一种茄果类蔬菜微生物复合菌剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种茄果类蔬菜微生物复合菌剂、其制备方法和应用；其采用胶质芽孢杆菌（Bacillus?mucilaginosus）发酵液，巨大芽孢杆菌（Bacillus?megaterium）发酵液，褐色球形固氮菌（Azotobacter?chroococcum）发酵液，枯草芽孢杆菌（Bacillus?subtilis）发酵液混合后作为混合菌剂，经再次发酵制得。本复合菌剂充分利用了各菌种之间的相互作用，起到刺激植物生长、缓解土地板结、改良土壤生态环境、防病抗病等作用，能改善果实外观质量和提高果实品质，增产效果明显，能显著提高经济效益，达到增产、高产的目的。
【专利说明】一种茄果类蔬菜微生物复合菌剂
【技术领域】
[0001]本发明属于农业和生物【技术领域】，涉及一种茄果类蔬菜微生物复合菌剂、其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002]化肥的诞生在一定的时间里给农民带来了丰收的希望。然而长期使用化肥产生的弊端随之而来，土地板结、化学元素残留、环境污染等等一系列问题浮出水面。化肥已经不能满足可持续发展的需要，更不能成为绿色农业的支柱。
[0003]而茄果类蔬菜是一类以食用鲜嫩果实为主、生长周期相对较长的蔬菜，主要包括黄瓜、番茄、辣椒等。这些蔬菜对养分需求有相似之处，与叶菜类蔬菜比较，在氮磷钾三要素中对磷、钾需求量相对较多，而需氮量较少，同时由于它们生长期长，所以要求养分释放期长，以免后期脱肥。现有的生产模式是采用化肥等为主，一般是将所有的原料一起发酵，使有机物中养分大部分释放出来，这对于茄果类蔬菜的后期果实生长不利。要解决上诉问题就要改变现有的生产模式，从而使养分释放符合茄果类蔬菜养分吸收要求。随着科学的发展，微生物在农业中的作用渐渐显露出来。利用微生物制剂改良土壤、降解化学残留、改善生态环境、作物增产、抑菌防病等，已经成为农业科学研究的热点。微生物复合菌剂是发展“高产、优质、高效、生态、安全”农业的保证。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的问题是采用多种菌种制备复合菌剂，以及利用该复合菌剂制成植物生物调节剂应用在农作物的种植中。充分利用菌种之间的相互作用，起到刺激植物生长、缓解土地板结、改良土壤生态环境、防病抗病等作用，从而达到解决增产、高产的目的。
[0005]本发明所述的茄果类蔬菜微生物复合菌剂，其采用胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 发酵液，巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010发酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142发酵液，枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) ACCC01183发酵液混合后作为混合菌剂，经再次发酵制得。
[0006]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:所述的胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 发酵液，巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010发酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142发酵液，枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) ACCC01183发酵液混合的质量百分比分别为30~40%、30~40%、10 ~20%、5 ~10%。
[0007]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:所述的混合菌剂经再次发酵的接种量为混合菌剂占总发酵培养基质量的1~5%。
[0008]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:所述再次发酵的发酵培养基为:玉米粉 2 ~20g/100mL、豆栢粉 1 ~10g/100mL、酵母膏 0.05 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2 ~2g/100mL、Κ2ΗΡ04 0.5 ~2g/100mL、MgS04.7Η20 0.001 ~0.02g/100mL、NaCl 0.5 ~0.8g/100mL、(NH4)2S04 0.001 ~0.01g/100mL，溶剂为蒸馏水。
[0009]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:所述的胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 发酵液，巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010 发酵液，褐色球形固氮菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142发酵液的菌种数量均不低于 108 个 /mL。
[0010]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:所述的再次发酵制得的终产物总菌数量 6 ~10X108f/mL。
[0011]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:所述再次发酵的条件为30°C下培养4~7天。
[0012]对于上文所述的技术方案，优选的情况下:制备胶质芽孢杆菌(钾细菌)(Bacillus mucilaginosus)CGMCC1.153发酵液所用的一级和二级发酵液体培养基配方为:ΚΗ2Ρ04 0.06g、MgS04.7Η20 0.05g、CaS04.5Η20 0.004g、蛋白胨 5g、玉米浆(50% 干重)2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸懼水 1000mL、pH7.1 ；
[0013]制备巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010发酵液所用的一级和二级发酵液体培养基配方为:牛肉膏3g、蛋白胨5g、NaC15g、蒸馏水1000mL、pH7.0 ;
[0014]制备揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum)CGMCCl.142发酵液所用的一级和二级发酵液体培养基配方为:ΚΗ2Ρ04 0.2g、K2HP04 0.8g、MgS04.7H20 0.2g、CaS04.2H20
0.lg、Na2Mo04.2H20 微量、酵母膏 0.5g、甘露醇 20g、FeCl3 微量、蒸馏水 1000mL、pH7.2 ；
