一种茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种茄果类蔬菜专用生物有机肥，其通过将粉碎的秸秆与牛粪或鸡粪作为发酵有机物料，添加5‰比例的有机物料腐熟剂并加适量的水，与有机物料均匀混合，控制含水量为60％左右，自然室外温度下发酵腐熟5?10天形成初肥。再添加各类营养元素与发酵物料混合均匀后，添加4‰比例的促生长复合菌剂均匀混合后造粒或成粉获得的生物肥料。本发明解决了单纯施用化肥、普通有机肥、农家肥以及纯微生物菌肥所存在的种种弊端，并充分结合了茄果类蔬菜各个时期的生长特点及对养分的需求，注意调节其营养生长与生殖生长的矛盾，是一种尤其适用于茄果类蔬菜生长、高效、优质的生物有机菌肥。在茄果类蔬菜生产种植方面具有较大的应用前景。
【专利说明】
一种茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种生物有机肥及其制备方法，尤其适用于茄果类蔬菜，属于农业生 物有机肥制备的技术领域。
【背景技术】
[0002] 目前我国化肥年使用量在一亿三千万吨左右，广大农民一直以来都是使用化肥， 然而长期使用化肥产生的弊端随之而来，土地板结、化学元素残留、环境污染等等一系列问 题浮出水面。化肥已经不能满足可持续发展的需要，更不能成为绿色农业的支柱，各国都在 寻找对策。生物有机肥就此而诞生，成为化肥的第二次革命，生物有机菌肥是农业发展最有 希望、最有前途的不可替代的产品。中央电视二台已对其作了大量的介绍和报道，目前正由 国家科委牵头，国家技术监督局参与进行，而对这样的情况如何扩大产量，如何尽快将它推 广到世界各地，造福人类是摆在我们面前的重要问题。生物有机肥是指特定功能微生物与 主要以动植物残体(如畜禽粪便、农作物秸杆等)为来源并经无害化处理、腐熟的有机物料 复合而成的一类兼具微生物肥料和有机肥效应的肥料。
[0003] 而茄果类蔬菜是一类以食用鲜嫩果实为主、生长周期相对较长的蔬菜，主要包括 番茄、茄子、辣椒等。这类蔬菜共同特点是边现蕾，边开花，边结果。因此在生产上要注意调 节其营养生长与生殖生长的矛盾，才能获得好收成。茄果类蔬菜在幼苗期需要N肥多一些， 到成苗时对N、P的需求量要相对多些，这时氮肥一定不要过多否则会过于长枝叶，花期需要 P肥多些，可促进开更多的花，收获更多的果实。茄果类蔬菜的花芽分化都是在苗床上进行 的，所以育苗土要求全营养，一定要有丰富的氮、磷、钾和有机质，还要有适当的中微量元 素。同时由于它们生长期长，所以要求养分释放期长，以免后期脱肥。要解决上述问题就要 改变现有的生产模式，从而使养分释放符合茄果类蔬菜养分吸收要求。随着科学的发展，生 物有机肥在农业中的作用渐渐显露出来。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的问题是避免单纯施用化肥、普通有机肥、农家肥以及纯微生物 菌肥所存在的种种弊端，利用微生物技术，选配具有特定腐熟功能的菌种制成菌剂，用此菌 剂将固体有机物料发酵成初肥，再按适宜的比例添加各类营养元素，再配以各类营养元素 及功效相应的促进茄果类蔬菜生长的复合菌剂所制成的生物有机肥，并将其应用于茄果类 蔬菜作物的种植中。通过各菌种之间的相互作用，起到刺激植物生长、缓解土地板结、改良 土壤生态环境、防病抗病等作用，从而达到增产、高产的目的。
[0005] 本发明产品所选用腐熟菌剂，其采用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414等具有特殊腐熟功效的菌种，按适当的比例复合发酵而成的微 生物菌剂。所选用各菌种均能够产生纤维素酶、木质素酶、半纤维素酶、蜡质素酶、果胶酶等 多种生物酶，通过中温菌和耐高温菌的协同作用，快速将各类废弃的有机物料发酵腐熟成 肥料，变废为宝，节省资源，大大减少了环境污染。
[0006] 本发明所选用茄果类专用的促生长复合菌剂，其含有大量的对茄果类蔬菜生长发 育有特殊功效的有益微生物，其采用胶质芽孢杆菌（Baci Ilus muci laginosus)CGMCC 1.153,褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142,巨大芽抱杆菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱杆菌（Bacillus subtilis)ACCC 01183等菌 种发酵液混合后作为混合菌剂，经再次发酵而制备的微生物复合菌剂。本发明选取各菌种 是经查阅大量的文献资料，进行研究总结，根据实际要求选择几种针对茄果类蔬菜生长发 育有特殊功效的有益微生物，然后通过实际反复实验，最后确定各微生物的最佳比例，从而 保证茄果类蔬菜各阶段的营养需求。
