bacterial Vaginosis is improved by a Standardized Method of GramStain Interpretation，” J Clin Micrbiol29 (2) :297-301.纽金特分数 >4 的妇女在本文中被称为“纽金特阳性”。
[0134]在一些实施方案中，显示具有至少3个以上Amsel标准的个体被认为患有和/或被诊断具有BV。在一些实施方案中，为纽金特阳性的个体被认为患有和/或被诊断具有BV0在具体的实施方案中，患有和/或被诊断具有BV的个体为Amsel阳性。在又其它具体的实施方案中，患有和/或被诊断具有BV的个体为Amsel阳性和纽金特阳性。
[0135]优选地，患有和/或被诊断具有BV的个体将不具有其它的阴道感染，包括但不限于衣原体属（Chlamydia)、毛滴虫属（trichomonas)、淋病(gonorrhea)和念珠菌属(Candida)。优选地，患有和/或被诊断具有BV的个体不能在治疗其它的阴道感染，包括但不限于衣原体属、毛滴虫属、淋病和念珠菌属。在一个实施方案中，患有和/或被诊断具有BV的个体正用氟康唑治疗。
[0136]方法一般涉及向患有和/或被诊断具有BV的妇女阴道内施加如本文所述的用于许多用途的足以提供治疗益处的相当数量的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶。本文使用的“治疗益处”为当一种或多种BV的症状和/或一种或多种BV的临床表现包括，例如，一种或多种Amsel标准或纽金特分数，得到缓解、消除、根除或改进时实现。治疗方案可以为受试者提供治疗益处而不会治愈潜在的BV病患。
[0137]本文使用的如果在治疗之后量级降低或移至接近认为的正常水平，那么BV的症状或表现得到缓解。例如，如果阴道分泌物回至正常，那么Amsel标准得到缓解；在湿涂片中的线索细胞的数目小于约20%的阴道上皮细胞，例如，小于约19%、18%、17 %、16%、15%、10%、5%或甚至更小；阴道分泌物的pH治疗之前的约pH4. 7至约pH5. 3至治疗之后的约ρΗ4· O至约ρΗ4· 5的范围，例如，ρΗ4· 3、ρΗ4· 2、ρΗ4· I或ρΗ4· O ;和/或嗅测试未产生可观的胺或鱼腥味。如果症状使用熟知的检测方法（参见，如，提供于实施例部分的各种检测方法和公开于FDA指导中的那些）不再可检测，那么BV的症状被认为消除或根除。
[0138]本文使用的“治疗有效量”是指具有提供治疗益处的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的治疗方案。
[0139]在一些实施方案中，将相当数量的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶施加于足以在至少一个Amsel标准且优选地至少2个或3个且最优选地所有4个Amsel标准中和/或纽金特分数小于4的结果提供改进的许多施加。[0140]在一些具体实施方案中，将相当数量的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶施加于足以获得临床治愈的许多施加。当所有四个Amsel标准按以下所述得到中和时，实现本文使用的“临床治愈”：
[0141]I. BV的最初分泌物特征已经回至正常的生理分泌物，所述正常的生理分泌物取决于月经周期在外观和一致性中有所不同；
[0142]2.盐水湿涂片对于线索细胞为阴性的；
[0143]3.阴道分泌物的pH为pH〈4. 7，通常使用测量pH4. O至pH6. O的pH试纸进行测量;
[0144]4.嗅测试对于任何胺（“鱼腥”）味为阴性的。
[0145]在一些具体实施方案中，将相当数量的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶施加于足以获得细菌学治愈的许多施加。当实现纽金特分数〈4，例如，纽金特分数为1、2或3或在0-3的范围内时，实现本文使用的“细菌学治愈”。
[0146]在又其它具体的实施方案中，将相当数量的如本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶施加于足以获得治疗治愈的许多施加。当实现临床治愈和细菌学治愈两者时，实现本文使用的“治疗治愈”。
[0147]在又其它具体的实施方案中，将相当数量的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶施加于足以由医师确定无需另外的治疗的许多施加。在再另一具体的实施方案中，将相当数量的如本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶施加于足以实现如FDA指导中所定义的任何水平的治愈的许多施加。
[0148]在一些具体实施方案中，在单次施加中施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约60mg至约1OOmg MTZ0在一些具体实施方案中，在单次施加中施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约60mg至约80mg或约60mg至约70mg MTZ。在一些具体实施方案中，在单次施加中施加的高剂量MTZ水基凝胶的量含有约65mg MTZ。
[0149]施加的频率和持续时间可以变化且可能取决于所需的结果。一般来讲,每天施加凝胶一次持续一天、两天、三天、四天或五天。已经发现单次施加含有约65mg MTZ的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶可以实现有意义的治疗益处。因此，在一些实施方案中，将凝胶在单次施加（即，在不存在高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的其它施加中）中施加。还发现每天施加一次持续五天施加含有约65mg MTZ的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶比用FDA-批准的O. 75重量％的甲硝唑凝胶治疗的类似的过程获得较低的BV复发的发病率，和几乎不存在治疗后外阴道念珠菌病的发病率。因此，在一些实施方案中，将凝胶每天施加一次持续五天。
[0150]本文使用的术语“复发”意指用本文所述的高剂量MTZ凝胶治疗之后如本文所定义的BV的至少一种症状的再现使得在治疗结论之后至少再次诊断受试者患有BV。
[0151]“复发的发病率的下降”意指用本 文所述的高剂量MTZ凝胶得出治疗结论之后BV症状的复发时间与用常规的O. 75重量％的MTZ凝胶，诸如METROGEL VAGINAL?观察到
的历史复发的时间相比有所增加。在具体的实施方案中，发生的发病率的下降意指在得出治疗结论之后持续至少约19天，例如20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天或更长未观察到BV的症状。在得出治疗结论之后，BV的无复发症状持续至少29天，例如，30天、35天、40天、45天、50天、3个月、6个月、9个月、一年或更长表明在得出治疗结论之后在受试者中不存在复发。
