专利名称：一种调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，涉及一种调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法。
背景技术：
在草地生态系统中，生物群落以多种生物种群形式存在，它们之间以食物链的关系来联系在一起，其中任何一环发生变化，必然会引起其他环节的变化。因此在一定的草地生态系统范围内，分析害虫的种群与天敌种群的相互关系，人为地予以加强天敌种群控制害虫种群的力量，就能把害虫种群数量压低到不能对牧草造成危害的水平。利用天敌昆虫防治害虫是生物防治中应用最广、最多的方法。草地螟Loxostege sticticalis Linnaeus (鳞翅目:螟蛾科)是农牧业突发性多食迁飞害虫，危害范围广，食性杂，幼虫可取食藜科、寥科、豆科、茄科、葫芦科、十字花科等300多种植物，对我国华北、东北和西北地区农牧业危害很大，并时常暴发成灾、造成重大经济损失。国内对于草地螟的防治主要采取的是化学防治，喷施适量有机合成杀虫剂，能起到快速消灭降低害虫种群密度的作用，但过量施用化学药剂，严重影响了农作物的质量，而且造成环境污染和农药残留，危害人畜健康。因此，改变当前以化学防治为主的草地螟防治方法已成为牧草产业发展的当务之急，充分利用田间自然发生的天敌昆虫的控害作用是这其中的重要措施之一，具有十分重要的意义。草地螟阿格姬蜂Agrypon flexorius Thunberg隶属膜翅目，姬蜂科,阿格姬蜂属，是完全变态类寄生蜂，发育过程中共有卵、幼虫、蛹和成虫这四个虫态(发育阶段)，每个虫态的发育特点各有不同如卵、蛹不食不动；幼虫只能在寄主体内取食，活动能力很差；成虫则具翅膀，可以灵活飞翔。草地螟阿格姬蜂分布在河北、内蒙古、山西等地区，是农牧业迁飞害虫草地螟幼虫的优势寄生蜂。调查发现草地螟阿格姬蜂为草地螟高龄幼虫寄生性天敌，其种群数量和优势度指数都比较高，种群变动趋势跟草地螟的种群变动趋势也相似，具有明显的跟随现象，是当地寄生草地螟的优势蜂，对控制草地螟暴发有重要作用。为了开发利用这一宝贵的天敌资源，必须采用人工繁殖释放的途径。但采用传统连代繁殖的方法，蜂源容易退化，而且不易长期保存，给田间释放带来了很大的困难；通过改进繁殖技术，人为诱导该蜂进入滞育状态，可使保存期大大延长，没有滞育调控技术，往往造成天敌昆虫在害虫发生前就已死亡，或害虫发生时天敌昆虫产品还没生产出来，这恰恰是目前生物防治领域中严重制约天敌昆虫产业化生产和大面积应用的瓶颈因素。因此利用低温储藏滞育虫茧技术，控制天敌发育时间，这对于周年扩繁天敌昆虫意义极其重要。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法。本发明所提供的调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法，具体可包括如下步骤:(I)将待进行滞育诱导的草地 螟阿格姬蜂置于温度17土TC、光周期L8:D16至L12:D12的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态；
(2)将步骤(I)得到的进入滞育态的所述草地螟阿格姬蜂转入温度4°C、黑暗的条件下贮存；(3)步骤(2)贮存结束后，将所述草地螟阿格姬蜂转入温度23°C、光周期L14:D10至L16:D8的条件下，恢复发育。本发明的再一个目的是提供一种草地螟阿格姬蜂滞育诱导及贮存方法。本发明所提供的草地螟阿格姬蜂滞育诱导及贮存方法，具体可包括如下步骤:(I)将草地螟阿格姬蜂置于温度17±11:、光周期1^8:016至1^12:012的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态；(2)将步骤(I)得到的进入滞育态的所述草地螟阿格姬蜂转入温度4°C、黑暗的条件下贮存。本发明的还一个目的是提供一种草地螟阿格姬蜂滞育诱导方法。本发明所提供的草地螟阿格姬蜂滞育诱导方法，具体可包括如下步骤:将草地螟阿格姬蜂置于温度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态。对于上述本发明所提供的三种方法，在本发明的一个实施例中，步骤(I)中，所述温度具体为17。。;所述光周期具体为L8:D16、L10:D14或L12:D12。在本发明的一个实施例中，步骤(I)中，所述条件中的光照强度为4000 5000LX ；所述条件中的空气相对湿度为70%- 80%。