[0007] 具体的本发明所述茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法，该方法包括如下步 骤：
[0008] (一)有机物料腐熟剂的制备
[0009] 将菌种数量分别达到IO8个/mL以上的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌种发酵液按1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3的比例混合均勾 后，接种于盛有复合菌剂培养基A的发酵罐中，接种量为复合菌剂培养基A总体积的5%，复 合菌剂培养基A的pH 6.0~8.0，30°C下培养4~7天，使发酵液中总菌数达到IO8个/mL，即得 到有机物料腐熟剂；
[0010] 所述复合菌剂培养基A配方为：玉米面0.5~1.5g/L、玉米秸杆粉15~17g/L、麸皮 0 · 2~0 · 4g/L、_a饼粉0 · 2~0 · 4g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH值6 · 0~8 · 0;
[0011] 步骤(一)的具体制备过程为：
[0012] 1.菌种活化:将所述各菌种接于斜面培养基上;枯草芽孢杆菌28~32°C，pH为7.2 ~7.4,培养时间为1~3天;米曲霉培养温度25~28°C，pH为6.0~6.5,培养时间为4~7天； 白腐菌培养温度25~28°C，培养时间为4~7天；
[0013] 2.-级菌种培养:将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的50mL锥形瓶中，培养 基pH为6.0~8.0，锥形瓶放入摇床振荡培养，温度为30°C，振荡24~48h;采用血球计数板计 数，菌液中菌种数量分别达到IO8个/mL;
[0014] 3.二级发酵:将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000 mL锥形瓶中，培养基 pH6.0~8.0，放入摇床振荡，温度为30°C，振荡48~72h;从而获得菌种数量分别达到IO8个/ mL以上的枯草芽抱杆菌（BacilIus subtiIis)CICC10088，米曲霉（AspergilIus niger) CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414。
[0015] 所述斜面培养基配方为：
[0016] 1.枯草芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为:牛肉浸液1.0L，蛋白胨IOg，NaC15.Og， 琼脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制备：瘦牛肉洗净，切碎，称取550g浸泡于1375mL 水中，浸泡一夜，过滤，过滤分装后〇.6kgf/cm2 40min备用。
[0017] 2.米曲霉采用的斜面培养基配方为：5 OBe麦芽汁琼脂，5 OBe麦芽汁1.0L，琼脂 15 .OgdSPH0
[0018] 3.白腐菌的斜面培养基配方为:PDA培养基，取去皮的马铃薯200克，切成小块，加 水1000毫升煮沸30分钟滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克， 溶化后分装，15镑灭菌30分钟；自然PH。
[0019]所述液体培养基为斜面培养基不加琼脂即可。
[0020](二)混拌、发酵
[0021] 将步骤(一）制备好的有机物料腐熟剂按发酵物料总质量的5%。比例混合，再兑入 适量的水，使总水分控制在60 %左右，在发酵池经过5-10天发酵，即制得初肥；
[0022] 所述发酵具体为:将混合搅拌均匀的发酵物料放进发酵设施，压实填满排去空气， 发酵池顶部覆盖一层塑料薄膜，上盖密封发酵、适时翻垛，翻堆时补充水分，将总水分控制 在60%左右，原料手握成团，指缝有水但不滴，而松手即散为好。
[0023] 在优选的技术方案中，步骤(二）的发酵时间是指:一般夏天4-5天，春秋6-7天，冬 季10天。
[0024](三)深加工
[0025] 将初肥进行粉碎、烘干，按初肥质量百分比，具体添加如下营养元素：
[0026] 氮2.5~3.5%、磷0.8~1.5%、钾5.0~7.0%;钙1.5~2.0%、镁 1.0~1.5% ;硼 0.05~0.1 %;腐植酸类肥料5.0~10.0%;