[0152]也可以相对于研究人群来定义“复发的发病率的下降”。例如，与用常规的O. 75重
量％的MTZ凝胶（诸如，例如，METROGEL VAGINAL?)治疗之后在20天或更长时报道的
BV症状的妇女数目相比，用如本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶治疗之后在20天或更长时获得经历BV症状的统计学上显著较少的妇女数目的治疗方案被认为BV的复发的发病率的下降。
[0153]为了使用，可以将高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包装成对于所需的施加方式方便的任何形式。在可用于阴道内施加的具体的实施方案中，可以将高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶包装成单位剂型，以预装、单剂量注射器型涂药器作为具体实例。
[0154]6.5.另外的非限制性方面
[0155]高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶组合物以及用其以治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女方法的另外的非限制性方面提供于下文。
[0156]6. 5. L 方法
[0157]Ml. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向受试者阴道内施加包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I重量％至约2重量％的甲硝唑（MTZ)和水的粘膜粘附水基凝胶，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约60mg至约IOOmgMTZ。
[0158]M2.根据方面Ml所述的方法，其中用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中于角质层和接受液中测量的来自粘膜粘附水基凝胶的MTZ水平，当被归一化为浓度时，分别比由METROGEL VAGINAL?测量的MTZ水平高至少约25-55倍和低至少约1-20`倍。
[0159]M3.根据方面Ml所述的方法，其中在25°C下使用控制剪切率方法，Bohlin CV0100流变仪和表11的流变仪设置测量的所述粘膜粘附水基凝胶具有约200，OOOmPa至约400，OOOmPa 的粘度。
[0160]M4.根据方面Ml所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶的粘膜粘附度在MG33PB的粘膜粘附度的约± 10 %内。
[0161]M5.根据方面Ml所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约30重量％至约60重量％的水。
[0162]M6.根据方面Ml所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶基本上不含糊精、环糊精、烟酸和烟酰胺。
[0163]M7.根据方面Ml所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶在25°C下至少6个月内保持稳定。
[0164]M8.根据方面M1-M7中任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约I重量％至约3重量％的总粘膜粘附胶凝聚合物和约40-45重量％的针对MTZ的溶剂系统。
[0165]M9.根据方面M8所述的方法，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
[0166]M10.根据方面M9所述的方法，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约50mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂以及在25°C下具有约20mg / g至约25mg /g范围内的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。[0167]Mil.根据方面MlO所述的方法，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇以及任选地一种或多种低级脂肪族二醇和/或分子量为约200至约400范围内的的一种或多种聚氧化烯（“低级聚氧化烯”）。
[0168]M12.根据方面Mil所述的方法，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和/或一种或多种低级聚氧化烯。
[0169]M13.根据方面M12所述的方法，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯。
[0170]M14.根据方面M11-M13中任一项所述的方法，其中所述一种或多种低级芳族醇选自苯甲醇、苯氧乙醇及其混合物。
[0171]M15.根据方面M11-M14中任一项所述的方法，其中所述一种或多种低级亚烷基选自乙烷-I，2-二醇（乙二醇）、丙烷-I，2-二醇（丙二醇）及其混合物。
[0172]M16.根据方面M11-M15中任一项所述的方法，其中所述一种或多种低级聚氧化烯选自聚氧乙烯（聚乙二醇）、聚氧丙烯（聚丙二醇）及其混合物。
[0173]M17.根据方面M11-M16中任一项所述的方法，其中一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯以重量比率为约I :1至约I :2的总低级脂肪族二醇与总低级聚氧化烯包括在溶剂系统中 。
[0174]M18.根据方面M13-M17中任一项所述的方法，其中所述溶剂系统包含约3. 5重量％至约5重量％的的总低级芳族醇和约95重量％至约95. 5重量％的一种或多种低级亚烷基二醇和一种或多种低级聚氧化烯的混合物。
[0175]M19.根据方面M18所述的方法，其中总低级亚烷基二醇与总低级聚氧化烯的重量比率为约I ：1至约I :1. 67。
[0176]M20.根据方面M8-M19中任一项所述的方法，其中所述溶剂系统由苯甲醇、丙烷-1，2- 二醇和PEG400组成。
[0177]M21.根据方面M8-M20中任一项所述的方法，其中所述溶剂系统由约3. 5重量％至约5重量％的苯甲醇和约95重量％至约96. 5重量％的丙烷-1，2- 二醇和PEG400的混合物组成，其中所述丙烷-1，2-二醇与PEG400的重量比率为约I :1至约I :1. 67。
[0178]M22.根据方面M1-M21中任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶进一步包含一种或多种防腐剂。
[0179]M23.根据方面M1-M22中任一项所述的方法，其中所述一种或多种防腐剂为4_羟基苯甲酸的酯（对羟苯甲酸酯）。
[0180]M24.根据方面M23所述的方法，其中所述一种或多种防腐剂选自4-羟基苯甲酸甲酯（对羟苯甲酸甲酯）、4_羟基苯甲酸丙酯（对羟苯甲酸丙酯）及其混合物。