[0015]制备枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) ACCC01183发酵液所用的一级和二级发酵液体培养基配方为:牛肉膏log、蛋白胨10g、NaC15g、葡萄糖10g，蒸馏水lOOOmL，pH7.0，
[0016]本发明的有益效果是:这种茄果类蔬菜微生物复合菌剂采用巨大芽孢杆菌、褐色圆形固氮菌、胶质芽孢杆菌(钾细菌)、枯草芽孢杆菌作为制备菌种。以上菌种分别经过一级菌种培养，二、三级发酵，使发酵液中菌数达到6~10 X 108个/mL，即得茄果类蔬菜微生物复合菌剂。本产品经长期实地验证，配方合理，功效稳定，能促进作物生长、改善果实品质、促早熟、增加产量，提高肥料利用率，改良土壤生态环境，并且有一定的防病抗病功效。
【具体实施方式】
[0017]本发明采用胶质芽孢杆菌(钾细菌)(Bacillus mucilaginosus) CGMCC1.153,巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010,褐色球形固氮菌(Azotobacterchroococcum) CGMCC1.142,枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) ACCC01183，均可由商业途径购买获得，后文中为方便描述，分别简写为胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐色球形固氮菌、枯草芽孢杆菌。
[0018]实施例1:
[0019]所述的茄果类蔬菜微生物复合菌剂制备步骤如下:
[0020]1.接种:将所述各菌种(胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐色球形固氮菌、枯草芽孢杆菌)分别接于斜面培养基上；巨大芽孢杆菌为27~37°C，pH为6.5~7.5，培养时间为4天；褐色球形固氮菌培养温度25~30°C，pH为7.0~8.0，培养时间为5天；枯草芽孢杆菌培养温度27~37°C，p`H为6.5~7.5，培养时间为4天；胶质芽孢杆菌(钾细菌)培养温度25~35°C，pH为7.5~8.0，培养时间为5天；[0021]2.一级菌种培养:将所述步骤1制备的菌种分别按接种环一环的量接种于盛有相应液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基pH为6.5~7.5，锥形瓶放入摇床振荡，温度为30°C，振荡24~48h ;采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到108个/mL ；
[0022]3.二级发酵:将所述步骤2制备的菌种分别按5%接种于盛有液体培养基的lOOOmL锥形瓶中，培养基pH6.5~7.5，放入摇床振荡，温度为30°C，振荡48~72h ;使菌种数量分别达到108个/mL以上，从而制得胶质芽孢杆菌(钾细菌)发酵液、巨大芽孢杆菌发酵液、褐色球形固氮菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液。
[0023]将各菌种按质量百分比混合后进行再次发酵:胶质芽孢杆菌(钾细菌)发酵液30~40%、巨大芽孢杆菌发酵液30~40%、褐色球形固氮菌发酵液10~20%、枯草芽孢杆菌发酵液5~10%,如表1常用配方表。
[0024]表1.常用配方表
[0025]
【权利要求】
1.一种茄果类蔬菜微生物复合菌剂，其特征在于:采用胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 发酵液，巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010发酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142发酵液，枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) ACCC01183发酵液混合后作为混合菌剂，经再次发酵制得。
2.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于:所述的胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 发酵液，巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010发酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142发酵液，枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) ACCC01183发酵液混合的质量百分比分别为30~40%、30~40%、10 ~20%、5 ~10%。
3.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于:所述的混合菌剂经再次发酵的接种量为混合菌剂占总发酵培养基质量的1~5%。
4.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于:所述再次发酵的发酵培养基为:玉米粉 2 ~20g/100mL、豆栢粉 1 ~10g/100mL、酵母膏 0.05 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2 ~2g/100mL、Κ2ΗΡ04 0.5 ~2g/100mL、MgS04.7Η20 0.001 ~0.02g/100mL、NaCl 0.5 ~0.8g/100mL、(NH4)2S04 0.001 ~0.01g/100mL，溶剂为蒸馏水。
5.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于:所述的胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 发酵液，巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium) ACCC10010 发酵液，褐色球形固氮菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142发酵液的菌种数量均不低于 108 个 /mL。
6.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于:所述的再次发酵制得的终产物总菌数量6~10X108f/mL。
7.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于:所述再次发酵的条件为30°C下培养4~7天。
【文档编号】A01N63/02GK103719159SQ201310659244
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年12月6日 优先权日:2013年12月6日
【发明者】顾艳丽, 崔国臣, 周悦, 崔昌娜 申请人:大连三科生物工程有限公司