[0027] 优选情况下，添加营养元素的比例为：
[0028] a.大量元素(氮、磷、钾)的添加比例:氮3.0%、磷1.1%、钾6.0%;
[0029] b.中量元素(钙、镁)的添加比例:妈1.8%、镁1 · 2% ;
[0030] c ·微量元素（硼）的添加比例：0 · 08% ;
[0031] d.腐植酸铵的添加比例:5.0%。
[0032] (四）茄果类蔬菜专用促生长复合菌剂的制备
[0033] 将菌种数量分别达到IO8个/mL以上的胶质芽孢杆菌(BaciIlus muciIaginosus) CGMCCl · 153，褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1 · 142，巨大芽抱杆菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183的菌 种发酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (30~40% ): (5~10% )的比例混合均匀后作为混合 菌剂，接种于盛有复合菌剂培养基B的发酵罐中，接种量为复合菌剂培养基B总体积的5%， 复合菌剂培养基B的pH 6.5~7.5，30°C下培养4~7天，使发酵液中总菌数达到6~10 X IO8 个/mL，即得到茄果类蔬菜专用微生物复合菌剂，pH为6.8，总有效活菌数为9 X IO8个/mL; [0034] 所述复合菌剂培养基B的配方为：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵 母膏0· 1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4 · 7H20 0.001~0.028/10011^、似(：10.5~0.88/10011^、（順4)2304 0.001~0.018/10011^，其余为蒸 馏水；
[0035]所述步骤（四）的具体过程如下：
[0036] 1.接种:将所述各菌种(胶质芽孢杆菌、褐色球形固氮菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢 杆菌)分别接于斜面培养基上;胶质芽孢杆菌(钾细菌)培养温度25~35 °C，pH为7.5~8.0， 培养时间为5天;褐色球形固氮菌培养温度25~30°C，pH为7.0~8.0，培养时间为5天；巨大 芽孢杆菌为27~37°C，pH为6.5~7.5，培养时间为4天;枯草芽孢杆菌培养温度27~37°(：，？!1 为6.5~7.5,培养时间为4天；
[0037] 2.-级菌种培养:将所述步骤1制备的菌种分别按接种环一环的量接种于盛有相 应液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基pH为6.5~7.5，锥形瓶放入摇床振荡，温度为30°C， 振荡24~48h;采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到IO8个/mL;
[0038] 3.二级发酵:将所述步骤2制备的菌种分别按5%接种于盛有液体培养基的1000 mL 锥形瓶中，培养基pH 6.5~7.5，放入摇床振荡，温度为30°C，振荡48~72h;使菌种数量分别 达到IO8个/mL以上，从而制得菌种数量分别达到IO8个/mL以上的胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153,褐色球形固氮菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142， 巨大芽抱杆菌(Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis) ACCC 01183的菌种发酵液。
[0039]所述茄果类蔬菜微生物复合菌剂制备过程中用到的斜面培养基配方为：
[0040] 1.胶质芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为:KH2P04 0.06g、MgS04 · 7H20 0.05g、
[0041 ] CaS04 · 5H20 0.004g、蛋白胨5g、玉米楽_(50%干重）2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸馏 水1000 mU琼脂25g、pH 7.1;