[0181]M25.根据方面M1-M23任一项所述的方法，所述粘膜粘附水基凝胶的pH范围为约pH3. O 至约 ρΗ5· O。
[0182]Μ26.根据方面Μ25所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶的pH为约pH4. O。
[0183]M27.根据方面M1-M26任一项所述的方法，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物选自羟乙基纤维素、卡波姆、聚卡波非及其混合物。
[0184]M28.根据方面M1-M27任一项所述的方法，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg MTZ。[0185]M29.根据方面M1-M28任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I重量％至约I. 5重量％的組7。
[0186]M30.根据方面M29所述的方法，其中其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次
持续一至五天。
[0187]M31.根据方面M29所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一天。
[0188]M32.根据方面M29所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
[0189]M33.根据方面M1-M28所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I. 3重量％的 MTZ。
[0190]M34.根据方面M33所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续
一至五天。
[0191]M35.根据方面M 33所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一天。
[0192]M36.根据方面M33所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
[0193]M37.根据方面M1-M7中任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约I. 3重量％的MTZj^ 2重量％的聚卡波非AA-Ij^ 2重量％的苯甲醇、约15重量％的丙烷-1，2- 二醇、约25重量％的PEG400、约0.02重量％的4-羟基苯甲酸甲酯和约0.08重量％的4-羟基苯甲酸丙酯。
[0194]M38.根据方面M37所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续
一至五天。
[0195]M39.根据方面M37所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一天。
[0196]M40.根据方面M37所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
[0197]M41.根据方面M37-M40中任一项所述的方法，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg MTZ。
[0198]M42. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法,其包括向受试者阴道内施加足以实现临床治愈的许多施加的水基凝胶的量，其中所述水基凝胶包含一种或多种粘膜粘附聚合物、约I. 3重量％ MTZ和水，并具有一种或多种选自以下组的特征或特性：
[0199](a)用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中于角质层和接受液中测量的来自粘膜粘附水基凝胶的MTZ水平，当被归一化为浓度时，分别比由METROGEL VAGINAL?测量的MTZ水平高至少约25-55倍和低至少约1-20倍；
[0200](b)在25°C下使用控制剪切率扫描方法，Bohlin CV0100流变仪和表11的流变仪设置测量，粘度范围约200，OOOmPa至约400，OOOmPa ；
[0201 ] (c)粘膜粘附度在MG33PB的粘膜粘附度的约± 10 %内；
[0202](d)包含约30重量％至约60重量％的水；
[0203](e)基本上不含糊精、环糊精、烟酸和烟酰胺；[0204](f)在25°C下至少6个月保持稳定；且
[0205](g)包括约I重量％至约3重量％的总粘膜粘附聚合物和约40-45重量％的针对MTZ的溶剂系统。
[0206]M43.根据方面M42所述的方法，其中施加水基凝胶的量以足以实现治疗治愈的许多施加。
[0207]M44. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女的方法，其包括向妇女阴道内施加单剂量的粘膜粘附MTZ水基凝胶，所述凝胶包含约I. 3重量％的MTZ、约I重量％至约2重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约40重量％至约50重量％的针对MTZ的溶剂系统和约50重量％至约55重量％的水，其中所述溶剂系统包含约3重量％至约5重量％的在25°C下具有至少约50mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂以及约95重量％至约97重量％的在25°C下共同地具有约20mg / g至约25mg / g范围内的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂，其中施加的粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约60mg至约IOOmg MTZ0
[0208]M45.根据方面M44所述的方法，其中施加的粘膜粘附MTZ水基凝胶的量含有约65mg MTZ0
[0209]M46.根据方面M43-M45中任一项所述的方法，其中在25°C下具有至少约50mg /g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂为苯甲醇。
[0210]M47.根据方面M43-M46中任一项所述的方法，其中在25°C下共同地具有约20mg / g至约25mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂各自地选自由低级脂肪族二醇和低级聚氧化烯组成的组。
[0211]M48.根据方面M43-`M47中任一项所述的方法，其中所述溶剂系统包含约3重量％至约5重量％的苯甲醇和约95重量％至约97重量％的低级脂肪族二醇与低级聚氧化烯的混合物，其中低级脂肪族二醇与低级聚氧化烯的重量比率在约I :1至约I :2的范围内。
[0212]M49.根据方面M48所述的方法，其中低级脂肪族二醇与低级聚氧化烯的重量比率为约 I :1. 67。