在上述本发明所提供的三种方法中，所述待进行滞育诱导的草地螟阿格姬蜂感受滞育信号的敏感虫期为卵或I龄幼虫。当所述待进行滞育诱导的草地螟阿格姬蜂具体可为草地螟阿格姬蜂的卵或I龄幼虫时，步骤(I)中所述诱导的时间可为2天。在本发明的一个实施例中，步骤(2 )中，所述空气相对湿度为60%_70%。在本发明所提供的前两种方法中，步骤(2)中所述贮存的时间可为120天以内，最好为80天以内。在本发明的一个实施例中，步骤(3)中，所述条件中的光照强度为4000 5000LX ；所述条件中的空气相对湿度为70%-80%。在本发明的一个实施例中，步骤(3)中所述恢复发育的时间具体可为20天。本发明所提供的调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法，滞育诱导率近100%，滞育后的贮存期可达120天，滞育解除后20天可得到羽化的成蜂。本发明不仅有助于生产实践中促进草地螟阿格姬蜂的大规模扩繁，延长其产品货架期及在田间的防控作用时间，也有助于掌握天敌昆虫的发育特点，提闻害虫防治效率。
图1为温度及光周期对草地螟阿格姬蜂的滞育影响。图2为草地螟阿格姬蜂感受滞育信号的敏感虫态分析结果。图3为不同冷藏时间对草地螟阿格姬蜂滞育茧的影响。
具体实施方式
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。供试虫源:草地螟:记载于“不同的球孢白僵菌对草地螟的毒力测定，吴晋华、刘爱萍等《中国植保导刊》2011年第10期” 一文中，公众可从中国农业科学院草原研究所获得。草地螟作为供试寄主，在实验室内的人工气候箱(23°C，L16:8D，光强8800Lx)内用豌豆苗继代饲养,豌豆苗用作寄主食物时选取发育至5-6片叶的盆栽植株，剪取茎叶饲养草地螟幼虫，每天饲喂1-2次，为了减少幼虫的死亡，应尽量减少更换叶片时对幼虫的刷伤或拨动，采用轻轻抖动或震荡叶片使幼虫自行脱落到新鲜叶片上，I龄 2龄幼虫所处环境湿度保持在70%-80%，3-5龄幼虫所处环境保持在60%左右。草地螟阿格姬蜂:记载于“草地螟寄生蜂及其对寄主种群的控制作用，田晓霞，中国农业科学院硕士论文，2010年”一文中，公众可从中国农业科学院草原研究所获得。在人工气候箱(23°C，RH60%, L16:8D，光强8800Lx)内以草地螟3_5龄幼虫连代饲养草地螟阿格姬蜂，蜂虫比为1:40，任其充分产卵寄生，逐日观察，待草地螟幼虫入土作茧后，每天喷洒适量水，保持土壤一定湿度，置于原条件下待其羽化，取羽化24h内的草地螟阿格姬蜂待试。试验仪器及材料温度和光周期对草地螟阿格姬蜂滞育诱导的影响试验均在人工气候箱(SPX-3001-G型，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)内进行，人工气候箱温度设置误差为± I °C，相对湿度设置误差为±5%。草地螟幼虫及草地螟阿格姬蜂的饲养均在自制养虫笼中进行，连代种群在大养虫笼(45cmX45cmX 30cm)中饲养,试验中所用小养虫笼规格为30cmX20cmX20cm (长X宽X高)。另需平底试管(6cmX 1.5cm)，水银温度计，毛笔，脱脂棉，橡皮圈，托盘、培养皿、保鲜膜、蛭石等若干。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例实施数据分析时，均利用DPS进行方差分析，差异显著性检验采用Duncans新复极差法。下述实施例中，光周期Lx:Dy表示每天光照时长X小时,黑暗时长y小时，x+y=24。下述实施例均采用国际通用的寄生蜂滞育判断标准，基本原理是基于有效积温法贝U，当某寄生蜂的某虫态在应完成发育历期的两倍时间内仍未完成发育，即认定是进入滞育状态。更加具体的，本发明中判定草地螟阿格姬蜂是否进入滞育状态是按照如下方法确定的:若草地螟阿格姬蜂“蛹”这一虫态在应完成发育历期的两倍时间(即30天)内仍未完成发育，即自幼虫入土作茧时起，在30天内草地螟阿格姬蜂未能羽化，则认定草地螟阿格姬蜂进入滞育状态。实施例1、草地螟阿格姬蜂的滞育诱导一、草地螟阿格姬蜂滞育温度和光周期的确定采用二因子正交试验法，设置5个不同光周期(L8:D16、L10:D14、L12:D12、L14:D10、1^16:08)和4个不同温度(171:、201:、231:、26°0，共20个处理，每个处理30头草地螟幼虫(寄主),重复3次，将交尾Id后 的草地螟阿格姬蜂雌蜂寄生于草地螟幼虫，然后转入装有沙土的养虫盒中，放入不同光周期和温度处理的人工气候箱中(其中，光照时的光照强度为4000 5000LX、空气相对湿度为70%-80%)，对草地螟阿格姬蜂进行滞育诱导(滞育诱导视为自“卵”这一虫态开始)，诱导时间为2天，诱导后转移至草地螟阿格姬蜂的正常饲养条件，即人工气候箱(23°C，RH60%，L16:8D，光强8800Lx)。