[0042] 2.褐色球形固氮菌采用的斜面培养基配方为：KH2P04 0.2g、K2HP04 0.8g、 MgS04 · 7H20 0.2g、CaS04 · 2H20 0.1g、Na2Mo04 · 2H20微量、酵母膏0.5g、甘露醇20g、 FeC13微量、琼脂 15g、蒸馏水1000 mUpH 7.2;
[0043] 3.巨大芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为：牛肉膏3g、蛋白胨5g、琼脂15g、NaCl 5g、蒸馈水 1000mL、pH 7.0;
[0044] 4.枯草芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为:牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、葡萄 糖 10g，琼脂15g，蒸馏水1000 mUpH 7.0;
[0045] 所述液体培养基配方为斜面培养基不加琼脂制得。
[0046](五）按步骤(三)深加工所获得的发酵物料总质量的3~5%。比例添加步骤（四）获 得的茄果类蔬菜专用的促生长复合菌剂获得终产品，将物料混合均匀后，经造粒机造粒或 成粉，检测合格后，包装入库。
[0047]对于上述技术方案，在优选的情况下，步骤(一)所述复合菌剂培养基A配方为：玉 米面0 · 5g/L、玉米猜杆粉 15g/L、麸皮0 · 25g/L、豆饼粉0 · 25g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH 8.5〇
[0048]对于上述技术方案，在优选的情况下，步骤（一）所述枯草芽孢杆菌（Bacillus subtil is )CICC10088，米曲霉（Aspergi Ilus n iger)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌种发酵液按2:1:1的比例混合均勾。
[0049]对于上述技术方案，在优选的情况下，步骤(二)所述发酵有机物料为粉碎的玉米 秸杆与动物粪便按1~2:0.5~2质量比混合，所述动物粪便通常为鸡粪或牛粪。
[0050] 对于上述技术方案，在优选的情况下，步骤(三)所述复合菌剂培养基B的配方为： 玉米粉 16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0· lg/100mL、KH2P04 lg/100mL、K2HP〇4lg/ 100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaCl 0.6g/100mL、（NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余为蒸馏 水。
[0051] 本发明的技术方案是经过近几年的不懈努力，结合茄果类蔬菜各个时期的生长特 点及对养分的需求，注意调节其营养生长与生殖生长的矛盾，最终研制出一种高效优质的 生物有机肥。其综合运用了微生物技术、化肥工业和农业技术等最新成果，优先制备了一种 高效的富含有机质、N · P · K营养元素和某些微量元素、植物生长调节剂等物质有机结合起 来，由特定工艺最终形成了以有机质为主体的营养合理、N · P · K比例适当的颗粒状营养 源。该种肥料不仅具有高利用率、肥效期长的优点，而且具有改良土壤、提高农作物品质，增 强作物抗逆性，增加产量，减少污染，刺激作物生长发育等特点，省时省工，具有良好的社会 效益和经济效益。
[0052]有益效果
[0053]本发明所述的茄果类蔬菜专用的生物有机肥是选用具有特定具有腐熟功能的菌 种制成菌剂，用此菌剂将有机固体物料发酵腐熟成初肥，再按适宜的比例添加大量元素 (氮、磷、钾）、微量元素(钙、镁)及其他特殊物质，再配以功效相应的促进茄果类蔬菜生长的 菌剂所制成的肥料。腐熟剂中含有大量的枯草芽孢杆菌、米曲霉、白腐菌等菌种，能够产生 纤维素酶、木质素酶、半纤维素酶、蜡质素酶、果胶酶等多种生物酶，通过中温菌和耐高温菌 的协同作用，快速将各类废弃的固体有机物料发酵腐熟成肥料，变废为宝，节省资源，大大 减少了环境污染;又添加各类营养元素及茄果类蔬菜专用的促生长菌剂，通过对茄果蔬菜 有特殊功效的有益微生物胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌及圆褐固氮菌等各 菌种之间的相互作用，起到刺激植物生长、缓解土地板结、改良土壤生态环境、增加土壤的 腐殖质及有益微生物菌群、防病抗病等作用，从而达到增产、高产的目的。
【具体实施方式】