[0213]M50.根据方面M48-M49中任一项所述的方法，其中所述低级脂肪族二醇为丙烷-1，2- 二醇且所述低级聚氧化烯为PEG400。
[0214]M51.根据方面M43-M50中任一项所述的方法，其中一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物各自选自由交联的丙烯酸聚合物和纤维素聚合物组成的组。
[0215]M52.根据方面M43-M51中任一项所述的方法，其中一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物各自选自由卡波姆和聚卡波非组成的组。
[0216]M53.根据方面M43-M52中任一项所述的方法，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物为聚卡波非。
[0217]M54.根据方面M43-M53中任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附MTZ水基凝胶包含约I. 3重量％的MTZj^ 2重量％的聚卡波非AA-Ij^ 2%重量的苯甲醇、约15重量％的丙烷-1，2-二醇、约25重量^^^PEG400、约O. I重量％的一种或多种防腐剂和约54. 6重
量％的水。
[0218]M55.根据方面M54所述的方法，其中所述一种或多种防腐剂各自为对羟苯甲酸酯。
[0219]M56.根据方面M55所述的方法，其中所述一种或多种防腐剂为对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯。
[0220]M57.根据方面M43-M56中任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附MTZ水基凝胶包含约I. 3重量％的MTZ、约2重量％的聚卡波非AA-I、约2重量％的苯甲醇、约15重量％的丙烷-1，2-二醇、约25重量％的PEG400、约0.08重量％的对羟苯甲酸甲酯、约0.02重量％的对羟苯甲酸丙酯和约54. 6重量％的水。
[0221]M58. 一种用适于其的组合物的单次施加来治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向受试者阴道内施加包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、水和约I. 3重量％的MTZ的粘膜粘附水基凝胶，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg MTZ ;且所述单次施加在完全的或基本上缺乏其它治疗或施加中足以治疗或治愈BV0
[0222]M59. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向受试者阴道内施加单次施用的粘膜粘附水基MTZ凝胶，其中所述粘膜粘附水基MTZ凝胶包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I. 3重量％ MTZ和水，且在单次施用中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg MTZ。
[0223]M60. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向受试者阴道内施加粘膜粘附水基MTZ凝胶，其中（i)所述粘膜粘附水基MTZ凝胶包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I. 3重量％ MTZ和水，（ii)施加的粘膜粘附水基MTZ凝胶的量含有约65mg MTZ，且（iii)单次施加所述粘膜粘附水基MTZ凝胶而无其它施加。
[0224]M61. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法,其包括向受试者阴道内施加粘膜粘附水基MTZ凝胶，其中（i)粘膜粘附水基MTZ凝胶包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I. 3重量％ MTZ和水，（`ii)在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg MTZ，且（iii)将粘膜粘附水基MTZ凝胶每天施加一次持续总共一天。
[0225]M62. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括以每天至少一次向受试者阴道内施加粘膜粘附水基MTZ凝胶持续总共5天，其中（i)所述粘膜粘附水基MTZ凝胶包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I. 3重量％ MTZ,和水，且（ii)在单次施加中施加的粘膜粘附水基MTZ凝胶的量含有约65mg MTZ。
[0226]M63. 一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向受试者阴道内施加单次施加的足以治愈BV的数量的粘膜粘附水基MTZ凝胶，其中所述粘膜粘附水基MTZ凝胶包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I. 3重量％的MTZ和水。
[0227]M64.根据方面M55-M63中任一项所述的方法，其中所述粘膜粘附水基MTZ凝胶为根据下述方面C1-C32中任一项所述的凝胶。
[0228]6. 5. 2.组合物
[0229]Cl. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中于角质层和接受液中测量的来自粘膜粘附水基凝胶的MTZ水平，当被归一化为浓度时，分别比由METROGEL VAGINAL?测量的MTZ水平高至少约25-55倍和低至少约1_20倍。
[0230]C2. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中在25°C下使用控制剪切率方法，Bohlin CVOlOO流变仪和表11的流变仪设置测量的所述粘膜粘附水基凝胶具有约200，OOOmPa至约400，OOOmPa的粘度。
[0231]C3. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZj^ I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中所述粘膜粘附水基凝胶的粘膜粘附度在MG33PB的粘膜粘附度的约± 10% 内。
[0232]C4. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和约30重量％至约60重量％的水。
[0233]C5. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZj^ I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中所述粘膜粘附水基凝胶基本上不含糊精、环糊精、烟酸和烟酰胺以及任选地表面活性剂.