实验中，每天为草地螟幼虫提供新鲜的豌豆苗。观察记录草地螟幼虫(寄主)的生长和草地螟阿格姬蜂雌蜂(寄生蜂)发育情况，统计寄生蜂滞育虫态的形成与温度及光周期之间的关系。结果如表I和图1所示，在温度为17 26°C条件下，光照时间8 16h范围内，随着温度的降低和光照时间的缩短，滞育率明显增加。无论是温度还是光周期对草地螟阿格姬蜂滞育率都有显著的影响。从表I可以看出，温度为26°C时，光照时间8 16h，没有滞育现象发生；温度为23°C，光照时间12 8h，少数个体滞育(0.7% 13.6%);温度为20°C时，滞育率明显提高，光照时间16 8h的滞育率分别为2.8%、8.6%、61.6%,70.3%和90.5% ；当平均温度为17°C，光照时间低于12h，则100%的个体进入滞育。从图1可以看出，低温、短光照是诱导草地螟阿格姬蜂滞育的主要因素，温度起主导作用，光周期只在一定的温度范围内起作用；在261:时，短光照不能诱导滞育。表I室内条件下温度和光周期对草地螟阿格姬蜂滞育的影响
权利要求
1.一种调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法，包括如下步骤: (1)将待进行滞育诱导的草地螟阿格姬蜂置于温度17±l°c、光周期L8:D16至L12:D12的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态； (2)将步骤(I)得到的进入滞育态的所述草地螟阿格姬蜂转入温度4°C、黑暗的条件下贮存； (3)步骤(2)贮存结束后，将所述草地螟阿格姬蜂转入温度23°C、光周期L14:D10至L16:D8的条件下，恢复发育。
2.一种草地螟阿格姬蜂滞育诱导及贮存方法，包括如下步骤: (1)将草地螟阿格姬蜂置于温度17土1°C、光周期L8:D16至L12:D12的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态； (2)将步骤(I)得到的进入滞育态的所述草地螟阿格姬蜂转入温度4°C、黑暗的条件下贮存。
3.一种草地螟阿格姬蜂滞育诱导方法，包括如下步骤:将草地螟阿格姬蜂置于温度17土TC、光周期L8:D16至L12:D12的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于:所述待进行滞育诱导的草地螟阿格姬蜂为草地螟阿格姬蜂的卵或I龄幼虫。
5.根据权利要求4所述的方法 ，其特征在于:步骤(I)中所述诱导的时间为2天。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于:步骤(2)中所述贮存的时间在120天以内。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于:所述贮存的时间在80天以内。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于:步骤(3)中所述恢复发育的时间为20天。
全文摘要
本发明公开了一种调控草地螟阿格姬蜂滞育的方法。该方法包括如下步骤1)将待进行滞育诱导的草地螟阿格姬蜂置于温度17±1℃、光周期L8:D16至L12:D12的条件下进行诱导，使所述草地螟阿格姬蜂进入滞育态；2)将步骤1)得到的进入滞育态的所述草地螟阿格姬蜂转入温度4℃、黑暗的条件下贮存；3)步骤2)贮存结束后，将所述草地螟阿格姬蜂转入温度23℃、光周期L14:D10至L16:D8的条件下，恢复发育。该方法滞育诱导率100%，滞育后的贮存期可达120天，滞育解除后20天可得到羽化的成蜂。本发明对草地螟阿格姬蜂的大规模扩繁，延长其产品货架期及在田间的防控作用时间，提高害虫防治效率，加深对天敌昆虫发育机制的认识，探索昆虫对环境的适应机制及进化途径等均具有重要意义。
文档编号A01K67/033GK103141443SQ20131007358
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月8日 优先权日2013年3月8日
发明者刘爱萍, 徐林波, 高书晶, 张礼生, 徐忠宝, 刘雅学, 缪丽梅, 康爱囯, 崔智林, 特木儿 申请人:中国农业科学院草原研究所