[0054]本发明的下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发 明，但不以任何方式限制本发明。实施例中所用的生物材料均可以由商业途径获得。
[0055] 实施例一:茄果类蔬菜专用生物有机肥的制备
[0056] 本发明茄果类蔬菜专用的生物有机肥产品是指利用微生物技术，选配具有特定腐 熟功能的菌种制成菌剂，用此菌剂将有机固体物料发酵腐熟成初肥，再配以各种营养元素 及茄果类蔬菜专用的促生长复合菌剂所制成的生物肥料。其【具体实施方式】如下：
[0057](一)有机物料腐熟剂的制备
[0058]米用枯草芽抱杆菌（Baci I Ius subti I i s) CICC10088，米曲霉（Aspergi I Ius niger)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414等具有高效腐熟作用 的菌种按适当的比例复合发酵而成的腐熟菌剂。
[0059] 1.菌种活化:将所述各菌种接于斜面培养基上;枯草芽孢杆菌28~32°C，pH为7.2 ~7.4,培养时间为1~3天;米曲霉培养温度25~28°C，pH为6.0~6.5,培养时间为4~7天； 白腐菌培养温度25~28°C，培养时间为4~7天；
[0060] 2.-级菌种培养:将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的50mL锥形瓶中，培养 基pH为6.0~8.0，锥形瓶放入摇床振荡培养，温度为30°C，振荡24~48h;采用血球计数板计 数，菌液中菌种数量分别达到IO 8个/mL;
[0061] 3.二级发酵:将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000 mL锥形瓶中，培养基 PH6.0~8.0,放入摇床振荡，温度为30°C，振荡48~72h;使菌种数量分别达到IO8个/mL以 上，将各菌种按所述菌种的质量百分比混合；
[0062] 4.三级发酵：分别将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)CICC10088,米曲霉 (Aspergillus niger)ClCC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌 种发酵液按2:1:1的比例混合均匀后，接种于盛有复合菌剂培养基的发酵罐中，复合菌剂培 养基pH 6.0~8.0，接种量为5 %，30 °C下培养4~7天，使发酵液中菌数达到IO8个/mL，即得 到有机物料秸杆腐熟剂。
[0063]所述斜面培养基配方为：
[0064] 1.枯草芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为:普通琼脂：牛肉浸液1.0L，蛋白胨10g， NaC15. Og，琼脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制备:瘦牛肉洗净，切碎，称取550g浸泡 于1375mL水中，浸泡一夜，过滤，过滤分装后0.6kgf/cm240min备用。
[0065] 2.米曲霉采用的斜面培养基配方为：5 t3Be麦芽汁琼脂，5 t3Be麦芽汁1.0L，琼脂 15 .OgdSPH0
[0066] 3.白腐菌的斜面培养基配方为:PDA培养基，取去皮的马铃薯200克，切成小块，加 水1000毫升煮沸30分钟滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克， 溶化后分装，15镑灭菌30分钟。自然PH。
[0067]所述液体培养基为斜面培养基不加琼脂即可。
[0068]所述复合菌剂培养基配方为：玉米面0 · 5g/L、玉米秸杆粉15g/L、麸皮0 · 25g/L、豆 饼粉0·25g/L、4mL/100mL Vogel's母液，pH值8·5。
[0069](二)混拌、发酵
[0070]准备500kg粉碎的玉米秸杆与500kg牛粪作为发酵的原始有机物料，将制备好的有 机物料腐熟剂按发酵物料总质量的5%。兑入适量的水中，与有机物料均匀混拌，原料手握成 团，指缝有水但不滴，而松手即散为好(总水分在60%左右）。将混合搅拌均匀的发酵物料放 进发酵设施，压实填满排去空气，发酵池顶部覆盖一层塑料薄膜，上盖密封发酵、适时翻垛， 翻堆时补充水分，将总水分控制在60 %左右。经过10天发酵，即制得初肥。
[0071] (三)各类营养元素的添加
[0072] 物料发酵完成后，按肥剂型要求进行粉碎、烘干，而后添加各类营养元素，包括大 量元素(氮、磷、钾）、中量元素(钙、镁）、微量元素(硼），按发酵物料质量计算，具体添加比例 如下：