[0234]C6. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的107、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中所述粘膜粘附水基凝胶在25°C下至少6个月保持稳定。
[0235]C7.根据方面C1-C6中任一项所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I重量％至约3重量％的总粘膜粘附胶凝聚合物和约40-45重量％的针对MTZ的溶剂系统。
[0236]CS.根据方面C7所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
[0237]C9.根据方面CS所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约50mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂以及任选地在25°C下具有约20mg / g至约25mg / g范围内的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
[0238]C10.根据方面C9所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇以及任选地一种或多种低级脂肪族二醇和/或分子量在约200至约400范围内的一种或多种聚氧化烯（“低级聚氧化烯”）。
[0239]Cll.根据方面ClO所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和/或一种或多种低级聚氧化烯。
[0240]C12.根据方面Cll所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯。
[0241]C13.根据方面C10-C12中任一项所述的凝胶，其中所述一种或多种低级芳族醇选
自苯甲醇、苯氧乙醇及其混合物。
[0242]C14.根据方面C10-C13中任一项所述的凝胶，其中所述一种或多种低级亚烷基二醇选自乙烷-I，2-二醇（乙二醇）、丙烷-I，2-二醇（丙二醇）及其混合物。
[0243]C15.根据方面C10-C14中任一项所述的凝胶，其中所述一种或多种低级聚氧化烯选自聚氧乙烯（聚乙二醇）、聚氧丙烯（聚丙二醇）及其混合物。
[0244]C16.根据方面C10-C15中任一项所述的凝胶，其中一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯以重量比率为约I :1至约I :2的总低级脂肪族二醇与总低级聚氧化烯包括在溶剂系统中。[0245]C17.根据方面C10-C16中任一项所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含约3. 5重量％至约5重量％的总低级芳族醇和约95重量％至约95. 5重量％的一种或多种低级亚烷基二醇和一种或多种低级聚氧化烯的混合物。
[0246]C18.根据方面C17所述的凝胶，其中总低级亚烷基二醇与总低级聚氧化烯的重量比率为约I :1. 67。
[0247]C19.根据方面C10-C18中任一项所述的凝胶，其中所述溶剂系统由苯甲醇、丙烷-1，2- 二醇和PEG400组成。
[0248]C20.根据方面C10-C19中任一项所述的凝胶，其中所述溶剂系统由约3. 5重量％至约5重量％的苯甲醇和约95重量％至约96. 5重量％的丙烷-I，2-二醇和PEG400的混合物组成，其中丙烷-1，2-二醇与PEG400的重量比率范围为约I :1.67至约I :1。
[0249]C21.根据方面C1-C20中任一项所述的凝胶，其进一步包含一种或多种防腐剂。
[0250]C22.根据方面C1-C21中任一项所述的凝胶，其中所述一种或多种防腐剂为4_羟基苯甲酸的酯（对羟苯甲酸酯）。
[0251]C23.根据方面C22所述的凝胶，其中所述一种或多种防腐剂选自4-羟基苯甲酸甲酯（对羟苯甲酸甲酯）、4_羟基苯甲酸丙酯（对羟苯甲酸丙酯）及其混合物。
[0252]C24.根据方面C1- C23中任一项所述的凝胶，其pH在约pH3. O至约pH5. O的范围内。
[0253]C25.根据方面C24所述的凝胶，其pH为约pH4. O。
[0254]C26.根据方面C1-C25中任一项所述的凝胶，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物选自羟乙基纤维素、卡波姆、聚卡波非及其混合物。
[0255]C27.根据方面C1-C6中任一项所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约I. 3重量％的MTZj^ 2重量％的聚卡波非AA-Ij^ 2重量％的苯甲醇、约15重量％的丙烷-I，2-二醇、约25重量％的PEG400、约0.02重量％的4-羟基苯甲酸甲酯和约0.08重量％的4-羟基苯甲酸丙酯。
[0256]C28. 一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I. 3重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物和约40重量％至约45重量％的针对MTZ的溶剂系统，其中所述溶剂系统包含苯甲醇、丙烷-1，2-二醇和PEG400，并且其中当储存在约25°C至约40°C的范围内的温度下，所述凝胶稳定保持18个月。
[0257]C29.根据方面C28所述的凝胶，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物选自交联的丙烯酸聚合物和纤维素聚合物。
[0258]C30.根据方面C29所述的凝胶，其中所述交联的丙烯酸聚合物选自卡波姆和聚卡波非。
[0259]C31.根据方面C29-C30中任一项所述的凝胶，其中所述纤维素聚合物选自羟乙基
纤维素、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。
[0260]C32.根据方面C29-C31中任一项所述的凝胶，其包含约2重量％的总粘膜粘附胶凝聚合物。
[0261]6.5.3.用途
[0262]Ul.根据方面C1-C32中任一项所述的粘膜粘附水基凝胶用于治疗患有和/或被诊断具有BV的妇女的用途。[0263]U2.根据方面Ul所述的用途，其中将所述粘膜粘附水基凝胶阴道内施加于足以获得细菌学治愈、临床治愈或治疗治愈的许多施加中。
[0264]U3.根据方面U1-U2中任一项所述的用途，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约60mg至约IOOmg MTZ0
[0265]U4.根据方面U1-U3中任一项所述的用途，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg MTZ.
