一种北虫草培育新方法
【专利摘要】本发明公开了一种北虫草的培育新方法，包括以下步骤：由试管固体菌种接入摇瓶转为液体菌种、把摇瓶菌种接入发酵罐进行菌种扩繁、北虫草固体培育栽培盒培养基制作、液体接种、菌丝培养、转色、出草管理、采收。摇瓶培养液体菌种配方如下：蚕蛹粉35g；葡萄糖35g；玉米面50g；VB12片；KH2PO4?5g；MgSO41.7g；水3500ml；发酵罐培养配方如下：按发酵罐每100L罐装量70L。黄豆粉200g；玉米面1400g；蔗糖1400g；KH2PO470g；MgSO470g；蚕蛹粉1050g；罐内加消泡剂7ml、色拉油7-10ml；北虫草固体培育栽培盒营养液配方如下：蛋白胨4g；KH2PO41g；MgSO41g；VB11片；豆粕粉16.67g；糖10g；水1000ml。本发明提供的培育新方法，操作方便，培育周期较短，培养成本较低，培养成功率较高，产量高，成草中虫草素含量也有大幅提高。
【专利说明】一种北虫草培育新方法
【技术领域】
[0001]本发明属于北虫草培育领域，尤其涉及一种北虫草培育的新方法。
【背景技术】
[0002]冬虫夏草，是麦角菌科真菌冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是一种传统的名贵滋补中药材，有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。但是冬虫夏草目前只有野生，而且因其极其稀少而价格昂贵。
[0003]但是冬虫夏草并非独一无二的“神奇草”，北虫草的药效成分含量并不逊色。北虫草与野生冬虫夏草作比较，发现其中最精华的虫草素含量高出7倍，虫草酸、虫草多糖、SOD酶等营养成分只多不少，抗癌、补肺益肾、提高免疫力等广泛药效，也与野生冬虫夏草不相上下。与野生冬虫夏草相比北虫草的市场价格要低得多，因此北虫草的培育方法具有巨大的市场前景。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种北虫草的培育新方法，其优点:配方独特，生产工艺新颖、独特，缩短了北虫草生产周期，减少了污染，提高了北虫草的产量，真正实现了大规模工厂规范化生产的要求。
[0005]本发明是这样实现的，一种北虫草的培育新方法，目前作为生产的菌株是使用从吉林、辽宁等地采集新鲜野生北冬虫夏草子座，通过组织培养、平板分离筛选、纯化最终得到一株适应性强、性状稳定、产量高的菌株，菌株代号:Y201005bCC。通过定期传代、复壮、驯化，以保证该菌株不退化、产量高。
[0006]本发明的北虫草的培育方法由以下流程组成:由试管固体菌种接入摇瓶转为液体菌种、把摇瓶菌种接入发酵罐进行菌种扩繁、北虫草固体培育栽培盒培养基制作、接种、菌丝培养、转色、出草管理、采收。
[0007]本发明的北虫草的培育方法中，
液体菌种配方如下:蚕蛹粉35g ;葡萄糖35g ;玉米面50g ^B1 2片；KH2PO4 5g ；KH2PO4
1.7g ;水 3500ml。
[0008]发酵罐培养配方如下:按发酵罐每100L罐装量70L。黄豆粉200g;玉米面1400g ；蔗糖1400g ；KH2PO4 70g ；MgS04 70g ;蚕蛹粉1050g ;罐内加消泡剂7ml、色拉油7-10ml。
[0009]北虫草固体培育栽培盒营养液配方如下:蛋白胨4g;KH2P04 Ig5KH2PO4 Ig5VBiI 片；豆柏粉 16.67g;糖 IOg;水 1000ml。
[0010]进一步，由试管固体菌种接入摇瓶转为液体菌种。
[0011]蚕蛹粉加200ml水打匀，玉米面加300ml水打匀，加热3000ml水至煮沸，90°C以上时倒入玉米面搅拌至糊化，再倒入蚕蛹粉至糊化、过滤关火、加入葡萄糖、VB1等，3500ml水添够，分别倒入5个摇瓶，700ml/1000ml瓶，封口，管口瓶塞内均塞棉花报纸包口，放入蒸锅0.ll-0.15MPa保持40min、自然冷却后接入试管菌种。