[0073] a.大量元素(氮、磷、钾)的添加比例:氮3.0%、磷1.1%、钾6.0%;
[0074] b.中量元素(钙、镁)的添加比例:妈1.8%、镁1.2% ;
[0075] c ·微量元素（硼）的添加比例:0 · 08% ;
[0076] d.腐植酸铵的添加比例:5.0%。
[0077] (四）茄果类蔬菜专用促生长复合菌剂制备及添加
[0078] 米用胶质芽抱杆菌（Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1 · 153，褐色球形固氮菌 (Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142,巨大芽抱杆菌（Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183等具有特殊功效的菌种发酵液混合 后作为混合菌剂，经再次发酵而制备的微生物复合菌剂。
[0079] 所述的茄果类蔬菜微生物复合菌剂制备步骤如下：
[0080] 1.接种:将所述各菌种(胶质芽孢杆菌、褐色球形固氮菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢 杆菌)分别接于斜面培养基上;胶质芽孢杆菌(钾细菌)培养温度25~35 °C，pH为7.5~8.0， 培养时间为5天;褐色球形固氮菌培养温度25~30°C，pH为7.0~8.0，培养时间为5天；巨大 芽孢杆菌为27~37°C，pH为6.5~7.5，培养时间为4天;枯草芽孢杆菌培养温度27~37°(：，？!1 为6.5~7.5,培养时间为4天；
[0081] 2.-级菌种培养:将所述步骤1制备的菌种分别按接种环一环的量接种于盛有相 应液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基pH为6.5~7.5，锥形瓶放入摇床振荡，温度为30°C， 振荡24~48h;采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到IO8个/mL;
[0082] 3.二级发酵:将所述步骤2制备的菌种分别按5%接种于盛有液体培养基的1000 mL 锥形瓶中，培养基pH 6.5~7.5，放入摇床振荡，温度为30°C，振荡48~72h;使菌种数量分别 达到IO8个/mL以上，从而制得胶质芽孢杆菌(钾细菌)发酵液、褐色球形固氮菌发酵液、巨大 芽孢杆菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液。
[0083] 将各菌种按质量百分比混合后进行再次发酵:胶质芽孢杆菌(钾细菌)发酵液30~ 40%、巨大芽孢杆菌发酵液30~40%、褐色球形固氮菌发酵液10~20%、枯草芽孢杆菌发酵 液5~10%，如表1常用配方表。
[0084] 表1.常用配方表
[0086] 4.三级发酵:将所述步骤3制备的混合后的菌液接种于盛有复合菌剂培养基的发 酵罐中，复合菌剂培养基pH 6.5~7.5,接种量为复合菌剂培养基总质量的5%，30°C下培养 4~7天，使发酵液中菌数达到6~10 X IO8个/mL，即得到茄果类蔬菜专用微生物复合菌剂， pH为6.8，菌数含量均达到9 X IO8个/mL。
[0087] 所述斜面培养基配方为：
[0088] 1.胶质芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为:KH2P04 0.06g、MgS04 · 7H20 0.05g、
[0089] CaS04 · 5H20 0.004g、蛋白胨5g、玉米楽_(50%干重）2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸馏 水1000 mU琼脂25g、pH 7.1;
[0090] 2.褐色球形固氮菌采用的斜面培养基配方为：KH2P04 0.2g、K2HP04 0.8g、 MgS04 · 7H20 0.2g、CaS04 · 2H20 0.1g、Na2Mo04 · 2H20微量、酵母膏0.5g、甘露醇20g、 FeC13微量、琼脂 15g、蒸馏水1000 mUpH 7.2;
[0091] 3.巨大芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为：牛肉膏3g、蛋白胨5g、琼脂15g、NaCl 5g、蒸馈水 1000mL、pH 7.0;