[0266]U5.根据方面U1-U4中任一项所述的用途，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天阴道内施加一次持续一至五天。
[0267]U6.根据方面U1-U5中任一项所述的用途，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天阴道内施加一次持续一天。
[0268]U7.根据方面U1-U5中任一项所述的用途，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
[0269]6. 5. 4.单位剂型
[0270]Dl. 一种适用于阴道内施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的单位剂型，其包括根据方面C1-C32中任一项所述的包装在适用于阴道内施加的容器中的含有约65mg至约IOOmg MTZ的数量的凝胶。
[0271]D2.根据方面Dl所述的单位剂型，其包括含有约65mg MTZ的数量的凝胶。
[0272]除非另外限定，否则本文使用的所有技术和科学术语具有如由本文所述的各种发明所属的领域的普通技术人员通常所理解的相同的意义。尽管类似于或等同于本文所述那些的方法和材料可用于实施或测试所公开的发明，合适的方法和材料描述于下文。本文提及的所有公开、专利申请、专利和其它参考以引用的方式整体并入。如发生矛盾，则本说明书，包括定义，将占据主导地位`。此外，材料、方法和实施例仅为示例性的并非旨在限制。
[0273]7.实施例
[0274]现已总体描述了所公开的本发明，相同的将更易于通过参考以下实施例理解，其通过示例提供且并不旨在限制本文所述的发明范围。
[0275]实施例I :用于溶剂系统的示例性溶剂
[0276]在25°C下确定MTZ在多种溶剂中的溶解度以鉴定在本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶需要的浓度下可用于溶解MTZ的溶剂。在25°C下许多溶剂的饱和MTZ溶解度提供于以下表1。可以使用这些饱和的溶解度作为指导设计具有MTZ的所需浓度可用于制备高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的溶剂系统。适于与这些（和其它）溶剂使用用于制备如本文所述的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶另外的溶剂可以基于其饱和MTZ溶解度而易于鉴定。在25°C下在已与适用于制备高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的水相混合的许多溶剂系统中的饱和MTZ溶解度提供于以下表2。
【权利要求】
1.一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向所述受试者阴道内施加包含一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约I重量％至约2重量％的甲硝唑（MTZ)和水的粘膜粘附水基凝胶，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约60mg至约IOOmg 的 MTZ。
2.根据权利要求1所述的方法，其中用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中于角质层和接受液中测量的来自粘膜粘附水基凝胶的MTZ水平，当被归一化为浓度时，分别比由METROGEL VAGINAL?测量的MTZ水平高至少约25-55倍和低至少约1-20倍。
3.根据权利要求1所述的方法，其中在25°C下使用控制剪切率方法，BohlinCV0100流变仪和表11的流变仪设置测量的所述粘膜粘附水基凝胶具有约200，OOOmPa至约400，OOOmPa 的粘度。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶的粘膜粘附度在MG33PB的粘膜粘附度的约±10%内。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约30重量％至约60重量％的水。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶基本上不含糊精、环糊精、烟酸和烟酰胺以及任选地表面活性剂。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶在25°C下至少6个月保持稳定。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I重量％至约3重量％的总粘膜粘附胶凝聚合物和约40-45重量％的针对MTZ的溶剂系统。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约20mg/g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约50mg/g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂以及任选地在25°C下约20mg / g至约25mg / g范围内的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇以及任选地一种或多种低级脂肪族二醇和/或具有约200至约400的分子量的一种或多种聚氧化烯（“低级聚氧化烯”）。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和/或一种或多种低级聚氧化烯。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯。
14.根据权利要求11所述的方法，其中所述一种或多种低级芳族醇选自苯甲醇、2-甲基苯甲醇、苯氧乙醇及其混合物。
15.根据权利要求11所述的方法，其中所述一种或多种低级亚烷基二醇选自乙烷-1，2-二醇（乙二醇）、丙烷-I，2-二醇（丙二醇）及其混合物。
16.根据权利要求11所述的方法，其中所述一种或多种低级聚氧化烯选自聚氧乙烯(聚乙二醇）、聚氧丙烯（聚丙二醇）及其混合物。
17.根据权利要求11所述的方法，其中一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯以重量比率为约I :1至约I :2的总低级脂肪族二醇与总低级聚氧化烯包括在所述溶剂系统中。
18.根据权利要求11所述的方法，其中所述溶剂系统包含约3.5重量％至约5重量％的总低级芳族醇和约95重量％至约95. 5重量％的一种或多种低级亚烷基二醇和一种或多种低级聚氧化烯的混合物。
