腹足类软体动物的固定方法
【专利摘要】腹足类软体动物的固定方法，涉及一种腹足类软体动物。获取腹足类、瓣鳃类等软体动物的生物样品，去除表面杂物、粘液；将腹足类、瓣鳃类等软体动物放入底部装有冰块的保温箱中，在冰块与生物样品之间垫一层导热性能差的材料，避免生物体直接接触冰块，保温箱保存干燥；经过低温保存后，腹足类、瓣鳃类等软体动物基本失去收缩能力，对外界的反应迟钝，厣外露或者壳微张；在需要固定的腹足类、瓣鳃类等软体动物的厣部或者双壳之间插入异物，防止动物在受刺激时再次将厣或者壳闭上；加入固定剂，完成杀死动物，初步固定的过程；根据实验需要，定期更换固定剂，实现标本的长期完整保存。简单快捷，固定效果好。
【专利说明】腹足类软体动物的固定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种腹足类软体动物，尤其是涉及一种腹足类软体动物的固定方法。【背景技术】
[0002]以螺类为代表的软体动物是重要的潮间带生物，它们在生态系统功能、形态结构、活性物质和遗传进化等方面具有重要的科学意义。在对螺类进行科学研究时，不可避免地需要对螺进行样品采集及固定操作，最常用的固定液是酒精和甲醛。螺的外部形态由螺壳和厣组成，在 固定过程中，螺的软体部分一旦受到刺激，将紧紧地缩进螺壳并在壳口堵上厣。普通的固定液无法渗透螺壳和角质的厣进入软体部。经常是螺类在固定液中浸泡时间很长，内部软体组织部分腐败了其厣才微微张开，采用此种方法固定的样品几乎无法开展形态学和分子生物学分析。对于个体大的种类，普通的固定方法更加无效。如果在采样过程中对每个螺进行撬开厣，灌入固定液的操作，这无疑增加了野外采样的难度，也常常会损害螺类机体的完整性。对于一些个体小数量的样品，这样的操作基本不可能。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于针对腹足类、瓣鳃类等软体动物的野外采集和固定困难等问题，提供采用先冷冻再固定的方法进行螺类生物的保存，具有简单快捷，固定效果好等优点的一种腹足类软体动物的固定方法。
[0004]本发明包括以下步骤:
[0005]I)获取腹足类、瓣鳃类等软体动物的生物样品，去除表面杂物、粘液；
[0006]2)将腹足类、瓣鳃类等软体动物放入底部装有冰块的保温箱中，在冰块与生物样品之间垫一层导热性能差的材料，避免生物体直接接触冰块，保温箱保存干燥；
[0007]3)经过I~2h的低温保存后，腹足类、瓣鳃类等软体动物基本失去收缩能力，对外界的反应迟钝，庵外露或者壳微张；
[0008]4)在需要固定的腹足类、瓣鳃类等软体动物的厣部或者双壳之间插入异物，防止动物在受刺激时再次将庵或者壳闭上；
[0009]5)加入固定剂，完成杀死动物，初步固定的过程；
[0010]6)根据实验需要，定期更换固定剂，实现标本的长期完整保存。
[0011]在步骤4)中，所述异物可采用牙签等。
[0012]在步骤5)中，所述固定剂可选自酒精或甲醛等。
[0013]本发明的优点如下:
[0014]1、特别适宜现场操作，无需额外的电力或者麻醉剂。
[0015]2、对于鲜活的个体固定彻底，组织结构保存完整。
[0016]3、样品一直处于低位或固定剂当中，有效避免动物组织腐败。
【具体实施方式】[0017]实施例1
[0018]在浙江南麂岛采集荔枝螺，样品采集清理后置于带冰的保温箱中。样品采集过程约2h。回到驻地后，所有的螺类都微微张开了厣部。在厣部与外壳之间插入牙签，螺并没有反应。加入酒精等固定剂后，螺略有收缩，但是被牙签阻隔，还留有大的孔隙供固定剂进入软体部分。固定后的样品很容易将软体部分旋出。螺类的齿舌制备完整，基因组DNA，线粒体DNA的抽提效果良好，能够满足PCR等实验的需求。
[0019]实施例2
[0020]在厦门市场购买波纹巴非蛤，采用与实施例1相似的方法，波纹巴非蛤的固定效果良好，完全能够满足现代实验 的要求。
【权利要求】
1.腹足类软体动物的固定方法，其特征在于包括以下步骤: 1)获取腹足类、瓣鳃类等软体动物的生物样品,去除表面杂物、粘液； 2)将腹足类、瓣鳃类等软体动物放入底部装有冰块的保温箱中，在冰块与生物样品之间垫一层导热性能差的材料，避免生物体直接接触冰块，保温箱保存干燥； 3)经过I~2h的低温保存后，腹足类、瓣鳃类等软体动物基本失去收缩能力，对外界的反应迟钝，庵外露或者壳微张； 4)在需要固定的腹足类、瓣鳃类等软体动物的厣部或者双壳之间插入异物，防止动物在受刺激时再次将厣或者壳闭上； 5)加入固定剂，完成杀死动物，初步固定的过程； 6)根据实验需要，定期更换固定剂，实现标本的长期完整保存。
2.如权利要求1所述腹足类软体动物的固定方法，其特征在于在步骤4)中，所述异物米用牙签。
3.如权利要求1所述腹足类 软体动物的固定方法，其特征在于在步骤5)中，所述固定剂选自酒精或甲醛。
【文档编号】A01K61/00GK103535303SQ201310507008
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年10月24日 优先权日:2013年10月24日
【发明者】丁少雄, 黄建荣, 李海, 柯才焕 申请人:厦门大学