[0092] 4.枯草芽孢杆菌采用的斜面培养基配方为:牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、葡萄 糖1(^，琼脂158，蒸馏水100〇1111^4!17.0;
[0093] 所述液体培养基配方为斜面培养基不加琼脂制得。
[0094]所述复合菌剂培养基配方为:玉米粉2~20g/100mL、豆栢粉1~10g/100mL、酵母膏 0.05~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP04 0.5~2g/100mL、MgS04.7H20 0.001 ~0·02g/100mL、NaCl 0·5~0·8g/100mL、（NH4)2S04 0·001 ~0·01g/100mL，其余为蒸馏水。 [0095]按发酵物料总质量的4%。比例添加茄果类蔬菜专用的促生长复合菌剂，再次混合 均匀。
[0096](五)造粒或成粉，检测、包装、入库
[0097]将物料混合均匀后，经造粒机造粒或成粉，检测合格后，包装入库。
[0098] 实施例二:茄果类蔬菜专用生物有机肥在番茄上的应用效果
[0099] 采用本发明制备的茄果类蔬菜专用生物有机肥在番茄种植中应用的效果试验： [0100] 1.试验材料与方法
[0101] 供试品种:金番一号
[0102] 试验方法:试验设置为两组，采用随机排列，分别三次重复，每个试验小区面积100 平方米。
[0103] 所述的两组处理：
[0104] ①对照组，常规施肥;②试验组，严格按照生物有机物肥产品使用说明施用。
[0105] 经实际调查，2015年番茄生育期自然条件较好，有利于番茄的生长。
[0106] 2.本发明制备的茄果类蔬菜专用生物有机肥在番茄上的应用试验结果见表1: [0107]表1.茄果类蔬菜专用生物有机肥对番茄作物性状及产量影响
[0109] 从表1数据可以看出，试验组比对照组的番茄每亩增加888kg，增产率为18.8%，因 此说明施用茄果类蔬菜专用生物有机肥能够明显提高番茄的产量。通过对试验番茄生育的 主要植物性状调查数据来看，与对照组相比，试验区秧苗更墩实，叶色深绿，叶片相对较多、 大而厚，底部叶片的老化程度低，茎粗壮，根系发达，果实大，着色好，无畸形果，口味甘甜； 该试验区作物耐旱，抗早衰，抗植株萎蔫、青枯病、早疫病及晚疫病等发病率较低。
[0110] 3.本发明制备的茄果类蔬菜专用的生物有机肥对番茄地土壤影响的应用试验效 果数据见表2:
[0111] 表2.茄果类蔬菜专用生物有机肥对番茄地土壤的腐殖质含量及有益菌含量的影 响
[0113] 从表2数据可以看出，试验组比对照组番茄地土壤中的腐殖质含量增加3.8%，每 克土壤样品所含的有益菌数量比对照组多12.2亿。这说明施用茄果类蔬菜专用生物有机肥 后，不但对番茄本身性状和产量有很大的促进作用，其对番茄地土壤的作用也十分显著，能 够明显改善土壤的理化特性，改良土壤生态环境增加腐殖质含量及有益微生物数量。
[0114] 4.结论:番茄施用茄果类蔬菜专用生物有机肥后，植株生长健壮，根系发达，叶片 深绿，叶面积增加，光合能力增强，番茄果个大，着色鲜艳，口感甘甜，能改善果实外观质量 和提高果实品质，且增产效果明显，能显著提高经济效益和社会效益。
[0115] 茄果类蔬菜专用生物有机肥在番茄上的试验效果证明，该产品可在茄果类蔬菜生 产中扩大示范面积，并进行大面积推广使用。
【主权项】
1. 一种茄果类蔬菜专用的生物有机肥，其特征在于， (一) 有机物料腐熟剂的制备 将菌种数量分别达到1〇8个/mL以上的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CICC10088， 米曲霉（Aspergi 1 lus niger )CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium) ACCC30414的菌种发酵液按1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3的比例混合均匀后，接种于盛有 复合菌剂培养基A的发酵罐中，接种量为复合菌剂培养基A总体积的5%，复合菌剂培养基A 的pH 6.0~8.0，30°C下培养4~7天，使发酵液中总菌数达到108个/mL，即得到有机物料腐 熟剂； 所述复合菌剂培养基A配方为：玉米面0.5~1.5g/L、玉米猜杆粉15~17g/L、麸皮0.2~ 0 · 4g/L、_a饼粉0 · 2~0 · 4g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH值6 · 0~8 · 0; (二) 混拌、发酵 将步骤(一）制备好的有机物料腐熟剂按发酵物料总质量的5%。