19.根据权利要求18所述的方法，其中总低级亚烷基二醇与总低级聚氧化烯的重量比率为约I ：1至约I :1. 67。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述溶剂系统由苯甲醇、丙烷-1，2-二醇和PEG400 组成。
21.根据权利要求11所述的方法，其中所述溶剂系统由约3.5重量％至约5重量％的苯甲醇和约95重量％至约96. 5重量％的丙烷-1，2- 二醇和PEG400的混合物组成，其中所述丙烷-1，2-二醇与PEG400的重量比率为约I :1至约I :1. 67。
22.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶进一步包含一种或多种防腐剂。
23.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种防腐剂为4-羟基苯甲酸的酯。
24.根据权利要求23所述的方法，其中所述一种或多种防腐剂选自4-羟基苯甲酸甲酯、4-羟基苯甲酸丙酯及其混合物。
25.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶的pH范围为约pH3.O至约 pH5. O。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶的pH为约pH4.O。
27.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物选自羟乙基纤维素、卡波姆、聚卡波非及其混合物。
28.根据权利要求1所述的方法，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg的MTZ。
29.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I重量％至约I.5重量％的組7。
30.根据权利要求29所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一至五天。
31.根据权利要求29所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一天。
32.根据权利要求29所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
33.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I.3重量％的MTZ。
34.根据权利要求33所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一至五天。
35.根据权利要求33所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一天。
36.根据权利要求33所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
37.根据权利要求1所述的方法，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约I.3重量％的MTZ、约2重量％的聚卡波非AA-I、约2重量％的苯甲醇、约15重量％的丙烷-I，2- 二醇、约25重量％的PEG400、约0.02重量％的4-羟基苯甲酸甲酯和约0.08重量％的4-羟基苯甲酸丙酯。
38.根据权利要求37所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一至五天。
39.根据权利要求37所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续一天。
40.根据权利要求37所述的方法，其中将所述粘膜粘附水基凝胶每天施加一次持续五天。
41.根据权利要求37所述的方法，其中在单次施加中施加的粘膜粘附水基凝胶的量含有约65mg的MTZ。
42.一种治疗患有和/或被诊断具有BV的受试者的方法，其包括向受试者阴道内施加足以实现临床治愈的许多施加的水基凝胶的量，其中所述水基凝胶包含一种或多种粘膜粘附聚合物、约I. 3重量％的MTZ和水，并具有一种或多种选自以下组的特征或特性： (a)用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中于角质层和接受液中测量的来自粘膜粘附水基凝胶的MTZ水平，当被归一化为浓度时，分别比由METROGEL VAGINAL?测量的MTZ水平高至少约25-55倍和低至少约1-20倍； (b)在25°C下使用控制剪切率方法，BohlinCV0100流变仪和表11的流变仪设置测量的粘度范围在约200，OOOmPa至约400，OOOmPa ； (c)粘膜粘附度在MG33PB的粘膜粘附度的约±10%内； (d)包含约30重量％至约60重量％的水； (e)基本上不含糊精、环糊精、烟酸和烟酰胺，以及任选地表面活性剂； (f)在25°C下至少6个月保持稳定；且 (g)包括约I重量％至约3重量％的的总粘膜粘附聚合物和约40重量％至45重量％的针对MTZ的溶剂系统。
43.根据权利要求42所述的方法，其中施加水基凝胶的量以足以实现治疗治愈的许多施加。
44.一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中用人类尸体皮肤进行的体外Franz细胞皮肤渗透实验中于角质层和接受液中测量的来自粘膜粘附水基凝胶的MTZ水平，当被归一化为浓度时，分别比由METROGEL VAGINAL?测量的MTZ水平高至少约25-55倍和低至少约1-20倍。
45.一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中在25°C下使用控制剪切率方法，Bohlin CV0100流变仪和表11的流变仪设置测量，所述粘膜粘附水基凝胶具有约200，OOOmPa至约400，OOOmPa的粘度。
46.一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZJ^ I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中所述粘膜粘附水基凝胶具有在MG33PB的粘膜粘附度的约± 10%内的粘膜粘附度。
47.一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZj^ I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和约30重量％至约60重量％的水。
48.一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZj^ I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中所述粘膜粘附水基凝胶基本上不含糊精、环糊精、烟酸和烟酰胺。