[0012]进一步，把摇瓶菌种接入发酵罐进行菌种扩繁。
[0013]将玉米面、蚕蛹粉、黄豆粉、加入搅拌桶搅匀，加热水，加至半桶时，通蒸汽加热IOmin至糊化过滤、加剩余原料、消泡剂加至罐内，加热至120°C保持40min,期间消毒各个口，接种后保持气压0.03-0.05MPa、过滤器0.07MPa。
[0014]培养条件:20-22°C、接种后静置12-24h、摇速95-100次/min (液峰高度2_5cm)、培养时间120h左右、液体菌种稀释倍数1:8。
[0015]进一步，北虫草固体培育栽培盒培养基制作。
[0016]选用耐高温塑料盒,每盒先装入400g小麦,再加入600ml营养液,混匀后用聚丙烯薄膜和塞子封口。采用高压灭菌法灭菌，压力0.11~0.15MPa，灭菌温度121~126°C，保持lOOmin。灭菌后将栽培盒移入预先消好毒的冷却室内，待盒内温度降至30°C以下时方可接种。
[0017]进一步，接种
用浓度30ppm臭氧对接种室消毒lh，或用硫磺和木屑熏蒸，再用75%酒精溶液擦拭接种流水线。开始接种前，先打开纯净空间IOmin,在接种流水线上,拔下塞子,用接种枪接种,保证菌液覆盖全面且均匀。
[0018]进一步，菌丝培养
栽培房使用前用气雾剂进行消毒，栽培架、地面、墙壁用0.03%高锰酸钾溶液喷雾消毒一次。栽培房要求清洁、干燥、黑暗、通风良好。前3~4d，栽培房温度保持在18~22°C，4d后温度控制在22~25°C，空气湿度控制在65%，经过5~10d，菌丝满盒。
[0019]进一步，转色、出草管理
白天打开灯光14h，温度控制在20~22°C，夜间温度控制在15~17°C，空气湿度控制在65%，3~5d后，菌丝由白色转为橘黄色，再过6~8d，菌丝扭结，原基出现。前5~6d，温度控制在20~22°C，5d后温度控制在20~25°C;白天充分利用自然散射光，不足部分用日光灯补充，调整栽培盒与光源相对方向，使盒内光照均匀，初期湿度控制在80%左右。子实体长出Icm时，空气湿度增大至90%。定期通风，2d通I次，每次30min，当虫草子实体长到2~3cm时,拔掉塞子。
[0020]进一步，采收
当子实体长到7~8cm时即可进行采收，采收前15d停止喷水，水汽太大草的颜色太浅，还易烂根，采收时手不能接触草根，那样烘干后会变黑的。采收后栽培盒应及时清理出栽培房，并对栽培房进行消毒。
[0021]效果汇总:
本发明一种北虫草的培育新方法，通过该培育方法所生产的北虫草品质优良，产量高。本发明中北虫草的培育方法，配方独特、培养工艺新颖、独特、结构简单、操作方便，培育周期较短，培养成本较低，培养成功率较高，品质优良，且产量高。成草中虫草素含量也有大幅提闻，因此具有广泛的市场如景。
[0022]_
【专利附图】
【附图说明】[0023]图1为本发明的提供的北虫草的培育新方法的流程图。
【具体实施方式】
[0024]本发明是这样实现的，一种北虫草的培育新方法。目前作为生产的菌株是使用从吉林、辽宁等地采集新鲜野生北冬虫夏草子座，通过组织培养、平板分离筛选、纯化最终得到一株适应性强、性状稳定、产量高的菌株，菌株代号:Y201005bCC。通过定期传代、复壮、驯化，以保证该菌株不退化、产量高。
[0025]如表1所示,液体菌种配方如下:蚕蛹粉35g ;葡萄糖35g ;玉米面50g ；VB ι 2片；KH2PO4 5g ；MgS04 1.7g ;水 3500ml。
[0026]如表2所示，发酵罐配方如下:虫草发酵罐培养基70L/罐；黄豆粉200g ;玉米面1400g ;蔗糖1400g ；KH2PO4 70g ；MgS04 70g ;蚕蛹粉1050g ;罐内加消泡剂7ml、色拉油7-10ml。
[0027]如表3所示，北虫草固体培育栽培盒营养液配方如下:蛋白胨4g ;KH2P04 Ig ；MgS04Ig ;VBi I 片;豆柏粉 16.67g ;糖 IOg ；/jC 1000ml。
[0028]进一步，由试管固体菌种接入摇瓶转为液体菌种。
