专利名称：荷叶离褶伞新菌株的制作方法
荷叶离褶伞新菌株
技术领域：
本发明涉及食用菌技术领域，更确切地说，涉及一种荷叶离褶伞新菌株。
背景技术：
荷叶离裙伞(拉丁文名称Lyophyllum decastes),隶属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白蘑科、离褶伞属，是国内外食用菌界竞相研究培育的优良野生食用菌。荷叶离褶伞菌肉肥厚细腻、清香扑鼻、口感脆滑、味道鲜美、营养丰富，并且在对人体细胞的修复作用和在治疗心血管性疾病、抗衰老等方面已显示出极大的优越性，是一种食药兼用的名贵食用菌。从2006年开始,荷叶离裙伞在日本开始少量人工栽培并获得成功。基于此,亟待通过人工驯化和选育适合人工栽培的新菌株。
发明内容本发明解决的技术问题是提供一种荷叶离褶伞新菌株Finc-LD-3，该菌株具有单株内菌柄长度均匀度好，抗杂菌能力强，栽培环节不需要覆土，采收期集中等特点，适宜工厂化推广种植。本发明是通过以下技术方案实现的，本发明荷叶离褶伞新菌株Finc-LD-3是通过采集云南的野生资源，经驯 化栽培，再经系统筛选获得。该菌株已经于2013年I月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址:中国武汉市武汉大学，其保藏号为CCTCC N0:M2013007o本发明荷叶离褶伞新菌株Finc-LD-3的特征在于:1、形态特征Finc-LD-3的菌丝:气生菌丝浓密；菌盖:直径为3±2cm，颜色呈浅黄色，圆形，菌盖表面有细小绒毛，质地脆嫩、易碎；菌褶:浅黄色，菌褶断面呈月牙形；菌柄:长度为6 15cm,菌柄上部浅黄，下部洁白，靠近菌盖处的菌柄内部致密紧实，远离菌盖处菌柄中空，菌柄有鳞片，鳞片主要着生在靠近菌盖的中上部，分布不规律，菌柄簇生。2、生物学特性营养成分来源:木屑、玉米芯、米糠、麸皮、玉米粉、棉籽壳、大豆皮等，其中，含水量64% 66% (重量百分比，下同)。培养及栽培条件:菌丝体培养温度为20 25°C，湿度75%，CO2浓度2000 3500ppm，培养周期50 70天。适宜出菇温度为15 18°C，湿度93% 100%，CO2浓度1000 2000ppm，前I 7天，光照强度10 50Lux，后8 32天光照强度200 300Lux，每天间隙式开启层架灯刺激出菇，栽培周期约为32天。3、遗传学特性荷叶离褶伞Finc-LD-3菌株的基因组DNA经过通用引物ITSl和ITS4进行PCR扩增，获得大小约为690bp的特异性DNA片断，对该片段进行测序，序列信息参见序列表。本发明荷叶离褶伞Finc-LD-3新菌株，具有单株内菌柄长度均匀度好，子实体外观品质优良，抗杂菌能力强，降低了生产管理难度，栽培环节不需要覆土，采收期集中等特点，大大地降低了生产环节的人工作业强度，且单产高，适宜工厂化推广种植。
图1是本发明荷叶离褶伞Finc-LD-3菌株的子实体外观图片。图2是本发明荷叶离褶伞Finc-LD-3菌株的系统发育树。
具体实施方式下面通过具体实施例对本发明作进一步详细说明。实施例1本发明Finc-LD-3的驯化本实施例说明了荷叶离褶伞Finc-LD-3的驯化过程，具体步骤如下:I)配制培养基PDA培养基 每IL培养基用马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g。2)资源采集2007年9月，于云南宾川鸡足山1800 3000米海拔地带，采集野生资源4株，带回实验室，进行组织分离，再接种于PDA培养基上，获得待驯化菌株4个，编号分别为FLD-A，FLD-C, FLD-C, FLD-D。3)菌种驯化将获得的4个菌株中的FLD-C使用PDA培养基进行扩繁，22 °C，湿度70%，二氧化碳浓度小于3000ppm，黑暗培养。 对上述4个菌株分别进行传代培养，每次扩繁20支，接种12 15天后，选取发菌最快的两只试管继代扩繁，接种在PDA培养基上，接种12 15天后，再取发菌最快的两只试管继代扩繁，重复10个循环，至扩繁后代试管发菌速率较快，发菌速率整齐均一，完成初步驯化工作，并用液氮保藏法将菌株保藏于上海市农科院食用菌研究所。4)生产配方筛选经多轮配方试验筛选，获得母种、栽培种配方为:母种培养基:木屑50%(重量百分比，下同)、米糠25%、麸皮15%和玉米粉10%，含水量为60% 62%。栽培种培养基:木屑15%，玉米芯25%、棉籽壳25%、米糠10%、麸皮20%和玉米粉5%，含水量为64% 66%。5)获得目标菌株:通过一系列的驯化选育工作，获得一个荷叶离褶伞菌株，它具有单株内菌柄长度均匀度好，抗杂菌能力强，栽培环节不需要覆土，采收期集中等特点，达到了驯化选育优良菌株的目的。该菌株被命名为“Finc-LD-3”。本发明荷叶离褶伞新菌株Finc-LD-3已于于2013年I月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC N0:M2013007，菌株经检测存活，分类地位为离褶伞属荷叶尚裙伞。实施例2碳源对荷叶离褶伞菌丝生长的影响供试碳源:葡萄糖、蔗糖和可溶性淀粉。所用基础培养基配方为:硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾lg、蛋白胨2g、琼脂20g，加水IOOOml0
向基础培养基中分别加入供试碳源的一种，加入量为20g (纯C含量)，混匀后装Λ 250ml三角瓶中，每瓶150ml，放入灭菌锅中121°C灭菌30min，待稍冷却后倒平板，每板约20ml培养基，每个平板中央接一直径为5mm的菌块，每一处理设置5次重复，置于25°C恒温条件下连续培养20天。每7天用十字交叉法测定菌落直径，用两次测试数值之差来除以间隔天数，即为平均每天的菌丝生长速率。表I碳源对Finc-LD-3和FLD-C菌丝生长的影响
权利要求
1.一种荷叶离褶伞新菌株Finc-LD-3，其 保藏编号是CCTCC NO: M 2013007。
全文摘要
本发明涉及一种荷叶离褶伞新菌株Finc-LD-3，其保藏编号是CCTCCNO: M2013007。Finc-LD-3菌株具有单株内菌柄长度均匀度好，抗杂菌能力强，栽培环节不需要覆土，采收期集中等特点，适宜工厂化推广种植。
文档编号A01H15/00GK103210849SQ20131006886
公开日2013年7月24日 申请日期2013年3月4日 优先权日2013年3月4日
发明者李金鑫, 雷先德, 郑慧芬, 陈长青 申请人:上海丰科生物科技股份有限公司