49.一种粘膜粘附水基凝胶，其包含约I重量％至约2重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物、约30重量％至约60重量％的针对MTZ的溶剂系统和水，其中所述粘膜粘附水基凝胶在25°C下至少6个月保持稳定。
50.根据权利要求44所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶包括约I重量％至约3重量％的总粘膜粘附胶凝聚合物和约40重量％至45重量％的针对MTZ的溶剂系统。
51.根据权利要求50所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约20mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
52.根据权利要求51所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含在25°C下具有至少约50mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂以及任选地在25°C下具有约20mg / g至约25mg / g的饱和MTZ溶解度的一种或多种溶剂。
53.根据权利要求52所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇，以及任选地一种或多种低级脂肪族二醇和/或分子量为约200至约400的一种或多种聚氧化烯（“低级聚氧化烯”）。
54.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和/或一种或多种低级聚氧化烯。
55.根据权利要求54所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含一种或多种低级芳族醇、一种或多种低级脂肪族二醇和一种或多种低级聚氧化烯。
56.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述一种或多种低级芳族醇选自苯甲醇、2-甲基苯甲醇、苯氧乙醇及其混合物。
57.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述一种或多种低级亚烷基二醇选自乙烷-1，2-二醇（乙二醇）、丙烷-I，2-二醇（丙二醇）及其混合物。
58.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述一种或多种低级聚氧化烯选自聚氧乙烯(聚乙二醇）、聚氧丙烯（聚丙二醇）及其混合物。
59.根据权利要求53所述的凝胶，其中一种或多种低级脂肪族二醇和所述一种或多种低级聚氧化烯以重量比率为约I :1至约I :2的总低级脂肪族二醇与总聚氧化烯包括在所述溶剂系统中。
60.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述溶剂系统包含约3.5重量％至约5重量％的的总低级芳族醇和约95重量％至约95. 5重量％的一种或多种低级亚烷基二醇与一种或多种低级聚氧化烯的混合物。
61.根据权利要求60所述的凝胶，其中总低级亚烷基二醇与总低级聚氧化烯的重量比率为约I :1. 67。
62.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述溶剂系统由苯甲醇、丙烷-1，2-二醇和PEG400 组成。
63.根据权利要求53所述的凝胶，其中所述溶剂系统由约3.5重量％至约5重量％的苯甲醇和约95重量％至约96. 5重量％的丙烷-1，2- 二醇和PEG400的混合物组成，其中所述丙烷-1，2-二醇与PEG400的重量比率为约I :1.67至约I :1。
64.根据权利要求44所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶进一步包含一种或多种防腐剂。
65.根据权利要求64所述的凝胶，其中所述一种或多种防腐剂为4-羟基苯甲酸的酯(对羟苯甲酸酯）。
66.根据权利要求65所述的凝胶，其中所述一种或多种防腐剂选自4-羟基苯甲酸甲酯(甲基对羟苯甲酸酯）、4_羟基苯甲酸丙酯（丙基对羟苯甲酸酯）及其混合物。
67.根据权利要求44所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶的pH范围为约pH3.O至约 pH5. O。
68.根据权利要求67所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶的pH为约pH4.O。
69.根据权利要求44所述的凝胶，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物选自羟乙基纤维素、卡波姆、聚卡波非及其混合物。
70.根据权利要求44所述的凝胶，其中所述粘膜粘附水基凝胶包含约I.3重量％的MTZ、约2重量％的聚卡波非AA-1、约2重量％的苯甲醇、约15重量％的丙烷-1，2- 二醇、约25重量％的PEG400、约0.02重量％的4-羟基苯甲酸甲酯和约0.08重量％的4-羟基苯甲酸丙酯。
71.一种粘膜粘附水凝胶，其包含约I. 3重量％的MTZ、约I重量％至约3重量％的一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物和约40重量％至约45重量％的针对MTZ的溶剂系统，其中所述溶剂系统包含苯甲醇、丙烷-1，2- 二醇和PEG400并且其中当储存在约25 °C至约40°C的温度下时，所述粘膜粘附水凝胶稳定保持18个月。
72.根据权利要求71所述的凝胶，其中所述一种或多种粘膜粘附胶凝聚合物选自交联的丙烯酸聚合物和纤维素聚合物。
73.根据权利要求72所述的凝胶，其中所述交联的丙烯酸聚合物选自卡波姆和聚卡波非。
74.根据权利要求72所述的凝胶，其中所述纤维素聚合物选自羟乙基纤维素、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。
75.根据权利要求71所述的凝胶，其包含约2重量％的总粘膜粘附胶凝聚合物。
76.—种适用于阴道内施加的高剂量粘膜粘附MTZ水基凝胶的单位剂型，其包含根据权利要求45含有约65mg至约IOOmg包装在适用于阴道内施加的容器中的MTZ的凝胶的量。
77.根据权利要求76所述的单位剂型，其包括含有约65mgMTZ的凝胶的量。
【文档编号】A01N43/50GK103763925SQ201280040540
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2012年6月28日 优先权日:2011年6月28日
【发明者】M·T·诺德斯基, K·S·巴拉吉 申请人:梅迪奇制药有限公司