[0029]蚕蛹粉加200ml水打匀，玉米面加300ml水打匀，加热3000ml水至煮沸，90°C以上时倒入玉米面搅拌至糊化，再倒入蚕蛹粉至糊化、过滤关火、加入葡萄糖、VB1等，3500ml水添够，分别倒入5个摇瓶，700ml/1000ml瓶，封口，管口瓶塞内均塞棉花报纸包口，放入蒸锅0.11-0.15MPa保持40min、自然冷却后接入试管菌种。
[0030]进一步，把摇瓶菌种接入发酵罐进行菌种扩繁。
[0031]将玉米面、蚕蛹粉、黄豆粉、加入搅拌桶搅匀，加热水，加至半桶时，通蒸汽加热IOmin至糊化过滤、加剩余原料、消泡剂加至罐内，加热至120°C保持40min,期间消毒各个口，接种后保持气压0.03-0.05MPa、过滤器0.07MPa。
[0032]培养条件:20-22°C、接种后静置12-24h、摇速95-100次/min (液峰高度2_5cm)、培养时间120h左右、液体菌种稀释倍数1:8。
[0033]进一步，北虫草固体培育栽培盒培养基制作。
[0034]选用耐高温塑料盒,每盒先装入400g小麦，再加入600ml营养液,混匀后用聚丙烯薄膜和塞子封口。采用高压灭菌法灭菌，压力0.11~0.15MPa，灭菌温度121~126°C，保持lOOmin。灭菌后将栽培盒移入预先消好毒的冷却室内，待盒内温度降至30°C以下时方可接种。
[0035]进一步，接种
用浓度30ppm臭氧对接种室消毒lh，或用硫磺和木屑熏蒸，再用75%酒精溶液擦拭接种流水线。开始接种前，先打开纯净空间IOmin,在接种流水线上,拔下塞子,用接种枪接种,保证菌液覆盖全面且均匀。
[0036]进一步,菌丝培养
栽培房使用前用气雾剂进行消毒，栽培架、地面、墙壁用0.03%高锰酸钾溶液喷雾消毒一次。栽培房要求清洁、干燥、黑暗、通风良好。前3~4d，栽培房温度保持在18~22°C，4d后温度控制在22~25°C，空气湿度控制在65%，经过5~10d，菌丝满盒。
[0037]进一步，转色、出草管理白天打开灯光14h，温度控制在20~22°C，夜间温度控制在15~17°C，空气湿度控制在65%，3~5d后，菌丝由白色转为橘黄色，再过6~8d，菌丝扭结，原基出现。前5~6d，温度控制在20~22°C，5d后温度控制在20~25°C;白天充分利用自然散射光，不足部分用日光灯补充，调整栽培盒与光源相对方向，使盒内光照均匀，初期湿度控制在80%左右。子实体长出Icm时，空气湿度增大至90%。定期通风，2d通I次，每次30min，当虫草子实体长到2~3cm时,拔掉塞子。
[0038]进一步，采收
当子实体长到7~8cm时即可进行采收，采收前15d停止喷水，水汽太大草的颜色太浅，还易烂根，采收时手不能接触草根，那样烘干后会变黑的。采收后栽培盒应及时清理出栽培房，并对栽培房进行消毒。
[0039]
【权利要求】
1.一种北虫草的培育新方法，其特征在于，该培育方法包括以下步骤:由试管固体菌种接入摇瓶转为液体菌种、把摇瓶菌种接入发酵罐进行菌种扩繁、北虫草固体培育栽培盒培养基制作、液体接种、菌丝培养、转色、出草管理、采收； 摇瓶培养液体菌种配方如下:蚕蛹粉35g ;葡萄糖35g ;玉米面50g ;VBi 2片;ΚΗ2Ρ045g ；MgSO4 1.7g ;水 3500ml ； 发酵罐培养配方如下:按发酵罐每IOOL罐装量70L;黄豆粉200g;玉米面 1400g ;蔗糖1400g ；KH2PO4 70g ；MgS04 70g ;蚕蛹粉1050g ;罐内加消泡剂7ml、色拉油7-lOml ； 北虫草固体培育栽培盒营养液配方如下:蛋白胨4g ；KH2P04 Ig ；MgS04 Ig ^B1 I片；豆柏粉 16.67g ;糖 IOg ;水 1000ml。
2.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，该培育方法采用的菌株从吉林、辽宁采集新鲜野生北冬虫夏草子座，通过组织培养、平板分离筛选、纯化最终得到。