比例混合，再兑入适量 的水，使总水分控制在60 %左右，在发酵池经过5-10天发酵，即制得初肥； (三) 深加工 将初肥进行粉碎、烘干，按初肥质量百分比，具体添加如下营养元素： 氮2.5~3.5%、磷0.8~1.5%、钾5.0~7.0% ;钙1.5~2.0%、镁1.0~1.5% ;硼0.05~ 0.1% ;腐植酸类肥料5.0~10.0% ; (四） 茄果类蔬菜专用促生长复合菌剂的制备 将菌种数量分别达到1〇8个/mL以上的胶质芽孢杆菌（Baci 1 lus mucilaginosus) CGMCC1 · 153，褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1 · 142，巨大芽抱杆菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183的菌 种发酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (30~40% ): (5~10% )的比例混合均匀后作为混合 菌剂，接种于盛有复合菌剂培养基B的发酵罐中，接种量为复合菌剂培养基B总体积的5%， 复合菌剂培养基B的pH 6.5~7.5，30°C下培养4~7天，使发酵液中总菌数达到6~10 X108 个/mL，即得到茄果类蔬菜专用微生物复合菌剂，pH为6.8，总有效活菌数为9 X 108个/mL; 所述复合菌剂培养基B的配方为：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵母膏 0.1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4.7H20 0.001 ~ 0·02g/100mL、NaCl 0·5~0·8g/100mL、（NH4)2S〇4 0·001 ~0·01g/100mL，其余为蒸馏水； (五） 按步骤(三)深加工所获得的发酵物料总质量的3~5%。比例添加步骤（四）获得的 茄果类蔬菜专用的促生长复合菌剂获得终产品。2. 根据权利要求1所述的茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤 (一)所述复合菌剂培养基A配方为:玉米面0.5g/L、玉米秸杆粉15g/L、麸皮0.25g/L、豆饼粉 0.25g/L、4mL/100mL Vogel's母液，pH 8.5。3. 根据权利要求1所述的茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤 (一） 所述枯草芽抱杆菌（Bacillus subtil is )CICC10088,米曲霉(Aspergillus niger) CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌种发酵液按2:1:1的比 例混合均匀。4. 根据权利要求1所述的茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤 (二) 所述发酵有机物料为粉碎的玉米秸杆与动物粪便按1~2:0.5~2质量比混合。5. 根据权利要求1所述的茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤 (三)所述营养元素为氮3.0%、磷1.1 %、钾6.0% ;钙1.8%、镁1.2% ;硼0.08% ;腐植酸类肥 料5.0%，腐植酸类肥料为腐植酸铵或者腐植酸钾。6. 根据权利要求1所述的茄果类蔬菜专用的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤 (三）所述复合菌剂培养基B的配方为：玉米粉16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0. lg/ 100mL、KH2P04 lg/100mL、K2HP〇4 lg/100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaC10.6g/100mL、 (NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余为蒸馏水。
【文档编号】C05F17/00GK105859480SQ201610227683
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月13日
【发明人】崔国臣, 崔昌娜
【申请人】大连三科生物工程有限公司