3.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，由试管固体菌种接入摇瓶转为液体菌种的方法为: 蚕蛹粉加200ml水打匀，玉米面加300ml水打匀，加热3000ml水至煮沸，90°C以上时倒入玉米面搅拌至糊化，再倒入蚕蛹粉至糊化、过滤关火、加入葡萄糖、VB1, 3500ml水添够，分别倒入5个摇瓶，700ml/1000ml瓶，封口，管口瓶塞内均塞棉花报纸包口，放入蒸锅0.ll-ο.15MPa保持40min、自然冷却后接入试管菌种进行培养。
4.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，把摇瓶菌种接入发酵罐进行菌种扩繁培养的方法为: 将玉米面、蚕蛹粉、黄豆粉、加入搅拌桶搅匀，加热水，加至半桶时，通蒸汽加热IOmin至糊化过滤、加剩余原料、消泡剂加至罐内，加热至120°C保持40min，期间消毒各个口，接种后保持气压0.03-0.05MPa、过滤器0.07MPa ； 培养条件:20-22°C、接种后静置12-24h、摇速95-100次/min，液峰高度2_5cm、培养时间120h左右、液体菌种稀释倍数1:8。
5.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，北虫草固体培育栽培盒培养基制作方法为: 选用耐高温塑料盒，每盒先装入400g小麦,再加入600ml营养液,混匀后用聚丙烯薄膜和塞子封口 ；采用高压灭菌法灭菌，压力0.11~0.15MPa，灭菌温度121~126°C，保持IOOmin ;灭菌后将栽培盒移入预先消好毒的冷却室内，待盒内温度降至30°C以下时方可接种。
6.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，接种方法为: 用浓度30ppm臭氧对接种室消毒lh，或用硫磺和木屑熏蒸，再用75%酒精溶液擦拭接种流水线；开始接种前，先打开纯净空间IOmin,在接种流水线上,拔下塞子,用接种枪接种，保证菌液覆盖全面且均匀。
7.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，菌丝培养方法为: 栽培房使用前用气雾剂进行消毒，栽培架、地面、墙壁用0.03%高锰酸钾溶液喷雾消毒一次；栽培房要求清洁、干燥、黑暗、通风良好；前3~4d，栽培房温度保持在18~22°C，4d后温度控制在22~25°C，空气湿度控制在65%，经过5~10d，菌丝满盒。
8.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，转色、出草管理方法为:白天打开灯光14h，温度控制在20~22°C，夜间温度控制在15~17°C，空气湿度控制在65%，3~5d后，菌丝由白色转为橘黄色，再过6~8d，菌丝扭结，原基出现；前5~6d，温度控制在20~22°C，5d后温度控制在20~25°C ;白天充分利用自然散射光，不足部分用日光灯补充，调整栽培盒与光源相对方向，使盒内光照均匀，初期湿度控制在80%左右；子实体长出Icm时，空气湿度增大至90% ;定期通风，2d通I次，每次30min，当虫草子实体长到2~3cm时,拔掉塞子。
9.如权利要求1所述的培育方法，其特征在于，采收方法为: 当子实体长到7~8cm时即可进行采收，采收前15d停止喷水，水汽太大草的颜色太浅，还易烂根，采收时手不能接触草根，那样烘干后会变黑的；采收后栽培盒应及时清理出栽培房，并对栽培房进行消 毒。
【文档编号】A01G1/04GK103460981SQ201310311996
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年7月24日 优先权日:2013年7月24日
【发明者】郭素萍, 杨槐俊, 李新冬, 张治家, 孙聪聪 申请人:山西省医药与生命科学研究院